МУНИЦИПАЛЬНОЕ АВТОНОМНОЕ ОБЩЕОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ СРЕДНЯЯ ОБЩЕОБРАЗОВАТЕЛЬНАЯ ШКОЛА №3

Кленбутерол Софарма инструкция по применению: показания, противопоказания, побочное действие – описание Clenbuterol Sopharma сироп 5 мкг/5 мл: фл. 100 мл в компл. с мерн. ложкой или стаканчиком (3014)

Кленбутерол Софарма 📜 Инструкция по применению Кленбутерол Софарма 💊 Состав препарата Кленбутерол Софарма ✅ Применение препарата Кленбутерол Софарма 📅 Условия хранения Кленбутерол Софарма ⏳ Срок годности Кленбутерол Софарма Сохраните у себя Поделиться с друзьями Пожалуйста, заполните поля e-mail адресов и убедитесь в их правильности Описание лекарственного препарата Кленбутерол Софарма (Clenbuterol Sopharma) Основано на официальной инструкции по применению препарата, утверждено компанией-производителем и подготовлено для электронного издания справочника Видаль 2009 года, дата обновления: 2020. 07.13 Владелец регистрационного удостоверения: Контакты для обращений: Интер-С Групп ООО (Россия) Лекарственная форма Кленбутерол Софарма Сироп 5 мкг/5 мл: фл. 100 мл в компл. с мерн. ложкой или стаканчиком рег. №: П N015306/01 от 18.05.12 – Бессрочно Форма выпуска, упаковка и состав препарата Кленбутерол Софарма Сироп прозрачный, слабовязкий, со специфическим запахом лесной малины. 5 мл кленбутерола гидрохлорид 5 мкг Вспомогательные вещества : сорбитол, глицерол, пропиленгликоль, натрия цитрата дигидрат, лимонной кислоты моногидрат, метилпарагидроксибензоат, пропилпарагидроксибензоат, бутилпарагидроксибензоат, натрия бензоат, ароматизатор малиновый, вода очищенная. 100 мл – флаконы темного стекла (1) в комплекте с мерной ложкой или стаканчиком – пачки картонные. 100 мл – флаконы из темного полиэтилентерефталата (1) в комплекте с мерной ложкой или стаканчиком – пачки картонные. Фармакологическое действие Селективный β2-адреномиметик. Оказывает бронхолитическое и секретолитическое действие. Возбуждает β2-адренорецепторы, стимулирует аденилатциклазу, повышает содержание в клетках цАМФ, который, влияя на систему протеинкиназы, лишает миозин способности соединяться с актином и содействует расслаблению бронхов. Тормозит высвобождение из тучных клеток медиаторов, способствующих бронхоспазму и воспалению бронхов. Уменьшает отек или застой в бронхах, улучшает мукоцилиарный клиренс. При применении в больших дозах вызывает тахикардию, тремор пальцев рук. Действие начинается через 10-15 мин после приема препарата внутрь и достигает максимума через 2-3 ч. Фармакокинетика Всасывание Хорошо всасывается из ЖКТ. Метаболизм Метаболизируется в печени с образованием 8 метаболитов (в незначительных количествах). Выведение Выводится преимущественно с мочой (около 78% – в неизмененном виде). Незначительная часть выводится с желчью. Показания препарата Кленбутерол Софарма бронхиальная астма; хронические обструктивные заболевания легких. Режим дозирования Взрослым препарат назначают внутрь по 15 мл 2-3 раза/сут. Поддерживающая доза – по 10 мл 2 раза/сут. Детям назначают в следующих дозах: Возраст ребенка (масса тела) Доза до 8 мес (4-8 кг) по 2.5 мл 2 раза/сут от 8 до 24 мес (8-12 кг) по 5 мл 2 раза/сут от 2 до 4 лет (12-16 кг) по 7. 5 мл 2 раза/сут от 4 до 6 лет (16-22 кг) по 10 мл 2 раза/сут от 6 до 12 лет (22-35 кг) по 15 мл 2 раза/сут старше 12 лет по 15 мл 2-3 раза/сут Побочное действие Со стороны сердечно-сосудистой системы: тахикардия, экстрасистолия, артериальная гипо- или (чаще) гипертензия, кардиалгия, гиперемия лица. Со стороны ЦНС и периферической нервной системы: тремор пальцев рук, тревожность, головная боль, головокружение, общая слабость, бессонница, парестезии. Со стороны пищеварительной системы: сухость во рту, тошнота, рвота, гастралгия. Аллергические реакции: кожная сыпь, крапивница, бронхоспазм, ангионевротический отек. Прочие: повышенное потоотделение, гипокалиемия, мышечные судороги. При резкой отмене препарата возможно развитие резистентности и синдрома “рикошета”. Противопоказания к применению тиреотоксикоз; тахикардия; тахиаритмия; идиопатический гипертрофический субаортальный стеноз аорты; тяжелые формы ИБС; острый период инфаркта миокарда; повышенная чувствительность к кленбутеролу и другим компонентам препарата. С осторожностью следует назначать препарат при гипертиреозе, заболеваниях сердечно-сосудистой системы (склонность к аритмиям, пороки сердца, ИБС, выраженная артериальная гипертензия, кардиомиопатии), сахарном диабете. Применение при беременности и кормлении грудью Не следует назначать препарат при беременности, особенно в I триместре, в предродовый период и во время родов, т.к. кленбутерол при применении в высоких дозах обладает токолитическим действием. Кленбутерол вероятно выводится с грудным молоком. Нет данных о возможности применения кленбутерола в период лактации, поэтому назначение его в этот период не рекомендуется. Возможно назначение только в случае, если ожидаемая польза для матери превосходит потенциальный риск для ребенка. Особые указания Влияние на способность к управлению транспортными средствами и механизмами В связи с возможностью возникновения тремора, головокружения и слабости в период приема препарата необходимо воздерживаться от занятий потенциально опасными видами деятельности, требующими повышенной концентрации внимания и быстроты психомоторных реакций. Передозировка Симптомы: аритмия, тахикардия, артериальная гипертензия, кардиалгия, тремор конечностей, возможно развитие гипокалиемии. Лечение: промывание желудка, назначение активированного угля, применение водно-солевых растворов, контроль уровня калия в сыворотке крови, симптоматическая терапия. Лекарственное взаимодействие При одновременном применении с бета-адреноблокаторами наблюдается антагонизм. Кленбутерол при одновременном применении уменьшает действие гипогликемических средств. При одновременном применении с ингибиторами МАО и теофиллином усиливается риск развития нарушений внутрисердечной проводимости. Кленбутерол при одновременном применении увеличивает токсичность сердечных гликозидов и риск развития аритмии. При одновременном применении Кленбутерола с симпатомиметическими средствами происходит взаимное усиление токсичности. Условия хранения препарата Кленбутерол Софарма Список Б. Препарат следует хранить в защищенном от света, недоступном для детей месте при температуре не выше 25°; не замораживать. Срок годности препарата Кленбутерол Софарма Срок годности – 3 года. Условия реализации Препарат отпускается по рецепту. Контакты для обращений Представительство АО “Софарма” в России 109429 Москва, МКАД 14-й км, 10 Тел./факс: (495) 786-22-26 Сохраните у себя Поделиться с друзьями Пожалуйста, заполните поля e-mail адресов и убедитесь в их правильности

Статьи

Действие препарата основано на связывании активного вещества – clenbuterol gidrohloridum – с бета-рецепторами 2-го типа, которые находятся в жировых и мышечных тканях. В результате, в организме происходит заметное увеличение синтеза цАМФ, который активизирует энзимы, «вытягивающие» жирные кислоты из клеток, формирующих жировую ткань. Еще одно действие кленбутерола – активизация выработки адреналина и норадреналина, которые, в свою очередь, также способствуют сжиганию жиров. Именно эти свойства используются спортсменами с целью «сушки» мышечной массы.

Фактический уровень увеличения обмена в организме при приеме кленбутерола составляет 20-30%. Для достижения максимального результата некоторые спортсмены применяют в комплексе кофеин, тироксин и кетотифен.

Эффект от приема кленбутерола

Курс кленбутерола, рассчитанный в соответствии с рекомендованными дозами, оказывает разносторонний эффект:

• сжигание жира и «сушка» мышечной массы;
• уменьшение аппетита;
• увеличение силы;
• поддержка интенсивных тренировок;
• повышение жесткости мышц, улучшение рельефности;
• психоэмоциональная мобилизация.

Способы применения препарата Clenbuterol

Для того чтобы получить оптимальный эффект от применения препарата Clenbuterol, необходимо четко придерживаться рекомендованных доз. Основные нюансы, как принимать кленбутерол для похудения, выглядят следующим образом:

• препарат принимается курсом, длительность которого обычно составляет 2 недели, так как после этого срока отмечено резкое снижение эффективности препарата;
• курс должен сочетаться с диетой и интенсивными физическими нагрузками, необходимо принимать повышенное количество протеина;
• препарат вводится по нарастающей и в конце необходимо «спуститься с лесенки»;
• время применения кленбутерола – утром и в послеобеденное время;

Дозировка кленбутерола для сжигания жира

Дозы, как принимать кленбутерол для сушки мужчинам:

• максимальная доза для мужчин – 120-140 мкг;
• начинать следует с 20 мкг, которые соответствуют 0,02 мг препарата; в дальнейшем дозу увеличивают ежедневно на 20 мкг, достигая пика на 6-12 день;
• последние 2 дня цикла количество кленбутерола снижают до 80 и 40 мкг.

Дозы, как принимать кленбутерол девушкам, отличаются только максимально допустимой нормой, которая находится на уровне 80-100 мкг, при этом остальная схема приема выглядит аналогично рекомендованной для мужчин.

Кленбутерол выпускается в таблетированном виде, а также в виде сиропа. Задача, как принимать кленбутерол в таблетках, решается очень просто: 1 таблетка – это 0,02 мг сlenbuterol. То есть начинается курс с приема одной таблетки в день, а в пиковые дни мужчины и женщины принимают по 6-7 и 4-5 таблеток, соответственно.

Более сложный расчет, как принимать кленбутерол в сиропе. В этом случае в 5 мл (чайной ложке) сиропа содержится 0,01 мг активного вещества. Исходя из этой пропорции, выполняется расчет для каждого дня курса препарата.

Сочетание кленбутерола с кетотифеном

Кетотифен позволяет пролонгировать действие кленбутерола и восстанавливать чувствительность бета-рецепторов 2-го типа к clenbuterol gidrohloridum. Сочетая эти два препарата, курс может быть увеличен до 30-ти дней и будет строиться по следующей схеме:

• кетотифен в дозировке 1 мг добавляется, начиная с 5-го дня приема кленбутерола, когда его доза достигает 100 мкг;
• в период с 6-го по 27-ой день доза кетотифена увеличивается до 2 мг, а кленбутерол принимается в максимальной дозе;
• на 28-ой день кетотифен снижают до 1 мг, кленбутерол – до 80 мкг;
• на 29-й день доза кетотифена составляет 1 мг, кленбутерола – 50 мкг;
• на 30-й день доза кетотифена составляет 1 мг, кленбутерола – 35 мкг.

Используя указанную выше схему можно получить ускорение сжигания жира еще на 10-20 процентов, снять психическое перевозбуждение и сердцебиение. Такой курс можно повторить не менее, чем через 2 недели после окончания первого.

Кленбутерол. Применение и побочные действия

<p><strong>Кленбутерол</strong> – фармакологический препарат, который используют многие бодибилдеры, а также представительницы прекрасного пола, мечтающие о стройном и подтянутом теле. Благодаря уникальному свойству данный препарат позволяет добиться видимого результата за достаточно короткое время. Изначально <a href=”http://farmasklad.com/produkciya/clenbuterol/”>кленбутерол</a> применялся для лечения людей, страдающих бронхиальной астмой и хроническими обструктивными бронхитами, но благодаря своей способности быстро сжигать жир, препарат занял свое место и в мире спорта. </p><p>Эффективность препарата</p><p>Несомненным достоинством кленбутерола является возможность ускорения процесса похудения с минимальными рисками для организма.

Принцип действия основан на воздействии на нервную систему и усилении выделения адреналина, за счет чего и происходит выраженное жиросжигающее действие. Следует отметить, что кленбутерол  – <strong>нестероидный гормон</strong>, который входит в состав некоторых спортивных добавок.</p><p>Кленбутерол обладает также способностью контролировать аппетит, увеличивает выносливость, а также обеспечивает анаболическое действие. В сочетании с рядом других нестероидных препаратов возможно ускорение процесса похудения и сушки на 10-20%.</p><p>Эффективность действия препарата достигается также за счет увеличения секреции гормонов щитовидной железы – людям, страдающим заболеваниями щитовидной железы, перед приемом кленбутерола необходимо проконсультироваться с врачом.

Прием препарата по индивидуальной схеме позволяет избавиться от 5 до 8 кг за 14 дней. </p><p>Побочные действия и противопоказания</p><p>Как и все лекарственные препараты, <a href=”http://farmasklad. com/produkciya/clenbuterol/”>clenbuterol</a> имеет свои побочные эффекты и противопоказания. Так, наиболее распространенным побочным действием является тремор рук, беспокойство, учащенное сердцебиение, повышение артериального давления и нервное возбуждение. У мужчин отмечается также повышенная потливость. </p><p>При передозировке кленбутерола отмечаются судороги и тошнота. Избежать перечисленных побочных действий поможет включение в схему приема препарата Кетотифена. Не лишним будет упомянуть, что чаще всего побочное действие препарата наблюдается в первые дни его приема и проходят самостоятельно в течение недели.

Кленбутерол противопоказан лицам, страдающим на ряд аллергических заболеваний, тиреотоксикоз, сахарный диабет, тахикардию, стеноз, а также перенесшим инфаркт и ишемическую болезнь сердца. </p>

Применение фуллеренов для идентификации мясных продуктов содержащих кленбутерол Текст научной статьи по специальности «Агробиотехнологии»

ВестникВГУИТ, №1, 2014■

УДК 637. 615.35

Профессор Г.В. Попов, старший преподаватель И.С. Косенко, соискатель М.В. Спиридонова

(Воронеж. гос. ун-т. инж. технол.) кафедра управления качеством и машиностроительные технологии. тел. (473) 255-15-49 E-mail: [email protected]

Professor G.V. Popov, senior teacher I.S. Kosenko, graduate M.V. Spiridonova

(Voronezh state university of engineering technology) Department quality managements and machine-building technologies. phone (473) 255-15-49 E-mail: [email protected]

Применение фуллеренов для идентификации мясных продуктов содержащих кленбутерол

Application fullerene for identification of meat products containing klenbuterol

Реферат. В современных условиях большинство развивавшихся животноводческих комплексов применяют различные химические добавки, для вскармливания скота. Одним из таких препаратов является кленбутерол. Кленбутерол – это P-2-адреностимулятор, принадлежащий к группе Р-агонистов, которые стимулируют рост мышечной массы и регулируют соотношение жировой и мышечной ткани при выращивании сельскохозяйственных животных и птицы. В России опубликованы результаты исследований, в которых рекомендуется применять кленбутерол в качестве стимулятора роста при выращивании крупного рогатого скота. При этом риск воздействий остаточного содержания препарата в продукции животноводства на здоровье потребителей не оценивался. Нами были проведены исследования в области изучения свойств фуллеренов и кленбутерола и их возможности взаимодействие между собой. Для идентификации кленбутерола в мясном сырье был поведен синтез Прато, основанный на функционализации фуллеренов С60 и С70, заключающийся в превращении его в пирролофуллерены по реакции 1,3-диполярного циклоприсоединения азометин-илидов по кратным связям С=С фуллерено-вого ядра. Реакция прошла с выделением осадка темного цвета, анализ которого доказал, что это продукт взаимодействия исследуемых нами веществ. Данный эксперимент дает возможность идентифицировать кленбутерол фуллеренами.

Summary. In modern conditions the majority of developing livestock complexes, various chemical additives, apply to cattle feeding. One of such preparations is clenbuterol. Clenbuterol is P-2-adrenostimulyator belonging to group P-agonist who stimulate growth of muscular weight and regulate a ratio of fatty and muscular tissue at cultivation of agricultural animals and birds. In Russia results of researches in which it is recommended to apply clenbuterol as a growth factor at cattle cultivation are published. Thus the risk of influences of the residual maintenance of a preparation in animal husbandry production on health of consumers wasn’t estimated. We conducted researches in the field of studying of properties fullerene and clenbuterol and their opportunities interaction among themselves. For identification clenbuterol in meat raw materials the synthesis of Prato based on a functionalization fullerene by C60 and C70 consisting in its transformation in fullerene on reactions of a 1,3-dipolar cycloaddition of azomethine ylide on multiple communications of C=C of a fulleren kernel was moved. Reaction took place with allocation of a deposit of the dark color which analysis proved that is a product of interaction of substances investigated by us. This experiment gives the chance to identify clenbuterolfullerene.

Ключевые слова: мясо, идентификация, фуллерены, кленбутерол, качество

Keywords: meat, identification, fullerene, clenbuterol, quality

Проблема безопасности мяса и мясных продуктов является важной частью социального благополучия населения. В последние годы данный фактор приобретает большую актуальность в связи с тем, что предприятия стали активно использовать для переработки импортное мясо. Это связано с ужесточением мер по предотвращению попадания в производство несвежего или недоброкачественного мясного сырья.

При вступлении России в ВТО открывается возможность дополнительного увеличения объема международной торговли мясом не только в замороженном, но и в охлажденном состоянии со странами ближнего и дальнего зарубежья. При импорте скоропортящейся продукции, в том числе и мясного сырья, особое внимание должно уделяться показателям свежести и безопасности [1].

© Попов Г.В., Косенко И.С., Спиридонова М.В., 2014

ВестникВГУИТ, №1, 2014__

На сегодняшний день импорт мясной продукции возрастает из Бразилии, Китая, Мексики, Уругвая, Испании, Франции, Канады, Дании, США. Во многих из них были зафиксированы случаи обнаружения в мясе остатков кленбутерола.

Рисунок 1. Импорт мяса в Россию

Для этого была проведена реакция Пра-то, которая заключается в функционализации фуллеренов С60 и С70 и превращении их в пирролофуллерены по реакции 1,3-диполярного цикло присоединения азометин-илидов по кратным связям С=С фуллеренового ядра, это наиболее изученный аминокислотный вариант, в котором илиды образуются в результате взаимодействия аминокислоте карбонильными соединениями.

Исходным образцом служил, раствор, состоящий из кленбутерола и воды. В ходе реакции осуществлено присоединение молекулы кленбутерола к молекуле фуллерена, о чем свидетельствует образование темного осадка (рисунок 3)

Люди, потреблявшие мясо, впитавшее Кленбутерол, заболевали самыми различными заболеваниями – от распухания щитовидной железы, сердечно-сосудистых нарушений и заболеваний печени до сильнейших приступов аллергии. В тысячах случаев была зарегистрирована рвота, слабость, головокружение, лихорадка и озноб. Наиболее тяжелые случаи включали нарушение сердцебиения, внутренние кровотечения и спазмы сосудов. Несколько человек умерло, несмотря на то, что мясо животных содержало кленбутерол в ничтожной концентрации один к миллиарду.

Однако при добавлении в корма кленбутерола животные дали 20-процентный прирост мышечной массы за четырнадцать дней. Препарат сразу же нашел нелегальное применение.

Широко используемым методом контроля является иммуноферментный анализ, который для потребителя достаточно дорогостоящий и трудоемкий [3]. Перспективным направлением для создания экспресс-метода является применение фуллерен-содержащих материалов, вступающих в реакцию с молекулами кленбутерола. Для определения механизмов взаимодействия и реализации экспресс метода проведены эксперименты, позволяющие рекомендовать следующую методику анализа. Опытным путем было определено взаи-

Рисунок 3. Раствор после добавления фуллерена, с выделением осадка

С помощью спектрофотометрического анализа было определено минимальное количество кленбутерола, необходимое для реакции с фуллереном (рисунок 4).

О 1 2 3 О 5 С

Рисунок 4. Количественное соотношение кленбутерола и фуллерена

Из рисунка 4 видно, что минимальное количество кленбутерола, необходимое для реакции с фуллереном составляет 80 мкг, а фуллерена с концентрацией С=0,479 г/дмЗ – 2 мл.

Концентрацию фуллерена определили методом спектрофотометрии (рисунки 5, 6).

ВестнмкВВТУМТ, №1, 2014_

Рисунок 5. Спектрофотометрический анализ

Рисунок 6. Калибровочная линия

Для того чтобы определить взаимодействие фуллеренов с кленбутеролом в присутствии мясных белков, была проведена экстракция мясного сырья, содержащего кленбутерол, а затем по реакции Прато определили, что в растворе выделился продукт реакции в виде темного осадка (рисунок 7).

ЛИТЕРАТУРА

Рисунок 7. Раствор после добавления фуллерена, с выделением осадка в присутствии мясных белков

Для подтверждения того, что фуллерен вступает в реакцию именно с кленбутеролом, а не с другими реагентами, был проведён контрольный эксперимент с экстрактом мясного сырья, не содержащего кленбутерол. В исследуемом растворе продуктов реакции не выделилось.

Таким образом, опытным путем было установлено, что фуллерены способны идентифицировать продукты животного происхождения, содержащие кленбутерол.

REFERENCES

1 Жаринов А.И., Серегин И.Г., Резвых А.В. Определение свежести и безопасности мясного сырья // Мясная индустрия. 2013. № 2. С. 12-15.

2 Попов Г.В., Косенко И.С., Спиридонова М. В. Проблемы идентификации продуктов животного происхождения, содержащих клен-бутерол // Актуальная биотехнология. 2012. №

3 (2). С. 13-15.

3 Комаров А.А., Вылегжанина Е.С., Латышев О.Е., Скрининг-определение Кленбутеро-ла в сетчатке животных методом иммунофер-ментного анализа // Материалы Всероссийского ветеринарного конгресса и XIV Международного Московского конгресса по болезням мелких домашних животных. Москва, 2006. С. 181-182.

1 Zharinov A.I., Seregin I.G., Rez-vykh A.V. Definition of freshness and safety of meat raw materials. Miasnaia industriia. [Meat industry], 2013, no. 2, pp. 12-15. (In Russ.).

2 Popov G.V., Kosenko I.S., Spirido-nova M.V. Problems of identification of products of the animal origin containing clenbuterol. Ak-tual’naia biotekhnologiia. [Modern biotechnology], 2012, no. 3(2), pp. 13-15. (In Russ.).

3 Komarov A.A., Vylegzhanina E.S., Lat-yshev O. E. Klenbuterol’s screening definition in a retina of animals a method of the immunofer-mental analysis. Materialy Vserossiiskogo veteri-narnogo kongressa i XIV Mezhdunarodnogo kon-gressa po bolezniam melkikh domashnikh zhivotnykh [Materials of All-Russian congress of veterinary and XIV Moscow international congress on diseases of small animals]. Moscow, 2006. pp. 181-182. (In Russ.).

как применять кленбутерол для сжигания жира

как применять кленбутерол для сжигания жира

как применять кленбутерол для сжигания жира

>>>ПЕРЕЙТИ НА ОФИЦИАЛЬНЫЙ САЙТ >>>

Что такое как применять кленбутерол для сжигания жира?

Активатор сжигания жира – представляет собой усовершенствованный комплекс на основе природных компонентов, в частности клетчатке, способной очищать внутреннюю поверхность пищеварительного тракта и кишечника от вредных веществ, накапливающихся долгие годы. После избавления от токсинов, организм как-бы перезапускается и начинает работать с новой силой, расходуя массу энергии, извлекаемой из жиров, отложенных в подкожных слоях. Эффективность препарата обусловлена расщеплением висцерального жира, в том числе, обволакивающего брюшную полость. Таким образом, худеют только проблемные зоны – живот, бедра, ягодицы, а мышечная масса остается без изменений. Я рекомендую принимать коктейль людям страдающим ожирением на любой стадии, так как с его помощью можно легко избавиться от лишнего веса, и нормализовать работу всего организма. Результат закрепляется на длительный период, так как организм привыкает извлекать энергию из жиров, а ускоренный метаболизм не позволяет поступающим калориям надолго задерживаться в теле.

Эффект от применения как применять кленбутерол для сжигания жира

Активатор сжигания жира АСЖ 35 абсолютно безопасный и универсальный продукт. Его можно принимать даже детям, не боясь навредить и вызвать побочные реакции (только после консультации с педиатром). Все компоненты составляют основу функционирования организма, поэтому хорошо воспринимаются и усваиваются.

Мнение специалиста

Не забывайте прочитать инструкцию перед применением, и следовать всем рекомендациям из нее. Длительность курса в среднем составляет 30 дней, но при необходимости его можно продлить до снижения массы тела на требуемую отметку. Вот небольшой видео обзор препарата:

Как заказать

Для того чтобы оформить заказ как применять кленбутерол для сжигания жира необходимо оставить свои контактные данные на сайте. В течение 15 минут оператор свяжется с вами. Уточнит у вас все детали и мы отправим ваш заказ. Через 3-10 дней вы получите посылку и оплатите её при получении.

Отзывы покупателей:

Tata

Наконец я решилась написать свою историю похудения. Мне 31 год. Ровно четыре года назад я стала мамой близнецов и с тех пор все заботы были только о детях. О своей внешности я не думала, но помог случай – приглашение на свадьбу подруги. Это был первый мой выход в общество за долгое время, поэтому я ужаснулась, когда ни одно платье не сошлось на мне. Расстроилась и решила быстро худеть. Долго искала таблетки для похудения, но нашла один форум, где девочки описывали свой опыт и многие рекомендовали АСЖ-35. О нем были и отрицательные отзывы, но как я поняла в каждом случае, нарушались правила применения активатора сжигания жира. Взвесив все за и против, я заказала его, и ни разу не пожалела. За 1,5 месяца я скинула 11,2 кг, при этом влезла в платье на 4 размера меньше (ни разу его не надевала, так как было мало). Что могу сказать – коктейль чудный, работает на все 100%, стоимость доступная, особенно во время скидок, эффект держится на данный момент около 4 месяцев.

Kira

Активатор сжигания жира – представляет собой усовершенствованный комплекс на основе природных компонентов, в частности клетчатке, способной очищать внутреннюю поверхность пищеварительного тракта и кишечника от вредных веществ, накапливающихся долгие годы. После избавления от токсинов, организм как-бы перезапускается и начинает работать с новой силой, расходуя массу энергии, извлекаемой из жиров, отложенных в подкожных слоях. Эффективность препарата обусловлена расщеплением висцерального жира, в том числе, обволакивающего брюшную полость. Таким образом, худеют только проблемные зоны – живот, бедра, ягодицы, а мышечная масса остается без изменений. Я рекомендую принимать коктейль людям страдающим ожирением на любой стадии, так как с его помощью можно легко избавиться от лишнего веса, и нормализовать работу всего организма. Результат закрепляется на длительный период, так как организм привыкает извлекать энергию из жиров, а ускоренный метаболизм не позволяет поступающим калориям надолго задерживаться в теле.

Я уже давно не верю в обещания а-ля “минус 20 кг за месяц”. Когда вижу такое, сразу понимаю, что производитель “приукрасил” немного)) Как правило от таких средств потом в 2 раза больше набираешь. Вот килограм 5-6 сбрасывать вполне естественно и похоже на правду. Принимаю АСЖ-35, результаты: – за первый месяц – минус 4,6 кг. – за второй месяц – минус 6,1 кг (совпало с постом). – за третий месяц – 3,4 кг Итог: за три месяца почти 15 кг. С моим ростом 165 см это оооочень ощутимый результат. Поэтому, девушки, не ждите быстрого результата. Вот за пару тройку месяцев – будет хороший эффект. Где купить как применять кленбутерол для сжигания жира? Не забывайте прочитать инструкцию перед применением, и следовать всем рекомендациям из нее. Длительность курса в среднем составляет 30 дней, но при необходимости его можно продлить до снижения массы тела на требуемую отметку. Вот небольшой видео обзор препарата:
Сжигание жира, сушка мышц. Рост силы и выносливости. Снижение аппетита. . Кленбутерол выпускается в сиропе и таблетках. Нас же интересуют именно . Если Т3 или трийодтиронин применять в связке с клёнбутеролом, то всё это начинает работать как жиросжигающая машина. Настолько эффективно, что вы. Насколько эффективен Кленбутерол для похудения? Правила применения для наращивания мышечной массы и сжигания жиров.  . К примеру, тренеры своим подопечным спортсменам нередко рекомендуют Кленбутерол для похудения, увеличения эффективности тренировок и наращивания мышечной массы. Фармакологическая промышленность предлагает широкий ассортимент продукции, предназначенной дли сжигания подкожного жира и активизации процесса похудения. Особой популярностью пользуется Кленбутерол. Кленбутерол без сомнения один из лучших жиросжигателей. Меня кроме этого в нем привлекает и сильный антикатаболический эффект. Прием препарата не сложен, но придерживаться схемы необходимо. Сейчас я поделюсь своим опытом в применении клена. Проводил два курса сушки и впечатлен полученными. Clenbuterol – это добавка из спортивного питания, активно применяемая в бодибилдинге при сушке организма. . Кленбутерол помогает в этом моменте, так как активизирует сжигание жира в теле спортсмена и препятствует сжиганию мышечной ткани. Комбинация из правильного питания при сушке с приёмом. Что такое Кленбутерол. Clenbuterol – это селективный адреностимулятор . Его активно используют в бодибилдинге для сжигания подкожного жира за счет . Если применяют Кленбутерол для похудения, то работает препарат комплексно. Во время приема происходит: Уменьшение доли жира. Основная причина. 4 Clenbuterol для похудения. 5 Отзывы о препарате Кленбутерол. Принцип действия Clenbuterol. . Прием препарата, помимо сжигания жира, оказывает разгоняющий эффект на метаболизм, повышая его скорость примерно на 20-30 процентов. Кленбутерол (Clenbuterol) – препарат, который применяется в медицине для лечения бронхиальной астмы. В последние годы, кленбутерол нашел широкое применение в бодибилдинге и фитнесе, в связи с его способностью сжигать жир, поэтому часто используется атлетами для похудения и сушки. Препарат сжигающий жир, а не мышечную массу – Кленбутерол: подробная инструкция, как действует, рекомендации . Облегчить достижение цели в похудении поможет кленбутерол – медицинский препарат, применяющийся при комплексной терапии бронхиальной астмы, и при этом широко используемый в. Кленбутерол широко применяют в курсах лечения людей с бронхиальной астмой и имеющих хронические заболевания легких. . Однако, это не мешает бодибилдерам и прочим лицам проходить курс Кленбутерола для сушки тела и сжигания жиров, не нанося ущерб мышечной массе. Активизируя расщепление жиров. NEWS: Поделиться. Кленбутерол (Clenbuterol, “клён”) – препарат, который применяется в медицине для лечения бронхиальной астмы. В последние годы кленбутерол нашел широкое применение в бодибилдинге и фитнесе в связи с его способностью сжигать
http://www.jgranit.pl//userfiles/zariadka_dlia_bystrogo_pokhudeniia_v_domashnikh5998.xml
http://www.aviatroglo.fr/IMG/dieta_dlia_szhiganiia_zhira_dlia_zhenshchin9103.xml
http://willa-larysa.pl/userfiles/samaia_bystraia_dieta_dlia_pokhudeniia8471.xml
http://www.directory.com.ar/userfiles/produkty_dlia_bystrogo_pokhudeniia_spisok1877.xml
http://www.monclair.com.br/userfiles/meniu_diety_bystrogo_pokhudeniia8185. xml
Активатор сжигания жира АСЖ 35 абсолютно безопасный и универсальный продукт. Его можно принимать даже детям, не боясь навредить и вызвать побочные реакции (только после консультации с педиатром). Все компоненты составляют основу функционирования организма, поэтому хорошо воспринимаются и усваиваются.
как применять кленбутерол для сжигания жира
Активатор сжигания жира – представляет собой усовершенствованный комплекс на основе природных компонентов, в частности клетчатке, способной очищать внутреннюю поверхность пищеварительного тракта и кишечника от вредных веществ, накапливающихся долгие годы. После избавления от токсинов, организм как-бы перезапускается и начинает работать с новой силой, расходуя массу энергии, извлекаемой из жиров, отложенных в подкожных слоях. Эффективность препарата обусловлена расщеплением висцерального жира, в том числе, обволакивающего брюшную полость. Таким образом, худеют только проблемные зоны – живот, бедра, ягодицы, а мышечная масса остается без изменений. Я рекомендую принимать коктейль людям страдающим ожирением на любой стадии, так как с его помощью можно легко избавиться от лишнего веса, и нормализовать работу всего организма. Результат закрепляется на длительный период, так как организм привыкает извлекать энергию из жиров, а ускоренный метаболизм не позволяет поступающим калориям надолго задерживаться в теле.
Похудение для ленивых помогает избавиться от 1-1,5 кг за неделю. Узнайте, какими методами можно добиться таких результатов, исключив . Ознакомьтесь с правилами, при помощи которых даже ленивый человек может быстро похудеть: Полноценный отдых. Спите не менее 8 часов, худеющему. Быстрое похудение для ленивых в домашних условиях. Не секрет, что наиболее эффективный способ избавления от лишнего веса ленивым в домашних условиях — употребление большого количества воды, так как вместе с жидкостью из организма уходят все вредные вещества, а соответственно и килограммы. Специально для ленивых и занятых существует особый и очень простой рецепт . 2 правила похудения для ленивых и занятых: 1. Ежедневно выпивать 2 стакана . Кроме того, их не нужно запивать и организмом они усваиваются лучше и быстрее. Какие способы похудения считаются самыми эффективными для ленивых? Может ли лентяйка быстро похудеть в домашних условиях не соблюдая диету? Простые и доступные каждой женщине методы борьбы с лишним весом. Большинство способов похудения предполагает, что человек возьмет себя в руки и будет выполнять все указания и правила . Если у вас дома есть яблочный уксус, значит вы можете себе устроить быстрое похудение для ленивых в домашних условиях с помощью эффективной уксусной диеты. Эта методика. Пробовала разные методы быстрого похудения, но всегда снова поправлялась. . Мужчины тоже ищут легкие способы похудеть, и зарядка для ленивых им не помешает! Узнайте, какие существуют реальные методы, как похудеть даже самымм ленивым и сбросить вес без диет и . ТОП-10 реальных способов и лайфхаков похудения для ленивых. . Несложные правила способны быстро перестроить организм, направить его на похудение. Эти советы дают все современные. Способы похудения для ленивых, от которых стоит убегать как можно дальше. Очень часто среди способов снижения . Такие диеты могут основываться на разных продуктах. Кто-то обещает быструю потерю килограммов при употреблении квашеной капусты с редькой, кто-то говорит, что жир сжигается, если. Существуют ли способы похудения для ленивых в домашних условиях за короткий срок. Полезные рекомендации. . При желании похудеть особое внимание стоит уделить обычной простой воде. Она ускоряет метаболизм, способствует быстрому усвоению клетчатки, жиров, белков. При похудении желательно пить.

Кленбутерол

Форма выпуска, состав и упаковка

Сироп прозрачный, слабовязкий, со специфическим запахом лесной малины. 5 мл кленбутерола гидрохлорид 5 мкг Вспомогательные вещества: сорбитол, глицерол, 1,2-пропиленгликоль, натрия цитрат, лимонная кислота, метилпарагидроксибензоат, пропилпарагидроксибензоат, бутилпарагидроксибензоат, натрия бензоат, эссенция \”Лесная малина\”, вода дистиллированная.

Клинико-фармакологическая группа: Бронхолитический препарат – бета2-адреномиметик.

Фармакологическое действие

Селективный β2-адреномиметик. Оказывает бронхолитическое и секретолитическое действие. Возбуждает β2-адренорецепторы, стимулирует аденилатциклазу, повышает содержание в клетках цАМФ, который, влияя на систему протеинкиназы, лишает миозин способности соединяться с актином и содействует расслаблению бронхов. Тормозит высвобождение из тучных клеток медиаторов, способствующих бронхоспазму и воспалению бронхов. Уменьшает отек или застой в бронхах, улучшает мукоцилиарный клиренс. При применении в больших дозах вызывает тахикардию, тремор пальцев рук. Действие начинается через 10-15 мин после приема препарата внутрь и достигает максимума через 2-3 ч.

Фармакокинетика

Всасывание

Хорошо всасывается из ЖКТ.

Метаболизм

Метаболизируется в печени с образованием 8 метаболитов (в незначительных количествах).

Выведение

Выводится преимущественно с мочой (около 78% – в неизмененном виде). Незначительная часть выводится с желчью.

Показания

-бронхиальная астма; -хронические обструктивные заболевания легких. Режим дозирования

Взрослым препарат назначают внутрь по 15 мл 2-3 раза/сут. Поддерживающая доза – по 10 мл 2 раза/сут.

Побочное действие

-Со стороны сердечно-сосудистой системы: тахикардия, экстрасистолия, артериальная гипо- или (чаще) гипертензия, кардиалгия, гиперемия лица. -Со стороны ЦНС и периферической нервной системы: тремор пальцев рук, тревожность, головная боль, головокружение, общая слабость, бессонница, парестезии. -Со стороны пищеварительной системы: сухость во рту, тошнота, рвота, гастралгия. Аллергические реакции: кожная сыпь, крапивница, бронхоспазм, ангионевротический отек. Прочие: повышенное потоотделение, гипокалиемия, мышечные судороги. При резкой отмене препарата возможно развитие резистентности и синдрома \”рикошета\”.

Противопоказания

-тиреотоксикоз; -тахикардия; -тахиаритмия; -идиопатический гипертрофический субаортальный стеноз аорты; -тяжелые формы ИБС; -острый период инфаркта миокарда; -повышенная чувствительность к кленбутеролу и другим компонентам препарата. С осторожностью следует назначать препарат при гипертиреозе, заболеваниях сердечно-сосудистой системы (склонность к аритмиям, пороки сердца, ИБС, выраженная артериальная гипертензия, кардиомиопатии), сахарном диабете.

Беременность и лактация

Не следует назначать препарат при беременности, особенно в I триместре, в предродовый период и во время родов, т.к. кленбутерол при применении в высоких дозах обладает токолитическим действием. Кленбутерол вероятно выводится с грудным молоком.

Нет данных о возможности применения кленбутерола в период лактации, поэтому назначение его в этот период не рекомендуется. Возможно назначение только в случае, если ожидаемая польза для матери превосходит потенциальный риск для ребенка.

Особые указания

Влияние на способность к вождению автотранспорта и управлению механизмами

В связи с возможностью возникновения тремора, головокружения и слабости в период приема препарата необходимо воздерживаться от занятий потенциально опасными видами деятельности, требующими повышенной концентрации внимания и быстроты психомоторных реакций.

Передозировка

Симптомы: аритмия, тахикардия, артериальная гипертензия, кардиалгия, тремор конечностей, возможно развитие гипокалиемии. Лечение: промывание желудка, назначение активированного угля, применение водно-солевых растворов, контроль уровня калия в сыворотке крови, симптоматическая терапия.

Лекарственное взаимодействие

При одновременном применении с бета-адреноблокаторами наблюдается антагонизм. Кленбутерол при одновременном применении уменьшает действие гипогликемических средств.

При одновременном применении с ингибиторами МАО и теофиллином усиливается риск развития нарушений внутрисердечной проводимости. Кленбутерол при одновременном применении увеличивает токсичность сердечных гликозидов и риск развития аритмии. При одновременном применении Кленбутерола с симпатомиметическими средствами происходит взаимное усиление токсичности.

Условия и сроки хранения

Список Б. Препарат следует хранить в защищенном от света, недоступном для детей месте при температуре не выше 25°; не замораживать. Срок годности – 3 года.

CLENBUTEROL 100 табл. – Sport-Pit78Sport-Pit78

Кленбутерол (Clenbuterol) – препарат, который применяется в медицине для лечения бронхиальной астмы. В последние годы кленбутерол нашел широкое применение в бодибилдинге и фитнесе в связи с его способностью сжигать жир, поэтому часто используется атлетами для похудения и сушки. Курсы кленбутерола часто включают тироксин и кетотифен для ускорения процесса похудения. Кленбутерол не имеет отношения к анаболическим стероидам и принадлежит к группе адреномиметиков, которые оказывают свое физиологическое действие за счет возбуждения бета-2-адренорецепторов, вследствие чего активируется симпатическая нервная система и запускается липолиз. Для приобретения препарата нужен рецепт, но в большинстве аптек его не спрашивают.

Несколько научных статей сообщают о частом неправомочном включении кленбутерола в состав спортивных добавок для сжигания жира.

Механизм действия

Являясь бета-2 агонистом, кленбутерол действует как жиросжигатель, связываясь с бета-рецепторами 2 типа в жировой и мышечной ткани организма человека. После того как кленбутерол соединяется с рецептором, запускается каскад биохимических реакций, которые ведут к увеличению синтеза цАМФ (циклический аденозинмонофосфат). цАМФ, в свою очередь, активирует энзимы, которые мобилизируют жирные кислоты из адипоцитов (клетки жировой ткани).

Анаболическое и антикатаболическое действие кленбутерола

При действии кленбутерола на бета-2-адренорецепторы пресинаптической мембраны усиливается выделение норадреналина и адреналина, которые обладают мощным жиросжигающим эффектом. Кленбутерол повышает уровень основного обмена на 20-30% от исходного уровня.

Кленбутерол подавляет активность липопротеиновой липазы, в результате чего отложение жира в жировой ткани становится невозможным. Действуя на бета-2-адренорецепторы центральной нервной системы, данный препарат усиливает секрецию гормонов щитовидной железы естественные жиросжигатели организма.

Уникальная особенность кленбутерола заключается в том, что он не только мощный жиросжигатель, но и обладает выраженным антикатаболическим действием защищая мышцы от разрушения, что весьма актуально во время похудения и сушки в бодибилдинге. В исследованиях было установлено, что антикатаболическое действие препарата обусловлено блокированием Ca++ зависимого и убиквитин-протеасомного протеолиза.

Новое исследование 2012 года (Francesca Wannenes, Loretta Magni) подтверждает способность кленбутерола блокировать механизмы атрофии мышц.

За счет вышеназванных механизмов препарат обладает умеренным анаболическим действием, что доказано в опытах на животных и практическим применением в бодибилдинге. Некоторые авторы (Юрий Бомбела) утверждают, что в больших дозах кленбутерол может обладать катаболическими эффектами, однако это утверждение не соответствует действительности. Для этого нет ни физиологических, ни практических обоснований.

Учитывая тот факт, что препарат практически не взаимодействует с бета-1-адренорецепторами, происходит расширение бронхов и облегчение дыхания, а также гораздо меньшая частота побочных эффектов со стороны сердечно-сосудистой системы по сравнению с неселективными агонистами, такими как эфедрин

Эффекты кленбутерола

• Сжигание жира и сушка мышц
• Повышение температуры
• Снижение аппетита
• Психическая активация
• Антикатаболическое действие
• Анаболическое действие (слабо выражено)

Низкая частота побочных эффектов, практически полное отсутствие вреда для здоровья (практика показывает, что необратимые побочные эффекты практически полностью отсутствуют) и широкий ряд положительных эффектов делают кленбутерол одним из лучших жиросжигателей в бодибилдинге.

Курс кленбутерола: похудение или сушка

У мужчин рекомендуемая доза кленбутерола для сушки и похудения составляет 120 – 140 мкг в сутки. У женщин средняя доза кленбутерола для сушки и похудения составляет 80-100 мкг в сутки. Курс кленбутерола имеет свои тонкие особенности, которые необходимо строго соблюдать во избежание побочных эффектов.

Длительность курса кленбутерола составляет обычно 2 недели, затем вырабатывается привыкание (толерантность рецепторов) и эффективность снижается. После чего необходимо сделать 2 недельный перерыв и затем повторить курс. Длительность и эффективность курса кленбутерола может быть увеличена за счет включения кетотифена. Иногда для предотвращения адаптации рецепторов рекомендуется пульс-курс – 2 дня приема, 2 дня отдыха, однако эта схема менее эффективна.

Не забывайте во время цикла принимать достаточное количество протеина, ВСАА и другие блокаторы кортизола это значительно улучшит результат. Соблюдайте соответствующую диету для похудения или сушки.

В 2010 году проведено исследование, выявившее синергический эффект при сочетании с анаболическими стероидами, что подтверждает целесообразность включения препарата в конец курса АС.

Курс кленбутерола без кетотифена

• день 1: 20 мкг
• день 2: 40 мкг
• день 3: 60 мкг
• день 4: 80 мкг
• день 5: 100 мкг
• день 6-12: 120 мкг
• день 13: 80 мкг
• день 14: 40 мкг
• двухнедельный перерыв

Доза кленбутерола должна прогрессивно увеличиваться в течение первой недели. Оптимальное время приема кленбутерола – утром (чтобы не спровоцировать бессонницу, к тому же в утренние часы эффективность препарата выше). При увеличении дозировки, начинайте принимать его в 2 приема: утром и после обеда

Курс кленбутерол + кетотифен

Кетотифен – противоаллергическое средство, с уникальной способностью восстанавливать чувствительность бета-2-адренорецепторов к кленбутеролу. Это свойство было многократно доказано в исследованиях.   С помощью кетотифена можно на 10-20 процентов ускорить процесс похудения или сушки и продлить курс до 8 недель. Ко всему прочему, кетотифен устраняет психическое возбуждение, облегчает засыпание и снижает сердцебиение, то есть устраняет многие побочные эффекты кленбутерола.

• день 1: 20 мкг кленбутерол
• день 2: 40 мкг кленбутерол
• день 3: 60 мкг кленбутерол
• день 4: 80 мкг кленбутерол
• день 5: 100 мкг кленбутерол + 1 мг кетотифена
• день 6-27: 120 мкг кленбутерол + 2 мг кетотифена
• день 28: 80 мкг кленбутерол + 2 мг кетотифена
• день 29: 50 мкг кленбутерол + 1-2 мг кетотифена
• день 30: 33-35 мкг кленбутерол + 1 мг кетотифена
• не менее двух недель перерыва

Кетотифен принимается на ночь, кленбутерол – утром. Распределение доз такое же как и в предыдущем примере.

Сочетание: Для максимального повышения эффективности курса кленбутерол комбинируют с тироксином. Однако в этом случае возрастает риск побочных эффектов.

Побочные эффекты кленбутерола

Побочные эффекты кленбутерола перечислены по частоте возникновения:

• Дрожь (20%) – особенно выражена в первый день приема, затем постепенно угасает. Устраняется кетотифеном.
• Потливость (10%)
• Бессонница (7%) – устраняется кетотифеном
• Беспокойство (6%) – устраняется кетотифеном
• Сердцебиение (6%) – устраняется бета-1-адреноблокаторами. Принимайте 5 мг Бисопролола, либо 50 мг Метопролола утром.
• Повышение артериального давления (6%) – устраняется бета-1-адреноблокаторами. Принимайте 5 мг Бисопролола, либо 50 мг Метопролола утром.
• Нарушение стула – диарея (5%) – как правило, наблюдается только в первые дни приема препарата
• Тошнота (3%)
• Судороги (при передозировке)

Как видно, многие побочные эффекты кленбутерола можно предотвратить с помощью кетотифена и бисопролола (метопролола). Также, нужно заметить, что большинство побочных эффектов особенно выражены только на начальных этапах курса, и уже через несколько дней они стихают или полностью исчезают.

В книге Остапенко “Анаболические средства” имеется информация о том, что за счет накопления полиаминов в клетках, кленбутерол может вызывать злокачественный процесс и приводить к увеличению внутренних органов (в частности гипертрофии миокарда), чем можно объяснить выраженное выпячивание передней брюшной стенки у многих современных атлетов. Однако этим заявлениям нет научного и практического подтверждения, поэтому расцениваться они могут только как догадки автора. К тому же, было определено, что увеличение брюшной полости у профессиональных атлетов связано прежде всего с использованием больших доз гормона роста.

Информация в некоторых инструкциях о бронхоспазме после отмены актуальна только для людей больных астмой, у которых реакция бронхиального дерева повышена.

Кленбутерол и алкоголь

Не рекомендуется сочетать кленбутерол и алкоголь, так как это может усилить тошноту и сердцебиение. Кленбутерол и алкоголь усиливают нагрузку на сердечно-сосудистую систему. К тому же алкоголь препятствует похудению и сушке. Алкоголь разрушает мышцы.

Перед применением данного препарата обязательно проконсультируйтесь с врачом!

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности. Если ваш браузер не принимает файлы cookie, вы не можете просматривать этот сайт.

---

Настройка вашего браузера для приема файлов cookie

Существует множество причин, по которым cookie не может быть установлен правильно. Ниже приведены наиболее частые причины:

• В вашем браузере отключены файлы cookie. Вам необходимо сбросить настройки браузера, чтобы он принимал файлы cookie, или чтобы спросить вас, хотите ли вы принимать файлы cookie.
• Ваш браузер спрашивает вас, хотите ли вы принимать файлы cookie, и вы отказались. Чтобы принять файлы cookie с этого сайта, нажмите кнопку «Назад» и примите файлы cookie.
• Ваш браузер не поддерживает файлы cookie. Если вы подозреваете это, попробуйте другой браузер.
• Дата на вашем компьютере в прошлом. Если часы вашего компьютера показывают дату до 1 января 1970 г., браузер автоматически забудет файл cookie. Чтобы исправить это, установите правильное время и дату на своем компьютере.
• Вы установили приложение, которое отслеживает или блокирует установку файлов cookie. Вы должны отключить приложение при входе в систему или проконсультироваться с вашим системным администратором.

---

Почему этому сайту требуются файлы cookie?

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности, запоминая, что вы вошли в систему, когда переходите со страницы на страницу. Чтобы предоставить доступ без файлов cookie потребует, чтобы сайт создавал новый сеанс для каждой посещаемой страницы, что замедляет работу системы до неприемлемого уровня.

---

Что сохраняется в файле cookie?

Этот сайт не хранит ничего, кроме автоматически сгенерированного идентификатора сеанса в cookie; никакая другая информация не фиксируется.

Как правило, в файлах cookie может храниться только информация, которую вы предоставляете, или выбор, который вы делаете при посещении веб-сайта. Например, сайт не может определить ваше имя электронной почты, пока вы не введете его. Разрешение веб-сайту создавать файлы cookie не дает этому или любому другому сайту доступа к остальной части вашего компьютера, и только сайт, который создал файл cookie, может его прочитать.

инструкторов, необходимых для курса первого года обучения (CLEN 181)

Инженерный колледж Техасского университета A&M набирает от 50 до 60 инструкторов для поддержки первого года обучения в колледже, CLEN 181: Сообщество инженерного обучения и семинар по успеху студентов .

Фон

Мы готовимся предложить Инженерное сообщество и семинар по успеху студентов (CLEN 181) для 2500 студентов первого курса инженерных специальностей осенью 2021 года.Официально запущенный в 2020 году план расширения инженерного колледжа для CLEN 181 согласуется с инициативой по успеху студентов университета и движением к предложению общего опыта первого года (FYE) для всех студентов, впервые обучающихся в колледже (FTIC) в Техасе. Университет A&M. CLEN 181 сертифицирован как курс первого года обучения Hullabaloo U через Управление по успешной работе студентов Техасского университета A&M.

О курсе

Семинар по обучению инженеров и успеху студентов (CLEN 181) – это семинар с нулевым баллом, который оценивается как удовлетворительно / неудовлетворительно (S / U).Цель семинара – приветствовать студентов-первокурсников инженерного факультета Техасского университета A&M и помочь им в переходе и интеграции в инженерный колледж. На семинаре студенты познакомятся с возможностями и ресурсами, доступными им во время учебы в Техасском университете A&M. Для справки, просмотрите образец программы курса на осень 2020 года.

Желаемые характеристики для инструкторов

Мы ищем профессионалов в области инженерии и / или студентов:

• стремится способствовать успеху студентов в области инженерии.
• удобен в проведении увлекательных интерактивных занятий, связанных с академическим и профессиональным развитием студентов инженерных специальностей.
• инвестировала в формирование инженерного сообщества и создание инклюзивной и поддерживающей учебной среды.
• готов служить представителем инженерного колледжа и важным ресурсом для наших студентов-первокурсников.

Обязанности инструктора

В соответствии со стандартами, установленными Управлением по успешной работе студентов университета, преподаватели CLEN 181 несут ответственность за следующее:

• Должен взять на себя обязательство работать инструктором в течение семестра, переход на курс колледжа с нулевыми кредитными часами.Секции состоят не более чем из 25 студентов первого курса общего инженерного факультета и встречаются еженедельно в течение 50 минут.
• Проведение еженедельных хорошо организованных презентаций, дискуссий в классе и мероприятий по различным темам. Вам будут доступны планы уроков, мероприятия и руководства. Кроме того, обязательные модули содержания в течение четырех недель семестра будут предоставлены вам университетским отделом успешной работы студентов.
• Развивайте взаимопонимание и безопасные отношения с новыми студентами-инженерами.
• Сообщать студентам точную и своевременную информацию об академических и студенческих ресурсах.
• Будьте доступны и готовы помогать студентам на первом курсе инженерного дела, а также направлять их в соответствующие ресурсы по вопросам, выходящим за рамки вашей компетенции.
• Соблюдайте все руководящие принципы учебной программы, такие как результаты обучения, требуемое содержание и т. Д.
• Проводить предоставленные оценки и возвращать заполненные анкеты / артефакты в Управление успеваемости студентов университета.
• Для НОВЫХ инструкторов: Завершите / посетите семинар для новых инструкторов Hullabaloo U, который координируется Управлением по успеху студентов.
  
  • Обучение будет предлагаться в виде онлайн-модулей, которые можно пройти в своем собственном темпе, ИЛИ в виде 4-часового личного семинара, который будет предлагаться в несколько вариантов даты в конце апреля / мае.
  • Обучение должно занять менее 4 часов.
  • Для получения информации о будущем обучении посетите веб-сайт OSS.
• Для НОВЫХ и ВОЗВРАЩАЮЩИХСЯ инструкторов:
  • Примите участие в симпозиуме инструкторов Hullabaloo U 10 мая 2021 г. (8 а.м. – полдень) под руководством Управления успехов студентов. Примечание: из-за ограничений COVID-19 на личные встречи это обучение может быть перенесено в онлайн. Пожалуйста, ждите будущих обновлений.
• Примите участие в брифинге для инструкторов CLEN 181, проводимом Инженерным колледжем в июле / августе.
• Регулярно встречаться с коллегой-наставником, назначенным в вашу секцию, для координации и планирования компонентов курса.
• Помогите своему коллеге-наставнику разработать контракт на обучение (предоставляется во время обучения), связанный с их опытом, и предоставьте им возможности развития в классе для достижения их целей.
• Получите стипендию в размере 500 долларов США (на каждый раздел курса), которая будет выплачена вашему отделу для вашего использования в целях профессионального развития. Примечание: Инструкторы могут проводить до двух разделов CLEN 181.

Минимальные требования

Инструкторы CLEN 181 должны соответствовать следующим минимальным требованиям:

• Получите как минимум степень бакалавра
• Статус действующего сотрудника инженерного колледжа (профессорско-преподавательский состав и штатный персонал)
• Проработал в Texas A&M не менее одного года (по состоянию на август.30, 2021)
• Завершение необходимых учебных семинаров
• Утверждение руководителя инструктора или начальника отдела

Если интересно, заполните заявку инструктора Hullabaloo U до 19 февраля 2021 года . Чтобы вас считали инструктором для первого года обучения в Инженерном колледже (CLEN 181), пожалуйста, не забудьте выбрать в заявке следующий вариант – « Я хотел бы, чтобы меня считали инструктором для следующего Hullabaloo Курс U: Сообщество инженеров по обучению и семинар по успеху студентов (CLEN 181) ». Для подачи заявки требуется одобрение вашего руководителя с формой одобрения, загруженной в процессе подачи заявки. Вам также понадобится актуальное резюме для загрузки в приложение.

Дополнительная информация

Благодарим вас за то, что вы рассмотрели эту возможность, чтобы сыграть важную роль в успехе наших студентов-первокурсников-инженеров. Для получения дополнительной информации или вопросов, пожалуйста, свяжитесь с членом координационной группы по первому году обучения инженерного колледжа.

Бонни Бустос-Риос , директор по инженерно-техническим операциям – [email protected]
Элисса Моррис , старший преподаватель инженерной программы для первокурсников – [email protected]
Андреа М. Огилви , помощник декана, Успех студентов – [email protected]

EDRC в Кентукки рекомендует отменить кленбутерол в течение 21 дня

Совет по изучению лекарственных препаратов для лошадей Кентукки 1 декабря проголосовал за предложение в Комиссию по лошадям штата Кентукки, согласно которому лошади, которым прописан кленбутерол в терапевтических целях, должны быть внесены в список ветеринаров на 21 день и требовать, чтобы у этих лошадей был отрицательный результат на бронходиализатор. образцы крови и мочи исключить из списка.

Комиссия по азартным играм штата Нью-Йорк приняла аналогичное предложение днем ​​ранее, и несколько штатов Средней Атлантики также недавно начали ограничивать использование кленбутерола.

EDRC – это консультативный совет, который дает рекомендации по правилам приема лекарств всей комиссии штата Кентукки, которая затем голосует при принятии предложения.

Кленбутерол, одобренный для использования у лошадей для лечения заболеваний нижних дыхательных путей, способствует наращиванию мышц и уменьшению жира.Действующие в штате Кентукки правила использования кленбутерола требуют, чтобы он был назначен ветеринаром и сообщен в контролирующую ветеринарную службу в течение 24 часов после выдачи. Текущее время вывода – 14 дней.

«Офис KHRC получил опасения и комментарии от многочисленных тренеров и владельцев, которые считают, что кленбутерол используется не по назначению», – сказал доктор Брюс Ховард, медицинский директор KHRC по коневодству. “Они обеспокоены тем, что кленбутерол используется для получения анаболического эффекта, а не предписанного терапевтического эффекта.Были случаи, когда ветеринарные записи показали, что кленбутерол давали многочисленным лошадям в сарае, а в некоторых случаях и всему конюшне ».

Рекомендация EDRC согласуется с модельным правилом Консорциума гонок по лекарствам и тестированию в отношении кленбутерола. Это применимо как к чистокровным, так и к стандартным гонкам в Кентукки.

Доктор Энди Робертс, представляющий интересы Standardbred в комитете, был единственным членом, проголосовавшим против рекомендации предложения комиссии в полном составе.Он чувствовал, что терапевтическое использование кленбутерола было ограничено в гонках на упряжных ремнях, а у Standardbreds участвовали примерно раз в неделю. 21-дневный период отмены позволил бы Standardbreds, полученным по терапевтическим причинам, дольше не участвовать в гонках.

Говард возразил: «Если лошадь настолько тяжело больна, что вы чувствуете, что вам нужно прописать это лекарство, мы стараемся не брать это из ваших рук в терапевтических целях. Я думаю, что это компромисс, чтобы попытаться уйти от анаболический эффект и по-прежнему оставьте его в руках частного ветеринара.«

«Я не хочу преуменьшать озабоченность по поводу кленбутерола, потому что я считаю, что желание контролировать его применение в законных терапевтических целях не является незаконным», – сказал Робертс. «Тем не менее, я думаю, что стандартбреды действительно очень серьезно относятся к этому в шортах, потому что наши лошади участвуют в гонках каждую неделю».

Получение монолитного полимера с отпечатком кленбутерола с гидрофильными внешними слоями путем обратимой радикальной полимеризации с переносом цепи присоединения-фрагментации и его применение при определении кленбутерола из сыворотки крови человека методом твердофазной экстракции в реальном времени / анализа ВЭЖХ

Получение монолитного полимера с импринтированным кленбутеролом с гидрофильными внешними слоями путем обратимой радикальной полимеризации с переносом цепи присоединения-фрагментации и его применение при определении кленбутерола из сыворотки крови человека с помощью твердофазной экстракции в реальном времени / анализа ВЭЖХ

rsc.org/schema/rscart38″> Новый импринтированный монолитный материал со способностью исключать белок был разработан для селективной экстракции кленбутерола (CLE) из биологических образцов путем прямой инъекции при анализе ВЭЖХ.Материал имеет тисненую внутреннюю структуру и гидрофильный внешний слой. Полимеризацию с обратимым присоединением-фрагментацией с переносом цепи (ОПЦ) использовали при получении материала по двухэтапной методике. На первом этапе был синтезирован монолитный полимер с отпечатком кленбутерола путем комбинирования методов молекулярного импринтинга и полимеризации методом ОПЦ. Полученный монолитный полимер имеет в своей структуре агент передачи цепи RAFT (тритиоэфирные группы), который использовали для прививки поли (моно-метакрилата глицерина) [pGMMA] на второй стадии полимеризацией после RAFT.Гидрофильные слои pGMMA, привитые на поверхность отпечатанного монолита, создавали барьеры для диффузии белка. Более 90% бычьего сывороточного альбумина можно исключить из монолитной колонки, покрытой pGMMA. Между тем кленбутерол удерживался выборочно с большим коэффициентом удерживания. Результат показал, что колонка, обозначенная как RA-MIM, обладает как достоинствами полимера с молекулярным отпечатком, так и материала с ограниченным доступом. Используя RA-MIM в качестве предварительной колонки для твердофазной экстракции, был разработан и утвержден метод ВЭЖХ с переключением колонок в режиме онлайн для определения кленбутерола в сыворотке крови человека.Извлечение кленбутерола из сыворотки составило 87,3–96,9% при повышенном уровне 2–1000 нг / мл ^–1 . Были получены как хорошая линейность ( R = 0,999), так и приемлемая воспроизводимость (RSD <7,0%). Предел обнаружения и предел количественного определения составляли 0,7 нг мл ^-1 и 2,0 нг мл ^-1 соответственно, что является чувствительным с точки зрения УФ-обнаружения. Результаты продемонстрировали, что RAFT-полимеризация может быть использована для синтеза бифункциональных монолитных колонок, используя их свойство живой реакции. Полученный в результате этого исследования RA-MIM можно использовать для эффективного определения кленбутерола с помощью ВЭЖХ из биологических образцов.

У вас есть доступ к этой статье

Подождите, пока мы загрузим ваш контент… Что-то пошло не так. Попробуйте еще раз?

Анализ динамики рынка кленбутерола 2021-2026: влияние COVID-19, SWOT-анализ, ведущие игроки, выручка и прогноз

Отдел новостей MarketWatch не участвовал в создании этого контента.

15 января 2021 г. (Expresswire) – «Окончательный отчет добавит анализ воздействия COVID-19 на эту отрасль».

Глобальный отчет «Рынок кленбутерола» содержит ключевой анализ состояния рынка производителей кленбутерола с лучшими фактами и цифрами, определениями, SWOT-анализом, мнениями экспертов и последними событиями по всему миру. В всеобъемлющем отчете о маркетинговых исследованиях также содержится анализ пяти сил Портера и приводится информация о некоторых из ведущих игроков мирового рынка кленбутерола.Он проливает свет на меняющуюся динамику рынка и подробно обсуждает различные движущие силы роста, рыночные проблемы и ограничения, а также тенденции и возможности. Заинтересованным сторонам предоставляются рыночные рекомендации и бизнес-советы для обеспечения успеха на мировом рынке кленбутерола.

>>> Получите образец отчета по адресу: https://www.absolutereports.com/enquiry/request-sample/16983826

Мировой рынок кленбутерола: конкурентное соперничество

Глава о компании Profile изучает различные компании, работающие на мировом рынке Кленбутерола. В нем оцениваются финансовые перспективы этих компаний, их статус в области исследований и разработок, а также их стратегии расширения на ближайшие годы. Аналитики также предоставили подробный список стратегических инициатив, предпринятых участниками рынка кленбутерола за последние несколько лет, чтобы оставаться впереди конкурентов.

Основные ключевые участники мирового рынка кленбутерола:

• Трансо-Фарм Хандельс-ГмбХ
• Vamsi Labs LTD
• Boehringer Ingelheim Chemicals
• Шанхай Bangjing Industrial
• Ухань Синьсиньцзяли Биотехнология
• Биохимическая технология Шэньчжэня Лицзин
• Shanghai Charm Instrument Technology
• Шанхай и Шанхайская биотехнология Чжэнь
• Шанхайская биологическая технология Xinyu
• Нанкин Даусф Биотехнология
• ChemStrong Scientific
• Шанхайская биотехнология Чжэньчжун
• Ла-Фарма

>>> Чтобы понять, как влияние Covid-19 освещается в этом отчете – https://www. who.int/absolutereports.com/enquiry/request-covid19/16983826

Глобальный рынок кленбутерола: анализ сегментов

Каждый сегмент глобального рынка кленбутерола тщательно оценивается в исследовании. Сегментарный анализ, предлагаемый в отчете, выявляет ключевые возможности, доступные на мировом рынке кленбутерола через ведущие сегменты. Включенное в отчет региональное исследование мирового рынка кленбутерола помогает читателям получить четкое представление о развитии различных географических рынков в последние годы, а также о будущем.Мы представили подробное исследование критической динамики мирового рынка кленбутерола, которое включает в себя влияние рынка и факторы рыночного эффекта, драйверы, проблемы, ограничения, тенденции и перспективы. Исследование также включает другие виды анализа, такие как качественный и количественный.

Объем рынка кленбутерола по типам:

• Таблетки
• Фильмы
• Аэрозоль
• Другой

Размер рынка кленбутерола по областям применения:

• Больничные аптеки
• Розничные аптеки
• Интернет-аптеки

Поинтересуйтесь или поделитесь своими вопросами, если таковые имеются, перед покупкой этого отчета – https://www. who.int/absolutereports.com/enquiry/pre-order-enquiry/16983826

Глобальный рынок кленбутерола: региональные сегменты

В главе, посвященной региональной сегментации, подробно рассматриваются региональные аспекты глобального рынка кленбутерола. В этой главе объясняется нормативно-правовая база, которая может повлиять на рынок в целом. Он подчеркивает политический сценарий на рынке и прогнозирует его влияние на мировой рынок кленбутерола.

• Ближний Восток и Африка (страны Персидского залива и Египет)
• Северная Америка (США, Мексика и Канада)
• Южная Америка (Бразилия и др.))
• Европа (Турция, Германия, Россия, Великобритания, Италия, Франция и др.)
• Азиатско-Тихоокеанский регион (Вьетнам, Китай, Малайзия, Япония, Филиппины, Корея, Таиланд, Индия, Индонезия и Австралия)

Основные моменты отчета

• Комплексный ценовой анализ на основе продуктов, приложений и региональных сегментов
• Подробная оценка рынка поставщиков и ведущих компаний, помогающая понять уровень конкуренции на мировом рынке кленбутерола.
• Глубокое понимание регуляторных и инвестиционных сценариев глобального рынка кленбутерола
• Анализ факторов рыночного эффекта и их влияния на прогноз и перспективы мирового рынка кленбутерола
• Дорожная карта возможностей роста, доступных на мировом рынке Кленбутерола, с определением ключевых факторов
• Исчерпывающий анализ различных тенденций на мировом рынке кленбутерола для выявления рыночных тенденций.

Приобрести этот отчет (цена 4000 долларов США за однопользовательскую лицензию) – https://www.youtube.com/watch?v=ru.absolutereports.com/purchase/16983826

Рынок кленбутерола TOC охватывает следующие пункты:

1 Обзор рынка кленбутерола

1.1 Обзор продукта и сфера применения кленбутерола

1.2 Сегмент кленбутерола по типу 9.10003 Глобальный

Сравнение темпов роста продаж кленбутерола по типам (2021-2026)

1. 3 Сегменты кленбутерола по приложениям

1.4 Глобальные оценки и прогнозы размера рынка кленбутерола

1.4.1 Мировая выручка кленбутерола в 2015-2026 гг.

1.4.2 Мировые продажи кленбутерола в 2015-2026 гг.

1.4.3 Размер рынка кленбутерола по регионам: 2020 г. по сравнению с 2026 г.

1,5 Промышленность кленбутерола

1,6 Тенденции рынка кленбутерола

2 Мировой рынок кленбутерола Конкуренция производителей

2.1 Доля мирового рынка продаж кленбутерола по производителям (2015-2020 гг.)

2.2 Доля мировых продаж кленбутерола по производителям (2015-2020)

2.3 Средняя цена на кленбутерол в мире по производителям (2015-2020 гг.)

2.4 Производители Площадки по производству кленбутерола, обслуживаемая территория, тип продукта

2.5 Конкурентная ситуация и тенденции на рынке кленбутерола

2.5.1 Уровень концентрации на рынке кленбутерола

2.5.2 Мировой верх Доля рынка 5 и 10 ведущих игроков по выручке

2. 5.3 Доля рынка по типу компании (уровень 1, уровень 2 и уровень 3)

2.6 Слияния и поглощения производителей, планы расширения

2.7 Первичные интервью с ключевыми участниками рынка кленбутерола (лидерами мнений)

3 Ретроспективный рыночный сценарий кленбутерола по регионам

3.1 Глобальный ретроспективный рыночный сценарий продаж кленбутерола по регионам: 2015-2020

3.2 Глобальный ретроспективный рыночный сценарий кленбутерола по регионам : 2015-2020

3.3 Факты и цифры рынка кленбутерола в Северной Америке по странам

3.3.1 Продажи кленбутерола в Северной Америке по странам

3.3.2 Продажи кленбутерола в Северной Америке по странам

3.3.3 США

3.3.4 Канада

3.4 Факты и цифры рынка кленбутерола в Европе по странам

3.4.1 Продажи кленбутерола в Европе по странам

3.4.2 Продажи кленбутерола в Европе по странам

3.4.3 Германия

3.4.4 Франция

3.4.5 Великобритания

3. 4.6 Италия

3.4.7 Россия

3.5 Азиатско-Тихоокеанский регион Рынок кленбутерола в фактах и ​​цифрах

3.5.1 Продажи кленбутерола в Азиатско-Тихоокеанском регионе по регионам

3.5.2 Продажи кленбутерола в Азиатско-Тихоокеанском регионе по регионам

3.5.3 Китай

3.5.4 Япония

3.5.5 Южная Корея

3.5.6 Индия

3.5.7 Австралия

3.5.8 Тайвань

3.5.9 Индонезия

3.5.10 Таиланд

3.5.11 Малайзия

3.5.12 Филиппины

3.5.13 Вьетнам

3.6 Латинская Америка Факты и цифры рынка кленбутерола по странам

3 .6.1 Латинская Америка Продажи кленбутерола по странам

3.6.2 Латинская Америка Продажи кленбутерола по странам

3.6.3 Мексика

3.6.3 Бразилия

3.6.3 Аргентина

3.7 Рынок кленбутерола на Ближнем Востоке и в Африке Факты и цифры по странам

3.7.1 Продажи кленбутерола на Ближнем Востоке и в Африке по странам

3.7.2 Продажи кленбутерола на Ближнем Востоке и в Африке по странам

3. 7.3 Турция

3.7.4 Саудовская Аравия

3.7.5 ОАЭ

4 Исторический анализ мирового рынка кленбутерола по типу

5 Исторический глобальный анализ рынка кленбутерола по приложениям

6 Профили компаний и ключевые показатели в бизнесе кленбутерола

7 Анализ затрат на производство кленбутерола 7.1 Анализ ключевого сырья кленбутерола

7.1.1 Основное сырье

7.1.2 Динамика цен на основное сырье

7.1.3 Ключевые поставщики сырья

7.2 Доля в структуре производственных затрат

7.3 Анализ производственного процесса кленбутерола

7.4 Анализ производственной цепочки кленбутерола

8 Маркетинговый канал, дистрибьюторы и клиенты

8.1 Маркетинговый канал

8.2 Список дистрибьюторов кленбутерола

8.3

8.3

8,3 Кленбутерол 9 Динамика рынка

9.1 Тенденции рынка

9. 2 Возможности и движущие силы

9.3 Проблемы

9.4 Анализ пяти сил Портера

10 Прогноз мирового рынка

10.1 Оценки и прогнозы мирового рынка кленбутерола по типам

10.1.1 Прогнозируемые глобальные продажи кленбутерола по типам (2021-2026)

10.1.2 Глобальный прогнозируемый доход от кленбутерола по типам (2021-2026)

10.2 Оценки и прогнозы рынка кленбутерола по приложениям

10.2.1 Глобальные прогнозируемые продажи кленбутерола по приложениям (2021-2026)

10.2.2 Глобальный прогнозируемый доход от кленбутерола по приложениям (2021-2026)

10.3 Оценки и прогнозы рынка кленбутерола по регионам

10.3.1 Глобальные прогнозируемые продажи кленбутерола по регионам (2021-2026)

10.3.2 Глобальные прогнозируемые доходы от кленбутерола по регионам (2021-2026)

10,4 Северная Америка Оценки и прогнозы кленбутерола (2021-2026)

10,5 Европа Оценки и прогнозы по кленбутеролу (2021-2026)

10,6 Азиатско-Тихоокеанский регион Оценки и прогнозы кленбутерола (2021-2026)

10. 7 Оценки и прогнозы кленбутерола в Латинской Америке (2021-2026)

10,8 Ближний Восток и Африка Оценки и прогнозы кленбутерола (2021-2026)

11 Выводы и выводы исследования

12 Методология и источник данных

12.1 Методология / Исследовательский подход

12.1.1 Исследовательские программы / Дизайн

12.1.2 Оценка размера рынка

12.1.3 Структура рынка и триангуляция данных

12.2 Источник данных

12.2.1 Вторичные источники

12.2.2 Первичные источники

12.3 Список авторов

12.4 Заявление об отказе от ответственности

Для подробного TOC – https://www.absolutereports.com/TOC/16983826#TOC

Свяжитесь с нами:

Имя: Ajay More

Телефон: США + 14242530807 / Великобритания +44 20 3239 8187

Электронная почта: [email protected]

Другие наши отчеты:

Следы минералов (хелатные) в анализе рынка кормов, региональном прогнозе, росте Тенденции, ключевые игроки, конкурентные стратегии и прогнозы до 2026 года

Объем рынка стоматологических 3D-сканеров для печати на 2021 год: влияние COVID-19, SWOT-анализ, динамика рынка с ведущими игроками, прогноз доходов и темпов роста до 2026 года

Размер мирового рынка медицинского туризма , Доля, новые тенденции, технологии и прогнозы будущего роста к 2026 г.

Факторы роста рынка газификации нефтяного кокса до 2021 г .: тенденции в отрасли, доля, размер, рост, возможности и Прогноз на 2026 год

Доля рынка резиновых башмаков для колес, оценка тенденций, глобальный рост, последние разработки, новейшие технологии и 2026 год по данным Absolute Reports

Пресс-релиз, распространенный Express Wire

Чтобы просмотреть исходную версию на Express Wire, посетите Clenbuterol Market Анализ динамики 2021-2026: влияние COVID-19, SWOT-анализ, ведущие игроки, доход и прогноз

COMTEX_377697127 / 2598 / 2021-01-15T00: 28: 10

Есть ли проблемы с этим пресс-релизом? Свяжитесь с поставщиком исходных текстов Comtex по адресу editorial @ comtex.com. Вы также можете связаться со службой поддержки клиентов MarketWatch через наш Центр поддержки клиентов.

Отдел новостей MarketWatch не участвовал в создании этого контента.

Активация β2-адренорецептора усиливает синаптическую потенциацию и поведенческую память посредством передачи сигналов цАМФ-PKA в медиальной префронтальной коре головного мозга крыс

1. Хоу-Чэн Чжоу1,
2. Янь-Ян Сунь1,
3. Вэй Цай1,
4. Сяо-Тин Хэ1,
5. Фэн И1,
6. org/Person”> Bao-Ming Li1,2,3 и
7. Сюэ-Хан Чжан1,3

1. ¹ Институт нейробиологии и Государственная ключевая лаборатория медицинской нейробиологии, Институты исследований мозга, Университет Фудань, Шанхай 200032, Китай
2. ² Центр психоневрологических заболеваний, Институт наук о жизни, Университет Наньчан, Наньчан 330031, Китай

Абстрактные

Префронтальная кора (ПФК) играет важную роль в когнитивных функциях, включая рабочую память, регуляцию внимания и т. Д. поведенческое торможение, а также хранение в памяти.Функции PFC очень чувствительны к норэпинефрину (NE), и даже низкие уровни эндогенно высвобождаемого NE оказывают сильное влияние на функционирование PFC. Активация β-адренорецепторов (β-AR) способствует синаптическому потенцированию и улучшает память в гиппокампе. Однако об этих процессы в PFC. В настоящем исследовании мы исследуем роль β2-AR в синаптической пластичности и поведенческой памяти.Наши результаты показывают, что селективный агонист β2-AR кленбутерол способствует длительной потенциации, зависящей от времени спайков (tLTP). в физиологических условиях с интактным ГАМКергическим ингибированием, и такое облегчение предотвращается совместным применением с ингибитором цАМФ Rp-cAMPS. Нагрузка постсинаптических пирамидных клеток с помощью Rp-cAMPS, ингибитора PKA PKI _5-24 или ингибитора G-белка GDP-β-S значительно снижает, но не устраняет эффект кленбутерола.Кленбутерол подавляет ГАМКергическую передачу, блокируя ГАМКергическую передачу посредством ГАМК _{Блокатор рецепторов} частично имитирует эффект кленбутерола. В поведенческих тестах настой кленбутерола после тренировки в mPFC улучшает 24-часовую память о страхе. Таким образом, мы наблюдали, что активация префронтального кортикального β2-AR кленбутеролом облегчает tLTP и улучшает память о страхе следа. Механизм, лежащий в основе облегчения tLTP, включает стимуляцию постсинаптического cAMP-PKA сигнальные каскады и подавление активности ГАМКергической цепи.

Префронтальная кора (ПФК) играет важную роль в нескольких аспектах познания, включая регуляцию внимания, поведенческие торможение, обучение и память (Goldman-Rakic ​​1987; Miller and Cohen 2001; Fuster 2003). PFC управляет поведением и мышлением, используя рабочую память (Goldman-Rakic ​​1987), и участвует в кодировании и извлечении воспоминаний, таких как подавление проактивного вмешательства и предотвращение воспоминаний и мыслей перестать отвлекать. Кроме того, PFC участвует в ассоциации временно разделенных событиях (Fuster et al. 2000) и долгосрочное хранение информации, включающей временные отношения (Runyan et al. 2004). Повреждение PFC приводит к неспособности выбирать, поддерживать и связывать временно отключенные стимулы (Dias et al. 1997).

Норэпинефрин (NE), нейромодуляторный медиатор, секретируется в ответ на возбуждающие или новые стимулы (Сара и Сигал, 1991; Берридж и Уотерхаус, 2003).Высвобождение низких и средних уровней NE активирует α-2A адренорецепторы и улучшает функции PFC, такие как рабочая память. работоспособность и внимание (Арнстен и Гольдман-Ракич 1985; Арнстен и др. 1988; Франович и Арнстен 1998; Ли и др. 1999; Франович и др. 2002; Ван и др. 2007). Напротив, более высокие уровни NE, а также стресс активируют α-1-адренорецепторы и ухудшают функции PFC (Arnsten and Jentsch 1997; Birnbaum et al. 1999; Mao et al. 1999; Marzo et al. 2010).

β-Адренорецепторы (β-AR) представляют собой рецепторы, связанные с G-белком, которые опосредуют физиологические реакции на NE.β-AR включают три подтипа, β1, β2 и β3, которые все присутствуют в нервной системе. Обширные поведенческие и физиологические исследования продемонстрировали что активация β-AR способствует долгосрочному потенцированию (LTP) (Katsuki et al. 1997; Lin et al. 2003; Straube et al. 2003; Gelinas and Nguyen 2005; O’Dell et al. 2010; Connor et al. 2011). ) и улучшает память (Ji et al. 2003; Tronel et al. 2004; Lemon et al. 2009; Miranda et al. 2011).

Было показано, что стимуляция β2-AR улучшает LTP и память в гиппокампе и миндалевидном теле.Например, Qian et al. (2012) сообщили, что активация β2-AR поддерживает пролонгирование θ-столбняка-LTP в гиппокампе (Qian et al. 2012), что является важной формой синаптической пластичности для функций гиппокампа. Макгоу и соавторы (1991) сообщили, что инфузия агониста β2-AR кленбутерола в миндалину сразу после тренировки улучшает сохранение памяти в тормозящая задача избегания (Introini-Collison et al. 1991). Напротив, функции префронтального кортикального β2-AR в синаптической пластичности и поведенческой памяти, особенно клеточные механизмы, участвующие в этих функциях, остаются малоизученными.

Возбуждающие глутаматергические синапсы в ПФК пластичны, и изменения в силе синапсов происходят в ПФК во время поведенческих реакций. задач, особенно во время задач, связанных с рабочей памятью (Ларош и др., 1990; Джей и др., 1995). Предполагается, что изменения силы корковых синапсов происходят в зависимости от точного времени пре- и постсинаптического периода. активность, процесс, известный как пластичность, зависящая от времени всплеска (Magee and Johnston 1997; Markram et al.1997; Би и Пу 2001). Относительное время пре- и постсинаптической активности определяет, будет ли синаптическая сила увеличиваться или уменьшаться (Sjostrom and Nelson 2002). Следовательно, пластичность префронтальной коры, зависящая от времени спайков, была предложена в качестве важного клеточного механизма, лежащего в основе Когнитивные функции ПФК.

Следовое кондиционирование – это форма обучения, которая требует ассоциации условного стимула (CS) и безусловного стимула. стимул (US), разделенный по времени, что отличается от классической парадигмы задержки тем, что животное должно поддерживать внимание во время интервал трассировки для изучения ассоциации CS – US (Huerta et al.2000; Han et al. 2003 г.). Предполагается, что PFC участвует в приобретении и хранении следов страха (Sacchetti et al. 2002; Runyan et al. 2004; Gilmartin and McEchron 2005). Синаптическая пластичность внутри mPFC критична для хранения следов страха (Gilmartin and Helmstetter 2010). Однако влияние норадренергической модуляции mPFC на память о следах страха остается неизвестным.

Целью настоящего исследования было охарактеризовать влияние активации префронтального кортикального β2-AR на синаптическую потенциацию и поведенческие объем памяти. Мы исследовали влияние агониста β2-AR кленбутерола на ЛТБ, зависящую от времени спайков (tLTP), с использованием цельноклеточного анализа in vitro. техника записи патч-зажим. Кроме того, мы исследовали эффект немедленного введения кленбутерола непосредственно в мПФК крыс. после следа страха кондиционирования. Результаты обоих исследований показывают, что активация β2-AR кленбутеролом усиливает tLTP и сохранение памяти, и что эти улучшения могут быть отменены антагонистом β2-AR ICI 118551.

Результаты

β2-AR присутствует в пирамидных клетках mPFC

Экспрессия

β2-AR в ПФК человека (Kalaria et al. 1989) и нечеловеческих приматов (Flugge et al. 1997) широко исследовалась. Однако распределение β2-AR в ПФК грызунов неизвестно. Мы рассмотрели выражение β2-AR в пирамидных клетках PFC крысы с использованием метода двойного иммунофлуоресцентного мечения. CaMKII – пирамидальная клетка маркер (Muller et al. 2006). Конфокальные изображения показали, что β2-AR равномерно экспрессируется в пирамидных клетках как поверхностных слоев (слой 2/3), так и глубокие слои (слой 5/6) mPFC. На рисунке 1 показано, что почти все CaMKII-положительные клетки окрашиваются положительно на β2-AR, что указывает на то, что β2-AR широко присутствует в пирамидные клетки мПФК.

Рисунок 1.

β2-AR присутствует в пирамидных клетках mPFC. Микроскопические конфокальные изображения, показывающие, что β2-AR коэкспрессируется с CaMKII в клетках mPFC. Изображения дважды окрашены β2-AR (красный) и CaMKII (зеленый). ( A1 ) Каждый квадрат иллюстрирует сечение ячеек слоя 2/3 при малом увеличении.Изображения из областей в рамке в A1 показаны в A2 . ( B ) Изображения с большим увеличением. Стрелками обозначены ячейки с двойной меткой. Прутки, 20 мкм.

Активация β2-AR способствует tLTP

Широкое распространение β2-AR в пирамидных клетках mPFC означает, что β2-AR играет важную роль в физиологических функция.Поэтому мы поинтересовались, может ли активация β2-AR изменять синаптическую пластичность mPFC. Чтобы проверить это вопрос, мы выполнили регистрацию целых клеток с помощью патч-клампа визуально идентифицированных пирамидных нейронов в слое 2/3 mPFC срезы и стимулировали ввод внеклеточной стимуляцией в слое 2/3 (рис. 2А). Мы идентифицировали пирамидные клетки, вводя деполяризованные токи в нейроны, чтобы вызвать потенциалы действия. Типичный Картина возбуждения пирамидных клеток показала значительную адаптацию частоты возбуждения (Цветков и др.2002) (рис. 2Б, слева). Введение люцифер желтого во внутриклеточный раствор позволило идентифицировать пирамидные клетки на основе пирамидальная форма их сомат и их апикальных дендритов (рис. 2В, справа).

Фигура 2.

Активация β2-AR усиливает tLTP в mPFC. ( A ) Схема экспериментальной установки.Размещение внеклеточного стимулирующего электрода и время индукции tLTP протокол (, вставка ). Возбуждающий постсинаптический потенциал (ВПСП) вызывался внеклеточной стимуляцией и сочетался с одиночный AP, индуцированный в пирамидных клетках ( слева, ). Показан репрезентативный ответ ВПСП-АП во время парного стимула ( справа ). ( B ) Записи токовых клещей для идентификации пирамидных нейронов с помощью инъекций тока -150, -50, 50 и 150 пА.Помеченный Ячейка пирамиды показана справа . ( C ) LTP индуцируется протоколом, зависящим от времени спайков (обозначен стрелкой). Синаптический прирост через 25–30 мин после тренировки. значительно выше исходного уровня ( P <0,05). График образца (, вставка ) показывает средние значения 11 EPSP за 5 минут до (черный) и 25 минут после (серый) тренировки. Пунктирная линия указывает среднее значение базальные синаптические ответы.Входное сопротивление ( R, , _и ) и мембранный потенциал (мВ) отслеживаются во всех экспериментах. ( D ) Применение агониста β2-AR кленбутерола (10 мкМ) во время периода спаривания усиливает tLTP. Синаптическое усиление на 25–30 мин после спаривания значительно выше исходного уровня ( P <0,01). Продолжительность применения обозначается серой полосой над графиком. ( E ) Совместное применение кленбутерола и антагониста β2-AR ICI 118551 устраняет усиление tLTP.( F ) Групповые данные, показывающие tLTP в контрольной группе, кленбутерол и ICI + кленбутерол. Серые круги представляют одну ячейку tLTP и усредненные данные обозначены полосой. (**) P <0,01.

LTP был индуцирован протоколом спайков (фиг. 2A) при интактном ГАМКергическом ингибировании.Повторное объединение ВПСП с одним постсинаптическим потенциалом действия (10 мсек. после начала ВПСП, 50 × при 0,1 Гц) привело к длительному увеличению как амплитуды, так и наклона ВПСП под неповрежденным ГАМКергическое ингибирование (среднее значение = 111,11 ± 3,90% от исходного уровня, n = 7 клеток от семи крыс, парные t -тест, P <0,05 по сравнению с исходным ответом до спайк-синхронизации) (рис. 2C ).

Когда кленбутерол (10 мкМ), селективный агонист β2-AR, применялся в течение периода спаривания (от 1 мин до этого до +7 мин после начала 8-минутного протокола спаривания) tLTP значительно увеличился (среднее значение = 154 ± 6.45% от исходного уровня, n = 7 клеток от шести крыс, t -тест, P <0,01 по сравнению с контролем) (рис. 2D). Увеличение tLTP было устранено совместным применением кленбутерола и ICI 118551 (10 мкМ), селективного антагониста β2-AR. (среднее значение = 114,22 ± 5,64% от исходного уровня, n = 6 клеток от шести крыс, t -тест, P > 0,05 по сравнению с контролем) (рис. 2E). Таким образом, активация β2-AR усиливает tLTP в пирамидных клетках 2/3 слоя mPFC.

Облегчение tLTP, индуцированное активацией β2-AR, включает передачу сигналов cAMP-PKA

Мы также исследовали, опосредуется ли индуцированное кленбутеролом облегчение tLTP с помощью передачи сигналов Gs-cAMP-PKA, классического нижестоящего сигнальный путь β2-AR. Совместное применение мембранопроницаемого ингибитора цАМФ Rp-cAMPS (20 мкМ) с кленбутеролом во время период спаривания предотвратил tLTP (127.23 ± 4,47% от исходного уровня, n = 5 клеток от четырех крыс, P > 0,05 по сравнению с исходным ответом) (фиг. 3A). Важно отметить, что загрузка мембранно-непроницаемого ингибитора цАМФ Rp-cAMPS (100 мкМ), мембранно-непроницаемой протеинкиназы A (PKA) ингибиторный пептид PKI _5-24 (0,5 мкМ) или ингибитор G-белка GDP-β-S (1 мМ) в записывающей пипетке значительно снижал индуцированный кленбутеролом tLTP облегчение по сравнению с группой кленбутерола (Rp-cAMPS, 127.23 ± 4,47% от исходного уровня, n = 5 клеток от четырех крыс; PKI _5-24 , 128,49 ± 6,62% от исходного уровня, n = 5 клеток от пяти крыс; GDP-β-S, 129,36 ± 5,76% от исходного уровня, n = 4 от четырех крыс, P <0,05 по сравнению с группой кленбутерола) (рис. 3), но не устраняет облегчение по сравнению с контрольной группой ( P <0,05 по сравнению с контрольной группой). Эти результаты предполагают, что постсинаптическая передача сигналов цАМФ-ПКА участвует в облегчении tLTP. индуцируются кленбутеролом и указывают на то, что кленбутерол может действовать как на пре-, так и на постсинаптический β2-AR, усиливая tLTP.

Рисунок 3.

Активация β2-AR усиливает tLTP посредством передачи сигналов cAMP-PKA. ( A ) Совместное применение кленбутерола с проницаемым ингибитором цАМФ Rp-cAMPS предотвращает tLTP. ( B ) tLTP, усиленный кленбутеролом, значительно снижается, но не устраняется полностью при регистрации Rp-cAMPS, загруженных пипеткой. (Rp-cAMP _{(загружено)} ) ( B1 ), PKI _5-24 (PKI _{(загружено)} ) ( B2 ) и GDP-β-S (GDP-β-S _{( загружен)} ) ( B3 ). ( C ) Краткое описание tLTP. (*) P <0,05 по сравнению с группой кленбутерола, ( ^# ) P <0,05 по сравнению с контрольной группой.

Активация β2-AR подавляет GABAergic вход в пирамидные клетки

Пирамидные клетки в mPFC получают глутаматергический и ГАМКергический входы.Индукция tLTP при сохранении тормозных цепей очень восприимчив к ГАМКергическому ингибированию (Meredith et al. 2003; Campanac and Debanne 2008). Таким образом, мы исследовали, увеличивает ли кленбутерол tLTP, влияя на ГАМКергическую передачу. Чтобы проверить этот вопрос, мы зарегистрированы спонтанные тормозные постсинаптические токи (sIPSC) в присутствии DNQX (20 мкМ) и APV (50 мкМ), которые блокируют Передача возбуждения, опосредованная AMPA-рецептором и NMDA-рецептором, соответственно. Через семь-десять минут после нанесения кленбутерола (10 мкМ) частота sIPSC была снижена до 70,14 ± 2,97% от исходного уровня ( P <0,01 по сравнению с исходным уровнем, n = 7 клеток от шести крыс) (рис. 4A), а амплитуда была снизился до 74,22 ± 5,97% от исходного уровня ( P <0,01 по сравнению с исходным уровнем) (рис. 4A). Подавляющий эффект кленбутерола на sIPSC в значительной степени восстанавливался через 7-10 минут после прекращения приема кленбутерола. приложение (частота, 96.27 ± 8,96% от исходного уровня; амплитуда, 92,35 ± 10,42% от исходного уровня, данные не показаны) (фиг. 4A). Реакция sIPSC зависит от срабатывания потенциала действия.

Рисунок 4.

Активация β2-AR подавляет ГАМКергическую синаптическую передачу. ( A ) Кленбутерол снижает частоту и амплитуду sIPSC. ( A1 ) Пример кривой с sIPSC, записанный в пирамидных клетках в отсутствие или в присутствии кленбутерола.Накопленная частота sIPSC распределение ( A2 , слева ) и распределение амплитуд ( A3 , слева ) проиллюстрированы в записи из A . Сводные сгруппированные данные показаны в A2 ( справа ) и A3 ( справа ). ( B ) Кленбутерол подавляет амплитуду вызванных IPSC (eIPSC), и подавление может быть восстановлено совместным применением с ICI118,551.( Left ) Примерные кривые с eIPSC были записаны, и удерживающий потенциал составлял -80 мВ. ( Средний ) Временной ход усредненной амплитуды eIPSC ( вверху ) и усредненных R _i ( внизу ) всех клеток до, во время и после нанесения кленбутерола в ванне без (белые кружки) и с непрерывным наличие антагониста β2-AR ICI118,551 (серые круги). ( Справа ) Индивидуальные (закрашенные кружки) и средние (столбцы) амплитуды eIPSC без (Clen) и с ICI118,551 (ICI + Clen) во время применения кленбутерола.(**) P <0,01. ( C ) Кленбутерол снижает частоту и амплитуду миниатюрных IPSC (mIPSC). Пример трассировки с mIPSC показан на С1 . Кумулятивное частотное распределение mIPSC ( C2 , слева, ) и распределение амплитуд ( C3 , слева, ) проиллюстрированы в записи с A . Сводные сгруппированные данные представлены в C2 ( правый ) и C3 ( правый ).(**) P <0,01.

Кроме того, мы проверили влияние кленбутерола на вызванную ГАМКергическую передачу. EIPSC в результате стимуляции 2/3 слоя полностью блокировались антагонистом рецептора GABAa, 50 мкМ пикротоксином (фиг. 4B). Через семь-десять минут после применения кленбутерола амплитуда eIPSC значительно снизилась до 73.92 ± 6,16% от исходного уровня ( P <0,01 по сравнению с исходным уровнем, парные t -тест, n = 7 клеток от семи крыс). R _i оставался неизменным во время применения кленбутерола ( R _i , 101,77 ± 1,36% от исходного уровня за 7–10 минут применения кленбутерола, данные не показаны). Эффект подавления на eIPSC восстанавливалась через 7-10 минут после прекращения приема кленбутерола (89.89 ± 4,54% от исходного уровня, данные не представлены). Кроме того, мы исследовали эффект кленбутерола в постоянном присутствии антагониста β2-AR ICI118,551 (10 мкМ). В этих условиях кленбутеролом подавление eIPSC больше не существовало (рис. 4B). Амплитуда eIPSC при лечении кленбутеролом составляла 96,91 ± 4,16% от исходного уровня ( P > 0,05 относительно исходного уровня, парный тест t- , n = 7 клеток от пяти крыс), что указывает на то, что подавление кленбутерола опосредовано β2- АР, но не по неспецифическим механизмам.

Затем мы поинтересовались, происходит ли подавляющий эффект кленбутерола на ГАМКергическую передачу за счет снижения пресинаптический выброс ГАМК. Чтобы исследовать этот вопрос, мы исследовали влияние кленбутерола на mIPSC, которые являются активными. потенциально независимые и представляют собой ответы пирамидных клеток на спонтанное высвобождение одиночных ГАМК-содержащих пузырьков.В настоящем исследовании mIPSC были зарегистрированы в присутствии 0,5 мкМ тетродотоксина, который блокирует возбуждение потенциала действия и размножение. Рисунок 4C показывает, что в течение 7–10-минутного применения кленбутерола в ванне частота mIPSC снизилась до 74,92 ± 3,36% от исходного уровня. ( P <0,01 по сравнению с контролем) (рис. 4B, в середине) и амплитуда mIPSC снизилась до 82,83 ± 2,02% от исходного уровня ( P <0,01 по сравнению с контролем, парные t -тест, n = 8 клетки от восьми крыс) (рис. 4Б, справа). Подавляющий эффект кленбутерола на mIPSC в значительной степени исчез после прекращения приема кленбутерола. применение (частота 90,60 ± 5,38% от исходного уровня; амплитуда 92,07 ± 3,78% от контроля, данные не показаны). Эти данные предполагают что кленбутерол действует как на пре-, так и на постсинаптический β2-AR, подавляя ГАМКергическую передачу.

Взятые вместе, эти результаты демонстрируют, что кленбутерол подавляет ингибирующий вход в пирамидные клетки слоя 2/3, действуя на β2-AR как в постсинаптических пирамидных клетках, так и в пресинаптических ГАМКергических окончаниях.

Активация β2-AR не влияет на глутаматергическую передачу пирамидным клеткам

Кленбутерол может также усиливать tLTP за счет усиления возбуждающего синаптического входа в пирамидные клетки 2/3 слоя. Исследовать По этому механизму мы зарегистрировали спонтанные возбуждающие постсинаптические токи (sEPSC) в присутствии пикротоксина (50 мкМ) в блокировать GABA _A -опосредованную ингибирующую передачу.На рис. 5А показано, что частота и амплитуда сЭПСК оставались неизменными через 7-10 мин после применения кленбутерола (10 мкМ) (частота 97,21 ± 2,89% от исходного уровня, P > 0,05 по сравнению с контролем; амплитуда 101,56 ± 2,71% от исходного уровня, P > 0,05 по сравнению с контролем; n = 7 клеток от шести крыс). Мы также исследовали влияние кленбутерола на вызванный синаптический ответ. Рисунок 5B показывает, что кленбутерол не влияет ни на амплитуду вызванного EPSC (eEPSC), ни на наклон вызванного EPSP (eEPSP) (eEPSC, 97.53 ± 3,64% от исходного уровня, P > 0,05 по сравнению с контролем, n = 8 от семи крыс; eEPSP, 100,11 ± 8,9% от исходного уровня, P > 0,05 по сравнению с контролем, n = 7 клеток от четырех крыс). Эти результаты предполагают, что активация β2-AR не изменяла возбуждающую глутаматергическую функцию. вход в пирамидальные клетки.

Рисунок 5.

Активация β2-AR не влияет на глутаматергическую передачу. ( A ) Влияние кленбутерола на sEPSC. ( A1 ) Пример кривой с sEPSC, записанной в отсутствие (контроль) или в присутствии кленбутерола (Clen). Совокупная частота sEPSC распределение ( A2 , слева ) и распределение амплитуд ( A3 , слева ) проиллюстрированы на записи из A1 .Сводные сгруппированные данные представлены в A2 ( справа ) и A3 ( справа ). ( B ) Влияние кленбутерола на вызванный синаптический ответ. Левая панель показывает временной ход усредненной амплитуды eEPSC, а на вставке показаны образцы кривых при -70 мВ удерживающем потенциале, который представляет собой среднее значение семи EPSC за 0–3 мин до (черный) и через 7–10 мин после (серый) нанесение кленбутерола соответственно. На правой панели показан временной ход усредненного наклона eEPSP и усредненного мембранного потенциала (мВ) всех клеток до, во время и после нанесения кленбутерола в ванне и на вставке показаны следы образца при -80 мВ мембранного потенциала.

Подавление ГАМКергической передачи частично имитирует эффект активации β2-AR на tLTP

Индукция

tLTP во многих возбуждающих синапсах чувствительна к ГАМКергическому ингибированию (Meredith et al.2003; Кампанак и Дебанн, 2008 г.). Представленные данные показывают, что активация β2-AR подавляет ГАМКергическую передачу. Затем мы спрашиваем, действительно ли редукция ГАМКергической передачи играет доминирующую роль в облегчении tLTP, вызванном активацией β2-AR. Чтобы проверить этот вопрос, мы добавлен GABA _A блокатор рецепторов пикротоксин (50 мкМ) в перфузионную искусственную спинномозговую жидкость (ACSF) для блокирования ГАМКергического ингибитора схема.На рисунке 6 показано, что tLTP индуцировался в присутствии пикротоксина (среднее значение = 124,26 ± 3,61% от исходного уровня, n = 5 клеток от четырех крыс, парный t -тест, P <0,05 по сравнению с исходным уровнем) ( Фиг.6A) ответ перед спайкованием по времени и величина tLTP были значительно увеличены по сравнению с контролем, что позволяет предположить что ГАМКергическое ингибирование сдерживает tLTP в пирамидных клетках 2/3 слоя mPFC ( P <0,05 по сравнению с контролем) (рис.6Б). Более того, величина tLTP в присутствии пикротоксина резко снижает величину tLTP, индуцированного кленбутеролом. ( P <0,01 по сравнению с группой кленбутерола) (рис. 6B), предполагая, что подавление ГАМКергической передачи частично, но не полностью имитирует эффект кленбутерола на tLTP. Вместе наши данные показывают, что усиление tLTP, вызванное активацией β2-AR при интактной ингибиторной цепи, частично опосредовано подавлением ГАМКергического ингибирования.

Рисунок 6.

Подавление ГАМКергической передачи частично имитирует эффект активации β2-AR на tLTP. ( A ) tLTP индуцируется в присутствии пиктротоксина (обозначено серой линией). Синаптический прирост через 25–30 мин после тренировки составляет значительно выше исходного уровня ( P <0.05). Образец графика , вставка показывает средние значения 11 EPSP за 5 минут до (черный) и 25 минут после (серый) обучения. ( B ) Групповые данные, показывающие tLTP в контрольной группе, группе кленбутерола и пиктротоксина. (*) P <0,05 по сравнению с группой кленбутерола, ( ^# ) P <0,05 по сравнению с контрольной группой.

Посттренировочная активация β2-AR улучшает память о страхе следов в mPFC

Синаптическая пластичность коры имеет решающее значение для памяти о следах страха (Gilmartin and Helmstetter 2010).Было высказано предположение, что усиление LTP в пирамидных клетках 2/3 слоя коры соответствует усилению страха следа. кондиционирование (Wu et al. 2008). Таким образом, усиление tLTP, индуцированное кленбутеролом, может привести к улучшенному сохранению памяти о следах страха. Следовательно, мы с двух сторон вводили кленбутерол (1 мкг в 0,5 мкл физиологического раствора с каждой стороны) в предлимбическую (PrL) область mPFC немедленно пост-тренинг, чтобы изучить реакцию замирания в поведенческой задаче отслеживания памяти о страхе.

Во время семи тренировок в парах CS – US все крысы показали сопоставимое усиление замирания на протяжении всех тренировок (рис. 7B1). Сохранение следов страха в памяти исследовали через 24 часа после тренировки. До подачи звукового сигнала все крысы демонстрировали одинаковые движения в испытательной камере ( F _(2,27) = 0,0729, P > 0,05, односторонний дисперсионный анализ, данные не показаны). Крысы, которым вводили кленбутерол, показали значительное увеличение реакции замораживания. в течение 40-секундного интервала отслеживания по сравнению с контрольными крысами, которым вводили физиологический раствор ( P <0.01 в сравнении с элементами управления; контроль, n = 13 крыс; кленбутерол, n = 9 крыс) (рис. 7B2). Чтобы определить, действует ли кленбутерол через дополнительные рецепторы, мы вводили кленбутерол совместно с ICI 118551 (0,1 мкг / 0,5 мкл) в mPFC сразу после тренировки. Крысы, подвергнутые совместной инфузии, показали сравнимую реакцию замораживания на инфузию физиологического раствора. контрольные крысы ( P> 0,05 по сравнению с контролем; кленбутерол + ICI 118551, n = 7 крыс) (рис.7B2).

Рисунок 7.

Посттренировочная активация β2-AR в mPFC улучшает память о следах страха. ( A ) Иллюстрация последовательности посттренировочных инфузий интра-mPFC, испытаний кондиционирования следов (пары CS-US) и тест на удержание. ( B ) Вливание кленбутерола внутрь mPFC сразу после тренировки улучшает 24-часовую память о страхе следов.Графики в B1 и B2 отображают режим зависания, выраженный в процентах, в течение 40-секундных интервалов между CS и US. Сеанс кондиционирования показан в B1 . В тесте на 24-часовое удерживание крысы, получавшие кленбутерол (Clen), показали более сильное замораживание по сравнению с крысами, получавшими физиологический раствор (контроль), и эффект усиления блокируется совместной инфузией с ICI 118551 (Clen + ICI [ B2 ]). (**) P <0.01 по сравнению с контрольной группой. (Открытые кружки) контроли, (закрашенные кружки) кленбутерол, (закрашенные треугольники) кленбутерол + ICI. ( C ) Типичный коронарный срез, показывающий место инфузии ( слева, ) и реконструкцию мест инфузии в mPFC ( справа, ).

Эти результаты демонстрируют, что активация β2-AR в mPFC сразу после тренировки усиливает консолидацию Отслеживайте память о страхе, тем самым улучшая 24-часовую память о страхе.

Обсуждение

Функции PFC чувствительны к уровням NE. Низкие и умеренные уровни эндогенно высвобождаемого NE оказывают важное влияние на функции PFC. Хорошо задокументировано, что NE оказывает благотворное влияние на рабочую память посредством действий. на адренорецепторы α-2A в ПФК.Однако роль префронтальных кортикальных β-AR, особенно β2-AR, в синаптической пластичности а память в значительной степени неизвестна. В этом исследовании мы демонстрируем, что активация β2-AR способствует зависимому от времени спайку синаптическая потенциация в физиологических условиях интактного ГАМКергического ингибирования в мПФК, которое опосредуется постсинаптическим Передача сигналов Gs-cAMP-PKA и подавление ГАМКергической передачи через пре- и постсинаптические механизмы. Кроме того, инфузия агониста β2-AR непосредственно в mPFC сразу после тренировки усиливает память о следах страха. Эти результаты предполагают что NE может оказывать благотворное влияние на синаптическую потенциацию и поведенческую память в mPFC.

Обширные данные свидетельствуют о том, что β-AR усиливают синаптическую пластичность и консолидацию памяти посредством передачи сигналов Gs-cAMP-PKA. (Сара 2009; Талли и Большаков 2010), в которых β-АР соединяются с Gs, G-белком, стимулирующим аденилатциклазу, и их активация увеличивает внутриклеточный цАМФ, который активирует цАМФ-зависимую ПКА.Предыдущие исследования показали, что активация β2-AR в коре головного мозга кленбутеролом увеличивается. Уровни цАМФ in vivo и что это увеличение цАМФ значительно снижается антагонистом β2-AR ICI 118551 (Ordway et al. 1987). Более того, поведенческое исследование показало, что кленбутерол увеличивает объем памяти, связываясь с аденилатциклазой и увеличивая Уровни цАМФ в миндалине (Ferry et al. 1999). В настоящем исследовании мы демонстрируем, что усиление tLTP, вызванное активацией β2-AR, требует повышения цАМФ в ПФУ и ингибирование повышения цАМФ или его нижерасположенной ПКА снижает облегчение tLTP (рис.3). Между тем, для облегчения tLTP необходимо функционирование G-белка (рис. 3). Таким образом, мы показываем, что β2-AR может соединяться с передачей сигналов Gs-cAMP-PKA для усиления синаптической потенциации и формирования памяти. Недавно Томас и его коллеги сообщили, что активация β2-AR цинтеролом или ксамотеролом ухудшает восстановление памяти. посредством Gi / o-связанной передачи сигналов (Schutsky et al. 2011a, b). β2-AR был предложен для соединения с Gi, G-белком, чувствительным к коклюшному токсину, ингибирующим аденилатциклазу, и это соединение может ограничивать или предотвращать увеличение цАМФ в сердечных миоцитах (Xiao et al.1995; Daaka et al. 1997; Devic et al. 2001). Это несоответствие β2-AR в обработке памяти может быть результатом активации β2-AR различными типами агонистов β2-AR. Таким образом, β2-AR, по-видимому, играет особую роль в обработке памяти посредством связывания с другой нисходящей передачей сигналов, хотя механизм, ответственный за набор различных сигналов с помощью β2-AR, неизвестен.

В ПФК норадренергические волокна, исходящие из ствола головного мозга, нацелены как на глубокие, так и на поверхностные слои коры (Lewis and Morrison 1989; Miner et al.2003 г.). Было предложено, чтобы синаптическая пластичность, возникающая в пирамидных клетках 2/3 поверхностного слоя коры, соответствовала условный рефлекс страха (Wu et al. 2008; Descalzi et al. 2012). ДП центральных синапсов считается основным механизмом, который управляет хранением памяти в мозгу (Bliss and Collingridge 1993; Kandel 2001). Таким образом, наши данные предполагают, что усиление tLTP, происходящее в слое 2/3, индуцированное кленбутеролом, является клеточным механизмом. лежащая в основе облегчения памяти о страхе после активации β2-AR в mPFC.

tLTP индуцируется, когда пресинаптический спайк предшествует постсинаптическому возбуждению в пределах временного окна (Magee and Johnston 1997). Поскольку время между пре- и постсинаптическим срабатыванием определяет синаптические изменения, tLTP стал привлекательным механизмом. моделировать естественную пластичность, особенно в изменениях корковых клеток, вызванных обучением. Порог, величина, временное окно, и на стробирование tLTP влияют катехоламинергические входы в коре и гиппокампе (Lin et al.2003; Seol et al. 2007; Zhang et al. 2009; Сюй и Яо 2010; Эдельманн и Лессманн 2012). В настоящем исследовании мы изучили роль префронтального кортикального β2-AR в tLTP с зависимой от времени стимуляцией пре- и постсинаптическая активность. Наши данные демонстрируют, что активация префронтального кортикального β2-AR увеличивает величину tLTP, который указывает на важную роль β2-AR в когнитивных функциях PFC, а также в хранении памяти. Наши данные показывают что кленбутерол изменяет tLTP, включая передачу сигналов cAMP-PKA.Постсинаптическое применение G-белка, цАМФ или ингибитора PKA значительно снижает величину tLTP, но не препятствует усилению (рис. 3B). Однако неясен механизм того, что активация β2-AR усиливает tLTP за счет связывания с цАМФ-PKA. Несколько строк показывают, что активация β-AR усиливает tLTP за счет увеличения временного окна для синаптической модификации посредством связывания с Передача сигналов цАМФ-ПКА для увеличения внутриклеточного цАМФ (Lin et al.2003; Seol et al. 2007), тогда как повышение внутриклеточного цАМФ ингибирует медленную постгиперполяризацию (sAHP). Подавление sAHP было предложили усилить tLTP, особенно в слое 2/3 mPFC (Fuenzalida et al. 2007; Zaitsev and Anwyl 2012). Следовательно, возможным механизмом, лежащим в основе облегчения tLTP за счет активации β2-AR, является ингибирование sAHP, которое вызывается повышение внутриклеточного цАМФ и может привести к усилению tLTP. Кроме того, индукция tLTP в физиологических условиях с интактными ГАМКергическими цепями очень чувствительна к ГАМКергическому ингибированию (Meredith et al.2003; Кампанак и Дебанн, 2008 г.). Например, на tLTP, возникающий в mPFC, влияет дофаминергический вход через подавление цепи ингибирования ГАМК. активности (Xu and Yao 2010), которая снижает порог tLTP, что приводит к усилению tLTP. Следовательно, подавление ГАМКергической передачи другой возможный механизм, лежащий в основе облегчения tLTP, вызванного активацией β2-AR. Действительно, наши данные показывают, что кленбутерол усиление tLTP частично связано с подавлением ГАМКергической передачи, поскольку такое ингибирование может быть эффективно облегчается кленбутеролом (рис.4), а действие кленбутерола лишь частично имитируется применением пикротоксина (рис. 6). В целом, наше исследование показывает, что как постсинаптическая сигнальная стимуляция цАМФ-ПКА, так и подавление активности ГАМКергической цепи вносят вклад в облегчение tLTP после активации β2-AR в mPFC.

Кроме того, механизм, с помощью которого кленбутерол подавляет ГАМКергическую передачу, является как пре-, так и постсинаптическим.Эта находка поддерживается после применения кленбутерола снижением частоты mIPSC и стойким подавлением eIPSCs в присутствии постсинаптических Rp-cAMPS или PKI _5-24 (дополнительный рис. 1), что указывает на то, что кленбутерол может действовать на β2-AR, расположенный в пресинаптических ГАМКергических окончаниях, для снижения высвобождения ГАМК. В Результаты иммуноокрашивания дополнительно подтвердили, что β2-AR присутствует в ГАМКергических окончаниях (дополнительный рис.3). Более того, снижение амплитуды mIPSC указывает на то, что кленбутерол может действовать на постсинаптический β2-AR в пирамидных клетках. для подавления ГАМКергической передачи. Хотя предыдущие исследования показали, что активация β-AR способствует ГАМКергической передаче в коре головного мозга (Salgado et al. 2012) и мозжечке (Sessler et al. 1989; Cheun and Yeh 1996; Saitow et al. 2000) наши данные подтверждают идею о том, что β-адренергическая модуляция ГАМКергической синаптической передачи зависит от пресинаптического интернейрона. подтипы (Kobayashi et al.2009; Salgado et al. 2012). Можно предположить, что кленбутерол подавляет ГАМКергическую передачу, которая, вероятно, происходит от определенного интернейрона. подтипы, которые в первую очередь нацелены на пирамидные клетки слоя 2/3, например, интернейроны с поздними и низкопороговыми импульсами. ГАМКергический входы в пирамидные клетки от этих подтипов интернейронов подавляются активацией β-AR (Koyanagi et al. 2010). Более того, подавление кленбутеролом ГАМКергической передачи может быть отменено селективным антагонистом β2-AR ICI118,551. (Рис.4Б). Напротив, возбуждающий глутаматергический вход, который является еще одним ключевым фактором, влияющим на LTP, не модулируется активацией β2-AR. в нашем исследовании. После применения кленбутерола как AMPAR-опосредованный ответ (рис. 5), так и опосредованный NMDAR ответ остается неизменным (дополнительный рис. 2).

Предполагается, что PFC участвует в сборе и хранении как следов, так и отсроченных воспоминаний о страхе (Sacchetti et al.2002; Runyan et al. 2004; Гилмартин и МакЭхрон 2005). Обусловливание страха следа отличается от классической парадигмы задержки тем, что животное должно удерживать внимание во время следа. интервал для изучения ассоциации CS-US (Huerta et al. 2000; Han et al. 2003). Наши результаты показывают, что введение кленбутерола после тренировки непосредственно в ПФУ усиливает память о следах страха (рис. 7). Соответственно, инфузия кленбутерола внутри mPFC крысам или системное введение кленбутерола обезьянам дает умеренное улучшение когнитивных функций при низкой производительности рабочей памяти (Ramos et al.2008 г.).

Настоящее исследование представляет первое доказательство того, что NE может усиливать tLTP через β2-AR в mPFC, тем самым способствуя облегчению памяти, связанной с PFC. Недавно Отани и его коллеги (2010) сообщили, что NE подавляет синаптическую передачу с помощью полное торможение, тогда как такая депрессия может длиться десятки минут и требует активации α-AR, но не β-AR (Marzo et al.2010). Этот тип депрессии синаптической передачи, вызванной NE, отличается от управляемой памяти пластичности, зависящей от спайков. хранение после обучения. Однако этот тип индуцированной NE LTD может повлиять на процесс памяти, затрудняя восстановление памяти. или нарушение сетей памяти. Следовательно, NE, по-видимому, проявляет разнообразие ролей, воздействуя на разные типы норадренергических рецепторы в mPFC. Основываясь на предыдущем исследовании и нашем настоящем исследовании, мы предполагаем, что умеренный эндогенно высвобождаемый NE способствует развитию памяти, связанной с ПФК, посредством β-AR, который опосредуется облегчением tLTP, в то время как значительное и устойчивое увеличение эндогенных NE (e.g., стресс) затрудняют память, связанную с префронтальной корой, через α-AR, что вызвано нарушением восстановления памяти или нарушением памяти сети.

В заключение, настоящее исследование демонстрирует, что префронтальный кортикальный β2-AR способствует tLTP и увеличивает память о страхе. вызванный следом страха обусловливания. Более того, активация β2-AR усиливает tLTP путем связывания с постсинаптическими каскадами цАМФ-PKA. и подавление тормозных цепей с участием как пре-, так и постсинаптического β2-AR.

Материалы и методы

Электрофизиологический эксперимент

Субъекты

самцов крыс Sprague-Dawley в возрасте 4-6 недель (100-120 г) были приобретены в SLACCAS, Шанхай, Китай.Крысы были размещены при 12-часовом цикле свет / темнота; пища и вода были доступны без ограничений. Эксперименты в данной работе были выполнены в соответствии с руководящими принципами, опубликованными в Руководстве NIH по уходу и использованию лабораторных животных . Были предприняты усилия, чтобы свести к минимуму количество используемых животных и их страдания.

Подготовка ломтиков

Коронковые срезы головного мозга (300 мкм), содержащие PFC, получали стандартными методами (Ji et al.2008 г.). Срезы переносили в погружную камеру для извлечения, содержащую оксигенированный (95% O ₂ и 5% CO ₂ ) ACSF (124 мМ NaCl, 2,5 мМ KCl, 2,5 мМ CaCl ₂ , 1,3 мМ MgCl ₂ , 26,2 мМ NaHCO ₃ , 1,25 мМ NaH ₂ PO ₄ и 11 мМ глюкозы) при комнатной температуре в течение не менее 1 часа.

Записи целых клеток

Токовые зажимы целых клеток выполняли с использованием стандартных процедур при комнатной температуре (Couey et al.2007). Срезы, содержащие ПФУ, помещали в перфузионную камеру, прикрепленную к неподвижному столику микроскопа Olympus BX51. (Olympus) с инфракрасной оптикой DIC для визуализации записей патч-зажима целых клеток. eEPSP генерировались импульсным от блока изоляции стимуляции, управляемого генератором импульсов Мастер-8 (A.M.P.I. Instruments). ВПСП были зарегистрированы с пирамидные клетки в слое 2/3 с использованием усилителя Axon 200B (Axon Instruments), а стимуляция проводилась с использованием биполярного Вольфрамовый стимулирующий электрод, помещенный в слой 2/3 примерно на 100 мкм латеральнее регистрируемой пирамидальной ячейки (рис.1А). ВПСП вызывались каждые 30 секунд, и мембранные потенциалы нейронов поддерживались на уровне -80 мВ. Пипетки записывающие (3–5 МОм) заполняли раствором, содержащим 145 мМ K-глюконат, 5 мМ NaCl, 1 мМ MgCl ₂ , 0,2 мМ EGTA, 10 мМ HEPES, 2 мМ Mg-ATP, 0,1 мМ Na ₃ -GTP и 10 мМ фосфокреатин (pH доведен до 7,2 с помощью КОН). После получения стабильных ВПСП в течение 10 минут парадигма индукции tLTP использовали в течение 12 мин после установления конфигурации целых клеток для предотвращения эффекта вымывания на индукцию tLTP.Наклон начальных 2,5 мс ВПСП был проанализирован, чтобы гарантировать, что данные отражают только моносинаптический компонент. каждого эксперимента (Froemke et al. 2005). Синаптическое усиление измерялось как изменение среднего наклона EPSP; а именно, когда 5-минутный период произошел 25–30-минутный пост-спаривание сравнивалось с наклоном EPSP, измеренным за последние 5 минут из 10-минутных базовых записей. Во время спаривания Период, пре- и постсинаптическая пара стимулов повторялась 50 раз с 10-секундным интервалом между каждой парой (Couey et al.2007). На протяжении экспериментов ячейка R _i контролировалась путем применения гиперполяризующего импульса 10 пА, 500 мсек в конце каждой развертки. Данные не были включены в анализ, если ячейка R _и изменилась более чем на ± 20% во время эксперимента. Чтобы оценить эффект стимуляции β2-AR в этих экспериментах, β2-AR агонист кленбутерол применялся в течение периода спаривания (с 1 мин до и через +7 мин после начала 8-минутного спаривания). протокол).Для экспериментов с записью лекарств, загружаемых в пипетку, запись начиналась не менее чем через 10 мин после разрыва клеточная мембрана. Для оценки значимости данных tLTP использовались знаковый ранговый критерий Вилкоксона и критерий Манна – Уитни U .

Для записей IPSC раствор для пипетки содержал (в мМ) 70 K-глюконат, 70 KCl, 20 HEPES, 0,5 CaCl ₂ , 5,0 EGTA и 5 Mg-ATP, а pH доводили до 7.2 с КОН. Потенциалы клеточной мембраны поддерживались на уровне -70 мВ. Частоты и амплитуды sIPSC / mIPSC / sEPSC были проанализированы с использованием программного пакета Mini Analysis (v8.0, Synaptosoft, http://www.synaptosoft.com). Изменения, вызванные лекарственными средствами, в кумулятивных долях амплитуд sIPSC / mIPSC / sEPSC и интервалах между событиями были проанализированы для статистическая значимость с использованием критерия Колмогорова – Смирнова (K-S) (Mini Analysis v8.0). Все сгруппированные данные были проанализированы с использованием парные или непарные t -тесты и критическая вероятность P <0,05 (STATISTICA 6.0).

Поведенческий эксперимент

Субъекты

самцов крыс Sprague-Dawley (7-8 недель, 180-200 г) были приобретены в SLACCAS, Шанхай, Китай.Крыс помещали в пластиковый клетки (1-2 на клетку) и помещают в 12-часовой цикл свет / темнота. Пища и вода предоставлялись ad libitum на протяжении всего эксперимента.

Хирургия

Крыс анестезировали пентобарбиталом натрия (40 мг / кг i.п.). Направляющие канюли из нержавеющей стали (калибр 23) устанавливались с обеих сторон. расположен над областью PrL mPFC на основе координат (Paxinos and Watson 1986): брегма +3,2 мм, латеральная ± 0,75 мм и глубина -1,5 мм от поверхности черепа. Направляющие канюли закреплены на черепе. с стоматологическим цементом. Искусственные канюли, обрезанные на 0,5 мм длиннее направляющих канюль, были вставлены в направляющие канюли для предотвращения засорение и снизить риск заражения.Перед экспериментальными процедурами крысам обеспечивали минимальное восстановление в течение 5 дней. были выполнены.

Администрация лекарств

Агонист β2-AR кленбутерол (1 мкг в 0,5 мкл физиологического раствора на каждую сторону) и антагонист β2-AR ICI 118551 (0,1 мкг в 0.5 мкл физиологического раствора с каждой стороны) были приготовлены в виде концентрированных исходных растворов в дистиллированной воде. Для введения лекарства крыс осторожно удерживали, в то время как фиктивные канюли заменяли на инфузионные канюли 30-го размера. Кончик инъекционной иглы выходил на 2,7 мм за пределы длина направляющей канюли составила 4,2 мм от поверхности черепа и достигла области PrL. В раствор лекарственного средства вводили двусторонне инфузионным насосом со скоростью 0.2 мкл в минуту. Каждая сторона мПФК была введена с общим объемом 0,5 мкл раствора препарата. После инфузии инфузионные канюли оставались на месте на дополнительный 2 мин, чтобы дать раствору лекарства диффундировать из кончика канюли. Затем фиктивные канюли были заменены, и крысы были возвращены в их домашние клетки. Инфузии проводились сразу после тренировки.

Поведенческая процедура

Все поведенческие тесты были выполнены исследователем, который не знал, какие группы лечили.Протокол кондиционирования следа страха, с незначительной модификацией выполняли, как описано ранее (Runyan et al. 2004). Животных на короткое время поместили в учебный контекст (Med Associates Inc.) и предоставили 120-секундный период привыкания. Испытания на кондиционирование начинались с 10-секундного звукового сигнала (2,2 кГц, 80 дБ, CS) с последующим 40-секундным периодом отслеживания перед тем, как животное получил удар ногой 0,5 с (0,5 мА) (США). За морозным поведением крыс наблюдали с помощью камеры.Процент подмерзания измерялся каждые 1 секунду в течение периода отслеживания (40 секунд) после сигнала. За испытанием кондиционирования последовало псевдослучайное испытание. интервал между испытаниями (ITI), который варьировался от 1 до 3 мин. Пробу кондиционирования повторяли семь раз в течение 16 мин. период обучения.

Удержание ассоциации CS-US измеряли через 24 часа, отслеживая поведение при замораживании.Во время тестирования сохранения памяти трассировки, животное было помещено в новый контекст и обеспечено 120-секундным периодом привыкания. При отсутствии сотрясения стопы Производился 10-секундный тональный сигнал, за которым следовали различные периоды ITI. Пробу удержания повторяли четыре раза. Только три удержания для анализа использовались испытания. Процент замерзания измерялся каждые 1 секунду в течение периода отслеживания (40 секунд) после тон.

Химическая промышленность

Все реагенты были приобретены у Sigma-Aldrich, за исключением Rp-cAMPS и PKI _5-24 (фрагмент ингибитора PKA 5-24), которые были приобретены у Tocris Bioscience. Все блокаторы каналов были приготовлены в концентрированном виде. исходные растворы в дистиллированной воде или ДМСО и либо сразу добавлялись в ACSF в рабочих концентрациях, либо хранились. при −20 ° C для последующего использования.

Иммуноокрашивание

Крыс (возраст примерно 30 дней, вес 100 г) подвергали глубокой анестезии пентобарбиталом натрия (45 мг / кг, внутрибрюшинно) и транскардиально. перфузия выполнялась 300 мл физиологического раствора при 37 ° C, а затем 200 мл 4% ледяного параформальдегида (PFA), растворенного в фосфатно-буферном растворе. физиологический раствор (PBS, pH 7.4). Мозг извлекали и фиксировали в течение 2 ч в PFA при 4 ° C. Затем мозг помещали в 30% (мас. / Об.) Сахарозу. решение. Коронковые срезы (35 мкм) вырезали с помощью криостата (Leica CM900). Срезы промывали 0,01 М PBS и инкубировали. в растворе 0,5% Тритона-X в PBS в течение 30 мин, а затем 10% нормальной козьей сыворотки (Invitrogen Immunodetection) в течение 2 ч при комнатная температура.

Для двойной иммунофлуоресценции срезы инкубировали в смеси кроличьих анти-β2-AR (1:25; Кат.SC-9042, Santa Cruz) и мышиное анти-CaMKII (1: 120, № по каталогу MAB8699, № партии LV1377413; Chemicon International), который представляет собой пирамидальную форму. клеточный маркер (Muller et al. 2006). Первичные антитела разводили в козьей сыворотке и инкубировали 48 ч при 4 ° C. После 48-часовой инкубации срезы промывали PBS и наносили соответствующее вторичное антитело. Флуоресцентные вторичные антитела (аффинно очищенные цельные IgG антитела, козьи анти-кроличьи антитела Alexa Fluor 568 и козьи антимышиные антитела Alexa Fluor 488 от Jackson ImmunoResearch Laboratories) наносили на ткани в разведении 1: 400 в нормальной блокирующей сыворотке на 2 ч при 4 ° C.

Иммуномеченые срезы были исследованы, и все изображения были получены с использованием системы конфокального лазерного сканирующего микроскопа (Olympus FV 1000). Двенадцатибитные изображения были получены с разрешением 1024 × 1024 пикселей с использованием иммерсии 20 × PlanApo и 40 × PlanApo. (1.2 NA) цели. Иммунореактивность исследовали при условии оптимального разрешения. Диаметр точечного отверстия был установлен на 105 мкм, чтобы значительно снизить вклад цитоплазматической флуоресценции.Z-сечение производилось с интервалом от 1 до 2 мкм, и были получены стопки оптических секций по оси z- . Конфокальные микрофотографии дополнительно обрабатывали с помощью Adobe Photoshop. Фотографии не были изменены кроме настроек масштабирования, уровней, яркости и контрастности. В контрольных срезах иммунной метки не наблюдалось. в котором было исключено первичное антитело. Для устранения перекрестных помех между флуоресцентными лампами использовалась конфигурация с несколькими трекингами. каналы обнаружения.

Анализ данных и статистика

Данные выражены как среднее значение ± стандартная ошибка среднего во всех случаях, при этом P <0,05 указывает на значимость. Статистическое сравнение данных между двумя группами проводилось с использованием тестов t , в то время как данные между группами анализировались с использованием одностороннего дисперсионного анализа (ANOVA) с запланированными сравнениями в виде апостериорный анализ с использованием STATISTICA (StatSoft).

Благодарности

Работа поддержана грантами Китайского национального фонда естественных наук (31271171, 309 и 30821002). к Б.-М.Л .; 31121061 и 30700218 по X.-H.Z.) и Министерству науки и технологий Китая (2011CBA00406 по B.-M.L.).

Сноски

• №3 Автор, ответственный за переписку

  Электронная почта xuehanzhang {at} fudan.edu.cn

  Эл. Почта bmli {at} ncu.edu.cn

• [Дополнительные материалы доступны к этой статье.]

• Поступила 16.01.2013.
• Принята к печати 20 февраля 2013 г.

• © 2013 Лабораторный пресс Колд Спринг Харбор

BfArM2013 – Домашняя страница – Статус HTTP 404

Перейти к:

• Содержание
• Главное меню
• Искать

Servicemeu

• Deutsch
• Press
• RSS
• Глоссарий
• Контакты

• О нас

  Unternavigationspunkte

  • • Организация

      • Руководитель
      • Портфолио BMG
      • Как с нами связаться
      • Библиотека
      • Консультации
      • Опрос удовлетворенности клиентов

    • ЕС и международные

      • CHMP
      • PDCO
      • HMPC
      • COMP
      • PRAC
      • CMDh
      • Меморандум о взаимопонимании
      • ICH

    • Публикации

      • Годовые отчеты

    • Сервис

      • Контактные лица
      • Формы
      • FAQ

• Лекарственные препараты

  Unternavigationspunkte

  • Лицензирование

    • Типы регистрационных свидетельств

      • Дополнительные и альтернативные лекарственные средства (CAM) и традиционные лекарственные препараты (TMP)
      • Библиографическая заявка

    • Процедуры лицензирования

      • Nat.Процедуры лицензирования
      • DCP / MRP
      • Централизованные процедуры лицензирования
      • Параллельный импорт лекарственных средств

    • Последующие процедуры

      • Варианты
      • Продление
      • Оговорка о прекращении действия
      • Письменный отказ
      • Публикация клинических испытаний результаты в соотв. Раздел 42b AMG

    • Вопросы, имеющие отношение к лицензированию

      • Электронная подача
      • Brexit
      • Консультационные процедуры
      • Фармакопея
      • Информация о Сертификаты ВОЗ

    • Лекарства для детей

      Правила ЕС
      товары для детей
      • Совместная работа в педиатрии
      • PUMA

      • Клинические испытания

        • Программы «Милосердное использование»
        • Процедура добровольной гармонизации (VHP)

      • Информация о лекарственных средствах

        • Директива о фальсифицированных лекарствах

        • Сервис

          • Часто задаваемые вопросы по лекарствам
          • Формы
          • Статистика

      • Фармаконадзор

        • Информация о рисках

          • Rote-Hand-Briefe и информационные письма
          • Процедуры оценки рисков
          • Прочая информация о рисках
          • Список лекарственных средств, находящихся под дополнительным мониторингом
          • Планы управления рисками ( RMP )
          • Учебные материалы
          • Европейская база данных по сообщениям о нежелательных реакциях на лекарства

        • Отчетность о рисках

          • Медицинские работники, сообщающие о побочных реакциях
          • Потребители, сообщающие о побочных реакциях
          • Подделки, дефекты качества, отзыв партий (быстрое оповещение)

        • Периодические отчеты по безопасности (ПОББ)

          • Основные профили безопасности (CSP): совместная работа

        • Советы и комитеты

          • Комитет по оценке рисков фармаконадзора ( PRAC )
          • Экспертные консультации Комитет по вопросам, касающимся только аптек
          • Консультативный комитет экспертов по вопросам, отпускаемым только по рецепту
          • Регулярные заседания

    • Медицинское оборудование

      Unternavigationspunkte

      • • Информация о рисках

          • Система бдительности
          • Полевые корректирующие действия
          • Рекомендации BfArM
          • Scientific Review
          • Безопасность медицинских устройств

        • Клинические испытания MD / Оценочные исследования эффективности

          • Процедуры консультирования
          • Информация о подаче запроса на разрешение клинического испытания или исследования оценки эффективности
          • Информация о подаче запроса об отказе в разрешении на проведение клинического испытания или исследование оценки эффективности
          • Последующие поправки
          • Серьезные нежелательные явления ( SAE )
          • Прекращение и прекращение исследований

        • Правовая база

          • Медицинские изделия: задачи BfArM
          • Законы и постановления
          • Доступ к рынку

        • Дифференциация / классификация

          • Критерии дифференциации / классификации
          • Запрос на классификацию и / или дифференциацию
          • Руководство по «Медицинским приложениям»

        • Приложения цифрового здравоохранения (DiGA)

          • Тесты на антиген SARS-CoV-2

            • Сервис

              • Новости о медицинских изделиях
              • Контактные лица по изделиям медицинского назначения
              • Формы медицинских изделий
              • Часто задаваемые вопросы по медицинскому оборудованию

        • Федеральное агентство по опиуму

          Unternavigationspunkte

          • • Наркотические средства

              • Лицензии
              • Уведомления
              • Записи
              • Импорт и экспорт

            • Регистр замещения

              • Отчет из Регистра замещения

            • Прекурсоры

              • Импорт и экспорт
              • Лицензия и регистрация

            • T-Prescriptions

              • T-Prescription Template
              • T-Prescription Procedure
              • Сводные характеристики продукта и листовки на упаковке
              • Брошюра для пациента по Imnovid® / Revlimid® / Thalidomide Celgene®
              • Таблицы информированного согласия и контрольные списки

            • Сервис

              • Формы Федерального агентства по опиуму

        • Исследования

          Unternavigationspunkte

          • • Фармакогеномика

              • Фармакоэпидемиология

                • Лекарственная аллергия

                  • Безопасность медицинских изделий

                    • Нейропсихофармакология

                      • Особые указания

                        • Биостатистика

                          • СНОМЕД CT

                            • Сервис

                              • Публикации

                        • Сервис

                          Unternavigationspunkte

                          • • Сервис

                              • Консультации
                              • Контактные лица
                              • FAQ
                              • Формы
                              • Стоимость
                              • Статистика

                            • Сообщения

                              • Новости
                        Вы здесь: Домашняя страница

                        Вы здесь:

                        1. Домашняя страница
                        2. Статус HTTP 404

                        Эта страница

                        • Рекомендовать страницу

                        Страница не найдена

                        Дата 2012 г.

                        No related posts.