Эргоферон взрослый: Эргоферон цена, инструкция по применению, купить Эргоферон в интернет-аптеке в Москве

Актуальные аспекты применения Эргоферона в амбулаторно-поликлинической практике Текст научной статьи по специальности «Клиническая медицина»

10.21518/2079-701X-2018-15-90-95

О.В. ФЕСЕНКО, ФГБОУ ДПО «Российская медицинская академия непрерывного профессионального образования» Министерства здравоохранения Российской Федерации, Москва

АКТУАЛЬНЫЕ АСПЕКТЫ ПРИМЕНЕНИЯ ЭРГОФЕРОНА

В АМБУЛАТОРНО-ПОЛИКЛИНИЧЕСКОЙ ПРАКТИКЕ

Острые респираторные вирусные инфекции (ОРВИ) и грипп относят к наиболее распространенным заболеваниям среди детей и взрослых. Несмотря на широкий выбор средств для лечения данной патологии, актуальным остается поиск препаратов, сочетающих в себе универсальную противовирусную активность, доказанную эффективность и безопасность, обеспечивающую возможность применения у пациентов из групп риска, в т. ч. при аллергических заболеваниях. Фармакологическая активность релиз-активного лекарственного препарата Эргоферон обусловлена комплексным действием его компонентов на противовирусный иммунный ответ и вирус-индуцированное воспаление респираторного тракта. Каждый компонент при этом оказывает на свою мишень модулирующее действие, которое является общим отличительным свойством релиз-активных форм антител.

В статье представлен обзор отечественных и зарубежных публикаций, обобщивший результаты доклинических и клинических исследований эффективности и безопасности применения Эргоферона для лечения и профилактики ОРВИ и гриппа у пациентов разных возрастных групп.

Ключевые слова: Эргоферон, релиз-активный препарат, грипп, острые респираторные вирусные инфекции (ОРВИ).

O.V. FESENKO, Russian Medical Academy of Continuing Professional Education of the Ministry of Health of Russia ACTUAL ASPECTS OF USE OF ERGOFERON IN OUTPATIENT POLYCLINIC PRACTICE

Acute respiratory infections (ARI) and influenza are referred to the most common diseases among children and adults. Despite a wide choice of medications for this pathology, we still need ones that combine a multipurpose antiviral activity, have proven effectiveness and safety and enable application in patients from risk groups, including allergic diseases. The pharmacological activity of a release-active drug Ergoferon is determined by the complex action of its components on antiviral immune response and virus-induced inflammation in the respiratory tract. Each component at the same time has its own target modulating action, which is a distinctive property of release-active antibodies forms. The article presents an overview of Russian and foreign publications, summarizing the results of preclinical and clinical studies effectiveness and safety of the Ergoferon use for treatment and prevention of acute respiratory infections and influenza in patients of different age groups. Keywords: Ergoferon, release-active drug, influenza, acute respiratory infections (ARI).

Острые респираторные вирусные инфекции (парагрипп, аденовирусная, респираторно-син-цитиальная, риновирусная, реовирусная, коро-навирусная инфекция и еще более 200 возбудителей) характеризуются коротким инкубационным периодом, непродолжительной лихорадкой, интоксикацией и поражением различных отделов респираторного тракта [1]. Это самые массовые и распространенные болезни человека, они составляют более 90% всей инфекционной заболеваемости в детской и взрослой популяциях. В среднем за год ребенок болеет от 4 до 10 раз, взрослый -от 2 до 4 раз. Пик заболеваемости приходится на ранний детский возраст [2].

Грипп занимает особое место. Это обусловлено способностью вируса к антигенной изменчивости, что определяет высокую восприимчивость населения. По данным ВОЗ, каждый год во время вспышек гриппа в мире заболевает до 15% населения (от 3 до 5 млн человек) и 250500 тыс. из них умирают [3, 4]. При этом наряду с легкой и среднетяжелой формами гриппа, заканчивающимися выздоровлением, у части больных возникают осложнения, приводящие к летальному исходу [4]. У больных с сердечно-сосудистыми заболеваниями, патологией органов дыхания в период эпидемии гриппа смертность в

50-100 раз выше, чем в группе здоровых людей. Частое развитие осложнений и затяжное течение характерно для пациентов с сопутствующими аллергическими заболеваниями [5, 6].

Вместе с тем осложнения после гриппа возникают не только у лиц, входящих в группы риска, но и у молодых пациентов без сопутствующих нарушений здоровья. Каждая вспышка гриппа наносит существенный ущерб здоровью населения и экономике соответствующего региона и страны. Так, в нашей стране в 2016-2017 гг. зарегистрировано более 50 тыс. случаев заболевания гриппом, из которых 35,5 тыс. случаев лабораторно подтверждены. Зарегистрировано 40 случаев смерти от гриппа [4].

В условиях реальной амбулаторно-поликлинической практики определение типа возбудителя (ОРВИ, грипп) и его чувствительности к терапии в большинстве случаев затруднительно [5, 6]. Вместе с тем в настоящее время отмечается рост числа штаммов вируса гриппа, резистентных к традиционной этиотропной терапии (ингибиторам нейраминидазы), в т. ч. при использовании в высоких дозах [7, 8]. Не менее важными критериями выбора лекарственного средства является доказанная безопасность и возможность применения у детей и пациентов из групп риска [9]. Таким образом, перспективный вариант терапии ОРВИ

и гриппа должен быть представлен таким лекарственным средством, которое бы отличалось благоприятным соотношением эффективности и безопасности, фармакоэкономи-ческими преимуществами и способностью препятствовать формированию вирусной резистентности.

В настоящее время отмечается рост числа штаммов вируса гриппа, резистентных к традиционной этиотропной терапии (ингибиторам нейраминидазы), в т. ч. при использовании в высоких дозах

В 2011 г. отечественной фармацевтической научно-производственной компанией ООО «НПФ «Материа Медика Холдинг» был выпущен комбинированный противовирусный препарат Эргоферон (Ergoferon), содержащий релиз-активные аффинно очищенные антитела к интер-ферону-гамма человека (РА АТ к ИФН-y), гистамину (РА АТ к гистамину) и CD4-корецептору (РА АТ к CD4). Получение релиз-активных форм антител осуществляется с применением принципиально новой технологии (US Patent 8,535,664 B2, 2013), обеспечивающей наличие у таких форм общего отличительного свойства – способности оказывать модифицирующее действие на исходное вещество (или структурно схожие биологические молекулы) посредством изменения его пространственной структуры, что, в свою очередь, приводит к изменению его физических, химических и биологических свойств [10]. Эргоферон обладает комплексным действием: противовирусным, противовоспалительным и антигистаминным [11-12].

Усиленное противовирусное действие Эргоферона реализуется за счет влияния РА АТ к ИФН-y и РА АТ к CD4 на систему интерферонов (ИФН) в сочетании с активацией процессов презентации антигена при участии CD4-корецептора. Экспериментально и клинически доказано, что РА АТ к ИФН-y повышают эффективность связывания молекулы интерферона со своим рецептором, повышают вирус-индуцированную продукцию ИФН-y и ИФН-а и сопряженных с ними интерлейкинов (ИЛ-2, ИЛ-4, ИЛ-10 и др.), восстанавливают цитокиновый статус. РА АТ к ИФН-y также способствуют активации фагоцитоза и естественных киллеров, регуляции баланса T-хелперной (1 и 2 типов) активности иммунного ответа и В-лимфоцитов c повышением продукции защитных антител – IgG и IgA, включая способствующий усилению местного иммунитета секреторный 1дА, и торможением выработки аллергических антител – 1дЕ [13-16].

РА АТ к CD4, входящие в состав Эргоферона, регулируют функциональную активность CD4-рецептора [17], представленного на антигенпрезентирующих клетках (макрофагах, дендритных клетках) и Т-хелперах 1 и 2 типов. Это, вероятно, приводит к повышению функциональной активности CD4+-Т-лимфоцитов, нормализации иммунорегуля-торного индекса CD4/CD8, а также субпопуляционного состава иммунокомпетентных клеток.

Противовирусная активность Эргоферона дополняется эффектами РА АТ к гистамину. Благодаря модифициру-

ющему действию на гистамин-зависимую активацию периферических и центральных HI-рецепторов, РА АТ к гистамину способствуют уменьшению проницаемости сосудов и снижению агрегации тромбоцитов при контакте с аллергеном, подавляют высвобождение гистамина из тучных клеток и базофилов, оптимизируют продукцию лейкотриенов, а также, за счет антагонистического воздействия на Н4-рецептор гистамина, снижают образование аллергенспецифических антител. Как следствие этих процессов, снижается тонус гладкой мускулатуры бронхов и выраженность сопутствующих инфекционному процессу аллергических реакций. Клинически это приводит к сокращению длительности и выраженности ринореи, отека слизистой оболочки носа, кашля и чихания [18].

Высокая противовирусная активность одного из компонентов Эргоферона – РА АТ к ИФН-y – была продемонстрирована в серии экспериментальных исследований. Так, был доказан сходный с осельтамивиром противовирусный эффект РА АТ к ИФН-y в отношении возбудителя пандемического гриппа А (h2N1) 2009, что проявлялось подавлением репликации вируса в легочной ткани, увеличением продолжительности жизни и снижением показателей летальности лабораторных животных [19]. Результаты другой экспериментальной работы показали, что Эргоферон обладает аналогичным осельтамивиру эффектом в отношении вируса гриппа А (h4N2). Оба препарата достоверно снижали репликацию вируса в легких животных более чем в 10 раз как через 2, так и через 4 суток [20].

На модели респираторно-синцитиальной инфекции in vitro было продемонстрировано, что Эргоферон ингиби-рует репликацию респираторно-синцитиального вируса, статистически значимо снижая вирусную нагрузку на клетки линии HeLa, и не обладает токсичностью [21].

Кроме того, было показано, что препарат снижает способность респираторно-синцитиального вируса инфицировать клетки после совместной предварительной инкубации вируса и препарата [22].

В 2011 г. был выпущен комбинированный противовирусный препарат Эргоферон (Ergoferon), содержащий релиз-активные аффинно очищенные антитела к интерферону-гамма человека (РА АТ к ИФН-y), гистамину (РА АТ к гистамину) и Сй4-кореце.птору (РА АТ к CD4)

Полученные результаты позволили сделать вывод о противовирусной активности Эргоферона в отношении респираторно-синцитиальной инфекции и возможности его применения в составе комплексной терапии и профилактики данного заболевания.

Эффективность Эргоферона в отношении риновирус-ной инфекции изучалась на модели осложнений бронхиальной астмы у мышей, где применение препарата способствовало статистически значимому увеличению экспрессии генов ИФН-ß и ИФН-y, а также снижению инфильтрации клеток воспаления (лимфоциты, нейтро-филы) в легкие [23].

Таким образом, трехкомпонентный состав Эргоферона позволяет воздействовать на различные механизмы инфекционно-воспалительного процесса и формировать адекватный противовирусный ответ широкого спектра без риска развития резистентности, что доказывается результатами доклинических и клинических исследований применения Эргоферона для лечения ОРВИ и гриппа. Клинические исследования эффективности и безопасности применения Эргоферона [6, 24-35] проводились в соответствии с действующими стандартами исследования лекарственных препаратов и принципами доказательной медицины и включают рандомизированные многоцентровые двойные слепые плацебо-контролируемые исследования [26, 27].

Так, многоцентровое двойное слепое плацебо-кон-тролируемое рандомизированное клиническое исследование, которое проводилось в 8 медицинских центрах РФ, показало, что применение Эргоферона обеспечивает эффективную противовирусную защиту, сокращает длительность лихорадочного периода и способствует более быстрому купированию клинических симптомов ОРВИ [26]. Аналогичные результаты были получены и в других рандомизированных клинических исследованиях, посвященных оценке препарата при лечении ОРВИ и гриппа [24-35]. Терапевтический эффект Эргоферона, проявляющийся быстрым купированием симптомов гриппа и ОРВИ, обусловлен в т. ч. ускорением элиминации возбудителя. В двуцентровом проспективном открытом клиническом рандомизированном исследовании было показано, что лечение ОРВИ Эргофероном способствовало увеличению доли «вируснегативных» пациентов до 76% к 3-му дню лечения [6].

Трехкомпонентный состав Эргоферона позволяет воздействовать на различные, механизмы инфекционно-воспалительного процесса и формировать адекватный противовирусный ответ широкого спектра без риска развития резистентности

Как правило, у пациентов с аллергической патологией частота возникновения ОРВИ выше, а само заболевание характеризуется затяжным течением, сниженной или замедленной реакцией на существующие схемы лечения и частым развитием осложнений [9]. Имеются данные о неэффективности осельтамивира при лечении гриппа у детей с бронхиальной астмой [36]. Наличие у Эргоферона противовоспалительного и антигистаминного действия в совокупности с благоприятным профилем безопасности и возможностью сочетания с другими лекарственными средствами объясняет его выбор в качестве средства для лечения ОРВИ и гриппа у пациентов с аллергическими заболеваниями. Эффективность и безопасность Эргоферона в лечении ОРВИ была доказана у пациентов с хронической обструктивной патологией легких, в т. ч. и с бронхиальной астмой. У больных, получавших Эргоферон, основные клинические проявления ОРВИ (катаральные симптомы,

интоксикация) купировались на 1-2-е сутки заболевания, в 78% случаев не потребовалось назначение антибактериальной терапии [33].

Внебольничная пневмония является одним из частых и серьезных осложнений ОРВИ и гриппа. Эффективность и безопасность Эргоферона в лечении пневмонии была продемонстрирована в ходе рандомизированного исследования с участием 132 пациентов старше 18 лет. Включение препарата в комплексную терапию внеболь-ничной пневмонии, осложнившей течение ОРВИ, статистически значимо уменьшило продолжительность основных симптомов заболевания (в среднем в 1,5 раза) и сроки проведения антибактериальной терапии (на 2,2 дня), сократило сроки стационарного лечения и в результате позволило увеличить число пациентов с полным клиническим выздоровлением в 1,5 раза. Безопасность Эргоферона в данном исследовании была подтверждена отсутствием нежелательных явлений [34].

Золотым стандартом этиотропной терапии при гриппе признаны ингибиторы нейраминидазы. Клинические доказательства противовирусной эффективности Эргоферона требовали проведения сравнительных исследований с осельтамивиром – препаратом, рекомендованным Всемирной организацией здравоохранения в качестве лекарственного средства 1-го порядка в лечении гриппа и включенным в публикуемый организацией Перечень основных лекарственных средств [37].

С февраля 2011 г. по апрель 2014 г. на базе 12 медицинских учреждений Российской Федерации было проведено многоцентровое открытое рандомизированное контролируемое клиническое испытание по оценке эффективности и безопасности Эргоферона в сравнении с осельтамивиром в амбулаторном лечении сезонной вирусной инфекции гриппа у взрослых пациентов [24]. Важно отметить, что исследование проводилось после появления в 2009 г. пандемического штамма вируса гриппа A/h2N1 (pdm09). Были включены пациенты в возрасте от 18 до 65 лет, обратившиеся в медицинское учреждение в течение первых 24 ч после проявления симптомов гриппа, n = 161. Подтверждение диагноза гриппа (по возбудителям A и B) осуществляли посредством экспресс-метода QuickVue influenza A+B (QuideL Corporation, г. Сан-Диего, Калифорния, США). Полученные результаты показали, что терапевтическое действие Эргоферона сопоставимо с эффектом осельтамивира. На фоне лечения Эргофероном к 3-му дню наблюдений выраженность интоксикационного синдрома (головная, мышечная и суставная боль) сокращалась вдвое. Средняя продолжительность симптомов гриппа в целом составила около 2 дней и была сопоставима с эффектом осельтамивира. Кроме того, статистический анализ указывал на сопоставимость показателей частоты приема жаропонижающих препаратов в исследуемых группах. Помимо этого, среди пациентов исследования не было выявлено ни одного случая усугубления течения заболевания или развития осложнений. Улучшение качества жизни пациентов, получавших Эргоферон, подтверждалось значимой положительной динамикой суммарных баллов опросника EQ5D

и шкалы субъективной оценки состояния здоровья. Данное исследование показало, что Эргоферон и осель-тамивир в равной степени эффективны и безопасны при лечении сезонного гриппа у взрослых пациентов.

Включение Эргоферона в комплексную терапию внебольничной пневмонии, осложнившую течение ОРВИ, статистически значимо уменьшило продолжительность основных симптомов заболевания (в среднем в 1,5 раза) и сроки проведения антибактериальной терапии (на 2,2 дня)

Многочисленные исследования подтверждают эффективность Эргоферона в детской популяции [6, 11, 25, 27, 28].

Открытое проспективное сравнительное рандомизированное исследование среди детей 3-7 лет, страдающих бронхиальной астмой, выявило, что профилактический прием Эргоферона в течение месяца позволяет значимо снизить частоту эпизодов ОРВИ и обострений бронхиальной астмы у детей дошкольного возраста. Клиническая эффективность лечебно-профилактической схемы проявлялась также тенденцией к более легкому течению ОРВИ при ее возникновении, что сочеталось с хорошей переносимостью и отсутствием аллергических реакций на препарат [27].

Безопасность и клиническая эффективность Эргоферона (жидкой лекарственной формы) в лечении ОРВИ у детей оценивалась и в ходе регистрационного многоцентрового двойного слепого плацебо-контролируемого рандомизированного исследования (РКИ №18 (16.01.2013)) [25, 38]. Оно проводилось в 13 центрах РФ с участием 162 амбулаторных пациентов в возрасте от 3 до 17 лет. Они были разделены на 2 группы, сопоставимые по возрасту, степени тяжести и выраженности клинических симптомов ОРВИ. В течение 5 дней пациенты 1-й группы принимали Эргоферон, пациенты 2-й группы – плацебо по схеме приема Эргоферона. Статистический анализ результатов с высокой достоверностью подтвердил превосходящую терапевтическую эффективность Эргоферона и свидетельствовал о том, что включение в терапию ОРВИ Эргоферона приводит к укорочению лихорадочного периода и способствует более быстрому выздоровлению. Эргоферон продемонстрировал хорошую совместимость с препаратами симптоматической терапии ОРВИ, разрешенными для применения в педиатрии (экспекторантами, деконгестантами, антипиретиками, ингаляционными кортикостероидами, антагонистами лейкотриеновых рецепторов, бета-2-агонистами короткого действия и местными антисептиками). На фоне применения Эргоферона не зарегистрировано случаев развития бактериальных осложнений, ухудшения течения респираторной инфекции, а также нежелательных изменений биохимических и общеклинических лабораторных показателей. Результаты исследования доказали не только хорошую переносимость препарата, но и высокую приверженность к терапии пациентов детского возраста, что было продемонстрировано в ходе оценки комплаентности.

В 2017 г. опубликованы результаты международной наблюдательной неинтервенционной программы «Эрмитаж». Целью данной программы явилось изучение практики применения Эргоферона в амбулаторных условиях, в т. ч. при позднем начале лечения, а также у пациентов с отягощенным аллергологическим анамнезом. Включались данные детей и взрослых пациентов, наблюдавшихся амбулаторно с диагнозом «грипп/ОРВИ», для лечения которых применялся Эргоферон. Продолжительность и схема терапии определялись непосредственно врачом, результаты оценивались ретроспективно. Данная программа проводилась с участием врачей общей практики из Азербайджана, Армении, Грузии, Казахстана, Киргизии, Монголии, Таджикистана и Узбекистана. Период проведения включал эпидемиологический сезон 2016-2017 гг. Были обработаны данные 8 411 человек, в т. ч. 6 005 детей. У 706 пациентов отмечались проявления аллергии в виде аллергического ринита/риносинусита, атопического дерматита/экземы, бронхиальной астмы [39]. Значительная часть пациентов (22,5% среди детей и 26,85 среди взрослых) обратились за медицинской помощью и начали лечение на поздних сроках заболевания (на 3-й день и позже).

Результаты многочисленных клинических и экспериментальных исследований свидетельствуют о высоком профиле безопасности и доказанной эффективности Эргоферона в профилактике и лечении ОРВИ и гриппа

Противовирусное действие препарата Эргоферон, усиленное за счет одновременного воздействия на систему ИФН и CD4+-рецепторы, обеспечивало выраженный клинический эффект даже при позднем начале терапии. Результаты наблюдательной программы показали, что продолжительность лихорадки на фоне терапии препаратом Эргоферон составила в среднем 1,99 ± 0,87 дня, при этом у трети пациентов (29,3%) лихорадка отсутствовала уже по окончании первого дня терапии. Доля больных с нормальной температурой тела через 2 дня лечения составила 78,4%, через 3 и 4 дня – 95,0 и 98,7% соответственно. Продолжительность симптомов интоксикации при лечении Эргофероном в среднем составила 2,33 ± 1,0 дня. Комбинированный состав препарата Эргоферон способствовал быстрому купированию катаральных проявлений, средняя продолжительность которых составила 2,9 ± 1,23 дня. Количество пациентов с жалобами на выделения из носа, боли и першение в горле уменьшалось начиная с 1-го дня терапии. В последующие дни отмечалось дальнейшее нарастание положительной динамики, и через 5 дней терапии катаральные проявления со стороны носа и горла были полностью купированы у 97,6 и 96,9% пациентов соответственно. В целом средняя продолжительность разрешения всех симптомов заболевания от начала лечения Эргофероном составила в среднем 4,84 ± 1,53 дня, у пациентов с гриппом – 4,73 ± 0,06 дня. Согласно литературным данным, сроки выздоровления пациентов при ОРВИ и гриппе в популяции в среднем не

превышают 7 дней и значительно сокращаются на фоне применения противовирусной терапии. По данным Кохрейновского обзора с использованием 20 рандомизированных клинических исследований, влияние ингибиторов нейраминидазы на течение гриппа проявлялось в сокращении сроков лечения с 7 до 6,3 дня для осельтами-вира и с 6,6 до 6,0 дня для занамивира у взрослых пациентов [40]. Препарат Эргоферон продемонстрировал в наблюдательной программе существенное влияние на течение ОРВИ и гриппа, не уступающее другим противовирусным средствам, но в отличие от них эффективность терапии Эргофероном не зависит от этиологии ОРВИ.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Таким образом, результаты многочисленных клинических и экспериментальных исследований свидетельству-

ют о высоком профиле безопасности и доказанной эффективности Эргоферона в профилактике и лечении ОРВИ и гриппа. Терапевтическое действие Эргоферона, обладающего комбинированным противовирусным, противовоспалительным и антигистаминным действием, проявляется в быстром купировании симптомов ОРВИ и гриппа на любых сроках начала терапии независимо от возраста больного, в т. ч. у пациентов с сопутствующими аллергическими заболеваниями. Использование препарата Эргоферон в амбулаторно-поликлинической практике позволяет эффективно и безопасно лечить ОРВИ любой этиологии и грипп, что сопровождается уменьшением частоты бактериальных осложнений, сокращает лекарственную нагрузку на пациента. ф

Конфликт интересов: автор заявляет об отсутствии конфликта интересов в ходе написания данной статьи.

ЛИТЕРАТУРА

1. Mahony JB. Detection of respiratory viruses by molecular methods. Clin Microbiol Rev, 2008, 21: 716-747.

2. Nichols WG. Respiratory viruses other than influenza virus: impact and therapeutic advances. Clin Microbiol Rev, 2008, 21: 274-290.

3. Грипп у детей в современных условиях (методические рекомендации для врачей всех специальностей). СПб.: СпецЛит, 2017, 49 с. / Influenza in children in the modern environment (methodical recommendations for doctors of all specialties). SPb.: SpecLit, 2017, 49 p.

4. Грипп и острые респираторные вирусные инфекции: современная рациональная этио-тропная и патогенетическая терапия. Алгоритмы оказания медицинской помощи больным. Методические рекомендации. М.: Федеральное медико-биологическое агентство, 2018, 23 с. /Influenza and acute respiratory viral infections: modern rational etiotropic and pathogenetic therapy. Algorithms for rendering medical care to patients. Methodical recommendations. Moscow: Federal Medical Biological Agency, 2018, 23 p.

5. Грипп: эпидемиология, диагностика, лечение, профилактика. Под ред. акад. РАМН О.И. Киселева, Л.М. Цыбаловой, В.И. Покровского. М.: ООО «Издательство «МИА», 2012, 496 с. Influenza: epidemiology, diagnosis, treatment, prevention. Under the editorship of Acad. of RAMS Kiseleva OI, Tsybalova LM, Pokrovsky VI. M.: Izdatelstvo MIA LLC, 2012, 496 p.

6. Заплатников А.Л., Кондюрина Е.Г., Елкина Т.Н., Бурцева Е.И., Грибанова О.А., Пирожкова Н.И., Мингалимова Г.А., Тюленева И.О., Трушакова С.В., Мукашева Е.А. Многоплановая оценка схем терапии острых респираторных инфекций в условиях рутинной педиатрической практики. Антибиотики и химиотерапия, 2016, 61(5-6): 8-20. / Zaplatnikov AL, Kondyurina EG, Elkina TN, Burtseva EI, Gribanova OA, Pirozhkova NI, Mingalimova GA, Tyuleneva IO, Trushakova SV, Mukasheva EA. Multidimensional assessment

of the therapy regimens for acute respiratory infections in routine pediatric practice. Antibiotiki i Khimioterapiya, 2016, 61 (5-6): 8-20.

7. Kiso M, Iwatsuki-Horimoto K, Yamayoshi S et al. Emergence of Oseltamivir-Resistant H7N9 Influenza Viruses in Immunosuppressed Cynomolgus Macaques. J.Infect. Dis. 2017, 216 (5): 582-93.

8. Gubareva LV, Sleeman K, Guo Z, et al. Drug Susceptibility Evaluation and Influenza A(H7N9) Virus by Analyzing Recombinant Neuraminidase Proteins. J Infect Dis, 2017, 216(4): 566-74.

9. Косяков С.Я. Острые респираторные инфекции в практике оториноларинголога. Медицинский совет, 2013, 7: 26-31. /Kosyakov SYa. Acute respiratory infections in the otorhi-nolaryngological practice. Meditsinsky Sovet, 2013, 7: 26-31.

10. Epstein O. The spatial homeostasis hypothesis. Symmetry, 2018, 10(4): 103. doi: 10.3390/ sym10040103.

11. Николаева И.В. Эргоферон в терапии острых респираторных вирусных инфекций у детей. Детские инфекции, 2014: 45-50. /Nikolaeva IV. Ergoferon in the treatment of acute respiratory viral infections in children. Detskie Infektsii, 2014: 45-50.

12. Инструкция к лекарственному препарату Эргоферон./ Patient Information Leaflet for Ergoferon http: // grls.rosminzdrav.ru/.

13. Don E, Farafanova O, Pokhil S, Barykina D, Nikiforova M, et al. Use of Piezoelectric Immunosensors for Detection of Interferon-Gamma Interaction with Specific Antibodies in the Presence of Released-Active Forms of Antibodies to Interferon-Gamma. Sensors, 2016, 16: s16010096.

14. Эпштейн О.И. Феномен релиз-активности и гипотеза «пространственного» гомеостаза. Успехи физиологических наук, 2013, 4(3): 54-76 /Epstein OI. The phenomenon of release activity and the spatial homeostasis hypothesis. Uspekhi Fiziologicheskikh Nauk, 2013, 4 (3): 54-76

15. Эпштейн О.И., Шерстобоев Е.Ю., Мартюшев-Поклад А.В., Дугина Ю.Л., Сергеева С.А., Дыгай А.М. Дозозависимость эффектов и специфичность действия сверхмалых доз антител к эндогенным регуляторам. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины, 2004, 137(5): 527-529. /Epshtein OI, Sherstoboev EYu, Martyushev-Poklad AV, Dugina YuL, Sergeeva SA, Dygay AМ. The dose-dependent effects and the specificity of activity of ultra-low doses of antibodies to endogenous regulators. Byulleten Experimentalnoy Biologii i Meditsiny, 2004, 137 (5): 527-529.

16. Эпштейн О.И. Экспериментальное исследование фармакологических эффектов сверхмалых доз антител к эндогенным регуляторам функций. Бюл. экспер. биол. и мед., 2008, Прил. 2: 82-88. /Epstein OI. Experimental study of pharmacological effects of ultra-low doses of antibodies to endogenous regulators of functions. Byul. Exper. Biol. i Med, 2008, App. 2: 82-88.

17. Емельянова А.Г., Греченко В.В., Петрова Н.В., Шиловский И.П., Горбунов Е.А., Тарасов С.А., Хаитов М.Р., Морозов С.Г., Эпштейн О.И. Влияние релиз-активных антител к рецептору CD4 на уровень lck-киназы в культуре мононуклеарных клеток периферической крови человека. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины, 2016, 162(9): 304307. /Emelyanova AG, Grechenko VV, Petrova NV, Shilovsky IP, Gorbunov EA, Tarasov SA, Khaitov MR, Morozov SG, Epstein OI. Effects of release-active antibodies to the CD4 receptor on the level of lck-kinase in cultured peripheral blood mononuclear cells. Byulleten Experimentalnoy Biologii i Meditsiny, 2016, 162 (9): 304-307.

18. Жавберт Е.С., Дугина Ю.Л. Эпштейн О.И. Противовоспалительные и противоаллергические свойства антител к гистамину в релиз-активной форме: обзор экспериментальных и клинических исследований. Детские инфекции, 2014, 1: 4-43. /Zhavbert ES, Dugina YuL, Epstein OI. Anti-inflammatory and antiallergic properties of antibodies to histamine in

release-active form: a review of experimental and clinical studies. Detskie Infektsii, 2014, 1: 4-43

19. Tarasov SA et al. Activity of ultra-low doses of antibodies to gamma-interferon against lethal influenza A(h2N1)2009 virus infection in mice. Antiviral Res, 2012, 93(2): 219-224.

20. Skarnovich MA, Emelyanova AG, Petrova NV, Borshcheva AA, Gorbunov EA, Mazurkov OY, Skarnovich MO, Tarasov SA, Shishkina LN, Epstein OI. Activity of ergoferon against lethal influenza A (h4N2) virus infection in mice. Antiviral Therapy, 2017, 22(4): 345-351. doi: 10.3851/IMP3115.

21. Шиловский И.П., Корнилаев Г.В, Хаитов М.Р. Новые возможности в терапии респиратор-но-синцитиальной вирусной инфекции: данные доклинического исследования препарата «Эргоферон». Иммунология, 2012, 33(3): 144148./ Shilovsky IP, Kornilaev GV, Khaitov MR. New possibilities in the therapy for respiratory syncytial viral infection: data of pre-clinical study of Ergoferon. Immunologiya, 2012, 33 (3): 144-148.

22. Шиловский И.П., Прозорова М.С., Хаитов М.Р. Способность препарата эргоферон подавлять инфицирующую активность респираторно-синцитиального вируса in vitro. Иммунология. 2015, 36(4): 216-219. /Shilovsky IP, Prozorova MS, Khaitov MR. The ability of ergoferon to suppress the infecting activity of the respiratory syncytial virus in vitro. Immunologiya, 2015, 36 (4): 216-219.

23. Petrova NV, Emelyanova AG, Gorbunov EA, Edwards MR, Walton RP, Bartlett NW, Aniscenko J, Gogsadze L, Bakhsoliani E, Khaitov MR, Johnston SL, Tarasov SA, Epstein OI. Efficacy of novel antibody-based drugs against rhinovirus infection: In vitro and in vivo results. Antiviral Research, 2017, 142: 185-192.

24. Rafalsky V, Averyanov A, Bart B, Minina E, Putilovskiy M, Andrianova E, Epstein O. Efficacy and safety of Ergoferon versus oseltamivir in adult outpatients with seasonal influenza virus infection: a multicenter, open-label, randomized trial. International Journal of Infectious Diseases, 2016, 51: 47-55.

25. Геппе Н.А., Кондюрина Е.Г., Галустян А.Н., Пак Т.Е., Бальцерович Н.Б., Жиглинская О.В., Камаев А.В., Лазарева С.Г., Лалэко С.Л., Мельникова И.М., Перминова О.А., Сабитов А.У. Жидкая лекарственная форма эргоферо-на – эффективное и безопасное средство лечения острых респираторных инфекций у детей. Промежуточные итоги многоцентрового двойного слепого плацебо-контролиру-емого рандомизированного клинического исследования. Антибиотики и химиотера-пия,2014, 59(5-6): 6-14./ Geppe NA, Kondyurina EG, Galustyan AN, Pak TE, Balcerovich NB, Zhiglinskaya OV, Kamaev AV, Lazareva SG, Laleco SL, Melnikova IM, Perminova OA, Sabitov AU. The liquid dosage form of ergoferon as an effective and safe treatment for acute respiratory infections in children. Interim results of a multicenter, double-blind, placebo-controlled, randomized clinical trial. Antibiotiki i Chimioterapiya, 2014, 59 (5-6): 6-14

26. Костинов М.П. Новый препарат для лечения гриппа и острых респираторных вирусных инфекций. Инфекционные болезни, 2011, 9(4): 29-34. /Kostinov MP. A new drug for the treatment of influenza and acute respiratory viral infections. Infektsionnye Bolezni, 2011, 9 (4): 29-34.

27. Кондюрина Е.П, Тюленева И.О., Бурцева Е.И., Трушакова С.В., Мукашева Е.А., Виноградова А.А., Елкина Т.Н., Зеленская В.В. Динамика клинической картины острого обструктивного бронхита у детей на фоне противовирусной терапии. Антибиотики и химиотерапия, 2016, 61(9-10): 32-42./ Kondyurina EG, Tyuleneva IO, Burtseva EI, Trushakova SV, Mukasheva EA, Vinogradova AA, Elkina TN, Zelenskaya VV. Clinical picture dynamics in acute obstructive bronchitis in children against the background of antiviral therapy. Antibiotiki i Chimioterapiya. 2016, 61 (9-10): 32-42.

28. Заплатников А.Л., Кондюрина Е.Г., Елкина Т.Н., Грибанова О.А., Пирожкова Н.И., Мингалимова Г.А., Тюленева И.О. Применение различных схем противовирусной терапии ОРВИ у детей. Детские инфекции, 2015, 3: 34-42. /Zaplatnikov AL, Kondyurina YeG, Elkina TN, Gribanova OA, Pirozhkova NI, Mingalimova GA, Tyuleneva IO. Use of various antiviral therapy regimens for children with acute respiratory viral infection. Detskie Infektsii, 2015, 3: 34-42.

29. Мордык А.В., Иванова О.Г., Антропова В.В., Ситникова С.В., Нагибина Л.А. Лечение и профилактика острых респираторных вирусных инфекций у больных туберкулезом органов дыхания в условиях противотуберкулезного стационара. Справочник поликлинического врача, 2017, 1: 14-19. /Mordyk AV, Ivanova OG, Antropova VV, Sitnikova SV, Nagibina LA. Treatment and prevention of acute respiratory viral infections in patients with respiratory tuberculosis in an anti-tuberculosis hospital environment. Spravochnik Poliklinicheskogo Vracha, 2017, 1: 14-19.

30. Степанищева Л.А. Эргоферон в лечении острых респираторных вирусных инфекций у взрослых. Результаты рандомизированного клинического исследования. Доктор.ру, 2012, Специальный выпуск: 31-38./ Stepanishcheva LA. Ergoferon in the treatment of acute respiratory viral infections in adults. Results of a randomized clinical trial. Doktor.ru, 2012, Special Issue: 31-38.

31. Гаврюченков Д.В. Новый противовирусный препарат Эргоферон в лечении респираторных инфекций. Поликлиника, 2011, 1: 78-81. / Gavryuchenkov DV. New antiviral drug Ergoferon in the treatment of respiratory infections. Polyklinika, 2011, 1: 78-81.

32. Тихонова Е.П., Кузьмина Т.Ю., Андронова Н.В. и соавт. Эффективность применения Эргоферона для лечения острых респираторных вирусных инфекций. Практ. медицина, 2014, 1(77): 179184. /Tikhonova EP, Kuzmina TYu., Andronova NV, et al. Efficacy of Ergoferon for the treatment of acute respiratory viral infections. Prak Meditsina, 2014, 1 (77): 179-184.

33. Княжеская Н.П., Баранова И.А., Фабрика М.П., Белевский А.С Новые возможности лечения и

профилактики ОРВИ у пациентов с хроническими обструктивными заболеваниями легких. Атмосфера. Пульмонология и аллергология, 2012, 3(46): 37-40. /Knyazheskaya NP, Baranova IA, Fabrika MP, Belevsky AS. New possibilities of treatment and prevention of ARVI in patients with chronic obstructive pulmonary diseases. Atmosfera. Pulmonologiya i Allergologiya, 2012, 3 (46): 37-40.

34. Шестакова Н.В., Загоскина Н.В., Самойленко Е.В., Минакова Е.Ю., и соавт. Эффективность и безопасность применения Эргоферона в комплексной терапии внебольничных пневмоний. Доктор.ру, 2012, 8(76): 44-47. / Shestakova NV, Zagoskina NV, Samoylenko EV, Minakova EYu, et al. Efficacy and safety of the use of Ergoferon in the complex therapy for community-acquired pneumonia. Doktor.ru. 2012, 8 (76): 44-47.

35. Веревщиков В.К., Борзунов В.М., Шемякина Е.К. Оптимизация этиопатогенетической терапии гриппа и ОРВИ у взрослых при применении эргоферона. Антиб. ихимиотер., 2011, 56(9): 23-26. /Verevshchikov VK, Borzunov VM, Shemyakina EK. Optimization of etiopathoge-netic therapy of influenza and acute respiratory viral infection in adults by using ergoferon. Antib. i Khimioter., 2011, 56 (9): 23-26.

36. Jefferson T, Jones M, Doshi P, Spencer EA, Onakpoya I, Heneghan CI et al. Oseltamivir for influenza in adults and children: systematic review of clinical study reports and summary of regulatory comments. BMJ, 2014, 348: g25.

37. World Health Organization. WHO List of Essential Medicines. Geneva: WHO. Available at: http: //www.who.int/medicines/publications/ essentialmedicines/ EML2015_8-May-15.pdf. (accessed July 4, 2016).

38. Реестр выданных разрешений на проведение клинических исследований лекарственных препаратов http: //grls.ros- minzdrav.ru/ Доступ свободный. /The register of clinical trial authorizations http: //grls.ros-minzdrav.ru/ Access is free.

39. Геппе Н.А., Валиева С.Т., Фараджева Н.А., Оганян М.Р., Мырзабекова Г.Т., Жанузаков М.А., Катарбаев А.К., Скучалина Л.Н., Айткулуев Н.С., Кабаева Д.Д., Раупов Ф.О., Ибадова ГА., Шамсиев Ф.С., Наврузова Ш.И., Хусинова Ш.А., Нурмухамедова Р.А., Абдрахманова С.Т. Лечение ОРВИ и гриппа в амбулаторно-поли-клинической практике: результаты международной наблюдательной неинтервенционной программы «ЭРМИТАЖ». Терапия, 2017, 8(18): 63-78. /Geppe NA, Valieva ST, Faradzheva NA, Oganyan MR, Myrzabekova GT, Zhanuzakov MA, Katarbaev AK, Skuchalina LN, Aitkuluev NS, Kabaeva DD, Raupov FО, Ibadova GA, Shamsiev FS, Navruzova ShI, Khusinova ShA, Nurmukhamedova RA, Abdrakhmanova ST. Treatment of acute respiratory viral infections and influenza in outpatient clinics: the results of the international observational non-inter-ventional HERMITAGE program. Terapiya, 2017,

8 (18): 63-78.

40. Howick J, Heneghan CI. Neuraminidase inhibitors for preventing and treating influenza in healthy adults and children. Cochrane Database Syst Rev, 2014, 1: CD008965.

СВЕДЕНИЯ ОБ АВТОРЕ:

Фесенко Оксана Вадимовна – д.м.н., профессор кафедры пульмонологии ГБОУ ДПО РМАНПО, Москва

Оптимизация терапии острых респираторно-вирусных инфекций верхних дыхательных путей у детей и взрослых

Согласно доказательной медицине, на сегодняшний день лекарство с прямым противовирусным действием разработано только для вируса гриппа. Так, в США с этой целью используются 5 зарегистрированных противовирусных препаратов, 3 из которых рекомендованы Управлением санитарного наблюдения за качеством пищевых продуктов и медикаментов (FDA), а именно: озельтамивир для перорального приема, зинамивир — порошок для ингаляций, перамивир — для внутривенного введения. Эти противовирусные препараты относятся к ингибиторам нейраминидазы и активны только в отношении вирусов гриппа группы А и В, в то время как группа адамантанов (амантадин и римантадин) активна только против группы А. На основании данных вирусологического исследования, полученных на протяжении последних сезонов гриппа, большая часть вирусов гриппа А (h3N2) резистентна к адамантанам (но чувствительна к ингибиторам нейраминидазы), а также значительная часть вирусов гриппа А (h2N1) нечувствительна к озельтамивиру (но поддается лечению занамивиром и адамантанами) [3, 4]. Однако известно, что кроме вируса гриппа возбудителями ОРВИ являются до 200 штаммов вирусов.

В практике отоларинголога наиболее часто вирусные инфекции проявляются острыми риносинуситами, тонзиллофарингитами, ларинготрахеитами. 60–65 % амбулаторных пациентов обращаются к лор-врачам по поводу острых риносинуситов, которые занимают первое место в структуре всех лор-заболеваний. Наиболее частыми их возбудителями являются риновирусы и коронавирусы (поражают слизистую оболочку носа), реовирусы поражают слизистую носа и глотки, вирусы парагриппа — гортань, вирусы гриппа — трахею, аденовирусы — лимфоидную ткань глотки и конъюнктивы.

К сожалению, разнообразие возбудителей, отсутствие перекрестного иммунитета к вирусам, постоянно мутирующий их антигенный состав, высокая аллергизация населения, а также наличие сопутствующей соматической патологии обусловливают четкую необходимость поиска методов лечения и неспецифической профилактики этих инфекций.

Перспективным направлением лечения на сегодняшний день является применение индукторов синтеза эндогенного интерферона (ИФН). Известно, что течение и исход вирусных инфекций во многом зависят от способности системы интерферона быстро реагировать на внедрение возбудителя [5]. Экспериментально доказано, что анти-ИФН-g повышают экспрессию ИФН-g, ИФН-a/b, а также сопряженных с ними интерлейкинов (ИЛ-2, -4, -10 и др.), улучшают лиганд-рецепторную взаимосвязь, восстанавливают цитокиновый статус; нормализуют концентрацию и функциональную активность естественных антител к ИФН-g, участвуют в противовирусном ответе и стимулируют интерферонзависимые биологические процессы, активизируя смешанный Th1– и Th2-опосредованный иммунный ответ [6–8, 9].

Одним из важных и наиболее хорошо изученных медиаторов воспаления является гистамин, который выступает посредником между воспалительным фактором и сосудистой реакцией, вызывая стимуляцию гистаминорецепторов, что, в свою очередь, приводит к местной вазодилатации, повышению проницаемости сосудистых стенок, транссудации плазмы крови (вызывая ринорею) и раздражению ирритантных рецепторов (чихание, кашель) [10]. С целью нивелирования подобного негативного действия применяются антитела к гистамину, которые модифицируют гистаминзависимую активацию центральных и периферических Н1-рецепторов и таким образом снижают проявления неприятных симптомов, выраженность сопутствующих инфекционному процессу аллергических реакций за счет угнетения высвобождения гистамина из тучных клеток, продукции лейкотриенов, синтеза молекул адгезии, снижения хемотаксиса эозинофилов и агрегации тромбоцитов [9].

Известно, что CD4-клетки, в том числе антигенпрезентирующие и Т-хелперы (Th1 и Th2), играют ключевую роль в противовирусном иммунном ответе [11]. Анти–тела к CD4, являясь аллостерическими модуляторами этого рецептора, регулируют функциональную активность CD4-лимфоцитов, тем самым нормализуя соотношение CD4/CD8 и субпопуляционного состава иммунокомпетентных клеток (СD3, CD4, CD8, CD16, CD20).

Эргоферон — препарат с комбинированным действием, который в своем составе объединяет антитела к важным эндогенным регуляторам: гамма-интерферону человека (анти-ИНФ-g), гистамину (анти-Н) и CD4.

☼ Таким образом, Эргоферон обладает комплексным действием за счет усиленных противо–вирусного, противо–воспалительного, антигистаминного эффектов.

Этот препарат применяется для лечения заболеваний дыхательных путей у взрослых и детей в Украине с 2013 года и активно изучался учеными [11–20]. Его доказательная база подтверждена рандомизированными клиническими исследованиями, которые соответствуют всем основным принципам доказательной медицины [12, 13].

В исследованиях, проведенных на базе университета имени А.А. Богомольца (2014), определяли уровень иммуноглобулинов в образцах слюны, и было доказано, что у детей с ОРВИ препарат Эргоферон проявлял иммуномодулирующие свойства, а именно способствовал увеличению выработки секреторного иммуноглобулина А, альфа-, гамма-интерферонов при пониженном исходящем уровне продукции [14]. Эргоферон через 3 дня терапии устраняет симптомы со стороны горла и носа с восстановлением местного иммунитета (рис. 1).

В клинических исследованиях, проведенных на базе 8 медицинских центров, было доказано, что при использовании Эргоферона пациенты реже применяли жаропонижающие препараты с целью облегчения выраженности симптомов ОРВИ начиная с первого дня лечения. Анализ температурной реакции показал, что у пациентов с длительностью течения ОРВИ не больше 48 часов отмечалась более низкая (на 5 %) частота приема жаропонижающих средств, чем в группе плацебо, уже с первых суток. В подвыборке пациентов с манифестацией заболевания не больше 24 часов разница с группой плацебо была еще выше (антипиретики использовали 47 % принимающих Эрго–ферон и 65 % принимающих плацебо). Кроме того, эффективность терапии –Эргофероном проявлялась в купировании основных катаральных и общеинтоксикационных проявлений ОРВИ в более короткие сроки у большего процента больных, чем в группе плацебо. Отчетливый клинический эффект препарата был отмечен также в отношении астенических проявлений (слабость, недомогание, сонливость) и симптомов со стороны верхних дыхательных путей (заложенность и выделения из носа, чихание) [11] (рис. 2).

В 2011–2014 годах было проведено многоцентровое открытое рандомизированное контролируемое исследование на базе 12 медицинских учреждений. Для участия в нем было отобрано 156 пациентов, у которых с помощью теста определили позитивные антигены к вирусу гриппа А или В. Больные были рандомизированы на группы, получающие –Эргоферон или озельтамивир. В результате исследований было доказано, что эффективность этих двух препаратов сопоставима для взрослых амбулаторных больных по следующим показателям: средняя температура тела; оценка степени тяжести неспецифических и респираторных симптомов; время регрессии симптомов гриппа; использование антипиретиков и нестероидных противовоспалительных препаратов; изменение качества жизни пациентов; процент ухудшений и осложнений, которые предполагали назначение антибактериальной терапии [15]. Эффективность Эргоферона в лечении гриппа сопоставима с озельтамивиром (рис. 3, 4).

В 2017 году опубликованы результаты обширного исследования под названием «Эрмитаж», которое проводилось с участием врачей общей практики из Азербайджана, Армении, Грузии, Казахстана, Киргизии, Монголии, Таджикистана и Узбекистана. В исследование были включены 8411 детей и взрослых, принимающих Эргоферон, в том числе и при позднем начале лечения, а также пациенты с отягощенным аллергологическим анамнезом. В результате был сделан вывод, что применение препарата эффективно при любых сроках начала терапии независимо от возраста пациентов, в том числе у лиц с аллергией [16]. Эргоферон после второго дня лечения нормализует температуру тела у 78 % пациентов, а также устраняет боль/першение в горле у 42 % (рис. 5, 6).

Была также изучена безопасность и эффективность применения Эргоферона у пациентов с сопутствующей бронхиальной астмой и хронической обструктивной болезнью легких. В рандомизированном клиническом исследовании было доказано, что у принимающих Эрго–ферон пациентов на 1–2-е сутки приема препарата купировался интоксикационный синдром и уменьшалось количество выделений. Доказано, что лечение Эргофероном также предупреждало развитие бактериальных осложнений, требующих применения антибиотиков (78 % больных в ходе лечения не требовалось назначение дополнительной антибактериальной терапии) [17].

В открытом проспективном рандомизированном исследовании изучалась профилактическая и лечебная эффективность Эргоферона при ОРВИ у пациентов с различными формами туберкулеза легких. Было доказано, что применение Эргоферона способствовало уменьшению частоты развития эпизодов инфекции в стационаре, сокращению продолжительности эпизода ОРВИ и снижению риска развития осложнений [19, 20]. С учетом благоприятного профиля переносимости Эргоферона и отсутствия гепатотоксичности безопасность его применения также исследовалась и была доказана при лечении ОРВИ у пациентов онкологического профиля, в том числе находящихся в процессе химиотерапии [18, 19].

☼ Таким образом, анализируя данные приведенных выше исследований по применению комплексного препарата Эргоферон в лечении острых риносинуситов, тонзиллофарингитов, ларинготрахеитов у пациентов различных возрастных групп и учитывая также наличие сопутствующей соматической патологии, отягощенный аллерго–логический анамнез, можно говорить об эффективности и безопасности применения препарата Эргоферон для нормализации иммунного гомеостаза, устранения ухудшающих качество жизни катаральных симптомов, что приводит к сокращению сроков лечения и предотвращению развития бактериальной инфекции у взрослых и детей.

Bibliography

1. Печінка А.М., Дземан М.І. Гострі респіраторні захворювання: питання клінічної діагностики та лікування // Укр. мед. часопис. — 2010. — № 5 (79). — С. 94-103.

2. Острые респираторно-вирусные инфекции у взрослых: Клинические рекомендации. Национальное научное общество инфекционистов. — М., 2014. — 69 с.

3. Seasonal Influenza in Adults and Children — Diagnosis, Treatment, Chemoprophylaxis and Institutional Outbreak Management: Clinical Practice Guidelines of Infectious Dise–ases Society of America, 2009.

4. Наказ МОЗ України № 499 від 16.07.2014 р.

5. Ершов Ф.И. Основные итоги изучения системы интерферона к 2011 году // Интер-ферон 2011: сборник научных статей. — М., 2012. — С. 14-34.

6. Эпштейн О.И. Сверхмалые дозы (история одного исследования). — М.: Издательство РАМН, 2008. — 336 с.

7. Эпштейн О.И., Дугина Ю.Л., Качанова М.В. и др. Противовирусная активность сверхмалых доз антител к гамма-интерферону // Вестник Международной академии наук (Русская секция). — 2008. — 2. — 20-3.

8. Эпштейн О.И., Штарк М.Б., Дыгай А.М. и др. Фармакология сверхмалых доз антител к эндогенным регуляторам функций. — М.: Издательство РАМН, 2005.

9. Инструкция к лекарственному средству Эргоферон.

10. Патофизиология хирургических заболеваний / Под ред. Я. Ошацкого. — Польское государственное мед. издательство, 1968. — С. 105-121.

11. Костинов М.П. Новый препарат для лечения гриппа и острых респираторных вирусных инфекций // Инфекционные болезни. — 2011. — Т. 9, № 4. — С. 29-34.

12. Rafalsky V., Averyanov A., Bart B., Minina E., Putilovskiy M., Andrianova E., –Epstein O. Efficacy and safety of Ergoferon versus oseltamivir in adult outpatients with seasonal influenza virus infection: a multicenter, open-label, randomized trial // International Journal of Infectious Diseases. — 2016. — 51. — 47-55.

13. Геппе Н.А., Кондюрина Е.Г., Галустян А.Н., Пак Т.Е., Бальцерович Н.Б., Жиглинская О.В., Камаев А.В., Лазарева С.Г., Лалэко С.Л., Мельникова И.М., Перминова О.А., Сабитов А.У. Жидкая лекарственная форма эргоферона — эффективное и безопасное средство лечения острых респираторных инфекций у детей. Промежуточные итоги многоцентрового двойного слепого плацебо-контролируемого рандомизированного клинического исследования // Антибиотики и химиотерапия. — 2014. — Т. 59, № 5–6. — С. 6-144.

14. Крамарьов С.О., Закордонець Л.В. Досвід застосування препарату Ергоферон у дітей з гострими респіраторно-вірусними інфекціями // Современная педиатрия. — 2014. — № 8 (64). — С. 12-16.

15. Рафальський В., Авер’янов О., Барт Б. та ін. Ефективність та безпека противірусного препарату Ерго–ферон у порівнянні з осельтамівіром у дорослих амбулаторних хворих із сезонним вірусом грипу: багатоцентрове відкрите рандомізоване дослідження // Міжнародний журнал інфекційних захворювань. — 2016. http://dx/doi/org/10/1016/j/ijid/2016/09/002.

16. Геппе Н.А., Валиева С.Т., Фараджева Н.А., Оганян М.Р., Мырзабекова Г.Т., Жанузаков М.А., Катарбаев А.К., Скучалина Л.Н., Айткулуев Н.С., Кабаева Д.Д., Раупов Ф.О., Ибадова Г.А., Шамсиев Ф.С., Наврузова Ш.И., Хусинова Ш.А., Нурмухамедова Р.А., Абдрахманова С.Т. Лечение ОРВИ и гриппа в амбулаторно-поликлинической практике: результаты между–народной наблюдательной неинтервенционной программы «Эрмитаж» // Терапия. — 2017. — № 8. — С. 63-78.

17. Княжеская Н.П. Новые эффективные методы лечения ОРВИ у пациентов с сопутствующей патологией респираторной системы // Поликлиника. — 2012. — № 3. — С. 92-95.

18. Шаповалова Ю.С. Клинико-фармакологическое обоснование и опыт применения инновационного релиз-активного препарата в лечении острых респираторных вирусных инфекций // Справочник поликлинического врача. — 2015. — № 2. — С. 38-42.

19. Спасский А.А., Попова Е.Н., Пло–скирева А.А. Применение препарата Эргоферон в лечении ОРВИ и гриппа у взрослых пациентов с различными сопутствующими заболеваниями. Doi: https: //dx.doi.org/10.18565/ Терапия. 2018; 6 [24]:157–161

20. Мордык А.В., Иванова О.Г., Антропова В.В., Ситникова С.В., Нагибина Л.А. Лечение и профилактика острых респираторно-вирусных инфекций у больных туберкулезом органов дыхания в условиях противотуберкулезного стационара // Справочник поликлинического врача. — 2017. — № 1. — С. 14-19. 

«Эргоферон» или «Бронхо-Ваксом взрослый»? – meds.is

Сравнение эффективности Эргоферона и Взрослого бронхо-ваксома

Эффективность у Эргоферона достотаточно схожа с Бронхо-ваксомом взрослым – это означает, что способность лекарственного вещества оказывать максимально возможное действие схоже.

Например, если терапевтический эффект у Эргоферона более выраженный, то при применении Взрослого бронхо-ваксома даже в больших дозах не получится добиться данного эффекта.

Также скорость терапии – показатель быстроты терапевтического действия у Эргоферона и Взрослого бронхо-ваксома примерно одинаковы. А биодоступность, то есть количество лекарственного вещества, доходящее до места его действия в организме, схожа. Чем выше биодоступность, тем меньше его потерь будет при усвоении и использовании организмом.

Сравнение безопасности Эргоферона и Взрослого бронхо-ваксома

Безопасность препарата включает множество факторов.

При этом у Эргоферона она достаточно схожа с Бронхо-ваксомом взрослым. Важно, где метаболизируется препарат: лекарственные вещества выделяются из организма либо в неизмененном виде, либо в виде продуктов их биохимических превращений. Метаболизм протекает спонтанно, но чаще всего задействует основные органы, такие как печень, почки, лёгкие, кожу, мозг и другие. При оценивании метаболизма у Эргоферона, также как и у Взрослого бронхо-ваксома мы смотрим, какой орган является метаболизирующим и наколько критично действие на него.

Соотношение риска к пользе – это когда назначение лекарственного препарата нежелательно, но оправдано при определенных условиях и обстоятельствах, с обязательным соблюдением осторожности применения. При этом у Эргоферона нет никаих рисков при применении, также как и у Взрослого бронхо-ваксома.

Также при рассчете безопасности учитывается проявляются ли только аллергические реакции или же возможная дисфункция основных органов. В прочем как и обратимость последствий от использования Эргоферона и Взрослого бронхо-ваксома.

Сравнение противопоказаний Эргоферона и Взрослого бронхо-ваксома

Исходя из инструкции. Количество противопоказаний у Эргоферона достаточно схоже с Бронхо-ваксомом взрослым и составляет малое количество. Это и перечень симптомов с синдромами, и заболевания, различные внешних и внутренние условия, при которых применение Эргоферона и Взрослого бронхо-ваксома может быть нежелательным или недопустимым.

Сравнение привыкания у Эргоферона и Взрослого бронхо-ваксома

Как и безопасность, привыкание тоже включает множество факторов, которые необходимо учитывать при оценивании препарат.

Так совокупность значения таких параметров, как «cиндром отмены» и «развитие резистентности», у Эргоферона достаточно схоже со аналогичными значения у Взрослого бронхо-ваксома. Синдром отмены – это патологическое состояние, возникающее после прекращения поступления в организм веществ, вызывающих привыкание или зависимость. А под резистентностью понимают изначальную невосприимчивость к препарату, этим она отличается от привыкания, когда невосприимчивость к препарату развивается в течение определенного периода времени. Наличие резистентности можно констатировать лишь в том случае, если была сделана попытка увеличить дозу препарата до максимально возможной. При этом у Эргоферона значения «синдрома отмены» и «резистентности» достотачно малое, впрочем также как и у Взрослого бронхо-ваксома.

Сравнение побочек Эргоферона и Взрослого бронхо-ваксома

Побочки или нежелательные явления – это любое неблагоприятное с медицинской точки зрения событие, возникшее у субъекта, после введения препарата.

У Эргоферона состояния нежелательных явлений почти такое же, как и у Взрослого бронхо-ваксома. У них у обоих количество побочных эффектов малое. Это подразумевает, что частота их проявления низкая, то есть показатель сколько случаев проявления нежелательного эффекта от лечения возможно и зарегистрировано – низкий. Нежелательное влияние на организм, сила влияния и токсическое действие у Эргоферона схоже с Бронхо-ваксомом взрослым: как быстро организм восстановиться после приема и восстановиться ли вообще.

Сравнение удобства применения Эргоферона и Взрослого бронхо-ваксома

Это и подбор дозы с учетом различных условий, и кратность приемов. При этом важно не забывать и про форму выпуска препарата, ее тоже важно учитывать при составлении оценки.

Удобство применения у Эргоферона примерно одинаковое с Бронхо-ваксомом взрослым. При этом они не являются достаточно удобными для применения.

Рейтинг препаратов составлен опытными фармацевтами, изучающий международные исследования. Отчет сгенерирован автоматически.

Дата последнего обновления: 2020-12-13 10:33:25

Эргоферон (Ergoferon): описание, рецепт, инструкция

Ergoferon

Аналоги (дженерики, синонимы)

Арбидол, Арпефлю, Эхинацеи настойка, Ликопид, Анаферон, Анаферон детский, Тимоген, Галавит, Имунофан, Имудон, Постеризан, Иммунал, Бронхо-мунал, Гепон, Полиоксидоний, Ферровир, Тималин, Иммунорм, Трекрезан, Деринат, ИРС 19, Актипол, Иммуномакс, Пирогенал, Тактивин, Вобэнзим, Натрия нуклеинат, Рибомунил, Рузам, Глутоксим, Йодантипирин, Акридонуксусная кислота, Алкимер, Арпетол, Арпетолид, Аффинолейкин, Бактиспорин, Бестим, Бронхо-Ваксом, Вилозен, Гроприносин, Дезоксинат, Задаксин, Имиквимод, Иммунал плюс C, Имунорикс, Интерферон, Капли Береш Плюс, Копаксон Тева, Кэтс Кло, Марина, Миелопид, Милайф, Моликсан, Натрия дезоксирибонуклеат, Нейроферон, Неовастэт, Оптинат, ОРВИтол, Панаген, Полиферон CD4Постеризан фортеПрофетальРеспитанРиниталСпленинСпоробактеринСтемокинСтимфортеСуперлимфТамеритТимусаминТубосанУро ВаксомФлогэнзимХеликсорЭксальбЭпифаминЭрбисолЭстифанЭхинацеяЭхинокор

Действующее вещество

Антитела к гамма интерферону человека аффинно очищенные (Антитела к гамма интерферону человека аффинно очищенные), Антитела к гистамину аффинно очищенные (Антитела к гистамину аффинно очищенные), Антитела к CD4 аффинно очищенные (Антитела к CD4 аффинно очищенные)

Фармакологическая группа

Другие иммуномодуляторы

Рецепт

Международный:

Rp.: Ergoferoni
D.t.d. № 20 in tab.
S. первые сутки – 8 таб. по схеме, далее 1 таб. х 3 р./сутки

Россия:

Отпускается без рецепта

Фармакологическое действие

Спектр фармакологической активности эргоферона включает в себя противовирусную, иммуномодулирующую, антигистаминную, противовоспалительную.

Экспериментально и клинически доказана эффективность применения компонентов эргоферона при вирусных инфекционных заболеваниях: грипп А и грипп В, ОРВИ (вызванные вирусами парагриппа, аденовирусами, респираторно-синцитиальными вирусами, коронавирусами), герпесвирусные инфекции (лабиальный герпес, офтальмогерпес, генитальный герпес, опоясывающий герпес, ветряная оспа, инфекционный мононуклеоз), острые кишечные инфекции вирусной этиологии (вызванные калицивирусами, коронавирусами, ротавирусами, энтеровирусами), энтеровирусный и менингококковый менингиты, геморрагическая лихорадка с почечным синдромом, клещевой энцефалит.

Препарат применяется в комплексной терапии бактериальных инфекций (псевдотуберкулез, коклюш, иерсиниоз, пневмония различной этиологии, включая атипичных возбудителей (Mycoplasma pneumoniae, Chlamydophila (Chlamydia) pneumoniae, Legionella spp.), используется для профилактики бактериальных осложнений вирусных инфекций, предупреждает развитие суперинфекций. Применение препарата в пре- и поствакцинальном периоде увеличивает эффективность вакцинации, обеспечивает неспецифическую профилактику ОРВИ и гриппа в момент становления поствакцинального иммунитета. Эргоферон обладает профилактической эффективностью в отношении ОРВИ негриппозной этиологии, предупреждает развитие интеркуррентных заболеваний в поствакцинальном периоде.

Компоненты, входящие в препарат, обладают единым механизмом действия в виде повышения функциональной активности CD4-рецептора, рецепторов к интерферону (ИФН)-γ и гистамину, что сопровождается выраженным иммунотропным действием.

Фармакодинамика

Данных по этому разделу нет. В текущий момент мы обрабатываем информацию, пожалуйста вернитесь позже.

Фармакокинетика

Данных по этому разделу нет. В текущий момент мы обрабатываем информацию, пожалуйста вернитесь позже.

Способ применения

Для взрослых:

Принимают внутрь.

Разовая доза – 1 таблетка (вне приема пищи).
Таблетку следует держать во рту, не проглатывая, до полного растворения.

Лечение необходимо начинать как можно раньше, при появлении первых признаков острой инфекции по следующей схеме: в первые 2 ч препарат принимают каждые 30 мин, затем в течение первых суток осуществляют еще 3 приема через равные промежутки времени. Со вторых суток и далее принимают по 1 таблетке 3 раза/сут до полного выздоровления.

Для профилактики инфекционных вирусных заболеваний – по 1-2 таб./сут.

Рекомендуемая продолжительность профилактического курса определяется индивидуально и может составлять 1-6 мес.

При необходимости препарат можно сочетать с другими противовирусными и симптоматическими средствами.

Показания

— в составе комплексной терапии острых респираторных вирусных инфекций, в т.ч. гриппа, у взрослых и детей с 6 лет.

Противопоказания

— повышенная индивидуальная чувствительность к компонентам препарата.

Особые указания

Данных по этому разделу нет. В текущий момент мы обрабатываем информацию, пожалуйста вернитесь позже.

Побочные действия

— Возможно: реакции повышенной индивидуальной чувствительности к компонентам препарата.

Передозировка

Данных по этому разделу нет. В текущий момент мы обрабатываем информацию, пожалуйста вернитесь позже.

Лекарственное взаимодействие

Данных по этому разделу нет. В текущий момент мы обрабатываем информацию, пожалуйста вернитесь позже.

Форма выпуска

Таб. д/рассасывания: 20, 40 или 100 шт.

Таблетки для рассасывания плоскоцилиндрической формы, с риской и фаской, от белого до почти белого цвета. На плоской стороне с риской нанесена надпись MATERIA MEDICA, на другой плоской стороне нанесена надпись ERGOFERON.

1 таб.

антитела к гистамину 0.006 г*

антитела к CD4 0.006 г*

антитела к гамма интерферону человека 0.006 г*
* наносятся на лактозу в виде смеси трех активных водно-спиртовых разведений субстанции, разведенной соответственно в 10012, 10030, 100200 раз.

Вспомогательные вещества: лактозы моногидрат, целлюлоза микрокристаллическая, магния стеарат.

20 шт. – упаковки ячейковые контурные (алюминий/ПВХ) (1) – пачки картонные.

20 шт. – упаковки ячейковые контурные (алюминий/ПВХ) (2) – пачки картонные.

20 шт. – упаковки ячейковые контурные (алюминий/ПВХ) (5) – пачки картонные.

инструкция по применению для детей и взрослых, отзывы о таблетках Эргоферон

Вся информация, представленная ниже, носит исключительно ознакомительный характер и не может служить заменой консультации врача.

Синонимы: Ergoferon

Эргоферон относится к проверенным иммуностимуляторам. Спектр его фармакологического действия сводится к антигистаминному,  противовирусному и противовоспалительному действию. Препарат выступает в качестве профилактического средства бактериальных осложнений, вызванных вирусной инфекцией. Его часто назначают гомеопаты при различных вирусных инфекциях, а также при герпесе.  Средство не допускает возникновение суперинфекций.

Содержание статьи

Состав препарата и формы выпуска

В состав Эргоферона входят компоненты из состава технологически обработанных антител. Препарат выпускается в виде таблеток.

Показания к применению

Эргоферон назначают при гриппе А и В, при ОРВИ, генитальном и опоясывающем герпесе и при ветряной оспе. Он отлично проявляет себя в период терапии острых вирусных заболеваний и клещевого энцефалита. Врачи включают его в состав комплексной терапии при диагностировании кишечных инфекций и корона- и ротавирусах. Также он помогает справиться с псевдотуберкулезом и коклюшем, и эффективен при пневмонии.п

Инструкция по применению

Препарат Эргоферон предназначен для рассасывания — его применяют внутрь. В инструкции по применению сказано, как пить Эргоферон взрослым. Единоразовый прием — 1 таблетка. Не рекомендуется это делать во время еды, лучше за четверть часа до приема пищи или после. Таблетку держат во рту до ее полного рассасывания.

Для детей в возрасте полугода до 3-х лет таблетку растворяют в 1 столовой ложке кипяченой воды, для чего ее предварительно остужают до состояний комнатной температуры. Во-вторых, терапевтические меры следует предпринимать как можно раньше, как только проявят себя первые признаки инфекции. Для этого инструкцией по применению предусмотрена определенная схема, которую стоит придерживаться: первые два часа препарат принимают каждые полчаса. За первые сутки Эргоферон принимают еще 3 раза через равные временные промежутки.
Обратите внимание! Это надо продолжать до момента полного выздоровления.

Как принимать в случае профилактических мер? В первые сутки предусмотрены 3 приема через одинаковые временные промежутки. Начиная со вторых суток, способ применения по 1 таблетке трижды в день, и так до полного выздоровления. Вирусные инфекции предполагает прием по 1-2 таблетки в день. Профилактические курсы часто длятся от 1 до 6 месяцев. Допускается сочетание Эргоферона с другими симптоматическими и противовирусными средствами.

Побочные эффекты

Как и у большинства медикаментов, у Эргоферона есть свои побочные эффекты. Возможна реакция, вызванная индивидуальной непереносимостью некоторых компонентов или повышенной чувствительностью к ним. В процессе клинических испытаний не были зарегистрированы аллергические реакции. Если пациент наблюдает побочную реакцию, которая усугубляется, об этом следует тут же сообщить врачу.

Противопоказания

К противопоказаниям Эргоферона относятся возрастные ограничения: его не назначают детям в возрасте до 3-х лет (в виде раствора), до 6 месяцев (в виде таблеток). Также к противопоказаниям относится индивидуальная повышенная чувствительность к компонентам препарата, наследственная непереносимость фруктозы или лактозы. С особой осторожностью препарат назначают и принимают пациенты с сахарным диабетом.

Передозировка

Если была допущена передозировка препарата, возможны рвота, тошнота и диарея. В этом случае назначается симптоматическое лечение.

Особые указания

В состав гомеопатического средства Эргоферон входит лактоза, поэтому он рекомендован пациентам с такими врожденными отклонениями, как синдром галактозы или глюкозы, при врожденной галактоземии или врожденной лактозной недостаточности.

Пациентам с сахарным диабетом необходимо знать и помнить: в каждой чайной ложке (5 мл) раствора препарата содержится 0,3 г мальтитола, а это 0,02 хлебных единиц (ХЕ).
Для процесса метаболизма мальтитола существует необходимость инсулина. Его доза незначительна за счет медленного гидролиза и нескорого всасывания в желудочно-кишечном тракте. Энергетическая ценность мальтитола — 2,4 ккал/г, а это намного меньше, чем у сахарозы. Энергетическая ценность 1 ч.л. препарата приблизительно равна 1,37 ккал. Обратите внимание! Эргоферон не влияет на способность управления любым автотранспортными средствами.
Безопасность применения Эргоферона при беременности и в период лактации пока не изучена, как и негативное влияние на потомство. По этой причине применение препарата Эргоферон назначается только при крайней необходимости, после того, как будет сделана оценка пользы и потенциального риска для матери и ребенка.

Форма выпуска, упаковка

Таблетированный препарат расфасован 20 штук в контурную ячейковую упаковку, сделанную из поливинилхлоридной пленки и алюминиевой фольги. В картонной упаковке предусмотрено вложение инструкции по применению на русском и других языках.

Условия и срок хранения, условия отпуска

Хранить препарат рекомендуется в месте, защищенном от света. Место должно быть недоступным для детей. Температура — не выше 25 °С. Срок хранения — 3 года. В инструкции говорится, что по истечению срока годности препарат принимать нельзя.

Эргоферон отпускают в аптечной сети без рецепта.

Взаимодействие

В ходе проведенных клинических исследований не были получены данные о взаимодействии Эргоферона с лекарственными средствами, применяющимися в качестве сопутствующей терапии.

Отзывы пациентов

Среди отзывов по препарату Эргоферон основная их часть — позитивные.

Игорь Матвеев, Можайск:
Нам назначили Эргоферон для профилактики ОРВИ детей-школьников. Они у нас часто болели — намного чаще, чем их одноклассники. Мы с женой начали уже подумывать о переводе их на домашнее обучение. Но такой вариант был крайним. Каждый год вывозим их на море, у ребят достаточно фруктов, сбалансированная еда. А вот иммунитет… Мы обратились к местному гепатологу и он порекомендовал Эргоферон. Уже через месяц ситуация порадовала — дети начали болеть реже, у них даже улучшились успехи в школе.

Татьяна Ильинична, Санкт-Петербург:
Нам Эргоферон посоветовал принимать друг нашей семьи — им он помог пережить волну гриппа в прошлом году. Мы посоветовались с врачом и тот одобрил. Пили всей семьей, побочных реакций ни у кого не было. И мы действительно проскочили сезон без болезней. Рекомендуем всем.

Материал подготовлен совместно с врачом-гомеопатом Галиевым Владимиром Алексеевичем и медиа-агентством Е-Медика.

Узнать больше об авторах можно по этой ссылке.

Эргоферон №20 табл.д/рассас.

Инструкция по медицинскому применению

лекарственного средства

ЭРГОФЕРОН

Торговое название

Эргоферон

Международное непатентованное название

Нет

Лекарственная форма

Таблетки для рассасывания

Состав

Одна таблетка содержит

активные вещества: антитела к гамма интерферону человека аффинно очищенные 0,006 г*, антитела к гистамину аффинно очищенные 0,006 г*,      

антитела к CD4 аффинно очищенные 0,006 г*.

вспомогательные вещества: лактозы моногидрат, целлюлоза микрокристаллическая, магния стеарат.

* наносятся на лактозы моногидрат в виде смеси трех активных водно-спиртовых разведений субстанции, разведенной соответственно в 10012, 10030, 10050 раз.

Описание

Таблетки плоскоцилиндрической формы с риской и фаской, от белого до почти белого цвета. На плоской стороне с риской нанесена надпись MATERIA MEDICA, на другой плоской стороне нанесена надпись ERGOFERON.

Фармакотерапевтическая группа

Противовирусные препараты прочие

Код АТХ J05AX

Фармакологические свойства

Фармакокинетика

Вследствие особенностей процесса технологической обработки исходной субстанции чувствительность современных физико-химических методов анализа (газожидкостная хроматография, высокоэффективная жидкостная хроматография, хромато-масс-спектрометрия) не позволяет оценивать содержание конечных продуктов данной технологии в биологических жидкостях, органах и тканях, что делает технически невозможным изучение фармакокинетики препарата Эргоферон.

Фармакодинамика

Входящие в состав препарата Эргоферон компоненты, приготовленные из афинно очищенных на антигене  поликлональных  антител к ИФНγ, гистамину и CD4, в процессе технологической обработки, связанной  с градуальным (последовательным) уменьшением концентрации, приобретают универсальную способность специфически воздействовать на фармакологические мишени, вызывая в них конформационные изменения, что приводит к изменению их функциональной активности. Отсутствие в готовой лекарственное форме определяемых количеств исходной субстанции делает невозможным использование классических фармакодинамических корреляций доза-эффект.

Экспериментально методом ядерно-магнитного резонанса  доказано, что препарат из  технологически обработанных антител вызывает конформационные изменения как в молекуле соответствующего антигена, так и в его рецепторе, инициируя активацию регуляторных (сигнальных) путей.

В экспериментальных и клинических исследованиях подтверждено, что антитела к интерферону гамма обладают противовирусной и иммуномодулирующей активностью: повышают экспрессию ИФНγ, ИФНα/β, а также сопряженных с ними интерлейкинов (ИЛ-2, ИЛ-4, ИЛ-10 и др.), модифицируют лиганд-рецепторное взаимодействие ИФНγ с его рецептором; нормализуют уровень естественных антител к ИФНγ, являющихся важным фактором естественной противовирусной толерантности  организма; стимулируют функциональную активность NK клеток.

Антитела к гистамину оказывают противоаллергическое и противовоспалительное действие, модифицируя гистамин-зависимую активацию периферических и центральных Н1-рецепторов и, таким образом, снижая тонус гладкой мускулатуры бронхов, уменьшают проницаемость капилляров, что приводит к сокращению длительности и выраженности ринореи, отека слизистой оболочки носа, кашля и чихания, а также выраженности сопутствующих инфекционному процессу аллергических реакций.

Антитела к CD4 регулируют функциональную активность CD4 рецептора, что приводит к повышению функциональной активности CD4-лимфоцитов, нормализации иммунорегуляторного  индекса CD4/CD8, а также субпопуляционного состава иммунокомпетентных клеток (CD3, CD4, CD8, CD16, CD20).

Экспериментально и клинически доказана эффективность применения Эргоферона  при острых респираторных  вирусных инфекциях; может применяться также в комплексной терапии и профилактике бактериальных осложнений вирусных инфекций; предупреждает развитие суперинфекций.

Показания к применению

– в составе комплексной терапии острых респираторных вирусных инфекций (в том числе гриппа) у взрослых и детей с 3 лет

– профилактика острых респираторных вирусных инфекций (ОРВИ)

Способ применения и дозы

Внутрь. На один прием – 1 таблетка (за 15 минут до приема пищи или через 15 минут после приема пищи). Таблетку следует держать во рту, не проглатывая, до полного растворения.

В составе комплексной терапии ОРВИ у взрослых и детей с 3-х лет:   лечение  нужно начинать как можно раньше, при появлении первых признаков острой инфекции по следующей схеме: в первые 2 часа препарат принимают каждые 30 минут, затем в течение следующих часов первых суток осуществляют еще три приема через равные промежутки времени. Со вторых суток и далее принимают по 1 таблетке 3 раза в день до полного выздоровления.

Профилактика ОРВИ у взрослых и детей с 3-х лет – по 1-2 таблетки в день. Рекомендуемая продолжительность профилактического курса определяется индивидуально и может составлять 1 – 6 месяцев.

При необходимости препарат можно сочетать с другими противовирусными и симптоматическими средствами.

Побочное действие

Существует риск развития  реакции повышенной индивидуальной чувствительности к компонентам препарата. В клинических исследованиях аллергических реакций, достоверно связанных с приемом препарата, не зарегистрировано.

Противопоказания

– повышенная индивидуальная чувствительность к компонентам препарата                 – детский возраст до 3-х лет

– наследственная непереносимость фруктозы, дефицит фермента Lapp-лактазы, мальабсорбция глюкозы-галактозы

Лекарственное взаимодействие

Случаев несовместимости с другими лекарственными средствами до настоящего времени не зарегистрировано.

Особые указания

В состав препарата входит лактозы моногидрат, в связи с чем его не рекомендуется назначать пациентам с врожденной галактоземией, синдромом мальабсорбции глюкозы или галактозы, либо при врожденной лактазной недостаточности.

Беременность и период лактации

Безопасность применения Эргоферона при беременности и в период лактации не изучалась.  Экспериментально доказано на беременных самках животных отсутствие эмбрио- и фетотоксического действия, а также негативного влияния на потомство. Поэтому рекомендуется применение препарата Эргоферон при крайней необходимости, после оценки соотношения пользы для матери и потенциального риска для плода или ребенка.

Особенности влияния лекарственного средства на способность управлять транспортными средствами или другими потенциально опасными механизмами

Эргоферон не оказывает влияния на способность управлять транспортными средствами и другими потенциально опасными механизмами.

Передозировка

При случайной передозировке возможны диспепсические явления, вызванные приемом вспомогательных веществ: лактозы моногидрата и магния стеарата.

Форма выпуска и упаковка

По 20 таблеток в контурной ячейковой упаковке из пленки поливинилхлоридной и фольги алюминиевой.

По 1, 2 или 5 контурных ячейковых упаковок вместе с инструкцией по медицинскому применению на государственном и русском языках помещают в пачку из картона.

Условия хранения

Хранить в защищенном от света месте при температуре не выше 25 °С.

Хранить в недоступном для детей месте.

Срок хранения

3 года

Не применять после истечения срока годности

Условия отпуска из аптек

Без рецепта

Производитель

ООО «НПФ «МАТЕРИА МЕДИКА ХОЛДИНГ»,  Россия, 127473, г. Москва,

3-й Самотечный пер., д.9. Тел./факс: (495) 684-43-33.

Владелец регистрационного удостоверения

ООО «НПФ «МАТЕРИА МЕДИКА ХОЛДИНГ», Россия.

Производственная площадка

ООО «НПФ «МАТЕРИА МЕДИКА ХОЛДИНГ»,  Россия, 454139,

г. Челябинск, ул. Бугурусланская, 54.

     Адрес организации, принимающей на территории Республики Казахстан претензии от потребителей по качеству продукции
Представительство  ООО «НПФ «МАТЕРИА МЕДИКА ХОЛДИНГ»  в РК                 г. Алматы, ул. Жибек жолы 64, офис 206.
Тел./факс: 2734713
E-mail: [email protected]  

}EF-%=+!3,7,<$-,#$3#!$%.2$0..7#.11,2',).'

G?H,-$2$’,+,1#.5!’!’.!$’.MNOPb*2$#$: !”(4zR3.#*/$7#.11$

COEB%$8,#$,#'(4: .3,'(41#.3,».%,-1,”$3%!’.=#!1%.-$0..

3.#*/$3 %!7,+’,)-$’.C/’.:!’.=.#$3.#*/$7#.11$E*3! %.+!’.=

1#,”,%:.!%&’,/.:.2′../’.:!’.=%!$% &’,/.#,.3,3.#*/’$;$-.3’,/&

$’.MNOj3,’, >!’..1$'”!5.+!/-,7,3.#*/$7#.11$CvOEB8(%$

/,1,/$3.5$/,/!%&$5.3.#,5$1#./,35!/’,51#.5!’!’..”3*4 1#!1$#$,3

2’$+.5,1,3(>$%$/&A<

L-/1!#.5!’$%&'(!.//%!”,3$’.;’$5,”!%. 7#.11$CVvO.>$55$

lVvOE1#,3!”!”(!3-,51 $’..l~]\sklC#$’0.;E3/,#*”‘.+!/3!/

’ /.*,5$/!#$C#$’0.;E$-:!1,-$2$%.1#,.3,3 .#*/’*=A<

$’.MNOP/,1,/$3.5*=/A<

1*8%.-$0..E

#,5!,7, 34,”!-%.’.+!/-.4.A-/1!#.5!’$%&'(4.//%!”,3$’. )”,-$2$’,+,

$’.MNOP1,3(>$!A-/1#!//.=MNOPMNO• V € . Mz.”#E*%*+>$!%.7$'”#!0!1,#’,!

32$.5,”! )/3.!MNO’,#5$%.2*!-,’0!’#$0.=.<*'-0.,'$%&'*= $-.3',/&

!/!/3!”(4$’.!%-MNOP+,,8*/ %,3%.3$!A<

2$6.*$$-:!,-$2(3$!1#,!-.3′,!3%.;’.!’$A1.!% .)#!/1.#$,#’,7,

#$-$./’.:$!3(#$:!”,/& 3,/1$%!’.;G@H

,%!-*%;#’,)5.>!’&=$’.QR?C3, #,7,-,51,’!’$A#7,

QR?-,#!0!1, #-%!,+’,7,#!0!1,#$1#!»/$3%!”()’$4!%1! #$4

5,’,0.$45$-#,<$7$4"!'"#.'(4-%!-$423!/ ',+,#$2%.+’(!<$-,#(

5,7*,-$2(3$&’!7$.3′ ,!3,2″!)/3.!’$1#!2!’$0.=3.#*/’,7,$’.7!’$

QR?S-%!-$5.+,3.,7!/’.:$!A<

,”*%.#*=6!!3%.;’.!$’.QR?’$<*'- 0.,'$%&'*=$-.3',/&QR?S-%!,-

,8!/1!+.3$;1 ,%’,0!”*=1#!2!’$0.=$’.7!’$A<

1#, .3,”!)/3*!3.#*%!’’,)7#.11,2′,).’

A$1,3!!#$23..;#,5!,7,1, 3(>$;<*'-0.,'$%&'*=$-.3',/&QR?S

%.5<,0.,3 $'.QR?1#!1;/3*!#!1%.-$0..3.#*/$./1,/,8/3*!3(/,-,)

/-,#,/.!7,-%.#!’/ $GBH$-.5,8#$2,5/,35!/’,!1#.5!’!’.!” 3*4-

-,51,’!’,3-A#7,

#!1%.-$0..3.#*/$.<,#5.#,3$'.=$ "!-3$',7,1#,.3,3.#*/',7,,3!$+,

#!$%.2*! /;38(/#,5-*1.#,3$’..%.4,#$”-.F,/’,3′,7,-% .’.+!/-,7,

5$#-!#$3.#!5..1#.7#.11!$$-:!”# *7.4-%.’.+!/-.4/.51,5,3

#,.3,3.#*/’$;.1#,. 3,3,/1$%.!%&’$;A<

“,1,%’;!/; 3%.;’.!5$’.’$7./$5.’,1,/#!”,3$”(!5!4$’.25( 

.’!’..

#!/1.#$,#'(4/.51,5,33.#*/’,) .’

{!+!’.!A#7,

#!8*=6.41#.5!’!’.;$ ‘.8.,.-,394,”!.//%!”,3$’.;8(%1,”3!#:”!’

3(/,-.)*#,3!’&8!2,1$/’,/.1#!1$#$$b’!8(%,1 ,%*+!’,”$”(4,

32$.5,”!)/3..A#7,

1,%*+$%.3-$+!/3!/,1*/3*=6! )!#$1..

9

Интрон А, интерферон альфа-2b (интерферон альфа-2b), дозировка, показания, взаимодействие, побочные эффекты и многое другое

ИНТЕРФЕРОН АЛЬФА – ИНЪЕКЦИИ

(ин-тер-ФЭЕР-он АЛ-фух)

ОБЩЕЕ ТОРГОВОЕ НАЗВАНИЕ(Я): Алферон Н, Интрон А, Роферон-А

ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ: Это лекарство редко может вызвать или усугубить серьезные (редко со смертельным исходом) медицинские состояния, в том числе психические/аффективные расстройства (такие как депрессия), проблемы с иммунной системой (аутоиммунные состояния, такие как волчанка или ревматоидный артрит), проблемы с кровообращением или инфекции.Если в вашей истории болезни есть какие-либо из этих состояний, немедленно сообщите об этом своему врачу. Кроме того, немедленно сообщите своему врачу, если возникнут какие-либо серьезные симптомы или побочные эффекты (см. раздел «Побочные эффекты»). Это лекарство можно комбинировать с рибавирином для лечения хронического гепатита С. Рибавирин может причинить вред нерожденному ребенку или привести к смерти. Женщины должны избегать беременности, пока они или их партнеры-мужчины используют рибавирин. Рибавирин может вызвать заболевание крови (гемолитическая анемия), которое может усугубить сердечные заболевания. Если вы используете это лекарство с рибавирином для лечения хронического гепатита С, также внимательно прочитайте информацию о препарате для рибавирина.

ИСПОЛЬЗОВАНИЕ: Это лекарство используется для лечения различных видов рака (таких как лейкемия, меланома, саркома Капоши, связанная со СПИДом). Он также используется для лечения вирусных инфекций (таких как хронический гепатит В, хронический гепатит С, остроконечные кондиломы). Этот препарат аналогичен белку, который естественным образом вырабатывается вашим организмом (интерферон). Считается, что в организме он работает, воздействуя на функцию / рост клеток и естественную защиту организма (иммунную систему) разными способами. Добавление большего количества интерферона может помочь вашему организму бороться с раком или вирусными инфекциями.

СПОСОБ ПРИМЕНЕНИЯ: Прочтите Руководство по лекарствам, которое можно получить у фармацевта, прежде чем начать использовать этот препарат и каждый раз, когда вы будете получать добавку. Изучите все инструкции по приготовлению и применению, предоставленные производителем. Если у вас есть какие-либо вопросы, обратитесь к врачу или фармацевту. Это лекарство вводится путем инъекции в мышцу или под кожу в соответствии с указаниями врача. Поворачивайте место инъекции каждый раз, когда вы вводите это лекарство, чтобы предотвратить болезненность. Его также можно вводить путем инъекции в вену или непосредственно в очаг поражения, как правило, медицинским работником.Если вы даете это лекарство себе дома, изучите все инструкции по приготовлению и применению у своего лечащего врача. Не встряхивайте контейнер с лекарством (флакон или шприц). Это может снизить эффективность препарата. Перед использованием визуально проверьте продукт на наличие частиц или обесцвечивания. Если они присутствуют, не используйте жидкость. Узнайте, как безопасно хранить и утилизировать медицинские принадлежности. Никогда не используйте повторно одноразовые шприцы или иглы. Многодозовую шприц-ручку можно использовать повторно.Его лучше всего использовать вечером перед сном, чтобы уменьшить побочные эффекты. Пейте много жидкости при использовании этого лекарства, если иное не указано вашим врачом. Дозировка зависит от вашего состояния здоровья и реакции на терапию. Не изменяйте дозу или частоту использования этого лекарства без разрешения врача. Используйте это лекарство регулярно, чтобы получить от него максимальную пользу. Чтобы помочь вам запомнить, используйте его в одно и то же время каждый вечер, когда у вас есть запланированная доза. Различные марки альфа-интерферона могут привести к разным количествам лекарства в крови.Это лекарство выпускается в разных формах (порошок во флаконе, раствор во флаконе и многодозовая ручка). То, как вы вводите это лекарство, зависит от формы, которую вы используете. Внимательно следуйте указаниям врача. Не меняйте бренды без разрешения врача.

ПОБОЧНЫЕ ДЕЙСТВИЯ: Реакции в месте инъекции (боль/отек/покраснение), головная боль, утомляемость, диарея, расстройство желудка, потеря аппетита, боль в спине, головокружение, сухость во рту, изменение вкуса, тошнота или рвота. Если какой-либо из этих эффектов сохраняется или ухудшается, немедленно сообщите об этом своему врачу или фармацевту.Могут возникнуть гриппоподобные симптомы, такие как лихорадка, озноб и мышечные боли, особенно когда вы впервые начинаете принимать это лекарство. Эти симптомы обычно длятся около 1 дня после инъекции и улучшаются или исчезают через несколько недель непрерывного использования. Вы можете уменьшить эти побочные эффекты, вводя это лекарство перед сном и используя жаропонижающее / обезболивающее, такое как ацетаминофен, перед каждой дозой. Проконсультируйтесь с врачом или фармацевтом для получения дополнительной информации. Иногда во время лечения могут возникать проблемы с зубами и деснами.Наличие сухости во рту может усугубить этот побочный эффект. Предотвратите сухость во рту, выпивая много воды или используя заменитель слюны. Хорошо чистите зубы не менее двух раз в день и регулярно проходите осмотр у стоматолога. Если у вас возникла рвота во время лечения, после этого прополощите рот, чтобы уменьшить вероятность проблем с зубами и деснами. Может произойти временное выпадение волос. Нормальный рост волос должен вернуться после окончания лечения. Помните, что это лекарство было назначено, потому что ваш врач пришел к выводу, что польза для вас больше, чем риск побочных эффектов.Многие люди, использующие это лекарство, не имеют серьезных побочных эффектов. Немедленно сообщите своему врачу, если у вас есть какие-либо серьезные побочные эффекты, в том числе: ощущение жара или холода (больше, чем у других вокруг вас), быстрое / нерегулярное сердцебиение, повышенная жажда / мочеиспускание, менструальные изменения (отсутствие/задержка/нерегулярные менструации), онемение/покалывание рук/ступней, отек (особенно лица/кистей/ступней), проблемы со сном, проблемы при ходьбе, изменения зрения (такие как нечеткость зрения, частичная потеря зрения), легкое кровотечение/синяки, постоянная тошнота/рвота, признаки инфекции (такие как лихорадка, постоянная боль в горле), боль в животе/желудке, темная моча, черный/дегтеобразный стул, пожелтение глаз/кожи.Немедленно обратитесь за медицинской помощью, если возникнут какие-либо из этих очень серьезных побочных эффектов: боль в груди, судороги, слабость на одной стороне тела, проблемы с речью. Этот препарат может вызвать у вас серьезные изменения психики/настроения, которые могут ухудшиться во время лечения или после последней дозы. Немедленно сообщите своему врачу, если у вас есть такие симптомы, как спутанность сознания, депрессия, мысли о самоубийстве или причинение вреда другим, необычная раздражительность или агрессивное поведение. В этом случае рекомендуется психиатрическая терапия и наблюдение во время и после лечения этим лекарством.Очень серьезная аллергическая реакция на этот препарат встречается редко. Однако немедленно обратитесь за медицинской помощью, если заметите какие-либо симптомы серьезной аллергической реакции, в том числе: сыпь, зуд/отек (особенно лица/языка/горла), сильное головокружение, затрудненное дыхание. Это не полный список возможных побочные эффекты. Если вы заметили другие эффекты, не перечисленные выше, обратитесь к своему врачу или фармацевту. В США позвоните своему врачу для медицинской консультации о побочных эффектах. Вы можете сообщить о побочных эффектах в FDA по телефону 1-800-FDA-1088 или на сайте www.fda.gov/medwatch.В Канаде: позвоните своему врачу, чтобы получить медицинскую консультацию о побочных эффектах. Вы можете сообщить о побочных эффектах в Министерство здравоохранения Канады по телефону 1-866-234-2345.

МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ: См. также раздел «Предупреждение». Перед использованием альфа-интерферона сообщите своему врачу или фармацевту, если у вас аллергия на него; или если у вас есть какие-либо другие аллергии. Этот продукт может содержать неактивные ингредиенты (например, альбумин), которые могут вызывать аллергические реакции или другие проблемы. Поговорите со своим фармацевтом для получения более подробной информации. Прежде чем использовать это лекарство, сообщите своему врачу или фармацевту свою историю болезни, особенно о: нарушениях клеток крови (таких как анемия, нейтропения, тромбоцитопения), тромбах, раке, диабете, проблемах со зрением, сердечных заболеваниях. (такие как стенокардия, нерегулярное сердцебиение), высокое кровяное давление, ВИЧ-инфекция, заболевания иммунной системы (такие как волчанка, псориаз, ревматоидный артрит), кишечные заболевания (такие как колит), заболевания почек, заболевания печени (такие как аутоиммунный гепатит, декомпенсированный заболевания печени), заболевания легких (такие как хроническая обструктивная болезнь легких — ХОБЛ, астма, пневмония), психические расстройства/аффективные расстройства (такие как тревога, депрессия), высокий уровень триглицеридов в крови, панкреатит, судорожные расстройства, заболевания щитовидной железы, употребление/злоупотребление наркотики/алкоголь.Этот препарат может вызвать у вас головокружение. Алкоголь или марихуана (марихуана) могут усилить головокружение. Не садитесь за руль, не пользуйтесь механизмами и не делайте ничего, что требует бдительности, пока вы не сможете делать это безопасно. Ограничьте алкогольные напитки. Поговорите со своим врачом, если вы используете марихуану (каннабис). Сообщите своему врачу, что вы используете альфа-интерферон, прежде чем делать какие-либо прививки/прививки. Избегайте контактов с людьми, недавно получившими живые вакцины (например, вакцину против гриппа, вдыхаемую через нос). контактные виды спорта.Перед операцией сообщите своему врачу или стоматологу обо всех продуктах, которые вы используете (включая рецептурные и безрецептурные препараты и продукты растительного происхождения). Дети могут быть более чувствительны к побочным эффектам этого препарата, особенно изменениям психики/настроения (таким как тяжелые депрессия, мысли/попытки самоубийства). Интерферон и рибавирин также могут замедлить скорость роста ребенка. Нормальная прибавка в весе и скорость роста обычно возвращаются после завершения лечения, но окончательный рост взрослого человека может быть ниже ожидаемого.Периодически контролируйте рост и вес вашего ребенка во время лечения. Пожилые люди могут быть более чувствительны к воздействию препарата, особенно к головокружению, изменениям психики/настроения и воздействию на сердце. Во время беременности интерферон альфа следует использовать только в случае крайней необходимости. Обсудите риски и преимущества с вашим врачом. Альфа-интерферон, при использовании в сочетании с рибавирином, не должен использоваться во время беременности ни беременной женщиной, ни ее партнером-мужчиной. Комбинация может причинить вред нерожденному ребенку.Надежные формы контроля над рождаемостью должны использоваться всякий раз, когда хотя бы один половой партнер принимает эти лекарства вместе. Пациентки женского пола должны продолжать использовать противозачаточные средства в течение 9 месяцев после прекращения лечения. Пациенты мужского пола должны продолжать использовать противозачаточные средства в течение 6 месяцев после прекращения лечения. Если вы или ваш партнер забеременеете, или если вы думаете, что вы или ваш партнер можете забеременеть, немедленно сообщите об этом своему врачу. Неизвестно, проникает ли этот препарат в грудное молоко. Перед кормлением грудью проконсультируйтесь с врачом.

ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ С ЛЕКАРСТВЕННЫМИ СРЕДСТВАМИ: Взаимодействие с лекарственными средствами может изменить действие ваших лекарств или увеличить риск серьезных побочных эффектов. Этот документ не содержит всех возможных лекарственных взаимодействий. Составьте список всех продуктов, которые вы используете (включая рецептурные и безрецептурные препараты и растительные продукты), и поделитесь им со своим врачом и фармацевтом. Не начинайте, не останавливайте и не изменяйте дозировку любых лекарств без одобрения вашего врача. Некоторые продукты, которые могут взаимодействовать с этим препаратом, включают: барбитураты (такие как фенобарбитал), колхицин, лекарства, которые могут повлиять на вашу иммунную систему (такие как химиотерапия рака, альдеслейкин, циклоспорин), гидроксимочевина, телбивудин, теофиллины (такие как аминофиллин, теофиллин).

ПЕРЕДОЗИРОВКА: Если у кого-то передозировка и серьезные симптомы, такие как потеря сознания или затрудненное дыхание, позвоните по номеру 911. В противном случае немедленно позвоните в токсикологический центр. Жители США могут позвонить в местный токсикологический центр по телефону 1-800-222-1222. Жители Канады могут позвонить в провинциальный токсикологический центр. Симптомы передозировки могут включать: боль в груди, постоянную тошноту/рвоту, боль в желудке/животе, потемнение мочи.

ПРИМЕЧАНИЯ: Не передавайте это лекарство другим людям. Лабораторные и/или медицинские анализы (такие как анализы крови, анализы щитовидной железы, функции почек/печени, уровни триглицеридов, осмотры глаз) следует проводить перед началом лечения, периодически для контроля вашего прогресс, или проверить наличие побочных эффектов.В зависимости от вашей истории болезни могут потребоваться другие тесты (например, ЭКГ). Проконсультируйтесь с врачом для получения более подробной информации. Не меняйте марки интерферона без консультации с врачом или фармацевтом. Другие интерфероны могут не оказывать такого же влияния на ваше заболевание.

ПРОПУЩЕННАЯ ДОЗА: Важно получать каждую дозу этого лекарства в соответствии с графиком. Если вы пропустите дозу, немедленно обратитесь к своему врачу или фармацевту за новым графиком дозирования. Не удваивайте дозу, чтобы наверстать упущенное.

ХРАНЕНИЕ: Хранить в холодильнике вдали от света и влаги.Не мерзни. Держите все лекарства подальше от детей и домашних животных. Проконсультируйтесь с инструкциями по продукту или вашим фармацевтом для получения дополнительных сведений о хранении после смешивания этого лекарства. Многодозовую ручку можно использовать до 4 недель после первой инъекции. Не оставляйте это лекарство вне холодильника более чем на 48 часов. После 4 недель использования выбросьте шприц-ручку, даже если в ней все еще есть неиспользованный раствор. Не смывайте лекарства в унитаз и не выливайте их в канализацию, если это не предписано.Правильно утилизируйте этот продукт, когда он просрочен или больше не нужен. Проконсультируйтесь с вашим фармацевтом или местной компанией по утилизации отходов.

Последняя редакция информации: март 2022 г. Copyright(c) 2022 First Databank, Inc.

ВАЖНО: КАК ПОЛЬЗОВАТЬСЯ ЭТОЙ ИНФОРМАЦИЕЙ: Это краткое изложение и НЕ содержит всю возможную информацию об этом продукте. Эта информация не гарантирует, что этот продукт безопасен, эффективен или подходит для вас. Эта информация не является индивидуальной медицинской консультацией и не заменяет консультацию вашего лечащего врача.Всегда спрашивайте у своего лечащего врача полную информацию об этом продукте и ваших конкретных медицинских потребностях.

a Обзор литературы

%PDF-1.4 % 1 0 объект >поток iText 4.2.0 от 1T3XT2020-07-09T19:17:15+05:30Arbortext Advanced Print Publisher2020-11-11T23:30:37-08:002020-11-11T23:30:37-08:00uuid:8addd02c-2a8d- 4824-a074-0375b52bef83uuid:9735c38c-787b-4f5b-aca7-e8422204bc96JournalCritical Reviews in Food Science and Nutrition© 2020 Taylor & Francis Group, LLC001-1411410.

  • Продукты питания или лекарства? Терапевтическое влияние пищи на продолжительность и заболеваемость инфекциями верхних дыхательных путей: обзор литературы
  • Taylor & Francis
  • Critical Reviews in Food Science and Nutrition, 2020. doi: 10.1080/10408398.2020.1784087
  • Гааг Эллен Хосе van der
  • Hummel Thalia Zoe
  • Цельные продукты
  • рецидивирующие инфекции верхних дыхательных путей
  • пробиотики
  • бузина
  • киви
  • VoR2020-07-10true
  • .tandfonline.com
  • 10.1080/10408398.2020.1784087
  • www.tandfonline.com
  • true2020-07-1010.1080/10408398.2020.1784087 конечный поток эндообъект 4 0 объект >поток xYK$5 8FFp[jOa\؎k2TU.r&U#Wx/2{;rOx$w=WG._&ag4tiwkspokeI-.*RjqQ+c`Grzt֓8/TE5\Ih5=5Y}M+ԬNTi5⡩tx;9&xw gB:[cH[~ƫ~3?~?82rď [DW>,XspokeG:?0 >?`)+ؒ+4?F\@dYͷspoken]vaQĂX)믯_/}U9p:Q.T{X4!!u2B?K(zyX_3o> \Xr1e

    Nuevo eufemismo científico para la homeopatía

    Publicar un artículo sobre homeopatía en muchas revistas científicas raya lo imposible. Por ello, la empresa rusa ООО «НПФ» МАТЕРИА МЕДИКА ХОЛДИНГ имеет научное изобретение: релиз-активные лекарственные формы (formas de liberación-activación de fármacos).Gracias a ello publicó un artículo en PLoS ONE en 2014 y desde entonces ha publicado muchos en otras revitas. La palabra «homeopatía» не апарече в ningún lugar de sus artículos sobre fármacos RA или formas RA de fármacos .

    Por supuesto, en el Apartado de Métodos se puede leer que se trata de diluciones reiteradas con sucusión («все последующие разведения состояли из одной части предыдущего разведения на 99 частей растворителя с встряхиванием между каждым разведением»).Se estudian diluciones C12, C30 и C50. En ellas ha desaparecido toda molécula del principio activo (recuerda el valor del número de Avogadro). El agua resultante se mezcla con lactosa para obtener el producto RA estudiado. ¿Cómo эс возможный дие estos artículos себе estén colando en revistas кон revisión por pares?

    El polémico artículo de 2014 publicado en PLoS ONE es Е. С. Гаврилова, С. А. Бобровник, …, О. И. Эпштейн, «Новый подход к оценке активности релиз-активных форм антиинтерферона-гамма», PLoS ONE 9: e97017 (2014), doi: 10.1371/journal.pone.0097017. Я получил благодарность от Джеймса К. Койна, «Статья о скрытой гомеопатии превращается в PLOS One, где она, вероятно, и останется», Quick Thoughts, 25 марта 2017 г. главный редактор al nuevo Йорг Хебер. Por Ahora ninguno де лос душ ха hecho caso де сус протестас.

    Algunos artículos recientes (todos ellos con títulos para confundir durante la revisión por pares) сын: Владимир Рафальский, Александр Аверьянов, …, Олег Эпштейн, «Эффективность и безопасность Эргоферона по сравнению с осельтамивиром у взрослых амбулаторных пациентов с сезонной вирусной инфекцией гриппа: многоцентровое исследование, открытое рандомизированное исследование», International Journal of Infectious Diseases 51: 47–55 (2016), doi: 10.1016/j.ijid.2016.09.002; Емельянова А. Г., Греченко В. В., …, Эпштейн О. И., «Влияние релиз-активных антител к рецептору CD4 на уровень lck-киназы в культивируемых мононуклеарных клетках периферической крови человека», Бюллетень of Experimental Biology and Medicine 162: 323–326 (2017), doi: 10.1007/s10517-017-3606-4; К. К. Ганина, Ю. Дугина Л., Абдурасулова И. Н., «Релиз-активные антитела к белку S100 могут корректировать течение экспериментального аллергического энцефаломиелита», Neuroscience and Behavioral Physiology 47: 163–167 (2017), doi: 10.1007/с11055-016-0380-0; Елена С. Дон, Александра Георгиевна Емельянова, …, Олег И. Эпштейн, «Феномен высвобожденной активности. Ответ на комментарий к Don et al.: Дозозависимая противовирусная активность высвобожденно-активной формы антител к гамма-интерферону против гриппа A/California/07/09(h2N1) на мышиной модели», Journal of Medical Virology (2017), doi: 10.1002/jmv.24759.

    ¿Hasta cuándo la revisión por pares de estas revistas biomedicas licenser que se sigan publicando estos artículos sobre homeopatía?

    Взгляд на механизм действия сильно разведенных биологических препаратов

    Ключевые моменты

    • Сильно разведенные антитела к IFN-γ индуцируют конформационные изменения в IFN-γ.

    • Высокоразведенные антитела к IFN-γ улучшают связывание IFN-γ с рецептором IFN-γ.

    • Высокоразведенные антитела к IFN-γ повышают выживаемость мышей с инфекцией гриппа А.

    Abstract

    Терапевтическое использование АТ в лечении рака, аутоиммунитета, трансплантологии и других областях является одним из основных биофармацевтических достижений 20-го века. Более широкое использование препаратов на основе антител сдерживается высокой стоимостью их производства и частыми побочными эффектами.Одним из многообещающих подходов для преодоления этих ограничений является использование сильно разбавленных АТ, которые получают путем постепенного снижения концентрации АТ до чрезвычайно низкого уровня. Эта технология была использована для создания группы препаратов для лечения различных заболеваний в зависимости от специфичности используемых АТ. Было показано, что высокоразведенные антитела к IFN-γ (hd-анти–IFN-γ) эффективны против гриппа и других респираторных инфекций в различных доклинических и клинических исследованиях. В текущем исследовании мы приводим доказательства возможного механизма действия hd-анти-IFN-γ.Используя спектроскопию ядерного магнитного резонанса высокого разрешения в растворе, мы показываем, что лекарство индуцирует конформационные изменения в молекуле IFN-γ. Изменения химического сдвига произошли в аминокислотах, расположенных в основном на поверхности димера и в С-концевой области IFN-γ. Эти молекулярные изменения могут иметь решающее значение для функции белка, о чем свидетельствует наблюдаемое HD-анти-IFN-γ-индуцированное увеличение специфического связывания IFN-γ с его рецептором в клетках U937, усиленная индуцированная продукция IFN-γ в культуре РВМС человека и повышение выживаемости мышей, инфицированных гриппом А.

    Введение

    Препараты на основе антител быстро увеличивают свою долю на рынке лекарственных средств. Приблизительно 60 mAb были одобрены для клинического применения (1). Несмотря на растущий спрос, использование терапевтических АТ остается проблематичным из-за ограничений их пероральной доступности, проблем со стабильностью и их побочных эффектов (2, 3). Таким образом, многие исследования были направлены на разработку и усовершенствование фармацевтических препаратов на основе антител с помощью адъювантов, химических модификаций, инкапсуляции и т. д.(4–6).

    Одним из многообещающих новых подходов для преодоления этих ограничений является постепенное снижение исходной концентрации Ab для достижения его сверхвысокого разведения (7). Эта платформа успешно используется для производства группы безопасных и эффективных препаратов для лечения различных состояний, включая инфекционные заболевания, эндокринные нарушения, урогенитальную дисфункцию и др. (8–10).

    Вышеупомянутая технология была применена к таргетным регуляторным молекулам, включая цитокин IFN-γ, участвующий в различных физиологических и болезненных состояниях.IFN-γ представляет собой гомодимерный гликопротеин (рис. 1) с плейотропными функциями, продуцируемый преимущественно Т-лимфоцитами и NK-клетками. Он действует как модулятор множества иммунных функций, включая противовирусный иммунный ответ. IFN-γ проявляет эту активность посредством связывания со своим высокоаффинным рецептором, состоящим из α- и β-цепей, что приводит к их объединению в активный комплекс и передаче сигналов через путь JAK/STAT (11).

    Антитела против IFN-γ использовались для воздействия на иммунный ответ в экспериментальных моделях (12, 13), но их клиническая разработка не увенчалась успехом, несмотря на демонстрацию некоторых преимуществ (14, 15).Природные аутоантитела к IFN-γ присутствуют у здоровых людей; они увеличивают титр во время инфекций и при некоторых заболеваниях, и было показано, что они нарушают иммуномодулирующую активность цитокина (16). Эти факты побудили нас рассмотреть подход на основе антител для модуляции функций IFN-γ in vivo путем разработки агента на основе сильно разбавленных антител к IFN-γ (hd-анти-IFN-γ). На сегодняшний день уже изучена способность hd-анти-ИФН-γ регулировать функциональную активность и продукцию эндогенных ИФН, модулировать иммунный ответ и влиять на уровень естественных циркулирующих антител к ИФН-γ (17, 18). .Кроме того, противовирусная активность hd-анти-IFN-γ в отношении гриппа и других респираторных инфекций была продемонстрирована в различных доклинических и клинических исследованиях (17, 19–23). Информацию о недавних клинических испытаниях можно найти на сайте ClinicalTrials.gov (https://clinicaltrials.gov/ct2/results?cond=&term=anaferon&cntry=&state=&city=&dist=).

    Физико-химические свойства hd-анти-ИФН-γ изучены методами динамического светорассеяния, кондуктометрии, рН-метрии и тензиометрии.Эти результаты показали, что водные растворы сильно разбавленных АТ представляют собой самоорганизующиеся дисперсные системы, в которых формируются нанообъекты (24). Самоорганизация растворов АТ сопровождалась существенным изменением их свойств по сравнению с аналогично обработанной водой. Кроме того, было показано, что раствор hd-анти-ИФН-γ может содержать агрегаты исходных АТ, связанные с газовыми нанопузырьками, которые остаются в многократно разбавленной жидкости за счет флотационного эффекта (25).Эти данные согласуются с ранее продемонстрированным присутствием исходных материалов в форме наночастиц даже в экстремальных разведениях (26).

    С помощью пьезоэлектрического иммуносенсора мы показали, что взаимодействие между IFN-γ и IFN-γ-специфическими антителами изменилось в присутствии hd-анти-IFN-γ (27). Были продемонстрированы конформационные изменения Ag при связывании Ab (28). Подобный аллостерический эффект на антиген также может быть приписан сильно разбавленным антигенам. Таким образом, целью настоящего исследования было выяснить, может ли hd-анти-ИФН-γ вызывать конформационные изменения в молекуле ИФН-γ, влияющие на ее биологическую активность и взаимодействие с другими молекулами (т.д., рецептор IFN-γ).

    Материалы и методы

    Получение экспериментальных образцов

    HD-анти–ИФН-γ – активная фармацевтическая субстанция противовирусного коммерческого препарата Анаферон для детей (ООО «НПФ «Материа Медика Холдинг», Москва, Российская Федерация). Аффинно-очищенные кроличьи поликлональные антитела к человеческому rIFN-γ (исходная концентрация 2,5 мг/мл) были произведены в соответствии с действующими требованиями Европейского Союза к GMP для исходных материалов (29) компанией Angel Biotechnology Holdings (Penicuik, U.К.). HD-анти–ИФН-γ были произведены на заводе ООО «НПФ «Материа Медика Холдинг» по технологии, описанной в патенте США 8,535,664 (30). Вкратце, АТ к ИФН-γ (2,5 мг/мл) смешивали с растворителем (этанол–водный раствор) в соотношении 1:100 и подвергали интенсивной вибрационной обработке для получения первого сотенного разведения (т.е. 100-кратного разведения). . Все последующие разведения включали одну часть предыдущего разведения и 99 частей растворителя (этанол-водный раствор для промежуточных разведений и очищенную воду для приготовления конечных разведений) с интенсивной вибрационной обработкой между стадиями разбавления.Наконец, hd-анти-IFN-γ содержит смесь 12-го, 30-го и 50-го сотенных разведений. Теоретический уровень снижения концентрации исходных АТ составляет не менее 1 × 10 24 . Таким образом, если не принимать во внимание физические аспекты, упомянутые во Введении , теоретическая концентрация исходных АТ может составлять 2,5 × 10 -24 мг/мл. Это значение упоминается в этой статье только во избежание неправильного понимания уровня разбавления. Высокоразведенные антитела к TNF-α (hd-анти-TNF-α) были приготовлены с использованием аналогичного метода, но исходный раствор содержал аффинно-очищенные поликлональные антитела кролика против человеческого rTNF-α (исходная концентрация 2.5 мг/мл). Плацебо-контроль, не содержащий антител, готовили, применяя ту же процедуру к очищенной воде. В качестве носителя использовали очищенную воду. Все растворы готовили в стеклянных флаконах в стерильных условиях, защищенных от прямого интенсивного света, и хранили при комнатной температуре. Образцы были закодированы производителем и отправлены в исследовательские организации США (Университет Питтсбурга), Бельгии (Euroscreen), Нидерландов (U-CyTech biosciences) и Франции (Apcis), где соответствующие исследования были проведены независимо.Образцы тестировались вслепую.

    Ядерно-магнитно-резонансная спектроскопия

    Кодирующая последовательность человеческого IFN-γ без сигнального пептида (Thermo Fisher Scientific) была клонирована в рамке считывания с N-концевой His6-меткой, а затем Strep-меткой в ​​pET-28b(+ ) вектор (Novagen). IFN-γ амплифицировали из кДНК в двухэтапной ПЦР с использованием трех праймеров (прямой праймер 1: 5′-CCGCAGTTCGAAAAAGGCGCGCCC CAGGACCCATATGTA -3′; 5′-прямой праймер 2: 5′-TATACATATGG CTAG CTGGAGCCACCCGCAGTTCGAAAAA-3′ ; обратный праймер: 5′-GTG CTAG TCGACGC GGCC GC TTACTGGGATGCTCTTCG -3′) для получения фрагмента, вводящего Strep-метку, а также сайты рестрикции NheI и NotI, необходимые для клонирования в pET-28( б+) вектор.Полную конструкцию трансформировали в компетентные клетки Rosetta(DE3)pLysS (Lucigen). Двойную дрожжевую триптоновую среду (16 г триптона, 10 г дрожжевого экстракта и 5 г NaCl на литр [pH 7,4]), содержащую 50 мкг/мл канамицина, инокулировали глицериновым раствором рекомбинантных клеток и инкубировали в течение ночи при 37°С при встряхивании ( 200 об/мин). Один литр двойной триптоновой среды для дрожжей с 50 мкг/мл канамицина инокулировали ночной культурой с получением исходной OD 600 , равной 0,1. Культуру поровну разделяли на три 2-литровые колбы и инкубировали при 37°С при встряхивании при 160 об/мин до достижения ОП 600 , равной 0.5–0,6. Клетки собирали центрифугированием (3000× g ; 30 мин) и удаляли надосадочную жидкость. Каждый осадок ресуспендировали в 0,3 л минимальной среды М9 (6,6 г Na 2 HPO 4 , 3,0 г KH 2 PO 4 , 0,5 г NaCl, 0,4% глюкозы, 1 мМ 0,2 MgSO 4). CaCl 2 , 1,0 мг биотина и 0,5 мг тиамина/л) с добавлением 1,0 г/л 15 N-меченый NH 4 Cl (Cambridge Isotopes), содержащий 50 мкг/мл канамицина, и инкубировали при 37°C с встряхивание при 160 об/мин в течение 1 часа.Экспрессию индуцировали добавлением изопропил-β-d-1-тиогалактопиранозида до конечной концентрации 1,0 мМ и инкубировали культуру в течение 4 ч при 37°С при встряхивании со скоростью 160 об/мин. Клетки собирали центрифугированием, осадок замораживали при -20°С.

    Затем осадок оттаивали и ресуспендировали в 5 мл буфера А (50 мМ фосфата натрия [pH 8] и 300 мМ NaCl) на 1,0 г свежего веса. Суспензию обрабатывали ультразвуком шестью импульсами по 10 с каждый с 10-секундной паузой на льду между импульсами.Лизат центрифугировали при 5000 × г при 4°C в течение 15 мин, затем осадок ресуспендировали в таком же количестве буфера А. После стадии центрифугирования при 5000 × г при 4°C в течение 15 мин, осадок ресуспендировали в 5 мл буфера Б (100 мМ фосфата натрия [pH 8], 10 мМ Трис и 6,0 М гидрохлорида гуанидина) на 1,0 г сырого веса осадка и перемешивали в течение 1 ч при комнатной температуре. Суспензию центрифугировали при 15 000 × g в течение 30 мин при 4°C, а супернатант наносили на колонку Ni-NTA объемом 5 мл (QIAGEN), уравновешенную пятью объемами колонки буфера B.Колонку промывали 10 колоночными объемами буфера B и 10 колоночными объемами буфера C (100 мМ фосфата натрия [pH 6,3], 10 мМ Трис и 6,0 М гидрохлорида гуанидина) перед элюированием белка четырьмя колоночными объемами элюирующего буфера ( 100 мМ натрий-фосфатного буфера [рН 4,5], 10 мМ Трис и 6,0 М гуанидина гидрохлорида). Всего к элюируемым фракциям по каплям добавляли 350 мл буфера для рефолдинга (150 мМ NaCl, 100 мМ глицина, 20 мМ Трис [pH 8], 100 мМ PMSF и одну таблетку ингибитора протеазы [номер по каталогу 04693132001; Roche]). при комнатной температуре при перемешивании для ускорения рефолдинга белка.Затем раствор оставляли при 4°С на ночь при постоянном перемешивании. На следующий день раствор концентрировали с помощью фильтрующего устройства (отсечка 10 кДа) до объема примерно 5 мл. Концентрированный белок загружали в колонку для гель-фильтрации Superdex 75 (16/60) после уравновешивания колонки 120 мл буфера для гель-фильтрации (10 мМ натрий-фосфатного буфера [pH 7,4], 150 мМ NaCl и одна таблетка ингибитора протеазы). Петлю промывали 15 мл буфера для гель-фильтрации и образец элюировали при скорости потока 1.0 мл/мин с 1,5 объемами колонки того же буфера на фракции элюции по 2,0 мл. Элюированные фракции, содержащие 15 N-меченый IFN-γ, объединяли и концентрировали до 0,4 мМ с использованием концентраторов Amicon для исследований методом ядерного магнитного резонанса (ЯМР) и анализировали при конечной концентрации 50 мкМ.

    ЯМР-эксперименты проводились при 25°C на спектрометре Bruker Avance 900 МГц, оснащенном 5-мм криозондом с тройным резонансом и градиентным криозондом z . Двумерные (2D) спектры 1 H– 15 N только для IFN-γ были получены с использованием стандартной последовательности импульсов гетероядерной одиночной квантовой когерентности (HSQC) со 128 сканами в протонном измерении и 128 сканами в азотном измерении. , с задержкой 1 с.Для ЯМР-образцов, содержащих IFN-γ с добавлением сильно разбавленных антител или плацебо, спектры получали при сканировании 2048 × 34. Сбор данных проводили с использованием программного обеспечения TopSpin версии 3.0 (Bruker BioSpin, Billerica, MA). Спектры обрабатывали и анализировали с использованием программного обеспечения NMR View (31) и Sparky (SPARKY 3; Т. Д. Годдард и Д. Г. Кнеллер, Калифорнийский университет, Сан-Франциско). Наблюдаемые резонансы основной цепи были сопоставлены с использованием ранее опубликованных данных ЯМР, которые были получены в аналогичных условиях для конструкции IFN-γ, содержащей остатки 1–133 (всего 143 остатка) (32).Из 133 ожидаемых сигналов амида основной цепи 130 наблюдались в спектре HSQC. Мы однозначно определили 128 из 130 ранее назначенных остатков в нашей выборке. Для целей распределения был подготовлен более концентрированный образец, чем тот, который использовался для тестирования эффектов hd-анти-IFN-γ, и был подвергнут спектроскопическому анализу 2D 1 H– 15 N HSQC. Этот образец содержал 400 мкМ концентрированного 15 N-меченого IFN-γ в 20 мМ калий-фосфатном буфере (pH 6), содержащем 20 мМ NaCl и 10% D 2 O, который использовали для записи спектров.Для экспериментов ЯМР с участием hd-анти-IFN-γ и плацебо тестируемые образцы добавляли к 50 мкМ 15 N-меченого IFN-γ в 20 мМ калий-фосфатном буфере (рН 6), 20 мМ NaCl и 10 % D 2 O. В каждом случае образцы для ЯМР готовили идентичным образом в трех отдельных пробирках: 21,5 мкл IFN-γ плюс 113 мкл буфера (20 мМ K 2 HPO 4 /KH 2 PO 4 плюс 20 мМ NaCl плюс 10% D 2 O, [pH 6]) добавляли к 42 мкл либо плацебо, либо hd-анти-IFN-γ, чтобы получить конечную концентрацию 50 мкМ IFN- γ.

    Анализ насыщения связывания радиолиганда

    Анализ проводили путем последовательного добавления следующих реагентов в силиконизированные микроцентрифужные пробирки: 50 мкл буфера для анализа (культуральная среда RPMI 1640 [12–115F; Lonza Bioscience] с добавлением 10% FBS [Ch40160.03 ; Perbio]), 25 мкл [ 125 I]IFN-γ (разбавленного в буфере для анализа с 0,4% азидом натрия в возрастающих концентрациях [3,0, 1,0, 0,3, 0,1, 0,03, 0,01, 0,003 и 0,001 нМ; 285 -IF/CF; R&D Systems; индивидуальная маркировка Perkin Elmer]), и 25 мкл суспензии человеческих моноцитоподобных клеток линии U-937 (85011440; Sigma-Aldrich; 1 миллион клеток на пробирку, разведенных в буфере для анализа без натрия азид; 200 мкг общего белка на точку измерения).Для определения неспецифического связывания в лунку добавляли 50 мкл IFN-γ (285-IF/CF; R&D Systems) (разведенного в буфере для анализа без азида натрия до конечной концентрации 300 нМ) вместо 50 мкл буфера для анализа.

    Пробирки инкубировали 150 мин при 4°C и затем центрифугировали. Супернатант удаляли, а осадок клеток промывали один раз 1 мл ледяного буфера для анализа. Пробирки снова центрифугировали, супернатант удаляли, дно пробирки, содержащей осадок клеток, разрезали, помещали в счетные пробирки и затем подсчитывали с помощью счетчика гамма-излучения Cobra (Packard Instrument) в течение 1 мин на пробирку.

    Значения Kd были рассчитаны с использованием программного обеспечения GraphPad Prism и опции односайтового связывания (гипербола). Данные доза-реакция были проанализированы с помощью программного обеспечения XLfit (IDBS Software Solutions) с использованием нелинейной регрессии, примененной к сигмоидальной модели доза-реакция, как описано в соответствующем руководстве GraphPad для анализа данных связывания радиолиганда (33).

    Анализ конкуренции связывания радиолиганда

    Анализ проводили путем последовательного добавления следующих реагентов в силиконизированные микроцентрифужные пробирки: 50 мкл hd-анти-IFN-γ ( n = 5), hd-анти-TNF-α ( n = 5), носитель ( n = 4), буфер ( n = 3) (буфер для анализа без азида натрия) или IFN-γ (разбавленный в буфере для анализа без азида натрия) в возрастающих концентрациях (0 .001, 0,01, 0,1, 1,0, 10 и 100 нМ), 25 мкл [ 125 I]IFN-γ (разбавленного в буфере для анализа 0,4% азида натрия в концентрации, соответствующей Kd = 0,14 ± 0,05 нМ, как определено с помощью анализа связывания насыщения радиолиганда; дополнительная рис. 1), и 25 мкл клеточной суспензии U-937 (1 миллион клеток на пробирку, разведенных в буфере для анализа без азида натрия; 200 мкг общего белка на данные точку в случае определения общего связывания лиганда). Следующая процедура такая же, как и для анализа связывания насыщения.

    Анализ IFN-γ ELISpot

    Набор человеческого IFN-γ ELISpot (красная точка; номер по каталогу CT230-PR2; U-CyTech biosciences) использовали для определения эффекта hd-анти-IFN-γ или носителя на генерацию IFN-γ-продуцирующих клеток в популяции 4×10 5 РВМС человека на лунку со стандартным клеточным стимулом. РВМС выделяли из венозной крови одного здорового донора методом центрифугирования в градиенте плотности. Процедура выполнялась в соответствии с инструкциями производителя с некоторыми изменениями.Вкратце, пластины с нижней мембраной из PVDF предварительно смачивали и покрывали захватывающим Ab в течение ночи при 4°C. Перед началом эксперимента культуральную среду лиофилизировали (продолжительность 48 ч). Затем сухое вещество восстанавливали в hd-анти-IFN-γ ( n = 6) или в растворителе ( n = 6) и затем стерилизовали фильтрованием (0,2 мкм). U-CyTech biosciences (Утрехт, Нидерланды) предоставила РВМС человека. Клетки ресуспендировали в культуральной среде, содержащей hd-анти-IFN-γ или носитель, и стимулировали пептидным пулом ICE (пулом из 23 вирусных пептидов вируса гриппа А, CMV и эпитопов EBV, распознаваемых CD8 + Т-клетками). , каталожный номерСТ370; бионауки U-CyTech). Лунки с нестимулированными клетками в среде, восстановленной в носителе, использовали в качестве контроля для подсчета фоновых пятен.

    PBMC высевали по 4 × 10 5 клеток на лунку в 100 мкл в трех повторностях. Планшеты ELISpot закрывали крышками и инкубировали при 37°C, 5% CO 2 и 100% влажности в течение примерно 20 часов. После инкубации и промывки основную массу клеток удаляли сильным встряхиванием и в каждую лунку добавляли биотинилированные детектирующие АТ на 1 ч при 37°С.Далее в лунки добавляли раствор стрептавидин-HRP на 1 ч при 37°С, затем субстрат 3-амино-9-этилкарбазол с образованием окрашенной зоны (пятна) на 25 мин при комнатной температуре. Развитие окраски останавливали тщательной промывкой обеих сторон ПВДФ-мембраны деминерализованной водой (собственного производства) и пластины высушивали на воздухе при комнатной температуре. Цветная зона показывает место секреции цитокинов, а клетки, продуцирующие IFN-γ, подсчитывали, анализируя развитие окраски с помощью анализатора изображения ImmunoSpot (CTL, Oberndorf am Neckar, Germany).

    Животные и эксперименты in vivo

    Мыши.

    В исследовании с вирусом h2N1 в возрасте 4–5 недель и массой тела 15–17 г (при заражении вирусом) самки мышей BALB/c (Janvier Labs, Le Genest-Saint-Isle, Франция) были случайным образом распределены в три группы по 20 мышей в каждой. В исследовании с вирусом h4N8 в возрасте 5–7 недель и массой тела 14–18 г (при заражении вирусом) самок мышей BALB/c (лаборатория Чарльза Ривера, Сант-Анджело-Лодиджано, Италия) случайным образом распределяли на четыре группы: по 20 мышей. Мышей содержали по 10 в клетке с высокоэффективными воздушными фильтрами для твердых частиц (лаборатория Чарльза Ривера) в изоляторах уровня биобезопасности 2 в Центре биомедицинских исследований Национальной ветеринарной школы Альфор, Maisons Alfort, Франция.Мышей кормили стерильной поддерживающей диетой для грызунов (A010-Safe, F89 Augy) и негазированной водой (Beaupré). Все исследования с использованием живых вирусов проводились в условиях усиленной защиты 2-го уровня биобезопасности. Исследования на животных проводились в соответствии с применимыми законами и руководствами и соответствовали рекомендациям Национального исследовательского совета (34–36). Исследования были одобрены Институциональным комитетом по этике Центра биомедицинских исследований Национальной ветеринарной школы Альфорт (№ C2EA-16, от октября 2011 г.; Maisons Alfort, Франция).

    Вирусный вызов.

    Клетки почек собак Madin-Darby инкубировали в полной среде RPMI 1640 с добавлением 5% FCS при 37°C во влажной атмосфере с 5% CO 2 . Запасы вирусов гриппа A A/Equi2/Miami/1/63(h4N8) и A/California [пандемия A/California/07/2009(h2N1)] выращивали в куриных яйцах с эмбрионами (F-38 Grenoble; Lohmann Hatcheries). после возможных пассажей на мышах (2 и 0 соответственно для каждой линии). Все штаммы были получены благодаря любезному предоставлению лаборатории гриппа Института Пастера, Париж, Франция.Вирусные запасы готовили из аллантоисной жидкости и хранили аликвотами при -70°С. Титры вируса штаммов Equi2/Miami/1/63 и A/California/07/2009 (3 × 10 8 БОЕ/мл и 1,4 × 10 8 БОЕ/мл соответственно) определяли с помощью стандартного анализа бляшек. с использованием клеток почек собак Madin-Darby (37). Инфекционность этих вирусных штаммов в нашей мышиной модели титровали путем интраназального заражения 4-кратными серийными разведениями вирусов в Игле MEM для определения LD 50 , после чего дозу заражения корректировали до ближайшего кратного LD 50 , что соответствует расчетному LD 90 во всех экспериментах.Титры LD 50 рассчитывали с использованием метода, описанного Reed и Muench (38). Титрование LD исходного вируса у самок мышей BALB/c в возрасте 7 недель проводили путем интраназальной инокуляции групп из пяти мышей 40 мкл 4-кратного серийно разведенного вируса в PBS (pH 7,2) (Difco Laboratories). Мышей отслеживали на предмет развития признаков, соответствующих гриппозной инфекции, в течение 7 дней и подвергали эвтаназии, если их клиническое состояние соответствовало любому из следующих критериев: потеря 20% массы тела до заражения, развитие любых неврологических или респираторных симптомов или неспособность есть или пить.

    Мышей интраназально заражали двумя LD 50 эквивалентами пандемического штамма гриппа A/California/07/2009(h2N1) или пятью LD 50 штамма гриппа A/Equi2/Miami/1/63(h4N8) в 50 мкл стерильного физиологического раствора распределяют поровну между обеими ноздрями. Незараженные мыши получали только разбавитель (PBS). Мышей взвешивали до заражения, а затем каждые 3 дня на протяжении всего эксперимента.

    Лечение.

    В исследовании h2N1 hd-анти-IFN-γ вводили через зонд два раза в день с 7-часовым интервалом между дозами 0.2 мл/мышь (т.е. 0,4 мл/мышь/день), начиная с 5 дня до и до 21 дня после заражения, как сообщалось ранее (19). Параллельно с желудочным зондом в питьевую воду добавляли hd-анти-ИФН-γ в соотношении 1:3 (замена ежедневно). Принимая во внимание, что среднее поглощение воды мышами составляет 5,7 ± 0,2 мл/30 г массы тела (39), а масса тела мышей в этом эксперименте составляла 18–20 г, поглощение hd-анти-ИФН-γ из поилки было по расчетам составляет ~0,903 мл/мышь/день. В исследовании h4N8 hd-анти-IFN-γ вводили таким же образом, но в течение 26 дней после контрольного заражения и без добавления в питьевую воду.В качестве препарата сравнения использовался осельтамивир, противовирусная активность которого в отношении вируса гриппа была доказана в ходе доклинических исследований (40, 41). Раствор осельтамивира готовили за день до заражения путем растворения содержимого 75 мг капсулы Тамифлю (осельтамивир; Roche, Велвин-Гарден-Сити, Великобритания) в очищенной воде (исследование h2N1) или в 0,9% NaCl (исследование h4N8) до концентрации 0,4 мг/мл. Осельтамивир (10 мг/кг/сут в исследовании h2N1 или 4 мг/кг/сут в исследовании h4N8) вводили через зонд дважды в день с 7-часовым интервалом между дозами либо отдельно (оба исследования), либо в комбинации с hd- анти-IFN-γ (в исследовании h2N1) (т.е., 0,4 мл/мышь/день, начиная с 1 часа до 5 дней после заражения). За пять дней до заражения и с 6 по 21 день (исследование h2N1) или 26 день (исследование h4N8) после заражения мыши из этих групп получали воду в том же объеме, но без осельтамивира. Контрольная группа инфицированных мышей получала носитель (питьевая вода) (0,4 мл/мышь/день) с использованием того же режима дозирования, что и группа hd-анти-IFN-γ. Мыши в контрольной группе (оба исследования), в группах, получавших только осельтамивир и осельтамивир плюс hd-анти-IFN-γ (исследование h2N1), получали обычную питьевую воду (заменявшуюся ежедневно) в соответствующих резервуарах для питья во время экспериментов.

    Следует отметить, что комбинация осельтамивира и hd-анти-IFN-γ тестировалась только против гриппа A [пандемия A/California/07/2009(h2N1)]. Этот штамм вируса, а не A/Equi2/Miami/1/63(h4N8), был выбран потому, что он был ответственен за пандемию свиного гриппа в 2009–2010 гг.

    Тестирование исходных антител к IFN-γ было сочтено неприемлемым, поскольку перорально принимаемые белки и пептиды (и особенно антитела) обычно и без специфических модификаций имеют чрезвычайно низкую биодоступность в диапазоне концентраций около 0–2% (42, 43) .Однако пероральное введение разбавленных белковых растворов может снизить скорость протеолиза белка и ускорить его диффузию через слизистую оболочку кишечника (44).

    Терапевтическая эффективность испытанных препаратов на мышах.

    В исследовании выживаемости за мышами наблюдали ежедневно в течение 21 или 26 дней после заражения для регистрации смертности (исследования h2N1 и h4N8 соответственно). В исследовании h2N1 мышей взвешивали один раз до (5 дней до заражения) и пять раз после заражения (точно после заражения, а затем на 5, 7, 12 и 19 дни после заражения), всегда через 5 дней.00 вечера. В исследовании h4N8 мышей взвешивали не менее двух раз в неделю, начиная с 10 дня до инокуляции и до 26 дня после инокуляции, всегда после 17:00.

    Статистические методы

    Статистический анализ выполнен с использованием SAS 9.4. Описательная статистика была представлена ​​в виде медианы, нижнего и верхнего квартилей (анализ конкуренции связывания радиоолиганда), медианы и межквартильного диапазона (ELISpot), средних значений для выживания (in vivo) и средних значений и стандартных отклонений для весов (in vivo). Приведенные значения 90 165 p 90 166 скорректированы для множественных сравнений.Корректировку множественности проводили при анализе каждого эксперимента в отдельности. Данные ELISpot анализировали с использованием точного теста Уилкоксона. Данные анализа конкуренции связывания радиолиганда анализировали с использованием точного теста Уилкоксона с процедурой множественного сравнения Двасса-Стила-Критчлоу-Флигнера. Коррекция множественности значений p для этих данных была выполнена методом Холма (понижающий Bonferroni, PROC MULTTEST). Данные о выживаемости h4N8 и h2N1 анализировали с использованием логарифмического рангового теста (PROC LIFETEST) с поправкой Бонферрони для множественных сравнений.Данные о массе h4N8 и h2N1 анализировали с использованием модели ANOVA с повторными измерениями (PROC MIXED). Были включены групповые, дневные и групповые факторы взаимодействия. Условия применимости смешанной модели оценивались с использованием графика Q–Q для невязок. Попарные сравнения были выполнены с использованием оценок средних по методу наименьших квадратов с методом корректировки множественности Холма.

    Результаты

    HD-анти-IFN-γ вызывают конформационные изменения в IFN-γ:

    1 H ЯМР-спектроскопия

    Экспериментальный метод выбора для изучения влияния hd-анти-IFN-γ на структурные свойства IFN-γ используют ЯМР-спектроскопию растворов высокого разрешения.Преимущество ЯМР-спектроскопии по сравнению с другими методами исследования структуры белков, такими как рентгеновская кристаллография и криогенная электронная микроскопия, заключается в том, что она применяется к образцам в среде их водного раствора и позволяет обнаруживать временные взаимодействия между лигандами и белками (45). ). Успех ЯМР-спектроскопии белков основан на том факте, что химические сдвиги ядер в белке очень чувствительны к изменениям в локальном окружении этих ядер. Таким образом, мы можем использовать химические сдвиги в качестве репортеров для потенциальных структурных эффектов hd-анти-IFN-γ на его мишень, IFN-γ (рис.1). Обычно используемые ЯМР-активные ядра в белках включают протон и азот. Естественное содержание 1 H составляет 100%, поэтому спектры ЯМР протонов можно измерять с белками, не обогащенными изотопами (т. е. немечеными). Одномерный (1D) спектр 1 H для одного немеченого IFN-γ, полученный на спектрометре с частотой 900 МГц, показан на рис. 2. Одномерный спектр дает общее представление о профиле IFN-γ и подтверждает возможность дальнейших исследований. ЯМР исследования. Вода впитывается на 4.7 ppm, с протонами OH поблизости, тогда как химические сдвиги влево (более высокие значения частей на миллион) преимущественно возникают из-за NH и ароматических протонов, тогда как сдвиги около 0 ppm возникают из-за алифатических боковых цепей. На рис. 2А показан полный диапазон 1 H, тогда как на рис. 2В показано увеличение диапазона, содержащего пептидный остов (NH). Мы можем видеть, что существует большое количество различий, наблюдаемых между одним IFN-γ (нижний спектр) и IFN-γ, к которому был добавлен hd-анти-IFN-γ.Несколько пиков изменили свою интенсивность, появились новые пики, а некоторые пропали. В целом пики в контрольном спектре более широкие и, следовательно, менее интенсивные, о чем свидетельствует более низкое отношение сигнал/шум при том же числе сканирований. Области с меньшим перекрытием сигналов в 1D-спектре позволяют идентифицировать основные группы NH остатков E39, W37 и D42 (см. метки на рис. 2B). Очень хорошо видно, как эти три пика изменяют свою относительную интенсивность (увеличиваются) при добавлении hd-анти-IFN-γ.Таким образом, анализ 1D протонной ЯМР-спектроскопии IFN-γ в присутствии и в отсутствие hd-анти-IFN-γ свидетельствует об изменении локального окружения ряда пиков как в основной, так и в боковых цепях аминокислот молекула. Эти изменения позволяют предположить наличие конформационных изменений в IFN-γ.

    РИСУНОК 1.

    Трехмерная структура IFN-γ. Использовали код идентификатора (ID) банка данных белков (PDB) 1FG9. IFN-γ имеет 127 а.о. (0–126 а.о.). Мы использовали нумерацию из файла PDB со смещением на 1 для обозначения остатков по всей рукописи.( A ) Атомное представление димера IFN-γ. Каждый мономер показан зеленым и бирюзовым цветом соответственно. ( B ) Представление вторичной структуры димера IFN-γ. Цветовое кодирование и вид как на (A). ( C ) Представление вторичной структуры бирюзового мономера и атомарное представление зеленого мономера. Вид как на (А). ( D ) Обратная сторона (C), с представлением вторичной структуры зеленого мономера и атомным представлением бирюзового мономера.Вид как на (А).

    РИСУНОК 2.

    1D ЯМР-спектроскопический анализ взаимодействия между hd-анти-IFN-γ и IFN-γ. Сравнение одного немеченого IFN-γ, отрицательного (-) контроля (нижний спектр, обозначенный как -контроль) с образцом немеченого IFN-γ в присутствии hd-анти-IFN-γ (верхний спектр, обозначенный как положительный [+] для добавления hd-анти-IFN-γ). Эксперимент представляет собой в среднем 10 240 сканирований при 25°C. Подавление воды было достигнуто за счет моделирования возбуждения с помощью градиентов. ( A ) Полный спектр протонов, показывающий все протоны в образце.Помимо протонов IFN-γ, имеется несколько буферных пиков высокой интенсивности (за пределами шкалы). ( B ) Увеличенный масштаб, показывающий диапазон пептидной основы.

    HD-анти-IFN-γ вызывают конформационные изменения в IFN-γ:

    1 H, 15 N-HSQC ЯМР-спектроскопия этот спектр (E39, W37 и D42). Устранение перекрытия требует увеличения размерности и уменьшения количества пиков в спектре ЯМР.Это может быть достигнуто путем объединения 1 H ЯМР с одним или несколькими ядрами, такими как углерод или азот, которые также широко распространены в белках. Однако естественное содержание соответствующих ЯМР-активных изотопов невелико, и поэтому их необходимо обогащать в рекомбинантной системе. Поэтому мы экспрессировали IFN-γ в Escherichia coli и очистили его, чтобы включить ЯМР-активное ядро ​​азота, 15 N. Это позволяет применять последовательность импульсов, HSQC, которая выбирает только те протоны, которые связаны с другим ядра, и мы выбрали 15 N.Меньшее количество сигналов и второе измерение спектра позволят разрешить большинство сигналов основной цепи NH IFN-γ. Это было сделано ранее (32), и поэтому мы можем использовать существующее назначение пиков для обозначения всех перекрестных пиков в спектре. Спектр 2D 1 H– 15 N HSQC, зарегистрированный на спектрометре ЯМР 900 МГц для одного IFN-γ (синий) и для IFN-γ в присутствии hd-анти-IFN-γ или плацебо (красный ) показан на рис. 3А, 3Б соответственно.Мы смогли отнести почти все основные пики NH только к IFN-γ, используя предыдущее распределение (32). Спектр для IFN-γ с hd-анти-IFN-γ или плацебо, соответственно, регистрировали в тех же условиях, что и для одного IFN-γ, за исключением того, что концентрация только IFN-γ была выше, что позволило нам собрать большее количество данных. число приращений в измерении азота (см. Материалы и методы ). Это было необходимо для определения всех пиков при сохранении требований к образцу на низком уровне, чтобы обеспечить максимально возможный объем добавления hd-анти-IFN-γ или контроля соответственно.Мы использовали плацебо в качестве контроля, тогда как вода без антител против IFN-γ подвергалась той же обработке, что и образцы, содержащие антитела. Таким образом, этот контроль является более строгим, чем просто буфер, используемый в экспериментах 1D ЯМР, показанных на рис. 2. Сравнение спектров плацебо (записанных в тех же условиях, что и для hd-анти-ИФН-γ; показано на рис. 3А) и только IFN-γ показан на фиг. 3B.

    РИСУНОК 3.

    2D-ЯМР-спектроскопический анализ взаимодействия между hd-анти-IFN-γ и IFN-γ.( A ) Наложение спектров 15 N– 1 H-HSQC IFN-γ в отсутствие (синий) или в присутствии (красный) hd-анти-IFN-γ. Двумерные спектры 1 H– 15 N только для IFN-γ (синие) были получены с помощью 128 сканирований в протонном измерении и 128 сканирований в азотном измерении при 25°C. Для образцов ЯМР, содержащих IFN-γ с добавленными сильно разбавленными антителами, было получено 2048*34 сканирований (красный). (A I ) Обзор всего спектра; (A II и A III ) расширение локальных областей спектра, показанное на AI.( B ) Наложение спектров 15 N– 1 H–HSQC IFN-γ в отсутствие (синий) или в присутствии (красный) плацебо. Сбор данных, как в (А). ( C ) Структурное картирование 13 изменений химического сдвига, наблюдаемых в IFN-γ при его взаимодействии с hd-анти-IFN-γ, наряду с их расширенными областями для каждого отдельного остатка (обратите внимание, что каждый остаток появляется на изображении дважды из-за образование димера). Активный димер IFN-γ с заменой домена представлен в виде ленточной диаграммы розового цвета (цепь A) и голубого цвета (цепь B) для выделения отдельных цепей.Сигналы, демонстрирующие изменения химического сдвига в диапазоне 0,01–0,02 и 0,02–0,04 м.д., представлены синими и красными палочками соответственно (см. Таблицу I). Более слабые изменения наблюдались для V117 и I45 (желтые палочки, черные метки). Соответствующие спектры показаны слева для остатков на границе раздела димеров и справа для остатков вне границы раздела. Горячие точки взаимодействия выделены сеткой (т. Е. Интерфейс димера в зеркальной плоскости двух мономеров и интерфейсы C-концевой цепи).(B I ) Обзор всего спектра; (B II и B III ) расширение локальных участков спектра показано в BI. На вставке показано то же изображение, что и на рис. 1В, чтобы помочь зрителю идентифицировать два мономера в димере. Представление и идентификатор (ID) банка данных белков (PDB), как на рис. 1.

    Сначала мы исследуем спектральные изменения, наблюдаемые при добавлении hd-анти-IFN-γ, показанные на рис. 3A. Есть много красных пиков, которые не наблюдаются только у IFN-γ (синие пики), но они лежат за пределами назначенных пиков и могут соответствовать агрегированной конформации, которая сильно отличается от конформации, для которой были назначены пики и структура.Если мы увеличим спектр в области заданных пиков, то увидим, что центры красных сигналов смещены. Например, изменение положения пика аспарагиновой кислоты в положении 42 соответствует изменению локального окружения этой аминокислоты, что подтверждает наши выводы с немеченым IFN-γ в 1D-спектрах протонного ЯМР, показанных на рис. 2. Разрешение и отнесение еще многих пиков позволило выявить ряд дополнительных изменений. В общей сложности 13 пиков сместились после добавления hd-анти-IFN-γ.Явно смещенные пики в спектре IFN-γ плюс hd-анти-IFN-γ были идентифицированы как A9, E39, E40, D42, I45, Q47, I50, F82, F83 и S85, а также V117, A119 и E120 на С-конце (таблица I). Соответствующие изменения не наблюдались при добавлении плацебо-контроля (рис. 3В).

    Таблица I. Изменения химического сдвига в спектрах ЯМР IFN-γ, вызванные добавлением hd-анти-IFN-γ

    Наложение всех изменений параметров химического сдвига, которые мы наблюдали при добавлении hd-анти-IFN-γ, но не плацебо, на трехмерную структуру IFN-γ показана на рис.3C, наряду с увеличенными областями спектров ЯМР. Различные цвета указывают на величину наблюдаемого нами химического сдвига. Наибольшие изменения показаны красным и синим цветом, умеренные изменения – желтым. Розовые и зеленоватые цвета указывают на остатки, расположенные на границе раздела димеров. Для сравнения мы показываем в качестве вставки изображение структуры с рис. 1, чтобы выделить положения двух мономеров в димере. Это сравнение показывает, что многие изменения наблюдаются в этой области интерфейса.Из 13 остатков со смещенными пиками семь расположены на поверхности димера IFN-γ: E39, E40, D42, Q47, F82, V117 и A119 (рис. 3C). Некоторые из пиков со значительным увеличением интенсивности были теми, которые мы уже идентифицировали в спектре 1D 1 H немеченого IFN-γ: E39, W37 и D42 (рис. 2B). Все три идентифицированных пика с повышенной интенсивностью после обработки hd-анти-IFN-γ расположены близко к изгибу между спиралями B и C в центре димерной поверхности раздела IFN-γ.Данные убедительно свидетельствуют о том, что изменение структуры IFN-γ сосредоточено на границе раздела двух мономеров и, таким образом, вероятно, повлияет на равновесие мономер-димер IFN-γ.

    HD-анти-IFN-γ улучшает связывание IFN-γ с рецептором IFN-γ

    Линия моноцитоподобных клеток человека U-937 обильно экспрессирует высокоаффинный рецептор к IFN-γ (46). Чтобы проверить и количественно оценить высокоспецифичное связывание IFN-γ с его рецептором на клетках U-937, мы провели анализ конкурентного связывания.Данные показывают, что существует единственный класс высокоаффинных сайтов связывания с константой ингибирования связывания ( Ки ), равной 1,1 × 10 -9 (0,1–1 × 10 -9 , о которой сообщает van Loon et al. (47) [1991]). Обработка клеток U-937 hd-анти-IFN-γ приводила к значительному увеличению специфического связывания [ 125 I]IFN-γ с рецептором IFN-γ (процент специфического связывания в буферном контроле) по сравнению с как носитель, так и hd-анти-TNF-α ( p < 0.05): 148,92 (148,20; 155,44) против 119,50 (99,20; 129,64) процента (носитель) и 109,11 (73,22; 143,82) процента (hd-анти-TNF-α).

    hd-анти-IFN-γ стимулируют продукцию IFN-γ in vitro МКПК

    Ранее мы показали, что продукция IFN-γ значительно увеличивалась в результате лечения животных hd-анти-IFN-γ ( 48). Мы использовали анализ ELISpot для обнаружения и количественной оценки эффектов hd-анти-IFN-γ на клетки, продуцирующие IFN-γ, in vitro. PBMC ресуспендировали в культуральной среде, содержащей hd-анти-IFN-γ или носитель, и стимулировали пулом пептидов ICE.Количество клеток, продуцирующих IFN-γ, в среде, содержащей hd-анти-IFN-γ, было значительно выше (40 точек [межквартильный диапазон = 13]) по сравнению с 26 точками [межквартильный диапазон = 4] в носителе [ p < 0,05]) (рис. 4). Нестимулированные клетки в фоновых лунках не проявляли активности (дополнительная рис. 2).

    РИСУНОК 4.

    Обработка hd-анти-IFN-γ усиливает продукцию IFN-γ PBMC, стимулированными пулом пептидов. ELISpot-анализ клеток, продуцирующих IFN-γ, проводили на культуре PBMC человека, стимулированной пулом пептидов ICE в присутствии hd-анти-IFN-γ или носителя.* p <0,05 по сравнению с носителем.

    Это открытие указывает на то, что hd-анти-IFN-γ участвуют в регуляции уровней IFN-γ, усиливая секрецию IFN-γ и/или индуцируя пролиферацию клеток, продуцирующих IFN-γ. Изображения отдельных чашек можно найти на дополнительной рис. 2.

    HD-анти-IFN-γ повышают выживаемость мышей с инфекцией гриппа А A/h4N8 и лечили перорально hd-анти-IFN-γ (начиная за 5 дней до и до 21 дня или 26 дней после заражения соответственно), носителем (питьевая вода), классическим противовирусным препаратом осельтамивиром (тамифлю), или комбинация hd-анти-IFN-γ и осельтамивира (для h2N1).Смертность и масса тела использовались в качестве конечных точек исследования. Животные, получавшие hd-анти-IFN-γ, демонстрировали повышенную выживаемость (рис. 5). HD-анти-ИФН-γ были по меньшей мере столь же эффективны в снижении смертности, как и один осельтамивир, с выживаемостью 95% против 75% для h4N8 (

    p > 0,05) и 80% против 70% для h2N1 ( p > 0,05). ), статистически значимое различие по сравнению с носителем (20% для h4N8 и 30% для h2N1) было обнаружено для каждой группы лечения ( p < 0.05). Выживаемость при комбинированном лечении анти-IFN-γ и осельтамивиром составила 75 по сравнению с 70% при лечении только осельтамивиром для h2N1 ( p > 0,05). В конце исследования потеря массы тела была значительно ниже во всех группах лечения по сравнению с группой, получавшей носитель ( p <0,05) для инфекции h4N8; достоверных различий в потере массы тела в группах животных с инфекцией h2N1 не обнаружено (рис. 6).

    РИСУНОК 5.

    HD-анти-IFN-γ защищает самок мышей BALB/c от заражения гриппом A ( A ) HD-анти-IFN-γ проявляет противовирусную активность против гриппа A [A/California/07/2009 (h2N1) пандемия] с эффективностью, сравнимой с осельтамивиром ( p > 0.05), о чем свидетельствуют повышенные показатели выживаемости по сравнению с таковыми в группе с зараженным носителем ( p <0,05). Кроме того, hd-анти-IFN-γ в сочетании с осельтамивиром улучшала противовирусную активность препарата сравнения ( p > 0,05). * p < 0,05 по сравнению с носителем, ** p < 0,01 по сравнению с носителем. ( B ) HD-анти-IFN-γ проявлял противовирусную активность против гриппа A [A/Equi2/Miami/1/63(h4N8)] с эффективностью, сравнимой с осельтамивиром ( p > 0.05), о чем свидетельствуют повышенные показатели выживаемости по сравнению с таковыми в группе с зараженным носителем ( p <0,01). ** p <0,01 по сравнению с носителем.

    РИСУНОК 6.

    HD-анти-IFN-γ улучшает вес самок мышей BALB/c с инфекцией гриппа А. ( A ) HD-анти-IFN-γ проявлял противовирусную активность против гриппа A [пандемия A/California/07/2009(h2N1)] с эффективностью, сравнимой с осельтамивиром ( p > 0,05), о чем свидетельствует увеличение общего живая масса в группе лечения по сравнению с живой массой в группе, получавшей контрольный носитель.Не было обнаружено существенных различий в общей живой массе в группе, получавшей лечение, по сравнению с таковой в группе, получавшей контрольный носитель ( p <0,05). ( B ) HD-анти-IFN-γ проявлял противовирусную активность против гриппа A [A/Equi2/Miami/1/63(h4N8)] с эффективностью, сравнимой с осельтамивиром ( p > 0,05), о чем свидетельствует увеличение общая живая масса в группе лечения по сравнению с таковой в группе, получавшей контрольный носитель ( p <0,05). ** р < 0.01 против автомобиля.

    Обсуждение

    В наших предыдущих исследованиях мы показали, что биологические эффекты высоких разведений антител очень специфичны. Например, когда мы оценивали влияние введения сильно разбавленных биопрепаратов in vivo на секрецию цитокинов, мы заметили, что только обработка hd-анти-IFN-γ приводила к увеличению продукции IFN-γ мышиными лимфоцитами, тогда как сильно разведенные антитела к эритропоэтину, hd-анти-TNF-α или плацебо не оказывали значительного эффекта (48).Мы также показали, что аффинность взаимодействия Ag-Ab (IFN-γ и Abs к IFN-γ соответственно) изменялась в присутствии hd-анти-IFN-γ (27).

    Таким образом, специфичность этих эффектов привела нас к гипотезе о том, что сильно разбавленные АТ могут действовать аллостерически непосредственно на антиген-мишень, вызывая конформационные изменения, подобные тем, которые иногда наблюдаются при связывании АТ с АГ. Например, связывание Ab с Ag может вызывать аллостерические эффекты, приводящие к конформационным изменениям Ag (28).Было показано, что mAb, распознающие гормон роста человека, вызывают аллостерические изменения в гормоне, которые влияют на связывание с его рецептором и модифицируют биологическую активность гормона (49).

    В текущем исследовании мы оценили влияние hd-анти-IFN-γ на молекулярную структуру и биологические функции IFN-γ. Во-первых, мы использовали ЯМР-спектроскопию высокого разрешения для обнаружения любых конформационных изменений в молекуле IFN-γ, происходящих в присутствии hd-анти-IFN-γ. Зрелый человеческий IFN-γ представляет собой гомодимер из двух субъединиц, каждая из которых состоит из 143 аминокислотных остатков с общей молекулярной массой 45 кДа (50).Мономер IFN-γ состоит из ядра из шести α-спиралей и удлиненной развернутой последовательности в С-концевой области (12, 51). Биологически активный димер образуется путем антипараллельного сшивания двух мономеров. Добавление hd-анти-IFN-γ к образцу IFN-γ вызывало как глобальные, так и специфические изменения в спектре ЯМР. В целом, интенсивность и разрешение спектра улучшились. Мы обнаружили в общей сложности 13 а.о., которые демонстрируют изменение положения или интенсивности при добавлении hd-анти-IFN-γ, но не плацебо.

    Семь остатков с изменениями химического сдвига в наших спектрах были отнесены к остаткам, расположенным на границе димера и включающим С-конец IFN-γ. На рис. 2Б отчетливо видно усиление резонансов 1 H в IFN-γ при добавлении hd-анти-IFN-γ. На основании этого результата и высокого разведения анти-ИФН-γ и, следовательно, низких концентраций hd-анти-ИФН-γ мы можем исключить образование комплекса hd-анти-ИФН-γ/ИФН-γ. Такой большой комплекс привел бы к очень широким пикам из-за высокой молекулярной массы комплекса, и было бы невозможно разрешить резонансы с помощью ЯМР.Таким образом, наблюдаемые химические сдвиги обусловлены временным взаимодействием IFN-γ с hd-анти–IFN-γ. Наблюдаемое увеличение интенсивности и резкости резонансов, появление новых пиков свидетельствует об изменении равновесия мономер-димер. Поскольку димер IFN-γ образуется путем замены доменов (см. рис. 1), при котором отдельные элементы вторичной структуры, такие как спирали, занимают соответствующие места в другой структуре, интерфейс распространяется на широкий диапазон структуры, и изменение состояния олигомеризации фактически требует хотя бы частичного развертывания структуры.Таким образом, наиболее общий вывод, который мы можем сделать из изменений химических сдвигов, наблюдаемых с помощью ЯМР-спектроскопии, состоит в том, что существует изменение структуры IFN-γ, вызванное добавлением hd-анти-IFN-γ, с особым акцентом на димер интерфейс. Вероятно, такие стерические изменения в структуре димера потенциально могут влиять на стабильность димера, изменять кинетику олигомеризации IFN-γ и влиять на стехиометрию рецепторного комплекса IFN-γ/IFN-γ. Все эти гипотезы могут быть проверены в будущих углубленных исследованиях состояний и кинетики олигомеризации, как это было сделано ранее для изучения равновесия между мономерными, димерными и олигомерными состояниями в отсутствие hd-анти-IFN-γ. (52).

    Ответы на IFN-γ активируются за счет его взаимодействия с высокоаффинным гетеродимерным рецептором, состоящим из рецептора IFN-γ 1 (IFNGR1) и IFNGR2. Связывание IFN-γ с рецептором активирует путь JAK-STAT. Через свою С-концевую область IFN-γ также связывается (но с меньшей аффинностью) с гликозаминогликановым гепарансульфатом на поверхности клетки. Это взаимодействие ингибирует биологическую активность IFN-γ, а также, возможно, защищает его от протеолитического расщепления и регулирует нацеливание на ткани и локальное накопление (53).Интересно, что внутриклеточный IFN-γ обладает биологической активностью без распознавания внеклеточного домена его высокоаффинного рецептора. Было высказано предположение, что комплекс, состоящий из активированного Stat1a в ассоциации с IFNGR1, подвергается ядерной транслокации в присутствии человеческого IFN-γ, поскольку С-концевой пептид IFN-γ содержит сигнал ядерной локализации (54).

    Таким образом, далее мы исследовали, может ли hd-анти-IFN-γ изменить взаимодействие лиганд-рецептор, принимая во внимание, что биологически активная форма IFN-γ представляет собой димер (50) и IFN-γ связывается с его рецептором как димер (55).Кроме того, С-концевая область молекулы IFN-γ, которая вызывала пространственные изменения, наблюдаемые с помощью ЯМР, играет критическую роль в ее связывании с рецептором IFN-γ и передаче сигналов IFN-γ (54, 56). Результаты анализа конкуренции связывания радиолиганда показали, что hd-анти-IFN-γ усиливает специфическое связывание IFN-γ с его рецептором.

    IFN-γ является провоспалительным цитокином и в основном продуцируется NK, NKT, врожденными лимфоидными клетками, CD4 + Th2 и CD8 + CTL, а также профессиональными АПК, такими как макрофаги, дендритные клетки и В-клетки.IFN-γ оказывает защитное действие посредством усиления клеточного иммунитета, активации макрофагов и индукции дифференцировки Th2. Клетки Th2, которые секретируют IFN-γ, стимулируются IFN-γ, IL-12, IL-23 и IL-27 посредством активации STAT1, STAT4 и T-bet. IFN-γ, IL-12 и IL-27 являются частью петли положительной регуляторной обратной связи, которая усиливает продукцию этих цитокинов в клетках того же или разных типов, действуя через цитокин-специфические рецепторы (57). Было обнаружено, что IFN-γ является мощным повышающим регуляторным стимулом для экспрессии собственного гена в PBMC человека (58).Также было показано, что обработка РВМС IFN-γ приводила к секреции IFN-γ через 24–48 часов (59).

    Чтобы изучить влияние hd-анти-IFN-γ на продукцию IFN-γ, мы обработали РВМС человека и измерили количество клеток, секретирующих IFN-γ, с помощью анализа ELISpot. Мы показываем, что hd-анти-IFN-γ положительно регулируют секрецию IFN-γ, индуцированную пулом вирусных пептидов. Возможные механизмы могут включать повышение эффективности презентации антигена или функциональную активацию цитотоксических Т-клеток CD8 + .Кроме того, наши результаты можно рассматривать как косвенное свидетельство того, что hd-анти-IFN-γ регулирует петлю положительной обратной связи посредством активации сигнального пути IFN-γ.

    IFN-γ играет важную роль во врожденном и адаптивном иммунитете против вирусных и бактериальных инфекций (57). IFN-γ способен напрямую ингибировать репликацию вируса, но, что наиболее важно, цитокин обладает иммуностимулирующим и иммуномодулирующим действием (57). IFN-γ вырабатывается во время острых стадий вирусной инфекции гриппа А и может быть обнаружен в секрете верхних дыхательных путей и в сыворотке крови.Однако, основываясь на данных, полученных на животных моделях [с использованием инъекций нейтрализующих антител против IFN-γ (60) или IFN-γ -/- (61) и IFN-γR -/- (62) мышей], был сделан вывод, что контроль инфекции гриппа А обычно не зависит от IFN-γ. Механизмы уклонения, используемые вирусом гриппа А, играют важную роль в этой неэффективности (63). Интересно, что все же можно было достичь IFN-γ-специфического контроля над вирусом гриппа А на мышиных моделях. В этих случаях животных либо предварительно лечили индуктором IFN полирибоинозиновой-полирибоцитидиловой кислотой (64), либо лечили высокими дозами IFN-γ на ранней стадии инфекции (65).Таким образом, предварительная обработка животных hd-анти-IFN-γ может преодолеть резистентность вируса гриппа А к IFN-γ. В исследовании in vivo мы изучили противовирусную активность hd-анти-IFN-γ против вируса гриппа A на мышиной модели с использованием 5-дневного протокола предварительной обработки. Мы показали, что hd-анти-IFN-γ эффективен против гриппа in vivo. Эти данные согласуются с нашими предыдущими отчетами (19, 22, 23).

    Ранее был изучен механизм действия лечебного препарата, содержащего в качестве основного компонента высокоразведенные АТ, на β-субъединицу рецептора инсулина.Мы выявили действие препарата на молекулу-мишень (β-субъединицу рецептора инсулина) (66) и расширили исследование для изучения эффектов на уровне организма (67, 68). Кроме того, недавно были опубликованы результаты рандомизированного плацебо-контролируемого двойного слепого клинического исследования эффективности и безопасности этого препарата при сахарном диабете 1 типа (8).

    Результаты настоящего исследования позволяют сделать вывод о том, что в отличие от традиционных препаратов на основе антител сильно разведенные антитела действуют, индуцируя конформационные модификации своих мишеней, которые затем влияют на взаимодействие модифицированных мишеней с соответствующими рецепторами и, таким образом, в конечном итоге организуют мишень-зависимый биологический путь.Высокоразведенные биопрепараты предлагают революционный подход к разработке и клиническому применению препаратов на основе антител.

    Раскрытие информации

    Мы благодарим Николь Мюллер и Джоан Планас-Иглесиас за техническую помощь в подготовке IFN-γ и изображения структуры на рис. 3C соответственно. Авторы заявляют о следующих конкурирующих финансовых интересах: ООО «НПФ «Материа Медика Холдинг» выступило спонсором исследования, провело статистический анализ, приняло решение о публикации работы и покрыло текущие расходы по обработке статьи, а также приняло участие в разработке экспериментов и написание рукописи.МЭБ является учредителем, президентом и мажоритарным акционером ООО «НПФ «Материа Медика Холдинг». S.A.T., E.A.G., E.S.D., A.G.E. и A.L.K. являются научными руководителями ООО «НПФ «Материа Медика Холдинг». Различные технологические варианты hd-анти–ИФН-γ являются субстанциями (отдельно или одним из компонентов) для коммерческих препаратов Анаферон детский, Анаферон, Эргоферон и Полиферон производства или производства и реализации ООО «НПФ «Материа Медика Холдинг». ». Патенты на это вещество и лекарства принадлежат О.т.е. Другие авторы не имеют финансовых конфликтов интересов.

    Благодарности

    Мы благодарим Christophe Chaumeil и Maria Myslivetc за техническую помощь, Национальную ветеринарную школу Alfort за руководство мышиными моделями, включая указания по минимизации страданий животных, и членов Euroscreen, S.A., Госселис, Бельгия, за проведение экспериментов с IFN- γ-рецептор.

    Сноски

    • Работа выполнена при поддержке ООО «НПФ «Материа Медика Холдинг», Москва, Российская Федерация.

    • Сотрудники ООО «НПФ «Материа Медика Холдинг» принимали участие в планировании экспериментов и написании рукописи, проводили статистический анализ и принимали решение о публикации работы.

    • Электронная версия этой статьи содержит дополнительные материалы.

    • Сокращения, используемые в этой статье:

      1D
      одномерный
      2D
      2D
      Двухмерный
      HD-анти-IFN-γ
      Высоко разбавленный AB для IFN-γ
      HD-Anti –TNF-α
      сильно разбавленные антитела к TNF-α
      HSQC
      гетероядерная одиночная квантовая когерентность
      IFNGR1
      рецептор IFN-γ 1
      ЯМР
      ядерный магнитный резонанс.
    • Получено 29 января 2020 г.
    • Принято 4 июля 2020 г.

    Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован.