Вирус папилломы человека 68 типа у женщин: Вирус папилломы человека – СПб ГБУЗ Кожно-венерологический диспансер №11

Вирус папилломы человека – ВПЧ

Среди инфекций, передающихся половым путем, особое внимание привлекает папилломавирусная инфекция. Причина повышенного внимания к данной инфекции – ее широкая распространенность, высокая контагиозность (высокая степень заразности) и доказанная онкогенность вируса папилломы человека (ВПЧ), как основного этиологического фактора развития рака генитального тракта и прямой кишки.
В октябре 2008 года Нобелевский комитет присудил премию по медицине ученому, открытие которого сыграло огромную роль в гинекологии и в борьбе с вирусами человека, ежегодно отнимающими миллионы жизней. Премию «за открытие вирусов папилломы человека, вызывающих рак шейки матки» («for his discovery of human papillomaviruses causing cervical cancer»), получил Харальд цурХаузен из Германского центра исследования рака в Гейдельберге.

 

В середине семидесятых Харальд цурХаузен обнаружил, что женщины, страдающие раком шейки матки, в 100% случаев заражены ВПЧ (вирусом папилломы человека)

. В то время многие специалисты полагали, что рак шейки матки вызывается вирусом простого герпеса (Herpessimplexvirus), но Харальд цурХаузен нашел в раковых клетках не вирусы герпеса, а вирусы папилломы, и предположил, что развитие рака происходит в результате заражения именно вирусом папилломы человека.

В 1983 году ему удалось обнаружить ДНК папилломавируса в биопсии рака шейки матки, и это стало открытием онкогенного вируса ВПЧ-16. Годом позже он клонировал ДНК ВПЧ-16 и ВПЧ-18 у пациенток, больных раком шейки матки. Зараженные такими вирусами клетки в 100% случаев рано или поздно становятся раковыми, из них развивается злокачественная опухоль. Вскоре стало известно, что и другие штаммы ВПЧ, родственные с ВПЧ-16 (штаммы 31, 33, 35, 52 и 58) и родственные с ВПЧ-18 (штаммы 39, 45, 59 и 68), могут приводить к развитию рака шейки матки.

До 82% женщин заражаются ВПЧ уже через 2 года после начала половой жизни. Даже при одном партнёре 20% женщин являются заражёнными вирусом. После начала половой жизни женщина должна проходить ежегодные гинекологические осмотры, включающие мазки на онкоцитологию и ВПЧ-тесты. Папилломавирус находят у 99,7% женщин с гистологически подтверждённым диагнозом рака шейки матки — что составляет около 500 000 женщин в год. В исследованиях часто определяется инфицированность множественными типами ВПЧ, в том числе у женщин с нормальной цитологией. Риск инфицирования одним типом ВПЧ не снижает риска быть инфицированным филогенетически родственным типом.

Папилломавирусы – единственная группа вирусов, для которых доказано, что они индуцируют образование опухолей у человека в естественных условиях.

ВПЧ-ассоциированные заболевания делятся на:

  1. клинические формы, т. е. видимые невооруженным глазом: кондиломы, симптоматические цервикальные неоплазии, инвазивный рак шейки матки;

  2. субклинические формы, которые не видны вооруженным глазом и выявляются при кольпоскопии, цитологическом и/или гистологическом исследовании: плоские кондиломы, инвертированные кондиломы, кондиломатозный цервицит, вагинит, субклинические неоплазии;

  3. персистирующие формы (в случаях отсутствия клинических, кольпоскопических, цитологических и гистологических признаков папилломавирусной инфекции при обнаружении ДНК ВПЧ). 

Заболевания человека, вызванные различными типами папилломавирусной инфекции:

Заболевания и клинические проявления

Причинные типы вируса папилломы человека

Поражения кожи:

Бородавки на подошве стопы (мозоли)

1, 2, 3

Обычные бородавки

2, 4, 26, 27, 29, 57

Плоские бородавки

3, 10, 28, 49

Бородавки

7

Веруциформная эпидермодисплазия

2, 3, 5, 8, 9, 10, 12, 14, 15, 17, 19, 20-25, 36, 37, 46, 47, 50

Поражения слизистых половых органов:

Остроконечные кондиломы

6, 11, 42-44, 54

Скваматозные интраэпителиальные поражения (поражения высокого риска, могут быть предраковым состоянием)

6, 11, 16, 18, 30, 31, 33, 39, 40, 42, 43, 51, 52, 55, 57-59, 61, 62, 64, 67-70

Карцинома (рак шейки матки, рак вульвы, рак влагалища, рак области анального отверстия и полового члена)

16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 54, 56, 66, 68

Поражения других (не генитальных) оболочек:

Фокальная эпителиальная гиперплазия слизистой рта

13, 32

Рецидивный папилломатоз дыхательных путей

6, 11, 30

Карцинома (рак) головы, шеи, легких

2, 6, 11, 16, 18, 30

При наличии высокоонкогенных типов вируса папилломы человека ВПЧ обследование у гинеколога рекомендовано проводить 1 раз в 6 месяцев. При наличии низкоонкогенных типов ВПЧ не менее 1 раза в год.

ВПЧ и беременность – причины, симптомы, диагностика, лечение и профилактика

На сегодняшний день известно более 100 разновидностей ВПЧ. Некоторые из них считаются онкогенными – способными приводить к развитию рака. 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 и 68 типы папилломавирусной инфекции являются разновидностями высокого онкогенного риска.

ВПЧ отличается скрытым течением: от инфицирования до появления первых признаков вируса может пройти от трех месяцев до года и более. Именно поэтому женщинам, планирующим беременность, необходимо заранее проверить свое здоровье и пройти все необходимые обследования даже в том случае, если их ничего не беспокоит.

Как проявляется ВПЧ

Среди самых частых проявлений вируса папилломы человека – бородавки:

  • остроконечные кондиломы – небольшие бородавки в виде цветной капусты или петушиного гребня, расположенные на коже в области половых органов и анального отверстия. Их чаще всего вызывает ВПЧ низкого онкогенного риска. Однако они не так уж безобидны: могут кровоточить, мешать нормальной сексуальной жизни и препятствовать родам;
  • папилломы (мягкие доброкачественные образования на коже розового или телесного цвета) могут появиться на любой части тела. Они способны возникать и исчезать самостоятельно – в зависимости от состояния иммунной системы организма;
  • плоская кондилома шейки матки относится к проявлениям хронического вирусного заболевания, которое становится причиной изменений в клетках слизистой шейки матки, что может привести к раку. Плоская кондилома часто сочетается с остроконечными кондиломами.

Можно ли беременеть при ВПЧ

По сравнению со многими другими вирусными инфекциями, вирус папилломы человека при беременности не оказывает выраженного отрицательного влияния на ее течение. Однако, учитывая, что изучение влияния ВПЧ на будущую мать и ребенка еще продолжается, а также тот факт, что остроконечные кондиломы и папилломы могут способствовать проникновению в организм других инфекций, заниматься лечением ВПЧ необходимо до наступления беременности.

Если же беременность наступила во время проведения курса терапии, то его необходимо временно прервать, так как при терапии ВПЧ часто применяются противопоказанные беременным противовирусные препараты.

Впрочем, лечение ВПЧ возможно и во время беременности. В некоторых случаях беременным женщинам, имеющим множественные остроконечные кондиломы во влагалище, рекомендуют кесарево сечения для снижения риска заражения ребенка. Решение о способе родоразрешения принимает врач, который ведет беременность.

Программы ведения беременности ОН КЛИНИК

Лечение ВПЧ в ОН КЛИНИК

Для того чтобы родить здорового ребенка при наличии в организме вируса папилломы человека, недостаточно найти в сети ответ на вопрос «кто рожал с ВПЧ». Чужой опыт, не подкрепленный консультацией врача, может не дать ожидаемого эффекта.

Если у Вас диагностировали ВПЧ высокого онкогенного риска, а Вы собираетесь планировать беременность, то мы настоятельно рекомендуем Вам обратиться к гинекологам ОН КЛИНИК и сдать мазок на цитологию. Если исследование не выявит патологических изменений в шейке матки, то беременность не противопоказана. В противном случае её стоит отложить и предварительно пройти курс лечения.

Опытные врачи медицинского центра ОН КЛИНИК ответят на все Ваши вопросы о ВПЧ и любых гинекологических заболеваниях, а также назначат эффективное лечение, которое поможет Вам в скорейшие сроки вернуться к здоровой жизни. И Вы, в свою очередь, сможете подарить такую же здоровую жизнь самому дорогому для Вас существу – новому человеку.

ОН КЛИНИК – это тщательное комплексное обследование и высокотехнологичное лечение женских болезней! Обращайтесь!

Скрининг ВПЧ, расширенный 15 типов + КВМ HPV 6/ HPV 11/ HPV 16 / HPV 16,31,33,35,52,58 / HPV18 / HPV 18,39,45,59/ HPV 51,56,68 / HPV 51 / HPV 56 / HPV 68 в медицинском центре «Академия здоровья»

Стоимость услуги

750р

Лабораторная диагностика папилломавирусной инфекции – важнейший элемент скрининга и профилактики рака шейки матки (РШМ), что объясняется подтверждением этиологической роли вируса папилломы человека (ВПЧ) в развитии данного заболевания. Метод ПЦР с детекцией результатов в режиме реального времени (RT-PCR), позволяющем определить количество ДНК клинически значимых типов ВПЧ в образце. Результаты исследования представлены в копиях ДНК вируса ВПЧ в исследуемом образце. Технологические особенности RT-PCR позволяют врачу-клиницисту подобрать оптимальный вариант диагностического лабораторного обследования каждого пациента и, при необходимости, динамического мониторинга ВПЧ. Стандартизация диагностических тест-систем на основе RT-PCR дает возможность пересчёта полученных результатов в единицы Digene, поэтому все клинические рекомендации по интерпретации результатов Digene-теста могут быть применены для результатов, полученных методом RT-PCR. Выявляемые показатели Количественные результаты по группам клинически значимых типов HPV высокого онкогенного риска (13 типов HPV): HPV 16, 31, 33, 35, 52, 58; HPV 18, 39, 45, 59; HPV 51, 58, 68. Показания Определение типа ВПЧ с количественной оценкой вирусной нагрузки рекомендуется: при выявлении любых изменений на шейке матки; для оценки эффективности вакцинации; для контроля проводимой терапии; в качестве скринингового обследования специальных групп женщин. Стартовый возраст для начала скрининга: с 21 года или в течение 3 лет после начала половой жизни; с 18 лет при высокой степени сексуальной активности; с 30 лет для новых программ (основанных на выявлении ДНК ВПЧ) или с 25 лет для существующих программ (классическое цитологическое исследование). Специальные группы, которым показан скрининг: женщины, имеющие в анамнезе рак шейки матки; женщины в возрасте 25-65 лет, которым никогда не проводилось цитологическое исследование или проводилось более 3 лет назад; женщины с кровотечением в репродуктивном периоде, кровотечениями после наступления менопаузы, посткоитальными кровотечениями.

Вирус папилломы человека, диагностика – Клиника Здоровье 365 г. Екатеринбург

Необходимо обращаться за диагностикой к врачу, поскольку вирус папилломы человека (ВПЧ) часто никак себя не обнаруживает как у мужчин, так и у женщин.

 

Генитальные бородавки бывают телесного цвета, и расположены на шейке матки, половом члене, мошонке, в вагине или в анусе. Они могут быть маленькими или большими, плоскими или шарообразными, единичными или множественными. Их можно найти как в паху, так и на бедрах или даже во рту.

 

Генитальные бородавки можно разделить на два типа по форме и размеру:

 

  • Одни видны невооружённым глазом и расположены на поверхности кожи, другие маленькие и едва различимы
  • Второй вид является сквамозным внутриэпителиальным повреждением клеток и покрывает шейку матки. Чтобы увидеть их требуется проведение видеокольпоскопии

 

Исследования показали, что некоторые типы ВПЧ вызывают появление генитальных бородавок также известных как «остроконечные кондиломы». Все виды ВПЧ пронумерованы и разделены на «опасные» и «неопасные» в зависимости от того, вызывают ли они рак.

 

Например, вирусы папилломы человека 6 и 11, вызывающие появление генитальных бородавок, относятся к «неопасным». Вирусы ПЧ 16, 18, 31, 33 и 35, развивающиеся в области гениталий или в анусе, относятся к вирусам, провоцирующим рак, как у мужчин, так и у женщин.

 

Если у вас появилась бородавка, обратитесь к врачу. Также необходимо пройти диагностику, если:

 

  • У вас появились какие-либо необычные новообразования, опухоли или другие изменения кожного покрова на вульве, вагине, анусе или на половом члене
  • У вас зуд, боль или кровотечение в области гениталий
  • У вашего сексуального партнёра обнаружен вирус папилломы человека.

 

Чтобы обнаружить маленькие бородавки или другие аномалии, врач во время осмотра может использовать колькоскоп, оптический прибор с видекамерой и осветителем. Также врач может применить раствор уксуса, который окрасит поражённые ткани в белый цвет. Это не больно и позволит лучше исследовать бородавки или предопухолевое состояние кожи.

 

Вероятно, Вам назначат пройти тест Папаниколау – онкоцитологический тест, который направлен на выявление рака шейки матки на ранних стадиях. С помощью него можно также обнаружить предраковые клетки и активный ВПЧ.

 

Тест Папаниколау (ПАП-тест) – процедура несложная. В классическом тесте Папаниколау гинеколог во время гинекологического осмотра использует специальную кисточку и/или лопаточку для сбора клеток с шейки матки и помещает их на предметное стекло, которое затем отправляется в лабораторию. Более новый и точный тест Папаниколау ThinPrep также использует кисточку, но образец, перед тем как его отправят в лабораторию, помещается в жидкий антикоагулянт.

 

Для результатов, отклоняющихся от нормы, есть различные классификации, но самая распространённая – это атипичные клетки плоского эпителия неопределенного значения (ASCUS).

 

Для обнаружения ВПЧ женщины старше 30-ти лет могут прибегнуть как к тесту Папаниколау, так и к ПЦР диагностике ВПЧ, которая использует технологию, направленную на выявление специфических фрагментов ДНК вируса папилломы человека. Использование теста Папаниколау в сочетании с ПЦР диагностикой более эффективно для женщин этой возрастной категории, чем один тест Папаниколау.

 

Проведение обоих тестов помогает обнаружить у женщины риск ВПЧ и предотвратить рак шейки матки у женщин. Более того, два новых теста на опасные ВПЧ одобрены Минздравом США. Первый похож на тест, основанный на ДНК, и помогает выявить 15 опасных разновидностей вируса (Cervista HPV HR). Второй выявляет два типа ВПЧ, которые в большинстве случаев вызывают рак шейки матки – ВПЧ 16 и 18 (Cervista 16/18).

 

ВПЧ-тест (ПЦР диагностика ВПЧ) вкупе с историей болезни, лабораторными анализами и другими факторами риска помогает врачам определить нужное лечение, если тест Папаниколау положителен.

 

Рекомендации к проведению ПАП – теста (Папаниколау, PAP-test)

 

Здесь приведены несколько рекомендаций Американского общества борьбы с раковыми заболеваниями, касающихся тестов Папаниколау и выявления рака шейки матки на ранних стадиях:

 

  • Всем женщинам необходимо проходить обследование на рак шейки матки, начиная с 21 года, если у них есть сексуальные контакты. При использовании обычного теста Папаниколау, обследование проводится один раз в год, а тест Папаниколау методом жидкостной цитологии можно применять раз в два года
  • Если к 30-ти годам у женщины три теста Папаниколау подряд отрицательны, можно проводить последующие проверки раз в два – три года. Кроме того, если дополнительно проведен и ПЦР ВПЧ тест, то тест Папаниколау достаточно проводить раз в три года
  • Если у женщины в возрасте от 65 до 70 лет и старше было три или больше отрицательных теста Папаниколау подряд, и другие тесты также были отрицательны, то следующие 10 лет исследование на рак шейки матки можно не делать. Однако, женщины с факторами риска, перечисленными ниже, должны обследоваться каждый год.

 

Немногим отличаются рекомендации Американского колледжа акушеров-гинекологов. Специалисты из этого учреждения считают, что скрининг – тест на рак шейки матки нужно начинать в 21 год, независимо от того, есть или нет сексуальные контакты.

 

Девушки до 21 года очень редко подвержены риску раковых заболеваний. Американский колледж акушеров-гинекологов считает, что преимущества скрининг – тестов на рак шейки матки в этой возрастной группе не компенсируют всех потенциальных рисков, таких как излишние диагностические методы и возможно необоснованное лечение.

 

Он же рекомендуют женщинам в возрасте от 21 до 29 каждые два года проводить ПАП -тест. Ежегодное исследование для женщин этой возрастной категории не намного эффективнее исследования, проводимого каждый второй год. Однако, женщинам любого возраста, подверженным риску рака шейки матки, рекомендовано ехегодное обследование.

 

Женщины с гистерэктомией (удаление матки и шейки матки) могут не проводить исследование на рак шейки матки за исключением тех случаев, когда гистерэктомия была сделана по причине рака шейки матки или каких-либо предраковых факторов. Если гистерэктомия была проведена для устранения рака шейки матки, скрининг – тесты Папаниколау необходимо делать ежегодно.

 

Если была удалена матка, но не шейка матки, то необходимо продолжить скрининг – тесты на основании возрастной категории и дооперационной истории болезни (включая и результаты теста Папаниколау).

 

Если врач замечает какие-то изменения на клеточном уровне, он или она может порекомендовать дополнительные методы обследования или лечения в зависимости от вашей истории болезни. Например, повторить тест Папаниколау, ПЦР ВПЧ тест, кольпоскопию, или назначить всестороннее исследование или биопсию участка тела с отклонениями, а также воздержаться от лечения на некоторое время.

 

Кольпоскопия необходима, если результаты теста Папаниколау выявили более серьёзные отклонения. Дальнейшая диагностика и лечение будет зависеть от результатов кольпоскопии. Дисплазию в лёгкой форме внутриэпителиальной неоплазии шейки матки первой степени (ВНШМ-1) лечить не нужно, но необходимо повторять тесты Папаниколау от шести месяцев до года. Но в случае ВНШМ-2 и ВНШМ-3 необходимо назначить лечение для устранения аномальных клеток.

 

Женщинам – бисексуалам и лесбиянкам также необходимо регулярно проводить тесты Папаниколау. Опросы показывают, что лучше обращаться в частную клинику из-за того, что в обычной больнице они испытывают дискомфорт, отвечая на вопросы о своей сексуальной ориентации. Несмотря на то, что бисексуалки и лесбиянки могут думать, что им не нужна профилактическая диагностика поскольку они не находятся в группе риска, но они тоже подвержены инфекциям ВПЧ и раку шейки матки (например, через бывших партнёров мужского пола, вибраторы и другие секс-игрушки, которые имели кожные контакты с инфицированным партнёром).

 

Более подробную информацию о вирусе папилломы человека Вы можете получить у гинекологов клиники “Здоровье 365” г. Екатеринбурга.

 

Связанные темы:

ЗППП

Воспалительные заболевания

Бактериальный вагиноз

Менструальные боли

Овуляторный синдром

Боли внизу живота

Признаки беременности

Кольпоскопия

Выкидыш

Внематочная беременность

Преждевременные роды

Гистеросальпингография

Гистероскопия

Лапароскопия

Гинекологические операции

Удаление матки

Миома матки

Эндометриоз

Киста яичника

Аденомиоз

УЗИ малого таза

УЗИ молочных желез

Мастопатия

Менопауза

Биология вирусов папилломы человека

ВПЧ — мелкие ДНК-овые вирусы, характерная особенность которых заключается в способности вызывать пролиферацию эпителия кожи и/или слизистых оболочек. Они относятся к семейству паповавирусов. ВПЧ не размножаются в культуре клеток, поэтому сведения о биологии вирусов получены с помощью молекулярно-генетических технологий и эпидемиологических исследований. Показано существование 100 типов, отличающихся по строению ДНК, 75 из них молекулярно клонированы и полностью секвенированы. Типирование ВПЧ основано не на антигенных различиях, а на ДНК-гомологии.

Среди 30 типов ВПЧ, которые поражают аногенитальную область, различают типы высокого и низкого онкогенного риска. В 93% случаев инвазивного рака аногениталий обнаруживают ВПЧ, при этом 50% из них – ВПЧ 16.

Установлен половой путь передачи ВПЧ-инфекции. Вследствие частого бессимптомного пребывания ВПЧ в организме инфицированные люди зачастую не знают, что они инфицированы. Недавно появившиеся генитальные бородавки более инфекционны, чем давно существующие.

Резкое снижение иммунитета, наблюдаемое при СПИДе, при лечении цитотоксическими препаратами, сопровождается реактивацией латентной папилломавирусной инфекции, что клинически проявляется в виде образования множественных папилломатозных разрастаний.

Как происходит репликация вируса, сборка вирусных частиц и их высвобождение из клетки считать полностью установленными еще нельзя.

Известны два способа репликации — постоянная репликация эписомного генома в базальном слое эпителия и вегетативная репликация в более дифференцированных клетках гранулярного слоя. Репликация эписомного генома происходит постоянно, но количество копий ДНК низкое. Вегетативная репликация происходит в ядрах клеток, где генерируется потомство. Высвобождение вирусных частиц происходит в результате дегенерации десквамированных клеток.

Вирус заражает самый нижний глубокий слой кожи или слизистой оболочки, происходит усиленное размножение клеток этого слоя, что и приводит к образованию разрастаний. Сам вирус в глубоких слоях не размножается, его интенсивное размножение происходит в поверхностных слоях — в чешуйчатых клетках, которые по мере оттеснения к поверхности перестают делиться и становятся более пригодными для размножения вируса.

Вирус папилломы человека в отличие от многих других вирусов, не растет в культуре клеток и не может быть получен в виде массы вирусных частиц — вирионов. Однако с помощью электронного микроскопа вирионы этого вируса обнаружены в пораженных тканях.

Вирус может быть найден также с помощью современных молекулярно-биологических методов, которые основаны на обнаружении дезоксирибонуклеиновой кислоты, являющейся геномом вируса. Нуклеиновые кислоты ДНК и РНК обладают способностью к гибридизации. С помощью нагревания или действия химических веществ ДНК из двухнитевой спирали переходит в однонитевую, но сохраняет способность достраивать вторую нить, комплементарную к существующей при наличии в реагирующей среде затравок (праймеров), которые определяют направление достройки второй нити, и химических веществ для построения ДНК. Процесс воссоздания второй нити по образцу одиночной нити или ее части называют молекулярной гибридизацией, а участок, который используют в гибридизации (участок ДНК или РНК), называют зондом.

Благодаря молекулярно-гибридизационным методам стало известно, что существует много типов папилломавирусов, 30 из них инфицируют половые органы и область заднего прохода. У женщин инфицируется и покрывается генитальными бородавками область преддверия влагалища, стенки влагалища, шейка матки, наружное отверстие уретры. У мужчин поражается головка полового члена, крайняя плоть, мошонка, анальная область. В родах папилломавирус передается новорожденному ребенку.

В табл. 1 приведены типы ВПЧ, встречающиеся при различных заболеваниях.

По мере изучения ВПЧ гибридизационными методами выяснилось, что риск злокачественного перерождения связан с несколькими типами ВПЧ. Они были обозначены как вирусы высокого риска онкогенного заболевания. Это типы ВПЧ 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 и 68. Перечень типов ВПЧ высокого онкогенного риска расширяется за счет уточнения строения ДНК и появления новых типов промежуточного риска.

Вирусами низкого риска остаются 5 типов ВПЧ — 6, И, 42, 43, 44. Отмечено, что 16 тип наиболее часто встречается в ткани плоскоклеточного рака шейки матки, а 18 тип — в ткани железистого рака — аденокарциномы. Установлено, что существуют дозазависимые отношения, т.е. при высоком содержании ДНК ВПЧ в материале, взятом из шеечного канала матки, риск опухоли или неоплазии более высок и наоборот. В табл. 2 сведены признаки, связанные с ВПЧ-инфекцией, обусловленной онкогенными и неонкогенными типами ВПЧ.

Максимальная заболеваемость, обусловленная ВПЧ, наблюдается в возрасте от 18 до 28 лет. Однако и в старших группах в силу возрастных изменений иммунитета и гормональной функции, которые благоприятствуют многим факторам канцерогенеза, возможны проявления папилломавирусной инфекции и клеточная трансформация ракового характера.

Таблица 1

Типы ВПЧ, обнаруженные при различных поражениях кожи и слизистых оболочек (Villiers E. М., 1989)

Клинические появления

ВПЧ типы

Кожные поражения

Подошвенные бородавки

1,2,4

Обычные бородавки

2, 4, 26, 27, 29, 57

Плоские бородавки

3,10,28,49

Бородавки Бютчера

7

Бородавчатая эпидермодисплазия

5, 8, 9, 10, 12, 15, 19, 36

Небородавчатые кожные поражения

37,38

Поражения слизистых гениталии

Condylomata accuminata

6, 11,42-44,54

Некондиломатозные поражения

43, 51, 52, 55, 56, 57—59, 61, 64, 67—70

Карцинома

16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 54, 56, 66, 68

Поражения слизистых оболочек не гениталий

Папиллома гортани

6, 11,30

Карцинома шеи, языка

2,6, 11, 16, 18,30

Таблица 2 Различия ВПЧ-инфекции в зависимости от генотипа вируса

Признак

Типы вируса

Онкогенные (16, 18 и др.)

Неонкогенные (6, 1 1 и др.)

Персистирующее течение Количество вируса (число копий наклетку)

Всегда 1 1 1.5

Редко 3.8

ВПЧ, кондиломы, рак шейки матки

Вирус папилломы человека (ВПЧ) – представляет собой группу вирусов с большим количеством разновидностей, около 200 типов (HPV1, HPV2, HPV3…HPV190). Вирус широко распространен по всему миру. У каждого типа вируса есть преимущественное место локализации. Некоторые типы распространяются в клетках кожи, вызывая разрастания папиллом, другие обитают преимущественно в органах желудочно-кишечного тракта, и несколько типов вируса папилломы человека внедряются в слизистую половых путей.


Чаще всего заражение вирусом происходит при половом контакте, при соприкосновении слизистая/слизистая, кожа/кожа, кожа/слизистая. В ряде случаев может происходить заражение при использовании общего полотенца с человеком, зараженным ВПЧ.

Если рассматривать гинекологическую практику, необходимо сказать о трех местах присутствия вируса: слизистая оболочка влагалища, кожа наружных половых органов, шейка матки.

На слизистой оболочке влагалища и коже наружных половых органов как правило приживаются вирусы 6 и 11 типов, вызывая распространение кондилом и папиллом. Эти типы вируса обладают очень низкой канцерогенной активностью, то есть рак развивается из-за этих типов очень- очень редко, примерно в том же проценте случаев, что и у человека, не зараженного ВПЧ.

Кондиломы опасны тем, что могут снижать местный иммунитет во влагалище (чаще бывают воспалительные заболевания – бактериальный вагиноз, молочница), а также могут разрастаться до больших размеров, даже до гигантских. Распространение кондилом происходит при снижении иммунитета. В 99,999% случаев кондиломы не перерождаются в рак.

Удалять или не удалять кондиломы решает лечащий врач, опираясь на свой профессиональный опыт и клиническую ситуацию. Обязательно до и после удаления назначается противовирусная терапия.

Лечение и диагностика рака шейки матки в Казани

Рак шейки матки вызывают ВПЧ преимущественно 16-68 типов, при этом в 70% случаев заболевания выявляются ВПЧ 16,18 типов, то есть мы рассматриваем их как наиболее опасные. Эти типы вируса попадают на шейку матки только половым путем. Внедряясь, вирус начинает не только изменять клетки, но и блокировать гены, которые с ним должны бороться. Рак шейки матки при наличии вируса развивается не у всех. В 90% случаев он в течение 2 лет покидает организм сам. Но если вирус остается, то рано или поздно он может вызвать на шейке неблагоприятный процесс.

Для диагностики состояния шейки матки существуют специальные тест – системы, анализы и обследования.

1.    Скрининг на рак шейки матки или по – другому онкоцитология, ее нужно сдавать до 65 лет 1 раз в год. Если вы знаете, что у вас есть ВПЧ16-68 типов, онкоцитологию нужно сдавать чаще, один раз в 6 – 8 месяцев.

2.    Диагностика наличия ВПЧ на шейке – безболезненно производится забор материала с шейки матки

– самый чувствительный и самый дорогой метод Digene – тест

– чуть менее чувствительный, но тоже очень информативный тест ROCHE COBAS

– другие тест системы выявления ВПЧ, на сегодняшний день тоже достаточно точные.

      3. Кольпоскопия (субъективный, но необходимый

           осмотр шейки в микроскоп)

При наличии постоянного партнера проводится ко- тестирование (ВПЧ+онкоцитология) 1 раз в 5 лет, если половой партнер меняется – 1 раз в 2 года.

Лечение ВПЧ комплексное

Необходима нормализация микрофлоры во влагалище (важно, чтобы было как можно меньше воспалительных реакций), нужно помочь организму разблокировать гены для самостоятельной утилизации вируса, а также проводить противовирусную терапию и повышать местный иммунитет.

От заражения ВПЧ до рака шейки матки проходит от 7 до 15 лет, при регулярном посещении гинеколога и правильной тактике лечения – заболевание раком шейки матки 100% предотвратимое.

ВПЧ и кольпоскопия

ВПЧ (HPV) считается самой распространенной инфекцией, которая передается половым путем, расшифровывается аббривиатура ВПЧ, как вирус папилломы человека. Особенно опасным является то, что если инфекция, вирус папилломы человека, находится в организме очень долго, то у женщины могут развиться онкологические заболевания. Зачастую, женщина даже не знает, что произошло инфицирование вирусом папилломы человека, поскольку этот процесс протекает бессимптомно. И точно так же незаметно, вирус ВПЧ может исчезнуть из организма.

Это зависит от состояния иммунной системы организма. Насколько продолжительным будет инкубационный период (от момента, когда случилось заражение до момента, когда начали возникать первые признаки развития ВПЧ) напрямую зависит от того, каким именно типом вируса папилломы человека заразилась женщина и от иных причин. Чаще всего, у женщины могут появиться бородавки на гениталиях (остроконечные кондиломы), а во время половых контактов могут появиться кровянистые выделения из влагалища. Но выделения так же могут начаться и без особых на то причин.

Следует помнить, что ВПЧ может быть не только самостоятельным заболеванием, часто вирус папилломы человека появляется как сопутствующее заболевание вместе с такими проблемами, как хламидиоз, герпес, гонорея и даже сифилис.

Основные симптомы, по которым можно говорить о наличии ВПЧ у женщины являются:

  • Образования в виде папиллом, бородавчатого вида, в виде корост на коже женщины;
  • Зуд в области половых органов, выделения из влагалища нездорового вида;
  • Увеличение лимфатических узлов.

Вирус папилломы человека чаще всего заражает такие группы людей:

  • Женщины, которые в качестве меры предохранения от беременности используют оральные контрацептивы бесконтрольно, без согласования со своим гинекологом;
  • Женщины которые курят или часто употребляют спиртные напитки;
  • Люди, у которых очень слабый иммунитет;
  • Люди, которые в прошлом перенесли тяжелые инфекционные заболевания;
  • Люди, которые часто злоупотребляют лекарственными препаратами;
  • Наиболее подверженная группа риска вирусу ВПЧ – это люди, которые ведут бесконтрольную половую жизнь. Особенно, люди, которые практикуют секс (половую близость) без использования презервативов.

Cуществуют ВПЧ высокого и низкого онкогенного риска.

В группу ВПЧ высокого онкогенного риска включены вирусы типов: 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 и 68. В группу ВПЧ низкого онкогенного риска включены вирусы типов: 6, 11, 42, 43, 44.

Различают 2 главных способа, с помощью которых можно выявить вирус.

  • ПЦР как способ диагностики вируса папилломы человека у женщины;
  • Обследование на онкоцитологию.

Лечение такой проблемы, как папилломовирусная инфекция чаще всего проводится в два этапа, первый из которых, это лечение вируса (антивирусная терапия), а вторая проблема, это удаление симптомов проявления вируса ВПЧ, то есть самих образований в виде папиллом.

Лечение вируса папилломы человека обязательно должно проходить под контролем лечащего врача.

Кольпоскопия

Это инструментальный осмотр гинекологического осмотра влагалища, шейки матки и вульвы. Проводится она с использованием кольпоскопа.

В зависимости от оснащённости клиники врач использует оптический или видеокольпоскоп.
Оба прибора позволяют рассмотреть кровеносные сосуды женской половой системы, своевременно обнаружить аномальные клетки и начать лечение. Видеокольпоскоп позволяет присутствовать на диагностике нескольким врачам одновременно. При этом изображение выводится на экран в реальном времени.

Кольпоскопический метод позволяет выявить многие проблемы:

  • генитальные бородавки,
  • предраковые изменения,
  • онкологию.

Исследуется в основном вульва, влагалище, шейка матки. Но в некоторых случаях диагностике с использованием кольпоскопа подвергается и матка.

В этом случае исследование актуально для обнаружения очагов поражения эпителий нижней части шейки матки, для определения их характера и локализации.
Не рекомендуется проводить обследование в период менструации и других кровотечениях, при остром воспалительном процессе, а также при атрофии эктоцервикса.

Кольпоскопия подразделяется на простую и расширенную.
Для получения более точной информации рекомендуется проводить кольпоскопию в определенное время менструального цикла. Лучше прийти в первую его половину.
Золотым стандартом при наличии эктопий (эрозий шейки матки) является обследование на ВПЧ и метод кольпоскопии.

Своевременное обследование- это залог здоровья и долголетия!!!

Запишитесь на прием, заполнив форму на сайте, или позвоните нам по телефону. Опытные специалисты М+клиник ответят на любые интересующие вас вопросы.

Генотипы вируса папилломы человека 68 и 58 являются наиболее распространенными генотипами среди женщин из общин киломбо в штате Мараньян, Бразилия

Цели: Определить частоту типов вируса папилломы человека (ВПЧ) и поведенческих характеристик, связанных с цитологическими аномалиями, у женщин, потомков рабов, которые живут в изолированных общинах, известных как киломбо, в штате Мараньян, Бразилия.

Методы: Цервиковагинальные образцы 353 женщин были проанализированы с помощью традиционной цитологии и генотипирования. Выявление ВПЧ и генотипирование проводили с использованием набора для генотипирования ВПЧ с линейной матрицей. Были проанализированы поведенческие факторы и их связь с цитологическими отклонениями, а также связь между цитологическими отклонениями и ВПЧ-инфекцией.

Результаты: Частота ВПЧ-инфекции составила 13%, а заражение типами ВПЧ высокого риска встречалось чаще, чем типами низкого риска (10.2% против 2,8%). Наиболее распространенными генотипами были HPV 68 (3,1%) и HPV 58 (2,6%). У ВПЧ-положительных женщин в 6,5 раз чаще, чем у ВПЧ-отрицательных, диагностировались цитологические аномалии. Выявлена ​​достоверная связь между ВПЧ-инфекцией и наличием цитологических аномалий у женщин 31-40 лет и у женщин 51-60 лет.

Выводы: Выявлен отчетливый профиль генотипов ВПЧ высокого риска с преобладанием типов 68 и 58.Не исключено, что результаты настоящего исследования обусловлены особенностями популяции, которая географически изолирована и придерживается консервативных сексуальных привычек.

Ключевые слова: Мазок из шейки матки; эпидемиология; типы ВПЧ; Инфекция половых путей; Изолированные сообщества.

Распределение типов ВПЧ высокого риска среди женщин в провинции Сычуань, Китай: перекрестное исследование | BMC Infectious Diseases

Насколько нам известно, это первое крупное исследование распространенности ВПЧ-ВПЧ среди женщин в китайской провинции Сычуань, а также связи между инфекцией ВПЧ-ВПЧ и аномальной цитологией.В нашей выборке из 17 319 женщин, в основном из банковского и государственного секторов, общий уровень инфицирования ВПЧ-ВПЧ составил 12,6%, а пять наиболее распространенных типов ВПЧ-ВПЧ — 52, 53, 58, 16 и 56. частота инфекции HR-HPV (12,6%) аналогична частоте, зарегистрированной для крупных китайских городов Тяньцзинь (12,5%) [22], Гуандун (7,3%) [23] и Пекин (7,0%) [24], но она ниже, чем частота, зарегистрированная для Шанхая (31,8%) [25], Фуцзяня (18,7%) [26], Юньнани (18,4%) [27] и Циндао (32.2%) [28]. Более высокая распространенность в некоторых других исследованиях может отражать то, что мы набирали бессимптомных женщин, которые обращались в наш центр для плановых медицинских осмотров, а не пациентов больницы, у которых может быть более высокая распространенность ВР-ВПЧ. Расхождения между нашим исследованием и другими исследованиями могут также отражать географические или социально-экономические различия в распространенности вируса. Дальнейшая работа должна прояснить, в какой степени на эти результаты влияют различия в демографических характеристиках исследуемых образцов и в методах тестирования на вирусы.

В нашем исследовании уровень инфицирования HR-HPV в группе старше 60 лет намного выше по сравнению с другими группами, что аналогично результатам исследования женщин в Шэньчжэне, Китай [29].Обследование 10 602 тайваньских женщин показало, что распространенность ВПЧ была самой высокой среди женщин в возрасте 60–65 лет (20,1%) [30]. Исследование, в котором приняли участие 10 442 женщины из провинции Фуцзянь, показало, что распространенность ВПЧ имеет бимодальную тенденцию с возрастом [26]. Исследование женщин в Шанхае, посещающих центр диагностики и лечения заболеваний шейки матки, показало, что распространенность ВР-ВПЧ составляет 31,5% среди женщин в возрасте ≥65 лет, что выше, чем среди женщин в возрасте 35–54 лет [25]. Мы предполагаем, что из-за дискомфорта и смущения при гинекологическом осмотре уровень участия в скрининге на рак шейки матки у пожилых людей низок, и большинство участников участвуют в скрининге из-за дискомфортных симптомов репродуктивного тракта, поэтому процент положительных результатов высок. .Однако эти результаты контрастируют с сообщениями о снижении частоты инфицирования с возрастом в исследованиях, проведенных в Колумбии и Японии [31, 32]. Эти расхождения могут отражать этнические различия.

Наиболее распространенные типы ВПЧ-ВПЧ в Сычуани (52, 53, 58, 16, 56), по-видимому, отличаются от таковых в других китайских городах, таких как Шанхай (52, 16, 18, 31, 18) [25], Фуцзянь (16, 52, 58, 18, 53) [26], Тяньцзинь (16, 18, 58, 66) [22], Гуандун (52, 58, 16, 18) [23] и Хунань (16, 52, 58, 18) [33].

Несмотря на эти географические различия, эта разница может быть связана с включенным населением.Некоторые исследования представляли собой образцы пациентов, собранные в отделении акушерства и гинекологии, в то время как другие были нацелены только на население в целом, а некоторые представляли собой комбинацию двух групп. Другая потенциальная причина такого расхождения с другими исследованиями связана с размером выборки, в то время как наше исследование включало 17 319 женщин. Стоит отметить, что, несмотря на высокий уровень положительных результатов на ВПЧ53, цитологические результаты более чем у 90% женщин с положительным результатом на ВПЧ53 были NILM.

Далее мы проанализировали наиболее распространенный генотип ВПЧ при HSIL.В этом исследовании типы ВПЧ 52, 16, 58, 33 и 56 были пятью наиболее распространенными типами HR-HPV в HSIL. Первые три наиболее распространенных типа HR-HPV включали другие исследования, проведенные во многих городах Китая. ВПЧ-52 и ВПЧ-58 также очень распространены в Гонконге и на Тайване [34, 35]. Однако в нашем исследовании HPV16/18 составляет только 25,93% HSIL, тогда как HPV31/33/45/52/58 составляют 56,8%. когда мы смотрим на распространенность ВПЧ при раке, метаанализ показал, что при клеточном обнаружении ВПЧ 16/58/18/52/33 были пятью наиболее часто выявляемыми типами HR-ВПЧ в ICC во многих исследованиях, ВПЧ 31, 33, 52 и 58 чаще встречались при CIN3 по сравнению с цервицитом/нормальными образцами, но реже при ICC [36].Возможная причина требует дальнейшего изучения.

Кроме того, мы обнаружили, что распространенность HR-HPV увеличивалась с увеличением тяжести аномальной цитологии, что согласуется с предыдущими исследованиями [22, 25, 26, 27]. Это, вероятно, отражает хорошо установленную связь между HR-HPV и риском рака шейки матки. Кроме того, мы обнаружили, что наличие двух или более типов HR-HPV было связано с большей вероятностью аномальной цитологии, что также согласуется с предыдущей работой [23, 37, 38]. Это может быть эффект вирусной нагрузки, хотя он также может отражать взаимодействие между конкретными типами вирусов.Дальнейшие исследования должны изучить, почему множественная инфекция HR-HPV приводит к большему риску аномальной цитологии.

Наши эпидемиологические результаты по типам ВПЧ-ВПЧ в провинции Сычуань, где проживает более 40 миллионов женщин, могут иметь непосредственное значение для практики общественного здравоохранения Китая. В 2017 году правительство Китая одобрило вакцины, эффективные против ВПЧ-16 и ВПЧ-18, которые вместе вызывают примерно 70% случаев рака шейки матки во всем мире [6]. Однако в этом исследовании HPV16/18 составляет только 25.9% HSIL, тогда как HPV31/33/45/52/58 составляют 56,8%. Таким образом, результаты показывают, что бивалентная вакцина против ВПЧ может не защитить значительную часть женщин от внутриэпителиальных неопластических поражений шейки матки и рака шейки матки. Это подчеркивает необходимость 9-валентной вакцины против вируса папилломы человека для охвата этой большой группы уязвимых женщин.

Несмотря на большой размер и тщательную корреляцию между положительной реакцией на ВПЧ-ВПЧ и отклонением от нормы.

цитология, наши результаты следует интерпретировать с осторожностью в свете ограничений.В нашем исследовании участвовали в основном здоровые, работающие женщины из городов, поэтому результаты нельзя обобщать на отдаленные сельские женщины. Однако многоцентровое популяционное исследование в Пекине, Шанхае, Шаньси, Хэнани и Синьцзяне, представляющее как городские, так и сельские районы, показало, что распространенность ВПЧ у женщин с КИН из сельской и городской местности не имеет существенной разницы [39]. В этом исследовании мы проанализировали только взаимосвязь между ВПЧ и цитологией, а не гистологией. Цитология также не так хороша, как гистология, поскольку цитология является несовершенным тестом, мы продолжим изучение взаимосвязи между ВПЧ и гистологией в следующем исследовании.

Несмотря на эти ограничения, наше эпидемиологическое исследование HR-HPV в провинции Сычуань показывает, что значительная распространенность, зарегистрированная в нескольких крупных китайских городах, может быть верной для большой части страны. Мы также обнаружили, что инфицирование несколькими типами ВПЧ было связано с повышенным риском аномальной цитологии, что может помочь в будущих исследованиях того, как инфекция ВПЧ приводит к раку шейки матки.

Распределение генотипов вируса папилломы человека среди женщин в Мешхеде, Иран – Полный текст – Intervirology 2017, Vol.60, № 1-2

Объектив: Рак шейки матки занимает третье место среди злокачественных новообразований у женщин. Поскольку генотип вируса папилломы человека (ВПЧ) может различаться географически, важно определить его генотипическое распределение, прежде чем разрабатывать политику здравоохранения и программы вакцинации в той или иной области. Цель этого исследования состояла в том, чтобы определить частоту типов ВПЧ у женщин в Мешхеде, Иран. Методы: Мы использовали вложенную ПЦР и обратную дот-блот-гибридизацию для генотипирования.В исследование были включены 143 образца цитологии шейки матки из Мешхеда с подтвержденной молекулярными методами папилломавирусной инфекцией. Результаты: Выявлено, что 74,1% типов ВПЧ находились в группах высокого риска, включая генотипы 16, 18, 39, 52, 58, 66, 68 и 73. Коинфекция выявлена ​​в 56,4% случаев. В группу низкого риска, составившую 25,9%, вошли генотипы 6, 11, 42 и 44/55. Выводы: Доказано, что профилактика, ранняя диагностика и раннее лечение снижают уровень смертности от рака шейки матки.Поэтому очень важна точная диагностика генотипа вируса у инфицированных пациентов.

© 2017 S. Karger AG, Базель

Введение

Вирус папилломы человека (ВПЧ) представляет собой большое семейство ДНК-опухолевых вирусов, наиболее известных тем, что они вызывают доброкачественные эпителиальные пролиферативные поражения или бородавки. Всего в настоящее время существует более 200 различных типов ВПЧ, в том числе около 30 штаммов, вызывающих инфекцию в половых путях человека. В настоящее время инфекции половых органов человека, вызванные ВПЧ, являются распространенными заболеваниями, передающимися половым путем.Сообщается, что средняя глобальная распространенность инфекции ВПЧ составляет почти 10% (в диапазоне 1,4-25,6%). Эта группа вирусов состоит из ВПЧ низкого риска, которые не вызывают рак, но могут вызывать кожные бородавки (генотипы 6, 11, 42 и 44), и ВПЧ высокого риска, вызывающих рак (генотипы 16, 18, 26, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 53, 56, 58, 59, 66, 68, 73, 82). Неопластический рак и рак шейки матки могут возникнуть из-за контакта с ВПЧ высокого риска. По данным эпидемиологических исследований ВПЧ положительный примерно у 100% больных раком шейки матки [1,2,3,4,5,6].

С 2006 г. доступны три вакцины против инфекции и заболевания ВПЧ [1]. Четырехвалентная вакцина против ВПЧ 6/11/16/18 была одобрена в 2006 г., а в следующем году в Европе была представлена ​​бивалентная вакцина против ВПЧ 16/18. ЕС выдал разрешение на невалентную вакцину против ВПЧ 6/11/16/18/31/33/45/52/58 в 2015 году. так что регион может определить значимость разных типов ВПЧ [7,8,9,10,11].Наиболее распространенными видами, ответственными за рак шейки матки, являются типы 16 (на которые приходится около 50% случаев), 18, 31 и 45 в США и Европе [12]. Типы 52, 16, 58, 68 и 33 имеют наибольшую распространенность среди населения Южного Китая [13].

Необходимо определить генотипическое распределение ВПЧ перед принятием решения о политике общественного здравоохранения и подготовке вакцин в каждом регионе, поскольку, как уже упоминалось, тип ВПЧ может быть локально специфичным [14,15]. С этой целью успешный подход может использовать молекулярные методы для детального определения типов ВПЧ, даже на основе регионального распределения.Следовательно, текущее исследование было проведено для изучения частоты типов ВПЧ среди женщин в Мешхеде, Иран.

Материалы и методы

Это наблюдательное и описательное исследование, основанное на всех образцах, взятых из больниц и клинических центров в Мешхеде, Иран, с марта 2015 г. по апрель 2016 г. Наш протокол исследования был одобрен местным комитетом по этике Медицинского университета Мешхеда. наук. Все участники были иранскими женщинами, проживающими в Мешхеде, который расположен в северо-восточном регионе Ирана.После получения письменного информированного согласия был взят образец клеток из области шейки матки с помощью тампона. Затем образец помещали в бутылку с физиологическим раствором для использования для тестирования на ВПЧ. Все участники были женщинами с плоскоклеточными интраэпителиальными поражениями низкой степени.

Обнаружение ДНК ВПЧ

Исследование ДНК ВПЧ проводилось в лабораториях молекулярной микробиологии кафедры медицинской микробиологии Мешхедского университета медицинских наук. Из каждого образца шейки матки клетки собирали ультрацентрифугированием и хранили при -20°C до анализа ДНК.Выделение тотальной ДНК проводили с помощью набора QIAamp DNA Minikit (Qiagen, Германия) в соответствии с инструкциями производителя. Затем 10 мкл нуклеиновой кислоты использовали для обнаружения ДНК ВПЧ с помощью вложенной ПЦР (полимеразная цепная реакция; набор Pars Toos, Тегеран, Иран) с использованием термоциклера. Для первой стадии амплификации использовали комбинацию вырожденных праймеров для амплификации последовательности длиной от 449 до 458 п.н. в пределах открытой рамки считывания L1 генома ВПЧ, которая представляет собой наиболее консервативный ген в геноме.Для второго этапа гнездовой ПЦР использовали биотинилированные праймеры для амплификации последовательности длиной от 139 до 145 п.н. Для каждой ПЦР использовали праймеры для β-глобина в качестве внутреннего контроля, чтобы гарантировать, что все образцы были амплифицированы и не было ингибиторов ПЦР. Для каждых 10 образцов каждой ПЦР проводили отрицательный контроль (H 2 O) и положительный контроль, чтобы исключить возможное загрязнение и определить точность. После амплификации продукты ПЦР визуализировали путем окрашивания бромистым этидием после электрофоретического переноса через 1.5% агарозном геле и были легко идентифицированы на основании соответствующей длины ампликонов. Наконец, положительные образцы были отобраны для следующего шага.

Генотипирование ВПЧ

Генотипирование было проведено микробиологом на ДНК-позитивных образцах ВПЧ. Метод представлял собой анализ обратной дот-блот-гибридизации (hybriSpot 12™; HS12) и содержал специфические зонды для 36 наиболее часто встречающихся типов ВПЧ. Основываясь на их связи с различными степенями поражения, ВПЧ, которые могут индуцировать канцерогенез, были классифицированы как ВПЧ высокого риска или онкогенные, в то время как ВПЧ низкого риска – это те, которые вызывают остроконечные кондиломы и взаимодействуют с ВПЧ высокого риска.HPV Direct Flow CHIP предназначен для одновременного скрининга и генотипирования 18 генотипов высокого риска (HPV16, 18, 26, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 53, 56, 58, 59, 66, 68, 73 и 82) и 4 генотипа низкого риска (HPV6, 11, 42 и 44/45) с помощью ПЦР с последующей обратной дот-блот-гибридизацией, основанной на технологии потока ДНК (полуавтоматический hybriSpot 12™ и автоматизированный hybriSpot 24™) [16]. Наконец, для определения распространения ВПЧ использовали описательную статистику.

Результаты

Демографические характеристики

Смешанные инфекции с 2 или более типами ВПЧ были обнаружены в некоторых из наших 143 образцов и 184 генотипов.В таблице 1 показаны демографические данные пациентов. Участниками настоящего исследования были 143 женщины со средним возрастом 34,9 года (SD 6,9, диапазон 20-52), у которых пременопаузальный статус и предшествующая беременность в анамнезе были зарегистрированы примерно у 75%.

Таблица 1

Демографические характеристики исследуемой популяции

Распространенность ВПЧ и генотипическое распределение

На рисунке 1 представлена ​​распространенность ВПЧ высокого и низкого риска. По имеющимся данным, 48 (56.4%) случаев имели коинфекцию среди 85 человек, отнесенных к группе высокого риска. Из 143 женщин, участвовавших в исследовании, общая распространенность ВПЧ составила 26% в группе низкого риска и 74% в группе высокого риска (рис. 2). Следует отметить, что наиболее часто встречались типы ВПЧ высокого риска: 16 (38,6%), 18 (14,7%), 39 (3,8%), 52 (3,8%), 58 (3,3%), 73 (3,3%), 45 (2,1%), 66 (2,1%) и 68 (2,1%). Подтипы ВПЧ низкого риска были 6 (11,9%), 42 (7,0%), 11 (3,8%) и 44/55 (3,3%).

Рис. 1

Распределение ВПЧ высокого и низкого риска среди населения.

Рис. 2

Обсуждение

В настоящем исследовании мы смогли определить распределение типов ВПЧ в Мешхеде, Иран. По результатам примерно 74,1% испытуемых были отнесены к группе высокого риска.

Исследование, проведенное в Восточной Африке, показало, что наиболее распространенными во всем мире типами ВПЧ являются соответственно 16, 18, 31, 58, 52 и 66 среди женщин [17]. HPV16 и HPV18 были наиболее распространенными генотипами в текущей области исследования. HPV16 обладает самым высоким потенциалом канцерогенеза и является ключевым кандидатом для обычных вакцин против ВПЧ [18].

Эпидемиологические исследования сообщают об единичных и множественных инфекциях, вызванных ВПЧ16 и ВПЧ18, которые относятся к вирусам высокого риска примерно в 75% случаев рака шейки матки [19]. Кроме того, было обнаружено, что некоторые другие виды рака, включая рак влагалища, вульвы, анального канала и горла, вызываются этими вирусами. Отсутствие надлежащего скрининга в развивающихся странах привело к росту заболеваемости раком шейки матки. ВПЧ высокого риска представляют собой одну из ведущих причин развития рака шейки матки, а это означает, что развитие поражения в рак можно предотвратить с помощью ранних и быстрых терапевтических действий против вируса.Польза скрининга на эту группу инфекций очевидна [20]. Ку и др. [21] исследовали влияние генотипов на тяжесть и прогноз неоплазии шейки матки, которые показали влияние типа вируса на тяжесть заболевания. ВПЧ18 был наиболее распространенным ВПЧ в их исследовании, но был вторым наиболее частым типом в настоящем исследовании, что указывает на расхождение распространенности ВПЧ в разных районах [22].

В 2002 г. в ходе многоцентрового исследования, проведенного в 7 странах, Muñoz et al.сообщили, что HPV16 был наиболее распространенным типом (между 43,9 и 72,4%) без исключения [23]. В соответствии с нашим исследованием, наиболее часто встречающимися ВПЧ в случаях карциномы шейки матки были ВПЧ16 (на которые приходится более 50%) и ВПЧ18 (12%) в многочисленных отчетах [24]. Махмуди и др. [25] изучали роль генотипов ВПЧ в развитии рака шейки матки в Йезде, Иран, и наблюдали высокую частоту ВПЧ16 (70%) и ВПЧ18 (16,7%), за которыми следовали типы 33, 45 и 73 соответственно [26]. Эти выводы согласуются с нашим исследованием.Чтобы подтвердить наше исследование, всестороннее генотипирование, проведенное на 20 000 образцов мазка Папаниколау среди пациентов в Кермане, Иран, показало, что типы ВПЧ 16 и 18 имели наибольшую частоту [27].

Существует несколько причин для продолжения вакцинации против ВПЧ в качестве успешного подхода в Иране. К ним относится возможная перекрестная защита вакцин против непривитых типов ВПЧ. Кроме того, многие инфекции, ускользающие от целевого диапазона вакцины, являются преходящими и не могут вызывать рак шейки матки. Это указывает на определенную стратегию профилактики в таких условиях, как Иран, с очень ограниченными ресурсами и слабым охватом скринингом на рак шейки матки.Принятие результатов нашего исследования распространенности ВПЧ и распределения генотипов в Мешхеде в качестве исходного уровня может стать первым шагом в мониторинге динамики распределения генотипа ВПЧ после вакцинации против ВПЧ. Это может быть связано с предраковыми изменениями шейки матки, которые необходимо регулярно контролировать с течением времени. Тем не менее, необходим постоянный сбор данных о распространенности исходного типа ВПЧ у пациентов Мешхеда, чтобы можно было контролировать эффективность вакцины против ВПЧ в долгосрочной перспективе [7,18,28,29].

Следует учитывать несколько ограничений настоящего исследования. Во-первых, это отсутствие цитологической оценки, что привело к большей стратификации образцов. Кроме того, отсутствие амплификации всех генотипов с одинаковой чувствительностью к праймерам могло быть источником дисперсии в определении генотипа. Последним ограничением была невозможность оценить влияние вакцины против ВПЧ. Согласно экономическим моделям здравоохранения, учитывающим потенциальные преимущества, после программ вакцинации против ВПЧ в Иране можно увидеть рентабельность.

Заключение

Это исследование показало, что инфицирование некоторыми типами вирусов часто встречается у ВПЧ-позитивных женщин. В этом исследовании мы диагностировали различные типы ВПЧ и, в соответствии с другими опубликованными исследованиями, показали, что ВПЧ16 был наиболее распространенным. Этот результат важен для выбора стратегии профилактики и совершенствования подходов к борьбе с раком шейки матки.

Заявление о раскрытии информации

У авторов нет конфликта интересов, о котором следует заявить.

Авторское право: Все права защищены.Никакая часть данной публикации не может быть переведена на другие языки, воспроизведена или использована в любой форме и любыми средствами, электронными или механическими, включая фотокопирование, запись, микрокопирование или любую систему хранения и поиска информации, без письменного разрешения издателя. .
Дозировка препарата: авторы и издатель приложили все усилия, чтобы гарантировать, что выбор препарата и дозировка, указанные в этом тексте, соответствуют текущим рекомендациям и практике на момент публикации.Тем не менее, в связи с продолжающимися исследованиями, изменениями в правительственных постановлениях и постоянным потоком информации, касающейся лекарственной терапии и реакций на лекарства, читателю настоятельно рекомендуется проверять вкладыш в упаковке для каждого лекарства на предмет любых изменений в показаниях и дозировке, а также для дополнительных предупреждений. и меры предосторожности. Это особенно важно, когда рекомендуемый агент является новым и/или редко используемым лекарственным средством.
Отказ от ответственности: заявления, мнения и данные, содержащиеся в этой публикации, принадлежат исключительно отдельным авторам и участникам, а не издателям и редакторам.Появление рекламы и/или ссылок на продукты в публикации не является гарантией, одобрением или одобрением рекламируемых продуктов или услуг или их эффективности, качества или безопасности. Издатель и редактор(ы) отказываются от ответственности за любой ущерб людям или имуществу в результате любых идей, методов, инструкций или продуктов, упомянутых в содержании или рекламе.

Распространенность 30 генотипов ВПЧ, выявленных с помощью EUROArray HPV в образцах шейки матки среди непривитых женщин из провинции Воеводина, Сербия

Abstract

В этом исследовании оценивается распространенность инфекции ВПЧ до вакцинации у женщин из Воеводины, Сербия, в зависимости от возраста и цитологического статуса.Всего было включено 1495 женщин в возрасте от 18 до 65 лет с различными результатами цитологического исследования. Анализ генотипирования ВПЧ был выполнен с использованием теста EUROArray HPV для выявления тридцати генитально значимых подтипов ВПЧ. В нашем исследовании наиболее распространенными генотипами были ВПЧ 16, 31, 51 и 53. Среди них ВПЧ 16 стабильно присутствовал во всех цитологических подгруппах. Двенадцать генотипов ВПЧ, классифицированных как канцерогенные для человека (группа 1), были обнаружены в 77,8,0% HSIL/ASCH и 55,0% NILM с аномальными результатами кольпоскопии.Шесть возможных канцерогенов-HR (группа 2B) часто обнаруживались у женщин с нормальной цитологией (14,8%) и легкими аномалиями (ASCUS и LSIL), но с меньшей частотой при поражениях HSIL/ASCH (7,1%). ВПЧ 6 и 11 (группа 3) не были обнаружены в случаях HSIL/ASCH. Неклассифицированные типы ВПЧ были равномерно распределены во всех цитологических группах: 20,7%, 19,1%, 16,3% и 13% NILM, ASCUS, LSIL и HSIL/ASCH соответственно. Наши результаты подчеркивают, что большинство аномальных результатов теста Папаниколау вызвано ВПЧ группы 1 среди женщин из нашего региона.Низкочастотные ВПЧ группы 2А/2В, особенно HSIL/ASCH, подтверждают вывод о том, что отдельные генотипы требуют рассмотрения каждого типа как отдельного агента. Мы ожидаем положительного влияния вакцины против ВПЧ на снижение поражений шейки матки, связанных с ВПЧ, среди женщин из провинции Воеводина после внедрения программ вакцинации в нашей стране.

Образец цитирования: Ковачевич Г., Милошевич В., Николич Н., Патич А., Допудж Н., Радованов Дж. и др. (2021) Распространенность 30 генотипов ВПЧ, обнаруженных с помощью EUROArray HPV в образцах шейки матки среди невакцинированных женщин из провинции Воеводина, Сербия.ПЛОС ОДИН 16(4): е0249134. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0249134

Редактор: Peter C. Angeletti, University of Nebraska-Lincoln, США

Получено: 10 октября 2020 г.; Принято: 11 марта 2021 г .; Опубликовано: 14 апреля 2021 г.

Copyright: © 2021 Kovacevic et al. Это статья с открытым доступом, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника.

Доступность данных: Данные, лежащие в основе результатов, представленных в исследовании, доступны в хранилище данных Dryad (DOI: 10.5061/dryad.rxwdbrv7b).

Финансирование: Это исследование финансировалось Городским управлением здравоохранения города Нови-Сад в период 2016-2018 гг., номера проектов XII-51-46-3/2016, XII-51-46-51/2017. , XII-51-52-7/2018. Плата за публикацию была оплачена Merck Sharp & Dohme D.O.O., Белград, Сербия. Мерк Шарп и Доме Д.О.О., Белград, Сербия предоставила поддержку в виде заработной платы автору-депутату. Конкретные роли этих авторов сформулированы в разделе «вклад авторов». Спонсоры не участвовали в разработке исследования, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.

Конкурирующие интересы: Авторы ознакомились с политикой журнала и имеют следующие конкурирующие интересы: Милена Петрович является оплачиваемым сотрудником Merck Sharp & Dohme D.O.O., Белград, Сербия.Это не меняет нашей приверженности политике PLOS ONE в отношении обмена данными и материалами. Нет никаких патентов, продуктов в разработке или продаваемых продуктов, связанных с этим исследованием, которые нужно декларировать. Остальные авторы заявляют об отсутствии конкурирующих интересов.

Введение

Более 200 генотипов вирусов папилломы человека (ВПЧ) были охарактеризованы на молекулярном уровне на сегодняшний день, и только небольшая часть из них способна вызывать злокачественную трансформацию клеток человека. Международное агентство по изучению рака (IARC) классифицировало двенадцать типов ВПЧ (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58 и 59) из пяти филогенетических альфа-папилломавирусов видов α5, α6, α7. и α9 в группе 1 «канцерогенные для человека», поскольку имеется достаточно доказательств канцерогенности в человеческой популяции [1,2].Было подсчитано, что генотипы группы 1 этиологически связаны с более чем 98% всех случаев рака шейки матки во всем мире, от 70 до 90% случаев рака анального канала и влагалища, 40% случаев рака вульвы, 47% случаев рака полового члена и от 25 до 30% случаев рака ротоглотки. раки. Один вирус был признан (группа 2А, ВПЧ68) «вероятно канцерогенным для человека». Недавние данные показывают, что дополнительные типы ВПЧ (ВПЧ 26, 53, 66, 67, 70, 73, 82, 30, 34, 69, 85, 97) из видов альфа-папилломавируса были идентифицированы для достижения единичных инфекций при низком проценте рака шейки матки. ткани.Эти типы ВПЧ классифицируются как группа 2B «возможно канцерогенные для человека» на основании эволюционного сходства с известными типами, вызывающими рак. Два вируса (ВПЧ 6 и 11) были отнесены к группе 3 «не поддающиеся классификации в отношении канцерогенности для человека». Несколько других ВПЧ, которые могут инфицировать слизистую оболочку, обозначены как неклассифицированные в связи с их эпидемиологическим онкогенным риском [3,4].

Вирус папилломы человека считается основным фактором риска развития рака шейки матки в связи с хорошо документированным участием ВПЧ в злокачественной трансформации клеток [2–4].В глобальном масштабе рак шейки матки является четвертым наиболее распространенным видом рака среди женского населения с примерно 570 000 новых случаев в 2018 году, что является причиной 7,5% всех смертей от рака среди женщин [5]. Согласно текущим оценкам, в Сербии каждый год у 1327 женщин диагностируют рак шейки матки и 551 женщина умирает от этого заболевания. Рак шейки матки занимает 4   самых частых онкологических заболеваний среди женщин в Сербии и 2   самых частых онкологических заболеваний среди женщин в возрасте от 15 до 44 лет [5].

Многочисленные исследования показали, что ВПЧ 16 является наиболее распространенным типом ВПЧ при раке, связанном с ВПЧ, во всем мире [2–4].Кроме того, распространенность других типов ВПЧ сильно различается по географическому признаку. Знание распределения генотипов ВПЧ важно для разработки новых диагностических методов выявления ВПЧ, а также для оценки эффективности вакцин в различных географических регионах мира [6]. Многие страны осуществили проекты скрининга и вакцинации, которые оказались очень эффективными против рака шейки матки. Правительство Сербии неоднократно подчеркивало обязательство резко сократить заболеваемость и смертность от болезней, связанных с ВПЧ, включая рак шейки матки.Национальная программа скрининга рака шейки матки в Республике Сербия была создана в 2012 г. для женщин в возрасте от 25 до 64 лет [7]. Однако организованная, систематическая программа иммунизации против ВПЧ, охватывающая определенные когорты (например, 12-летних девочек и мальчиков) с государственным финансированием, еще не создана [8]. В нашей стране лицензированы три вакцины против ВПЧ: бивалентная вакцина (2vHPV; Церварикс, GlaxoSmithKline, Сербия), четырехвалентная вакцина (4vHPV; Gardasil, Merck Sharp & Dohme D.O.O., Сербия) и невалентная вакцина (9vHPV; Gardasil 9, Merck Sharp & Dohme D.O.O., Сербия).

В крупных эпидемиологических исследованиях основной интерес представляла распространенность генотипов ВПЧ группы 1, в то время как распределение вероятного (2А) и возможно канцерогенного (2В) типов среди женского населения мира менее известно [2–4]. . Рабочая группа IARC отметила, что определение канцерогенности является обязательным условием, но недостаточным для включения этих типов ВПЧ в программу первичной и вторичной профилактики [1].Несмотря на тот факт, что распространенность различных ВПЧ может различаться в разных странах, современные профилактические вакцины могут обеспечить защиту от 70 до 90% случаев рака шейки матки.

Только в нескольких исследованиях изучалась распространенность ВПЧ среди женщин в Сербии, обычно среди женщин из Белграда и прилегающих районов и из провинции Воеводина [9–13]. Эти предыдущие исследования были основаны на оценке распространенности ВПЧ у женщин с разными результатами цитологического исследования шейки матки, в то время как только одно оценивало распространенность ВПЧ среди женщин с раком шейки матки.Все эти анализы проводятся для выявления хорошо известных 12–14 ВПЧ высокого риска (ВПЧ ВПЧ).

Основная цель этого исследования заключалась в определении распространенности различных генотипов ВПЧ, включая группы 1, 2А, 2В и неклассифицированные типы, в образцах шейки матки, взятых у невакцинированных женщин из провинции Воеводина, Сербия. Второстепенными целями этого исследования были описание и оценка демографических и клинических параметров в соответствии с генотипами ВПЧ, а также установление научного обоснования внедрения вакцинации против ВПЧ в Сербии.

Материалы и методы

Предметы и этика

Это исследование было проведено в рамках текущего проекта: «Значение анализа ДНК ВПЧ в профилактике рака шейки матки», и результаты, представленные в этой статье, представляют собой результаты анализа, проведенного с 2016 по 2018 год. удобный тип выборки. Скрининг рака шейки матки проводился клиницистом во время гинекологического осмотра после визуализации шейки матки.Обычные мазки Папаниколау были получены с использованием цервикальных шпателей Айера. Слайды оценивали в лаборатории цитологии отделения гинекологии Общественного центра здоровья Нови-Сад, Воеводина, Сербия, и классифицировали в соответствии с классификационным диагнозом Bethesda [14]. В отделение гинекологии еженедельно поступали отчеты о результатах цитологического исследования из цитологической лаборатории. После этого персонал первичной медико-санитарной помощи вызвал пациентов для обсуждения дальнейшего лечения и последующего наблюдения. Тесты на ВПЧ предлагались женщинам в возрасте от 18 до 65 лет с отклонением от нормы мазка Папаниколау, а также женщинам с нормальными результатами цитологии и подозрительными результатами кольпоскопии (кольпоскопия используется при рутинном гинекологическом осмотре в нашей стране).Кроме того, целевой группой были женщины с нормальной цитологией шейки матки, но с высоким риском инфицирования ВПЧ. Участники, которые соответствовали критериям, получили устную информацию о важности тестирования на ВПЧ медицинским персоналом, но в исследование были включены только участники, давшие информированное согласие. Все женщины, включенные в исследование, заполнили анкету, чтобы облегчить сбор социально-демографических данных и информации об их сексуальных привычках и других факторах риска, связанных с заражением ВПЧ.

Образцы для анализа ДНК ВПЧ были собраны с использованием среды для транспортировки образцов ThinPrep Pap (Hologic Inc.) или eNAT (Copan, Италия) в соответствии с оригинальными инструкциями производителя. Исследовательская группа состояла из 1495 женщин, из которых 567 женщин имели нормальные цитологические показатели (отрицательные на внутриэпителиальные поражения или злокачественные новообразования, NILM), 751 женщина ASCUS (атипичные плоскоклеточные клетки неопределенного значения), 136 женщин LSIL (плоскоклеточные внутриэпителиальные поражения низкой степени) и 41 женщина. имел либо HSIL (плоскоклеточные внутриэпителиальные поражения высокой степени), либо ASCH (атипичные плоскоклеточные клетки, не может исключить HSIL).Женщины, включенные в исследование, были проинформированы о целях исследования, и все они подписали форму информированного согласия. Протокол исследования был рассмотрен и одобрен Комитетом по медицинской этике Института общественного здравоохранения Воеводины, Нови-Сад, Сербия (номер утверждения: 07-1086/3 от 8 сентября 2015 г.).

Экстракция ДНК и тест EUROArray HPV

ДНК

экстрагировали из образца объемом 200 мкл с помощью автоматической системы выделения нуклеиновых кислот (SaMag Viral Nucleic Acid Extraction Kit, Sacace, Италия).В каждом тесте EUROArray HPV использовали 5 мкл экстрагированной ДНК. Если амплификацию не проводили в тот же день, что и экстракцию, обработанные образцы хранили при температуре 2–8°C не более пяти дней или замораживали при температуре -20/-80°C на более длительный срок. Генотипирование ВПЧ проводили с использованием теста EUROArray HPV (EUROIMMUN, Любек, Германия) в соответствии со спецификациями производителя. В этом тесте используется обширная панель специфических праймеров и зондов для выявления тридцати генитально значимых типов ВПЧ в одной реакции.Среди них 18 типов ВПЧ (16, 18, 26, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 53, 56, 58, 59, 66, 68, 73, 82), включенных в группы IARC 1, 2А. и 2B считались HR HPV, а 12 типов HPV (6, 11, 40, 42, 43, 44, 54, 61, 70, 72, 81, 89) были включены в группу 3 IARC, а неклассифицированные типы были сочтены низкими риск ВПЧ (LR HPV). Стадии амплификации и гибридизации позволили идентифицировать как целевой вирусный генетический материал (ген E6/E7), так и фрагмент гена Hsp90 человека, используемые в качестве эндогенных контролей для извлечения и амплификации достоверных образцов.

Помимо положительных и отрицательных контролей, контроль перекрестного загрязнения (CC-I и CC-II) был включен в тест для обеспечения высокой безопасности результатов. Чип использует две точки ориентации (OS I и OS II) для автоматического определения положения с помощью EUROArray Scan. Оценка, интерпретация и архивирование результатов полностью автоматизированы программным обеспечением EUROArrayScan.

Статистический анализ

Все статистические анализы были выполнены с помощью программного пакета STATISTICA для Windows 13.0 [15]. Распространенность ВПЧ-инфекции, распределение генотипов, единичные и множественные ВПЧ-инфекции анализировались отдельно и с помощью критерия хи-квадрат, который использовался для сравнения распространенности этих параметров по целевым группам. Чтобы изучить взаимосвязь между статусом ВПЧ и поведенческими факторами риска, был проведен однофакторный анализ путем расчета отношения шансов (ОШ) и 95% ДИ. Также была проверена значимость связи между ВПЧ-статусом и цитологией, а также между ВПЧ-статусом и возрастом обследованных участников с помощью теста Независимости.Во всех анализах значения вероятности p<0,05 считались значимыми.

Результаты

Социально-демографические данные

Всего в исследование было включено 1495 непривитых женщин (средний возраст: 35 лет, возрастной диапазон: 18–65 лет). Сводка переменных, описывающих социально-демографические характеристики, образ жизни и сексуальные привычки участников, представлена ​​в таблице 1. Статистически значимое одномерное отношение шансов было обнаружено для статуса ВПЧ в группе 25–34 лет и в группе, имевшей двух половых партнеров в течение жизни.

Распространенность и типовое распространение ВПЧ

На первом этапе образцы были проанализированы на наличие всех 30 генитальных ВПЧ, из которых 760 имели положительный результат на ВПЧ, таким образом, общая распространенность ВПЧ в исследуемой популяции составила 50,8%. Все генотипы, охваченные тестом EUROArray HPV, были идентифицированы в исследуемой популяции, и пятью наиболее распространенными генотипами HPV были HPV 16 (30,6%), HPV 31 (15,0%), HPV 42 (13,0%), HPV 53 (11,7%) и HPV. 51 (9,1%). На рис. 1 показано распределение различных генотипов ВПЧ высокого и низкого риска независимо от цитологических результатов и возраста у проанализированных женщин.

Распределение генотипов ВПЧ по данным цитологии шейки матки и по возрасту

Что касается цитологических результатов и возрастных групп, анализируемых женщин отслеживали на предмет распределения высокого риска и двух типов ВПЧ низкого риска, в то время как неклассифицированные ВПЧ были исключены. В таблице 2 показана распространенность типов ДНК ВПЧ в зависимости от возраста и цитологического статуса шейки матки. Среди женщин с нормальной цитологией общая частота инфицирования ВПЧ составила 37,6% (213 из 567), а в группе женщин с цитологическими отклонениями – 46.3% (348 из 751) для ASCUS, 70,6% (96 из 136) для LSIL и 82,9% (34 из 41) для HISL/ASCH. В ВПЧ-положительных случаях самая высокая распространенность HR ВПЧ была зарегистрирована в HSIL/ASCH (100%). затем LSIL (95,8%), ASCUS (92,7%) и NILM (84,5%). В отличие от этих результатов, LR HPV чаще выявлялись в LSIL (2,1%), тогда как эти типы не были обнаружены в группе HSIL/ASCH.

Распространенность ВПЧ

и распределение типов ВПЧ высокого и низкого риска среди различных возрастных групп представлены в таблице 2.Показано, что распространенность ВПЧ достоверно связана с возрастом (p>0,05). Наибольшая распространенность ВПЧ отмечена среди женщин моложе 25 лет (48,6%) и 25–34 лет (55,7%). Распространенность LR ВПЧ варьировала от 2,7% в самой молодой возрастной группе (<25 лет) до отсутствия инфекции в самой старшей возрастной группе (> 55 лет).

Частота групп 1, 2А, 2В, 3 и неклассифицированных генотипов ВПЧ, связанных с цитологическим диагнозом

На следующем этапе ДНК-положительные образцы ВПЧ были проанализированы в соответствии с классификацией IARC.В таблице 3 показан относительный вклад 30 типов ВПЧ в целом в корреляции с цитологическими данными. Для сравнения, генотипы ВПЧ группы 1 были обнаружены в 77,8% HSIL/ASCH и 55,0% NILM, в отличие от группы 2B, которые чаще выявлялись в 15,2% LSIL. Также в каждой цитологической группе чаще встречались ВПЧ 16 (30,6%), 31 (15%) и ВПЧ 51 (9,1%). Генотип HPV 16 был заметно выше в группе HSIL/ASCH и выявлялся на 48,6%.

ВПЧ 6 и 11, которые не классифицируются как канцерогенные (группа 3), были обнаружены у 7.4% NILM, но ни в одном случае HSIL/ASCH. Шесть возможных канцерогенов — HR (группа 2B) часто обнаруживались у женщин с нормальной цитологией (14,8%) и легкими аномалиями (ASCUS и LSIL), но с меньшей частотой при поражениях HSIL/ASCH (7,4%). Среди 2В ВПЧ 53 показал самую высокую частоту 11,7%, независимо от цитологических результатов. Неклассифицированные типы ВПЧ были обнаружены в одинаковом процентном соотношении во всех цитологических группах: 20,7%, 19,1%, 16,3% и 13,0% NILM, ASCUS, LSIL и HSIL/ASCH соответственно (таблица 3), где HPV 42 (13.0%) постоянно присутствует.

Распространенность одиночной и множественной ВПЧ-инфекции

Коинфекция двумя и более типами ВПЧ наблюдалась у 45,6% (347 из 760) с учетом всех ДНК-положительных образцов ВПЧ. Женщины с положительным результатом на один генотип ВПЧ составили 54,3% (413 из 760), тогда как 25,9% (197 из 760) женщин были положительными на двойную инфекцию, 11,6% (88 из 760) на тройную инфекцию и 8,2% (62 из 760) имели четыре или более инфекций.Процент единичной инфекции значительно увеличился с 49,6% в подгруппе с нормальной цитологией до 53,5% в группе LSIL и до 61,1% в группе HSIL/ASCH (p<0,05). Двойные и тройные ВПЧ-инфекции были одинаково распределены во всех цитологических группах, в то время как коинфекции четырьмя и более типами ВПЧ не были обнаружены в группе HSIL/ASCH (табл. 4).

Пять наиболее распространенных генотипов ВПЧ (ВПЧ 16, 31, 53, 42 и 51) были проанализированы на предмет их присутствия при множественных инфекциях. Среди них ВПЧ 53 был значительно более распространенным генотипом, обнаруживаемым при множественных инфекциях (80.9%), за которыми следуют ВПЧ 31 (66,7%), ВПЧ 51 (66%), ВПЧ 42 (65,7%) и ВПЧ 16 (61,8%) (рис. 2).

Обсуждение

Это исследование предоставляет полезную информацию о частоте инфицирования ВПЧ и распределении типов ВПЧ по данным цитологии и возраста в когорте участников из провинции Воеводина, Сербия. Насколько нам известно, это первая работа, в которой изучается такой широкий спектр типов ВПЧ в этой популяции. По данным теста EUROArray на ВПЧ всей группы из 1495 непривитых женщин распространенность ДНК ВПЧ составила 50.8%. Наблюдаемая распространенность неудивительна, поскольку в исследование были включены женщины с различными цитологическими данными. Эти результаты аналогичны нашим предыдущим исследованиям [11,13] и согласуются с другими исследованиями, проведенными в европейских странах, в которых сообщалось о распространенности ВПЧ от 17,2% до 88,9% среди женщин с различными цитологическими поражениями [16,17]. Более высокий процент положительных результатов на ДНК ВПЧ у женщин с нормальными цитологическими результатами 37,6% по сравнению со средним мировым показателем 11–12% можно отнести к исследуемой когорте, которая наблюдалась по удобному типу выборки.Пациенты с цитологией NILM были отобраны для исследования, потому что у них были аномальные результаты при кольпоскопии. На некоторые социально-демографические характеристики и сексуальное поведение обследованного населения, такие как количество сексуальных партнеров в течение всей жизни и высокая доля молодых сексуально активных участников, может влиять более высокая распространенность ВПЧ. В настоящем исследовании выявлена ​​связь распространенности ВПЧ с возрастом участников. Наибольшая распространенность ВПЧ выявлена ​​у женщин моложе 35 лет.Такие данные ожидаемы и соответствуют данным, представленным в других европейских странах [18,19]. Важной причиной относительно высокой распространенности ВПЧ, вероятно, является использование теста ДНК ВПЧ, который охватывает более широкий спектр генотипов. Тест EUROArray HPV охватывает 18 типов ВПЧ HR с использованием системы классификации, основанной на новых молекулярных данных об онкогенных характеристиках некоторых дополнительных генотипов. Кроме того, с помощью теста EUROArray HPV можно обнаружить двенадцать генотипов, обозначенных как типы ВПЧ низкого риска, которые имеют тот же путь передачи, что и типы ВПЧ высокого риска.В этом исследовании было подтверждено, что все 30 генотипов, покрываемых тестом EUROArray HPV, циркулируют среди женщин в провинции Воеводина. Для оценки течения и риска ВПЧ-инфекции полезно определять распространенность ВПЧ на уровне типа, что позволяет различать распространенность ВПЧ высокого и низкого риска и, таким образом, улучшить индивидуальную оценку риска рака шейки матки. Этот подход особенно удобен для диагностических анализов в рамках скрининга на ВПЧ [6]. При оценке клинической эффективности теста EUROArray HPV с помощью сертификационных мониторов VALGENT этот тест соответствует международным критериям для его использования в скрининге рака шейки матки [20].

Выяснение вклада, особенно новых генотипов ВПЧ, вызывающих канцерогенез шейки матки, будет важно для оценки потенциального воздействия профилактических вакцин и программ скрининга рака. По этой причине среди женщин нашего региона мы проанализировали частоту каждого типа ВПЧ, который IARC отметил как канцерогенный, вероятно канцерогенный и, возможно, канцерогенный для человека. Преобладание специфического генотипа всего с 12 канцерогенными (группа 1) генотипами, где наблюдалось 55.0%, 57,6%, 61,4% и 77,8% в NILM, ASCUS, LSIL и HSIL/ASCH соответственно. Наиболее распространенные 12 типов ВПЧ во всем мире соответствовали 12 типам ВПЧ, отнесенным к группе 1. Они также очень часто встречались у женщин Воеводины. Среди них наиболее распространенным был ВПЧ 16, а ВПЧ 31, 33, 51 и 58 последовательно идентифицировались, но с меньшей частотой. Эти результаты согласуются с ранее опубликованными нами данными [9–13]. Однако при наблюдении за распространенностью типов ВПЧ из группы 1 среди женщин с наиболее тяжелым поражением шейки матки, таких как HSIL и ASCH, мы заметили, что наиболее распространенными типами были HPV16 (50%), HPV 52 (11.1%), ВПЧ 58 (11,1%), ВПЧ 51 (11,1%), а ВПЧ 18 обнаружены в 5,5% случаев. В ткани карциномы по данным Stamenkovic et al. были обнаружены ВПЧ 16 (80,39%), ВПЧ 33 (7,84%), ВПЧ 58 (5,88%), ВПЧ 18 (1,96%), ВПЧ 45 (1,96%) и ВПЧ 53 (1,96%) [10]. ВПЧ 16 и ВПЧ 18 обычно считаются наиболее важными онкогенными вирусами, на долю которых приходится более 70% всех случаев рака шейки матки, диагностированных во всем мире [21–23]. В данной работе подтверждается высокая частота и онкогенный потенциал ВПЧ 16 типа, а также более низкая частота ВПЧ 18 при тяжелых поражениях шейки матки и карциноме шейки матки [9–13].Разница между ВПЧ 16 и ВПЧ 18 может быть связана с тем, что аденокарциномы встречаются гораздо реже, чем плоскоклеточные карциномы. Кроме того, это несоответствие в распространенности конкретного типа ВПЧ может быть связано с небольшой когортой HSIL/ACH в этом исследовании. Кроме того, возможно, что многие из типов, наиболее часто обнаруживаемых в настоящем исследовании, не обязательно прогрессируют в рак шейки матки, в то время как ВПЧ 18, который менее распространен в Сербии, с большей вероятностью прогрессирует в инвазивный рак.

С помощью теста EUROArray HPV впервые на территории Воеводины удалось оценить распространенность шести типов (ВПЧ 26, 53, 66, 70, 73, 82) из ​​группы 2А/2В.Все шесть ВПЧ были обнаружены в группе женщин с нормальной цитологией и легкими отклонениями (ASCUS и LSIL). Однако у женщин с поражениями высокой степени, такими как HSIL/ASCH, мы обнаружили только три типа: HPV 53 (2,7%), 73 (5,5%) и 82 (2,7%). Эти результаты согласуются с исследованиями, проведенными другими авторами, которые установили, что ВПЧ группы 2А/2В циркулируют среди женщин во всем мире в разном процентном соотношении [17,24–26]. Тем не менее, pHR были идентифицированы как одиночные ВПЧ-инфекции примерно в 3% тканей рака шейки матки [21], что поставило вопрос об их потенциальной переклассификации [2,27].Халек и др. сообщили, что восемь типов ВПЧ pHR, когда они присутствуют в виде единичной инфекции при раке шейки матки, используют тот же молекулярный механизм, что и любой из хорошо известных онкогенных типов [21]. Тем не менее, авторы указали, что перед включением этих типов ВПЧ в программы первичной и вторичной профилактики для всего населения необходимо провести тщательную оценку эффективности и рентабельности [21]. Основываясь на данных этого исследования, было установлено, что типы ВПЧ pHR циркулируют среди инфицированных женщин нашего региона и были обнаружены в низком проценте, особенно среди женщин с поражением HSIL/ASCH.Это говорит о том, что типы pHR ВПЧ требуют рассмотрения каждого типа как отдельного агента и мониторинга их распространенности в будущих исследованиях.

Интересно, что мы выявили девять неклассифицированных генотипов (40, 42, 43, 44, 54, 61, 72, 81, 89) с общей распространенностью 20,7%, 19,1%, 16,3% и 13,0% при NILM, ASCUS, LSIL. и HSIL/ASCH соответственно. Следует отметить, что ВПЧ 42 входит в пятерку основных типов ВПЧ, обнаруженных в настоящем исследовании. Этот тип был стабильно частым во всех цитологических подгруппах, часто в сочетании с другими типами ВПЧ.В нескольких исследованиях сообщалось о наличии этого типа при различных поражениях шейки матки. Однако точная роль HPV42 изучена недостаточно [17,25,28]. Данные исследования Guimera et al. предполагают, что может быть сдвиг в определении роли ВПЧ 42 типа. Согласно их результатам, ВПЧ 42 и 70 демонстрируют диффузное окрашивание p16, что характерно для типов ВПЧ высокого риска. Авторы предположили, что эти типы могут быть связаны с плоскоклеточным типом злокачественного новообразования [29].

В этом исследовании множественные инфекции были обнаружены у 45 человек.6%. Столь высокий процент множественных инфекций ставит вопрос о перекрестном заражении. Однако в тесте EuroArray HPV используются встроенные элементы управления, такие как положительный контроль ДНК и контроль перекрестного загрязнения, которые обеспечивают надежность результатов теста. Кроме того, EUROArray HPV по сравнению с Anyplex II HPV28 показал высокий коэффициент соответствия для генотип-специфического обнаружения [30]. Наблюдаемые данные, скорее всего, являются следствием различных комбинаций «неклассифицированных генотипов» и «возможно канцерогенных для человека типов ВПЧ» с HR-типами ВПЧ.Это могла быть случайная закономерность, а не определенная тенденция взаимодействия между этими типами. Более того, до сих пор не решены вопросы случайного или синергетического взаимодействия множественных инфекций [31]. Множественные инфекции чаще встречались при NILM, ASCUS и LSIL, включая два или более типов ВПЧ, чем при HSIL. Принимая во внимание тот факт, что пациенты, инфицированные несколькими типами ВПЧ, нуждаются в постоянном наблюдении для предотвращения прогрессирования поражений шейки матки в рак, скрининг генотипа и количества ВПЧ может предоставить важную информацию для диагностики инфекций и дальнейшего ведения пациентов и прогноза.

Одной из целей этого исследования было создание научной основы для внедрения вакцинации против ВПЧ в Сербии. Наши результаты подчеркивают важность внедрения вакцинации против ВПЧ в нашем регионе, которая обеспечит прямую защиту от типов ВПЧ, которые чаще всего связаны с канцерогенными изменениями и чаще всего циркулируют среди населения Воеводины. Согласно имеющимся данным, потенциальное воздействие четырехвалентных вакцин против ВПЧ составляет около 50%, в то время как использование невалентной вакцины может предотвратить более 84% предраковых поражений шейки матки, выявленных в этом исследовании.

Выводы

Хотя это исследование не включает всех женщин из провинции Воеводина Сербия, результаты этого исследования свидетельствуют о высоком проценте онкогенных генотипов ВПЧ в группе инфицированных женщин. Эти данные подтверждают необходимость введения вакцины против ВПЧ в национальную программу иммунизации и интеграции тестов ДНК ВПЧ в программы скрининга рака шейки матки. Также нельзя было получить данные о некоторых типах ВПЧ с помощью ранее использовавшихся методов, поскольку тест EUROArray HPV позволил впервые в нашем регионе зафиксировать частоту «возможно канцерогенных типов», таких как 53, 73 и 82.Было бы важно продолжить изучение редких и необычных генотипов ВПЧ и их возможную связь с поражением шейки матки. Данные, полученные в этом исследовании, могут быть очень полезны для оценки поведения этих инфекций и связанных с ними поражений, а также для планирования соответствующих инструментов для скрининга ВПЧ и будущего внедрения вакцины.

Каталожные номера

  1. 1. Рабочая группа IARC по оценке канцерогенных рисков для человека. Биологические агенты.Том 100 Б. Обзор канцерогенов человека. IARC Monogr Eval Carcinog Risks Hum. 2012; 100:1–441. пмид: 23189750.
  2. 2. Шиффман М., Клиффорд Г., Буонагуро Ф.М. Классификация слабоканцерогенных типов вируса папилломы человека: устранение пределов эпидемиологии на грани. Заразить Агент Рак. 2009;4:8. пмид: 19486508.
  3. 3. Бувар В., Баан Р., Страйф К., Гросс Ю., Секретан Б., Эль Гиссасси Ф. и др. Обзор человеческих канцерогенов. Часть B: биологические агенты.Ланцет Онкол. 2009; 10: 321–322. пмид: 19350698.
  4. 4. Martel C, Plummer M, Vignat J, Franceschi S. Бремя рака во всем мире, связанное с ВПЧ, по локализации, стране и типу ВПЧ. Инт Джей Рак. 2017; 141:664–670. пмид: 28369882.
  5. 5. Бруни Л., Альберо Г., Серрано Б., Мена М., Гомес Д., Муньос Дж. и др. Вирус папилломы человека и связанные с ним заболевания в мире. Сводный отчет от 17 июня 2019 г. [Дата доступа]. Доступно по адресу: https://www.hpvcentre.net/statistics/reports/XWX.пдф.
  6. 6. Бурд Э.М. Лабораторное тестирование вируса папилломы человека: меняющаяся парадигма. Clin Microbiol Rev. 2016; 29: 291–319. пмид:268
  7. 7. Национальное регулирование. Уредба о национальной программе раннего выявления карциномы грлича матери. Сл. гласник РС, бр. 73/2013 и 83/2013. Доступно по адресу: http://www.skriningsrbija.rs/files/File/Nacionalni_program_ranog_otkrivanja_karcinoma_grlica_materice.pdf. (на сербском).
  8. 8. Правильник о иммунизации и начину застите лековима (“Сл.гласник РС», бр. 82/2017). 2017; Доступно по: https://www.zczajecar.com/images/dokumenta/doc2017/3.11.-PRAVILNIK-O-IMUNIZACIJI-I-NA%C4%8CINU-ZA %C5%A0TITE-LEKOVIMA-Sl.-glasnik-RS-br.-82-2017.pdf (на сербском языке)
  9. 9. Кнежевич А., Алексич Г., Солдатович И., Банко А., Йованович Т. Цервикальная папилломавирусная инфекция человека в Сербии: факторы риска, распространенность и распределение генотипов у женщин с нормальной цитологией шейки матки. Arch Biol Sci. 2012;64:1277–1283.
  10. 10. Стаменкович М., Кнежевич А., Кнежевич И., Кузманович И., Каралич Д., Миленкович С. и др.Генотипы вируса папилломы человека высокого риска при карциноме шейки матки сербских женщин: распространение и связь с патогистологическими данными. Биопрепараты. 2016; 44:412–416. пмид: 27461126.
  11. 11. Ковачевич Г., Николич Н., Йованович-Галович А., Хрнякович-Цветкович И., Вулета Д., Патич А. и др. Частота двенадцати канцерогенных типов вируса папилломы человека среди женщин из региона Южная Бачка, Воеводина, Сербия. Терк J Med Sci. 2016;46:97–104. пмид: 27511341.
  12. 12.Тасич Д., Лазаревич И., Кнежевич А., Тасич Л., Пикула А., Перишич З. Влияние экологических и поведенческих кофакторов на развитие заболеваний шейки матки у женщин, инфицированных HR-ВПЧ, в Сербии. Эпидемиол инфекции. 2018;146:1714–1723. пмид: 29923470.
  13. 13. Ковачевич Г., Милошевич В., Кнежевич П., Кнежевич А., Кнежевич И., Радованов Дж. и др. Распространенность онкогенного вируса папилломы человека и генетическое разнообразие в гене L1 HPV16 HPV 18 HPV31 и HPV33 обнаружены у женщин из провинции Воеводина, Сербия.Биопрепараты. 2019;58:57–63. пмид:30795963.
  14. 14. Наяр Р., Уилбур, округ Колумбия. Пап-тест и Bethesda 2014. Acta Cytol. 2015;59:121–132. пмид: 25997404.
  15. 15. TIBCO, 2017: Software Inc. Statistica (система программного обеспечения для анализа данных), версия 13.
  16. 16. Кьяер С.К., Брейгельманс Г., Мунк С., Юнге Дж., Уотсон М., Ифтнер Т. Распространённость среди населения, типо- и возрастное распределение ВПЧ среди женщин до введения программы вакцинации против ВПЧ в Дании.Инт Джей Рак. 2008; 123:1864–1870. пмид: 18661520.
  17. 17. Аргири Э., Папаспиридакос С., Цимплаки Э., Михала Л., Мириокефалитаки Э., Папассидери I и др. Поперечное исследование распространенности типов ВПЧ в зависимости от возраста и цитологии. BMC Infect Dis. 2013;13:53. пмид: 23363541.
  18. 18. Смит Дж.С., Меленди А., Рана Р.К., Пимента Дж.М. Возрастная распространенность инфекции вирусом папилломы человека среди женщин: глобальный обзор. Дж Адолеск Здоровье. 2008;43:С5–25. пмид: 18809145.
  19. 19. Мелони А., Пилия Р., Кампанья М., Усаи А., Масия Г., Каредда В. и др. Распространенность и молекулярная эпидемиология папилломавирусной инфекции у итальянских женщин с цитологическими аномалиями шейки матки. J Общественное здравоохранение Res. 2014;3:157. пмид: 25170506.
  20. 20. Вити Дж., Поляк М., Оштрбенк А., Бхатия Р., Альканьис Боада Э., Корналл А.М. и др. Валидация теста EUROArray HPV с использованием структуры VALGENT. Джей Клин Вирол. 2018;108:38–42. пмид:30223253.
  21. 21.Halec G, Alemany L, Lloveras B, Schmitt M, Alejo M, Bosch FX и др. Ретроспективное международное исследование и Группа изучения временных тенденций ВПЧ, Ретроспективное международное исследование и Группа изучения временных тенденций ВПЧ. Патогенная роль восьми вероятно/возможно канцерогенных типов ВПЧ 26, 53, 66, 67, 68, 70, 73 и 82 при раке шейки матки. Джей Патол. 2014; 234:441–451. пмид: 25043390.
  22. 22. Clifford GM, Smith JS, Plummer M, Muñoz N, Franceschi S. Типы вирусов папилломы человека при инвазивном раке шейки матки во всем мире: метаанализ.Бр Дж Рак. 2003; 13:88:63–73. пмид:12556961.
  23. 23. де Санхос С., Квинт В.Г., Алемани Л., Гераэтс Д.Т., Клаустермайер Дж.Е., Лловерас Б. и др. Ретроспективное международное исследование и Группа изучения временных тенденций ВПЧ. Атрибуция генотипа вируса папилломы человека при инвазивном раке шейки матки: ретроспективное перекрестное всемирное исследование. Ланцет Онкол. 2010; 11:1048–1056. пмид: 20952254.
  24. 24. Отеро-Мотта А.П., Ордонес Дж.Л., Гонсалес-Селадор Р.А., Ривас Б., Гарсия Масиас М.Д., Буллон А. и др.Распространенность генотипов вируса папилломы человека в цитологических аномалиях у невакцинированных женщин, проживающих на северо-западе Испании. Апмис. 2011; 119: 204–15. пмид: 21284738.
  25. 25. Martins TR, de Oliveira CM, Rosa LR, de Campos Centrone C, Rodrigues CL, Villa LL и др. Распределение генотипа ВПЧ у бразильских женщин с поражением шейки матки и без него: корреляция с цитологическими данными. Вирол Дж. 2016; 13:138. пмид: 27515763.
  26. 26. Эрраес-Эрнандес Э., Альварес-Перес М., Наварро-Бустос Г., Эскивиас Дж., Алонсо С., Анейрос-Фернандес Дж. и др.HPV Direct Flow CHIP: новый метод генотипирования вируса папилломы человека, основанный на прямой ПЦР из экстрактов неочищенных клеток. Дж. Вироловые методы. 2013; 193:9–17. пмид: 23680093.
  27. 27. Клиффорд Г.М., Хауэлл-Джонс Р., Франчески С. Оценка канцерогенности типов вирусов папилломы человека по соотношению одиночной/множественной инфекции при раке шейки матки. Инт Джей Рак. 2011; 129:1792–4. пмид: 21140454.
  28. 28. Аннунциата С., Стеллато Г., Грегги С., Санна В., Курсио М.П., ​​Лосито С. и др. Распространенность «неклассифицированных» генотипов ВПЧ среди женщин с аномальной цитологией.Заразить Агент Рак. 2018;13:26. пмид:30061920.
  29. 29. Гимера Н., Льоверас Б., Линдеман Дж., Алемани Л., ван де Сандт М., Алехо М. и др. Случайная роль вирусов папилломы человека 6, 11, 42, 44 и 70 с низким уровнем риска в аногенитальной карциноме, определяемой методом лазерной микродиссекции/ПЦР: результаты глобального исследования. Ам Дж. Сург Патол. 2013;37:1299–310. пмид: 24076770.
  30. 30. Лацубая А., Тапп Дж., Нгуен Т., Фишер М., Арбин М., Вейерс С. и др. Аналитическая оценка эффективности Anyplex II HPV28 и Euroarray HPV для генотипирования образцов шейки матки.Диагностика Microbiol Infect Dis. 2016; 85: 318–322. пмид: 27156793.
  31. 31. Хаджиа М, Сохраби. Возможные синергетические взаимодействия между множественными генотипами ВПЧ у женщин, страдающих генитальной неоплазией. Азиатский Pac J Рак Prev. 2018;27:785–789. пмид: 29582635.

Распространенность инфекции папилломавируса человека и распределение типов среди уйгурских женщин в Синьцзяне, северо-запад Китая

Введение

Рак шейки матки является вторым по распространенности типом гинекологический рак в развивающихся странах, с заболеваемостью и уровень смертности уступает только раку молочной железы в Китае (1).В 2018 году было зарегистрировано 106 000 новых случаев. рака шейки матки и 33 000 смертей в Китае (2). Вирус папилломы человека (ВПЧ) был доказано, что они являются причиной многих заболеваний репродуктивного тракта и является основной причиной рака шейки матки (3,4). По степени риска возникновения опухоли, связанной с инфекции различными штаммами ВПЧ, эти штаммы можно разделить на типы высокого риска (HR-HPV) и низкого риска (LR-HPV). Особенно, персистирующая инфекция HR-HPV является основной причиной цервикального рак и рак ротоглотки (5), в то время как инфекция LR-HPV в основном приводит к остроконечным кондиломам (4).

Поскольку ВПЧ играет важную роль в естественной этиологии рака шейки матки, скрининг ВР-ВПЧ является более чувствительным и рентабельнее, чем другие методы скрининга (6). В последние годы широкомасштабная вакцинация проекты были реализованы во многих странах и профилактический эффект вакцин против ВПЧ в отношении заболеваний, связанных с ВПЧ, было подтверждено в различных исследованиях (7,8). В 2014, Гардасил 9, вакцина, защищающая от ВПЧ 6, 11, 16, 18, 31, 33, 45, 52 и 58, был одобрен Управлением по контролю за продуктами и лекарствами США. Запущено администрирование и его приложение.Тем не менее, Гардасил 9 не охватывает все типы HR-HPV, которые могут привести к раку шейки матки. и распространенность типов ВПЧ зависит от географии, с определенная степень вариации в разных странах и регионах (9).

В Китае, хотя некоторые исследования проводится для оценки распространенности и заболеваемости ВПЧ генотипов в Юньнани, Хэнани и Циндао, большинство из них основаны на небольшие образцы (10–12). провинции Синьцзян, расположенной в северо-западная часть Китая относительно неосвоена экономическую и культурную точки зрения.Есть большой уйгурский населения в этом регионе и распространении ВПЧ, о которых сообщается в предыдущие исследования были исследованы только на небольшом количестве субъектов (13). Однако ни один предыдущий опрос проводил какой-либо скрининг большой выборки в этой популяции.

Следовательно, необходимо исследовать Распространенность и распределение типов ВПЧ у уйгурских женщин в Провинция Синьцзян, северо-запад Китая. В настоящем исследовании более крупный размер выборки (12 165) населения был проверен для оценки распространенность и тип распространения инфекции ВПЧ в Синьцзяне.То текущие результаты будут способствовать оценке потенциала экономическая эффективность скрининга и вакцинации против ВПЧ в Синьцзяне провинция.

Материалы и методы
Исследуемая популяция

В настоящее исследование были включены женщины из 12 деревень в Уезд Зепу, провинция Синьцзян. Всего 12 165 уйгурских женщин. посещала больницу матери и ребенка и амбулаторно клиник и выразили готовность пройти курс лечения рака шейки матки просмотр с января 2015 по декабрь 2017.Темы были включались, если они соответствовали следующим критериям: i) история полового деятельность; отсутствие текущей беременности, менструации и лактации; ii) нет история гормональной терапии в течение последних 6 месяцев; iii) нет истории рак; iv) отсутствие в анамнезе операции на шейке матки, лучевой терапии или химиотерапия; и v) отсутствие в анамнезе лечения инфекции ВПЧ.

Анализ ДНК ВПЧ

Всего было протестировано 12 165 образцов ВПЧ. Liquid Bead Microarray (Медицинский лабораторный центр CapitalBio), который способен обнаруживать 18 типов ВПЧ-ВПЧ (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 53, 56, 58, 59, 66, 68, 73, 82 и 83) и 10 типов LR-ВПЧ (6, 11, 40, 42, 43, 44, 54, 61, 70 и 81).

Приборы и реактивы

A Многофункциональная проточная матрица Luminex 200 (термо Fisher Scientific, Inc.), амплификация генов Mastercycler Gradient прибор (Eppendorf). ДНК экстракция, ПЦР-амплификация, гибридизация с покрытием из бисера, цифровая обработка сигналов, биотиновые универсальные праймеры, биотиновая маркировка β-глобиновые праймеры для ПЦР (таблица SI), и суспензионные шарики Luminex и гибридизация плавающих микросфер зонд был предоставлен Tellgen Corporation.

Сбор образцов шейки матки

Клетки слущивания шейки матки включенных женщин были собраны клиницистом с помощью специальной цервикальной щетки. Каждый цервикальный образец помещали в 2,5 мл пробирки для отбора проб с специальный раствор для сохранения клеток (корпорация Tellgen). Все пробы были доставлены в лабораторию при -20°C и испытаны в течение 48 ч.

Экстракция ДНК

Образцы в растворе для консервации были тщательно перемешивают перед помещением 1 мл каждого образца в центрифужная пробирка.Супернатант собирали после центрифугирование при 21 578 × g в течение 5 мин при 4°C, и нуклеиновая кислота экстрагировали с помощью набора для выделения нуклеиновых кислот после промывки с обычным солевым раствором. Наконец, образец ДНК растворяли в 50 мкл. элюирующий буфер (Tellgen Corporation) и хранят при -20°С.

Luminex жидкофазный грунт для стружки дизайн

Выявление генотипов ВПЧ в тканях с помощью Luminex технология жидкофазного чипа была выполнена с помощью ПЦР-амплификации использование универсальных праймеров, охватывающих разные подтипы ВПЧ; эти праймеры нацелены на зону высокой защиты фрагментов L1 ВПЧ в образцы.В то же время для количественной оценки экспериментального процесса и свести к минимуму ошибки пробоотбора и приборов, внутренний контроль содержащие β-глобиновые праймеры для ПЦР для обнаружения аугментированных Был включен ген β-глобина.

Типирование и гибридизация ВПЧ анализ

Гибридизация потока множественной ПЦР использовалась для обнаружения Инфекция ВПЧ в ДНК, выделенной из образцов, в том числе 18 типы ВР-ВПЧ (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 53, 56, 58, 59, 66, 68, 73, 82 и 83) и 10 типов LR-HPV (6, 11, 40, 42, 43, 44, 54, 61, 70 и 81).Всего 5 мкл каждой экстрагированной ДНК образец использовали для ПЦР-амплификации. ПЦР проводили при 94°C в течение 30 сек, затем при 58°С в течение 30 сек и при 72°С в течение 30 сек в течение 5 циклы. Затем проводили ПЦР при 94°С в течение 30 с, затем при 55°C в течение 30 секунд и 72°C в течение 30 секунд в течение 35 циклов, с окончательным удлинение при 72°С в течение 5 мин. Продукты ПЦР, полученные вышеуказанным способом методы быстро гибридизовали при 94°С в течение 5 мин и при 48°С в течение 5 мин. 30 минут. Анализы гибридизации и связанные с ней данные были выполнено с использованием многофункциональной потоковой решетки Luminex 200 система (Thermo Fisher Scientific, Inc.) и соответствующий ему Программное обеспечение для анализа данных xPONENT® (версия 3.1; Thermo Fisher Scientific, Inc.) соответственно.

Статистический анализ

Статистический анализ выполнен с использованием SPSS версия 22 для Windows (IBM Corp.) для расчета общая и типовая распространенность ВПЧ. Все генотипы от единичные и множественные инфекции рассчитывались индивидуально. Эти данные были стратифицированы по возрасту (≤35, 36–40, 41–45, 46–50, 51–55, 56–60 лет). и ≥61 года). Критерий χ2 использовался для сравнения распространенность между разными возрастными группами.P<0,05 (двусторонний) был расценивается как указание на статистически значимое различие.

Результаты
Распространенность инфекции ВПЧ в провинция Синьцзян

Всего было первоначально рассмотрено и всего 12 165 человек (средний возраст 44,55 ± 7,41 года). лет) были включены в последующие анализы после того, как 52 человека были исключены из дальнейшего анализа из-за отсутствия данных о ВПЧ. генотип. Распространенность инфекций ВПЧ представлена ​​в таблице I.Среди 12 165 человек общий ВПЧ-положительный показатель составил 9,34% (1136/12165). То HR-HPV-положительный показатель составил 7,41% (901/12 165). Среди ВПЧ-позитивных женщин, 936 были положительными на один тип ВПЧ (936/1136, 82,39% инфекции ВПЧ; 936/12165, 7,70% всех проб) и 200 были положительный результат на несколько типов (200/1136, 17,61% инфекций ВПЧ; 200/12165, 1,64% всех проб). Кроме того, 79,31% (901/1136) имели инфекции HR-HPV, 15,32% (174/1136) имели инфекции LR-HPV и только 5.37% (61/1136) имели инфекции как HR-, так и LR-ВПЧ.

Таблица I.

Распространенность инфекции ВПЧ в разные возрастные группы.

Таблица I.

Распространенность инфекции ВПЧ в разные возрастные группы.

936 (7.69)

174 (1.43)
Возрастная группа (лет) Средний возраст (лет) Всего (n) Холост инфекция Множественные инфекция HR-HPV инфекция LR-HPV инфекция HR и LR-HPV инфекция Итого ВПЧ-положительные
≤35 33.91±2,21 1050 66 (6.29)   11 (1.05)   58 (5,52) 18 (1,71) 1(0,10)   77 (7,33)
36-40 38,16±1,42 2954 200 (6,77)  41 (1.39) 180 (6.09) 47 (1.60) 14 (0,47) 241 (8.16)
41-54 43.09 ± 1.41 3552 252 (7.09) 51 (1.44) 238 (6,70) 49 (1.38) 49 (1.38) 16 (0,45) 303 (8.53)
46-50 47.80 ± 1.45 2215 191 (8.62) 35 (1.58) 183 (8.26) 30 (1.35) (0.59) 226 (10.20)
51-55 52,77 ± 1 41 1220 111 (9.10) 22 (1,80) 117 (9,59) 11 (0,90) 5(0.41) 133 (10,90)
56-60 57,87±1,45 742 78 (10,51)   14 (1,89)   70 (9,43) 18 (2,43) 4(0,53)   92 (12,40)
≥61 63,45±2,32 432   38 (8.80)   26 (6,02) 55 (12,73) 1 (0,23) 1(0,23)   64 (14,81)
Итого 44.55 ± 7.41 12165 936 (7.69) 200 (1.64) 901 (7.41) 61 (0.50) 1136 (9.34)
Возрастная распространенность ВПЧ инфекция

Распределенная по возрасту распространенность ДНК ВПЧ в различных возрастных группах представлены в Таблице I. Распространенность ВПЧ-инфекции была значимо различаются между возрастными группами (χ2=41,574, P<0,001) и был самым высоким в группе ≥61 года (14.81%, 64/432). ВПЧ-положительные показатели увеличиваются с возрастом (χ2=38,880, р<0,001). ВПЧ-положительный показатель был значительно выше у женщин в возрасте 50 лет и старше (12,07%, 289/2394), чем у женщин до 50 лет (8,67%, 847/9771; χ2=26,307, р<0,001). Распространенность множественного ВПЧ инфекции и частота инфицирования HR-HPV также были самыми высокими в группа ≥61 года (6,02%, 26/432 и 12,73%, 55/432). То распространенность множественных инфекций ВПЧ и частота ВР-ВПЧ инфекции также увеличивались с возрастом (χ2=16.485, р<0,001; χ2=4,619, р=0,032). Увеличение ВПЧ распространенность была наиболее выражена в группах 56–60 и старше 60 лет. годы. Распространенность единичных инфекций ВПЧ и LR-HPV инфекции были самыми высокими в группе 56–60 лет (10,51%, 78/742 и 2,43%, 18/742), но инфекции LR-HPV и единичные инфекции HPV были самый низкий в группах ≥61 и ≤35 лет соответственно.

Распространение и генотипы ВПЧ инфекции

Положительный показатель и распространение ВПЧ инфекции перечислены в таблице II.Наиболее распространенными типами HR-HPV были HPV16 (30,28%), HPV31 (10,65%), HPV68 (9,42%) и HPV52 (7,48%), а также наиболее распространенные типы LR-HPV. были ВПЧ54 (10,48%), ВПЧ42 (3,26%), ВПЧ6 (2,99%) и ВПЧ61. (1,94%).

Таблица II.

Распространенность каждого генотипа ВПЧ.

Таблица II.

Распространенность каждого генотипа ВПЧ.

Генотип ВПЧ Положительные образцы (n) Положительная ставка в Всего 12 165 проб (%) Доля среди 1136 ВПЧ-позитивных образцов (%)
HR-HPV
  16 344 2.83 30,28
18 32 0,26 2,82
31 121 0,99 10,65
33 16 0,13 1,41
35 30 30 0.25 0.25 2.64
39 60378 0,49 0,49 5.28 5.28
45 37 0.30 3,26
51 62 0,51 5,46
52 85 0,70 7,48
53 17 0,14 1,50
56 29 29 0.24 0,24 255 9
58 49 49 0,40378 431 431
59 49 0.40 4,31
66 59 0,48 5,19
68 107 0,88 9,42
73 6 0,05 0,53
82 14 14 0.12 1,23 1,23
83 10 0,08 0.08 0.88
LR-HPV
  6 34 0.28 2,99
11 7 0,06 0,62
40 10 0,08 0,88
42 37 0,30 3,26
43 7 7 0.06 0,06 0.62
44 44 5 0,04 0,04 0,44
54 119 0.98 10,48
61 22 0,18 1,94
70 4 0,03 0,35
81 3 0,02 0,26

Среди положительных случаев распространенность каждого Тип HR-HPV значительно различался между людьми разного возраста. группы (χ2=6,454, P=0,011; рис. 1). ВПЧ 16, 31, 68 и 52 были последовательно четыре наиболее распространенных типа HR-HPV в каждом возрасте группа.Распространенность ВПЧ16 была самой высокой среди лиц в возрасте ≥61 года. группа, за которой следуют группы 51–55 и 56–60 лет. То распространенность ВПЧ31 была самой высокой в ​​группе ≥61 года, за ними следуют группы 56–60 и 51–55 лет. Однако распространенность ВПЧ52 была самой высокой в ​​возрастной группе 56–60 лет. отличался от HPV16 и HPV31.

Распространенность каждого типа LR-HPV также была значительно отличается в разных возрастных группах (χ2=12,991, р<0,001). Наиболее распространенными типами были HPV54, 6, 42 и 61 в каждой возрастной группе.ВПЧ54 был самым распространенным тип во всех возрастных группах, кроме группы 51–55 лет. Однако разница в частоте встречаемости была незначительной. остальные три типа ВПЧ в каждой возрастной группе (рис. 2).

Среди 200 положительных случаев на множественные типы ВПЧ, три генотипа показали сравнительно более высокие положительные показатели: HPV16 (39,00%), HPV31 (21,00%) и HPV54 (20,50%) (рис. 3). Среди 200 инфицированных с несколькими типами ВПЧ у 169 была двойная инфекция (169/200, 84,50%), у 26 была тройная инфекция (26/200, 13.00%) и 5 ​​были заражены четыре или более типов ВПЧ (5/200, 2,50%). Самый распространенный комбинации генотипов: HPV16 + HPV54 (n=30, 15,00%), HPV16 + HPV31 (n=16, 8,00%) и HPV16 + HPV 68 (n=12, 6,00%) (таблица SII).

Обсуждение

Обнаружение ДНК ВПЧ имеет большое значение для скрининг и профилактика рака шейки матки. Тем не менее, шейный скрининг рака начался сравнительно поздно в Китае, и по-прежнему существует огромный разрыв между Китаем и некоторыми развитыми странами в сроки скрининга, диагностики и лечения (14).Данные о распространении генотипов ВПЧ в разных регионах еще недостаточно полны, особенно в отдаленных районах западного Китая, и молекулярные эпидемиологические данные все еще нуждаются в дальнейшем улучшении, чтобы обеспечить научную основу для профилактики, лечения и элиминация заболеваний, связанных с ВПЧ-инфекцией.

В настоящем исследовании 28 распространенных онкогенных типов ВПЧ были обнаружены в Синьцзян-Уйгурском автономном районе Китая, каждый со своим характером распространения.Были определенные различия в распределении частоты и подтипов инфекции ВПЧ в разных регионах и изучение этих различий будет полезно в профилактике и лечении ВПЧ-инфекции и разработка вакцин против ВПЧ.

Настоящее исследование показало, что общее количество ВПЧ уровень инфицирования среди женщин, прошедших скрининг, составил 9,34%. То общая распространенность ВПЧ в разных частях Китая колеблется от 7,23% (Чаочжоу, Южный Китай) до 36,55% (Харбин, Северо-Восточный Китай) (15–17).Текущие результаты были аналогичны для Нинся, Шаньси, Цинхая и северо-запада Ганьсу (7,67–9,03%) (18), но ниже, чем у предыдущее исследование населения Синьцзяна (10,96%) (13). Разница может быть в основном из-за тот факт, что настоящее исследование, основанное на скрининге населения, имели гораздо больший размер выборки. С увеличением осведомленность о раке шейки матки, многочисленные бессимптомные люди участвовать в скрининге на ВПЧ и определять распространенность ВПЧ в настоящем исследовании, вероятно, больше отражает фактическую распространенность.В азиатских странах распространенность ВПЧ колеблется от от 1,60 до 14,26% у женщин без каких-либо аномалий шейки матки (19). Кроме того, распространенность ВПЧ может зависеть от типа набора (амбулаторное или на основе скрининга), методы обследования и временной интервал для Тест на ДНК ВПЧ (20).

На основании настоящих результатов возрастной ВПЧ построена кривая распространенности инфекции. Кривая распространенности, представляют ли тотальные инфекции ВПЧ, множественные штаммы HPV или HR-HPV проявлял только один максимум, который был у женщин. в возрасте 61 года и старше.В других исследованиях сообщается о бимодальном возрасте. распределение с пиком у женщин в возрасте ≤20 лет и вторым пик у женщин старше 60 лет (21–24). Так как субъекты, прошедшие скрининг на рак шейки матки в этой области были старше 30 лет, определить ВПЧ было невозможно. заболеваемости среди молодых женщин, что может быть причиной пик, о котором ранее сообщалось у молодых самок, не наблюдался. В на самом деле, пик у молодых самок можно объяснить тем, что что у молодых женщин может быть несколько сексуальных партнеров, а также снижение иммунитета к инфекции ВПЧ (25).Следует уделять больше внимания второй пик ВПЧ-инфекции у женщин старше 60 лет. Высота Частота инфицирования ВПЧ у женщин в менопаузе может быть связана с физиологические и иммунные нарушения, вызванные персистенцией вируса или реактивация латентного ВПЧ (26,27). Таким образом, выявление ВПЧ с помощью программ скрининга рака шейки матки имеет клиническое значение для женщин в перименопаузе. ВПЧ-профилактика вакцины дают больше клинических преимуществ при вакцинации в раннем возрасте (8). Таким образом, предполагается, что девочки-подростки в возрасте 13–15 лет могут получить больше пользы, чем старше женщины со статусом ВПЧ-инфекции будут участвовать в программе вакцинации против ВПЧ в Китае (28).

Наиболее распространенные подтипы ВПЧ-ВПЧ среди женщин во всем мире ВПЧ 16, 18, 52, 31, 58, 33 и 51, хотя их распространенность варьируется в зависимости от региона (29). В настоящем исследовании были выявлены четыре наиболее распространенных типа ВПЧ-ВПЧ. HPV16, 31, 68 и 52. Аналогично результатам предыдущих исследований. (15,30–32), HPV16 был наиболее распространенным HR-HPV. Однако нынешние результаты были отличается тем, что HPV31 и HPV52 были более распространены в настоящее время. когорты, чем HPV18. Другим заслуживающим внимания моментом является то, что HPV68 не распространены в Европе, Северной Америке и Австралии (29,33,34), но HPV68 был третьим наиболее распространенным штаммом в настоящем исследовании. раскрытие уникального распределения HR-HPV у уйгурских женщин в Синьцзян.Это говорит о региональном разнообразии и динамичных изменениях. характеристика ВПЧ-инфекции и что ВПЧ-инфекция распределения могут проявлять неоднородность среди различных национальности и регионы. Образцы настоящего исследования были полученный из Кашгара на юге Синьцзяна, который имеет большое уйгурское население, и размер выборки был относительно большим; следовательно, полученные результаты должны быть репрезентативными в определенной степени. Следует отметить, что Гардасил 9, 9-валентная вакцина против ВПЧ, была одобрена для использования в Китае в 2018 году.По сравнению с 2-валентным и 4-валентным Вакцины против ВПЧ, 9-валентная вакцина против ВПЧ обеспечивает защиту от >90% случаев рака шейки матки (35), тем самым способствуя предотвращению рака шейки матки. 9-валентная вакцина нацелен на ВПЧ высокого риска 16, -18, -52, -58, -31, -33 и -45, а также как низкий риск HPV6 и -11. В связи с распространением генотипов ВПЧ демонстрируя очевидные региональные различия, выяснение распределение типов ВР-ВПЧ в конкретном регионе, как было выполнено в настоящем исследовании, способствует таргетной вакцине против ВПЧ разработки и клинического применения.

Некоторые исследования показали, что инфекция наличие нескольких типов ВПЧ существенно влияет на продолжительность типоспецифические эпизоды и развитие рака шейки матки. Файф и др. (36) сообщили о корреляция между высокой заболеваемостью раком шейки матки и заражение несколькими типами ВПЧ. Кроме того, Тортье и др. (37) показали, что коинфекция увеличивает продолжительность инфекции. Perrons и др. (38) сообщили что коинфекция ВПЧ68 и -16 увеличивает риск плоскоклеточные интраэпителиальные поражения высокой степени и рак шейки матки по сравнению с таковым только с HPV16 или только с HPV68.Из-за своего воздействия на возникновение рака шейки матки, распространенность множественных Инфекция ВПЧ имеет большое значение в прогнозе пациентов с персистирующей инфекцией. Настоящее исследование показало что доля множественных инфекций у ВПЧ-положительных женщин составила 17,61%, что ниже, чем в Пекине (27,73%), и Шаньси (24,31%) (21). Большинство общие комбинации генотипов в данной исследуемой популяции были HPV16 + HPV54 и HPV16 + HPV31, которые отличаются от тех, определено Zhao et al (39), а именно HPV16 + HPV52 и HPV52 + ВПЧ58.

Настоящее исследование имеет несколько ограничений. Во-первых, в исследовании отсутствовала информация о поведении участников. лица. Некоторые исследования показали, что поведенческие факторы может увеличить риск заражения ВПЧ и рака шейки матки, но отсутствие такой информации в настоящем исследовании затрудняет проанализировать влияние этих переменных потенциального воздействия на развитие рака шейки матки (40). Кроме того, настоящее исследование только основное внимание уделялось данным о распространении генотипов ВПЧ в Синьцзяне. провинция.Поскольку цитологические данные не были собраны у зарегистрированных физические лица; следовательно, цитологическая классификация шейки матки поражений было неизвестно, что может повлиять на исходную распространенность. В Кроме того, из-за отсутствия образцов от самок моложе 30 лет, эти результаты могут не полностью отражать общее население уйгурских женщин в Синьцзяне. Кроме того, определенные исследования показали, что инфекция ВПЧ может вызывать не только рак шейки матки, но рак ротоглотки и рак головы и шеи (5), предполагая требование сосредоточить внимание на связи между инфекцией ВПЧ и ротоглоточной рак и рак головы и шеи у уйгурских женщин в будущем исследования.Кроме того, получение данных о заражении ВПЧ в Уйгурские мужчины вышли за рамки настоящего исследования, в то время как это можно рассматривать как потенциальное направление будущих исследований.

В заключение, настоящее исследование выявило распространение различных типов ВПЧ и распространенность ВПЧ инфекция по генотипам с вакцинами, доступными для >12 000 Уйгурские женщины в скрининговой популяции из провинции Синьцзян, северо-запад Китая. Эта информация поможет оценить потенциал рентабельность скрининга и вакцинации против ВПЧ в Синьцзяне.В Кроме того, настоящие результаты имеют важное значение для разработка и применение вакцин против ВПЧ, предполагая, что более Типы ВПЧ (такие как ВПЧ68 и 54) следует рассматривать для включения в следующем поколении вакцин против ВПЧ.

Дополнительный материал
Вспомогательные данные
Благодарности

Не применимо.

Финансирование

Настоящее исследование было поддержано Наукой и Проект технологического плана производства и строительства Синьцзяна Корпус (грант No.2013BB015).

Наличие данных и материалов

Наборы данных, использованные и/или проанализированные в ходе настоящего исследование можно получить у соответствующего автора по разумной запрос.

Вклад авторов

XY и MJ участвовали в разработке концепции исследования и дизайн. XY, XH и YH собирали и собирали данные. КЛ, ХН и MZ занимались анализом и интерпретацией данных. XY составлено первоначальная рукопись. Все авторы прочитали и одобрили окончательный вариант рукопись.

Одобрение этики и согласие на участвовать

Исследование одобрено этической экспертизой комитет Медицинского колледжа Университета Шихэзи (Шихэзи, Китай; № утверждения 2015-058-01). Участвующие предметы предоставлены письменное информированное согласие.

Согласие пациента на публикацию

Не применимо.

Конкурирующие интересы

Авторы заявляют, что у них нет конкурирующих интересы.

Ссылки

1

Kim K, Zang R, Choi SC, Ryu SY и Kim JW: Текущее состояние гинекологического рака в Китае.Дж. Гинекол Онко. 20:72–76. 2009. Просмотр статьи: Google Scholar

2

Арбин М., Вейдерпасс Э., Бруни Л., де Санхосе С., Сарайя М., Ферли Дж. и Брей Ф.: Оценки заболеваемости и смертность от рака шейки матки в 2018 году: всемирный анализ. Ланцет Глоб Здоровье. 8: Е191–Е203. 2020. Просмотр статьи : Google Scholar : PubMed/NCBI

3

Walboomers JM, Jacobs MV, Manos MM, Bosch FX, Kummer JA, Shah KV, Snijders PJ, Peto J, Meijer CJ и Muñoz N: Вирус папилломы человека является необходимой причиной инвазивной цервикальной инвазии. рака во всем мире.Джей Патол. 189:12–19. 1999. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI

.

4

Форман Д., Мартель К.Д., Лейси С.Дж., Соержоматарам И., Лорте-Тиулан Дж., Бруни Л., Вигнат Дж., Ферлей Дж., Брей Ф., Пламмер М. и Франчески С.: Глобальное бремя человеческого папилломавирус и сопутствующие заболевания. вакцина. 30 (Приложение 5): F12–F23. 2012. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI

.

5

Джаярадж Р., Кумарасами С., Роям М.М., Sabarimurugan S и Baxi S: прогностические последствия патологических лимфатические узлы при ВПЧ-положительном раке ротоглотки: клинические достоверность и стратегии для рутинной клинической практики.Оральный онкол. 92:99–100. 2019. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI

6

Чжао Ф.Х., Линь М.Дж., Чен Ф., Ху С.И., Чжан Р., Белинсон Дж.Л., Селлорс Дж.В., Франчески С., Цяо Ю.Л. и Касл П.Е.; Группа скрининга рака шейки матки в Китае: производительность Анализ ДНК вируса папилломы человека высокого риска в качестве первичного скрининга рак шейки матки: объединенный анализ данных отдельных пациентов из 17 популяционных исследований из Китая. Ланцет Онкол. 11:1160–1171.2010. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI

.

7

Вэй Л, Се С, Лю Дж, Чжао И, Чен В, Чжао C, Wang S, Liao X, Shou Q, Qiu Y, Qiao Y и Saah AJ: Эффективность Четырехвалентная вакцина против вируса папилломы человека против персистентной инфекции и заболевания половых органов у китайских женщин: рандомизированный, плацебо-контролируемое исследование с последующим наблюдением в течение 78 месяцев. вакцина. 37:3617–3624. 2019. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI

8

Джулиано А.Р., Джоура Э.А., Гарланд С.М., Ха В.К., Иверсен О.Э., Кьер С.К., Ференци А., Курман Р.Дж., Роннетт Б.М., Столер М.Х., и др.: Эффективность девятивалентной вакцины против ВПЧ против сопутствующих заболеваний и окончательная терапия: сравнение с историческим плацебо Население.Гинекол Онкол. 154:110–117. 2019. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI

9

Цзян Л, Тянь Х, Пэн Д, Чжан Л, Се Ф, Bi C, Wang R, Wang J и Qi D: Распространенность ВПЧ и генотип распределение среди женщин в провинции Шаньдун, Китай: анализ 94 489 результатов генотипирования ВПЧ в крупнейшем независимом лаборатория патологии. ПЛОС Один. 14:e02103112019. Просмотр статьи : Академия Google : PubMed/NCBI

10

Ван XC, Sun LQ, Ма L, Li HX, Ван XL, Wang X, Yun T, Meng NL и Lv D: распространенность и генотип Распространение вируса папилломы человека среди женщин из провинции Хэнань, Китай.Азиатский Pac J Рак Prev. 15:7333–7336. 2014. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI

.

11

Bi Q, Zhang L, Zhao Z, Mu X, Zhang M и Ван П. Распространенность вируса папилломы человека и распределение генотипов среди амбулаторных больных женского пола в Циндао, Восточный Китай. J Med Virol. 87:2114–2121. 2015. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI

.

12

Ли Зи, Лю Ф, Ченг С, Ши Л, Ян Зи, Ян J, Shi L, Yao Y и Ma Y: Распространенность инфекции ВПЧ среди 28 457 человек Китаянки в провинции Юньнань на юго-западе Китая.Научный представитель 6:210392016. Просмотр статьи : Академия Google : PubMed/NCBI

13

Ван Дж, Тан ДД, Ван К, Ван Дж, Чжан З, Chen Y, Zhang X и Ma C: Распространенность и распространение генотипа ВПЧ в течение 2009–2018 гг. в Синьцзяне, Китай: базовые обследования перед массовым Вакцинация против ВПЧ. BMC Женское здоровье. 19:9. Просмотр статьи : Академия Google : PubMed/NCBI

14

Ронг-Мин В., Цзин-Цзин П. и Чжи-Сюэ Ю. Интерпретация ASCCP 2012 года по лечению аномального рака шейки матки Скрининг-тесты и предшественники рака (II).Журнал международных Акушерство и гинекология. 42:2015.PubMed/NCBI

15

Ли Дж., Хуан Р., Шмидт Дж. Э. и Цяо Ю. Л.: Эпидемиологические особенности папилломавирусной инфекции (ВПЧ) среди женщин, проживающих в материковом Китае. Азиатский Pac J Рак Prev. 14:4015–4023. 2013. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI

.

16

Чен К., Се Л.С., Цин З.Р., Ли Л.Дж., Луо З.И., Линь М., Чжан С.М., Чен В.З., Линь Б.З., Лин К.Л. и др.: Эпидемиологические характеристика папилломавирусной инфекции в сельской местности. Чаочжоу, восточная провинция Гуандун, Китай.ПЛОС Один. 7:e3214

. Просмотр статьи : Академия Google : PubMed/NCBI

17

Sun B, He J, Chen X, He M, He Z, Wang Y, Шанг К., Ю Л. и Вэй Л.: Распространенность и распределение генотипов Вирус папилломы человека в Харбине, Северо-Восточный Китай. Арка Вирол. 159: 1027–1032. 2014. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI

.

18

Цао Б.В., Ю Дж.Л., Хе Х., Ли С.Т. и Чжао Ю.Л.: Мета-анализ взаимосвязи между инфекцией ВПЧ и Рак пищевода у населения Китая.Джей Кэпитал Медикал Университет. 97:148–150. 2010.

19

Клиффорд ГМ, Галлус С., Эрреро Р., Муньос Н., Snijders PJ, Vaccarella S, Anh PT, Ferreccio C, Hieu NT, Matos E, и др.: Мировое распространение типов вируса папилломы человека в цитологически нормальные женщины в Международном агентстве исследований об исследованиях распространенности рака ВПЧ: объединенный анализ. Ланцет. 366: 991–998. 2016. Просмотр статьи : Google Scholar

20

Уускюла А., Калс М., Косенкраниус Л., МакНатт LA и DeHovitz JJ: Популяционная типоспецифическая распространенность Папилломавирусная инфекция человека высокого риска в Эстонии.BMC Заражение Дис. 10:632010. Просмотр статьи : Академия Google : PubMed/NCBI

21

Wu EQ, Liu B, Cui JF, Chen W, Wang JB, Lu L, Niyazi M, Zhao C, Ren SD, Li CQ и др.: Распространенность типоспецифический вирус папилломы человека и результаты Папаниколау на китайском языке женщины: многоцентровое популяционное перекрестное исследование. Рак вызывает контроль. 24:795–803. 2013. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI

.

22

Цзин Л, Чжун С, Чжун З, Хуан В, Лю И, Ян Г., Чжан С., Цзоу Дж., Цзин С. и Вэй С.: Преобладание человека папилломавирусная инфекция в провинции Гуандун, Китай: A популяционный опрос 78 355 женщин.Секс Трансм Дис. 41:732–738. 2014. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI

.

23

Ван Р, Го СL, Висман ГБ, Шууринг Э, Wang WF, Zeng ZY, Zhu H и Wu SW: Общенациональная распространенность папилломавирусная инфекция и распределение вирусных генотипов у 37 города в Китае. BMC Infect Dis. 15:2572015. Просмотр статьи : Академия Google : PubMed/NCBI

24

Wang CH, Garvilles RG и Chen CY: Характеристика папилломавирусной инфекции человека на севере Тайваня.J Med Virol. 82:1416–1423. 2010. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI

.

25

Торрес-Поведа К., Руис-Фрага И., Мадрид-Марина В., Чавес М. и Ричардсон В.: инфекция ВПЧ высокого риска распространенность и связанные с ней кофакторы: популяционное исследование в женщины-бенефициары ISSSTE, посещающие скрининг на ВПЧ и ранние Программа выявления рака шейки матки. БМЦ Рак. 19:12052019. Просмотр статьи : Академия Google : PubMed/NCBI

26

Альтхофф К.Н., Пол П., Берк А.Е., Висциди Р., Sangaramoorthy M и Gravitt PE: Корреляты цервикально-влагалищных заболеваний человека выявление папилломавируса у женщин в перименопаузе.J Женское здоровье (лиственница). 18:1341–1346. 2009. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI

.

27

Канг Л.Н., Касл П.Е., Чжао Ф.Х., Джеронимо Дж., Chen F, Bansil P, Li J, Chen W, Zhang X и Qiao YL: потенциальный изучение возрастных тенденций папилломавирусной инфекции высокого риска в сельский Китай. BMC Infect Dis. 14:962014. Просмотр статьи : Академия Google : PubMed/NCBI

28

Чен Р. и Вонг Э.: Осуществимость всеобщая программа вакцинации против ВПЧ в Шэньчжэне, Китай: здоровье анализ политики.Общественное здравоохранение BMC. 19:7812019. Просмотр статьи : Академия Google : PubMed/NCBI

29

де Санхосе С, Диас М, Кастельсаге Х, Clifford G, Bruni L, Muñoz N и Bosch FX: распространенность и Распределение генотипов ДНК вируса папилломы человека шейки матки у женщин с нормальной цитологией: метаанализ. Ланцет Infect Dis. 7: 453–459. 2007. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI

.

30

Sun LL, Jin Q, Li H, Zhou XR, Song ZQ, Cheng XM, Tao T, Liang B, Xu L, Wang YR и др.: На основе населения. изучение распространенности и факторов риска для человека папилломавирусная инфекция в Цюйцзине провинции Юньнань, юго-запад Китай.Вирол Дж. 9:1532012. Просмотр статьи : Академия Google : PubMed/NCBI

31

Аргири Э., Папаспиридакос С., Цимплаки Э., Михала Л., Мириокефалитаки Э., Папассидери И., Даскалопулу Д., Циаусси И., Маджиакос Г. и Панотопулу Э.: поперечное исследование распространенности типов ВПЧ в зависимости от возраста и цитологии. BMC заражает Дис. 13:532013. Просмотр статьи : Академия Google : PubMed/NCBI

32

Цзян И, Брассард П, Северини А, Мао И, Ли Ю.А., Ларош Дж., Чатвуд С., Корриво А., Кандола К., Хэнли Б. и др.: Распространенность вируса папилломы человека и его влияние на шейки матки; дисплазия в Северной Канаде.Заразить Агент Рак. 8:252013. Просмотр статьи : Академия Google : PubMed/NCBI

33

Бувар В., Баан Р., Страйф К., Гросс Ю., Секретан Б., Эль Гиссасси Ф., Бенбрахим-Таллаа Л., Гуха Н., Фриман С., Galichet L, et al: Обзор канцерогенов человека – Часть B: Биологические агенты. Ланцет Онкол. 10:321–322. 2009. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI

.

34

Йошикава Х.: Прогресс и трудности Вакцинация против ВПЧ.Уирусу. 59:243–248. 2009 г. (на японском языке). Просмотр статьи : Академия Google : PubMed/NCBI

35

Huh WK, Joura EA, Giuliano AR, Iversen OE, де Андраде Р.П., Олт К.А., Варфоломей Д., Честеро Р.М., Федрицци Э.Н., Hirschberg AL, et al: Окончательная эффективность, иммуногенность и безопасность анализы девятивалентной вакцины против вируса папилломы человека у женщин в возрасте 16–26 лет: рандомизированное двойное слепое исследование. Ланцет. 390:2143–2159. 2017. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI

36

Файф К. Х., Крамер Х. М., Шредер Дж. М. и Браун DR: Обнаружение нескольких типов вируса папилломы человека в нижней половых путей коррелирует с дисплазией шейки матки.J Med Virol. 64: 550–559. 2001. Посмотреть Статья : Google Scholar : PubMed/NCBI

37

Trottier H, Mahmud S, Prado JC, Sobrinho JS, Costa MC, Rohan TE, Villa LL и Franco EL: в зависимости от типа продолжительность папилломавирусной инфекции: последствия для человека скрининг на папилломавирус и вакцинация. J заразить дис. 197: 1436–1447. 2008. Посмотреть Статья : Google Scholar : PubMed/NCBI

38

Перронс С., Джелли Р., Клетер Б., Квинт В. и Грань N: Обнаружение персистентного вируса папилломы человека высокого риска инфекции гибридным захватом II и SPF10/LiPA.Джей Клин Вирол. 32:278–285. 2005. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI

.

39

Чжао Р., Чжан В.И., Ву М.Х., Чжан С.В., Пан Дж., Zhu L, Zhang YP, Li H, Gu YS и Liu XZ: Вирус папилломы человека инфекция в Пекине, Китайская Народная Республика: A популяционное исследование. Бр Дж Рак. 101: 1635–1640. 2009. Просмотр статьи : Академия Google : PubMed/NCBI

40

Лай Ч., Чао А., Чанг К.Дж., Хуан К.С., Ван LC, Hsueh S, Lin CT, Wu TI, Jao MS и Chou HH: Фактор возраста и значение распространенности вируса папилломы человека определенного типа в женщины с нормальной цитологией шейки матки.Эпидемиол инфекции. 140:466–473. 2012. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI

.

Распространенность и распределение генотипов вируса папилломы человека среди женщин племени хакка в Китае – Zeng

Введение

Рак шейки матки является вторым наиболее распространенным видом рака у женщин во всем мире. В 2008 году было диагностировано около 530 000 новых случаев рака шейки матки, и 275 000 женщин умерли от этого заболевания (1). В настоящее время широко признано, что рак шейки матки тесно связан с инфицированием вирусом папилломы человека (ВПЧ).

С помощью секвенирования ДНК было идентифицировано более 150 генотипов ВПЧ, которые можно стратифицировать в соответствии с онкогенным риском. Пятнадцать генотипов четко связаны с развитием аденокарциномы и плоскоклеточного рака шейки матки и поэтому относятся к группе высокого риска: ВПЧ-16, -18, -31, -33, -35, -39, -45, -51, -52, -56, -58, -59, -68, -73 и -82. Двенадцать генотипов либо не являются потенциально онкогенными, либо не участвуют в развитии рака шейки матки и относятся к группе низкого риска: ВПЧ-6, -11, -40, -42, -43, -44, -54, -61, -70, -72, -81 и CP6108 (1,2)

Все больше данных свидетельствует о том, что развитию рака шейки матки способствует множество факторов, включая генетическую предрасположенность или геном хозяина, варианты ВПЧ, коинфекцию ВПЧ и других агентов, а также факторы образа жизни (3).Хотя все генотипы ВПЧ коррелируют с раком шейки матки, на инфекции ВПЧ-16 и ВПЧ-18 приходится около 70% всех случаев.

Распространенность ВПЧ-инфекции широко изучалась, и эпидемиологические характеристики генотипов ВПЧ различаются в зависимости от географического региона (4). Форман и др. . (5) сообщили, что во всем мире распространенность инфекции ВПЧ без аномалий шейки матки составляет от 11% до 12%. де Санхосе и др. . (4) обнаружили, что в целом в Азии и Китае распространенность ВПЧ среди женщин без цитологических аномалий составила 8.0% и 11,4–20,3% соответственно. Однако распространенность инфекции ВПЧ составляет 10% в Гуанчжоу (6), 6,2% в Гонконге (6), 24,5% в Чаочжоу (7), 18,4% в Шэньчжэне (8), 12,6% в Шанхае (9), 13,3. % в Чжэцзяне (10), 13,6% в Шэньяне (11) и 29,9% в Макао (12).

Народ хакка — это отдельная группа ханьских китайцев, говорящая на китайском языке хакка и проживающая в нескольких провинциальных районах Китая. Около 60% народа хакка проживает в провинции Гуандун, особенно на северо-востоке. Город Хэюань в провинции Гуандун — единственный город на материке, в котором проживает только народ хакка.На протяжении веков у хакка сформировались отличительные физиологические характеристики. Основываясь на генетических исследованиях, считается, что хакка произошли от народа хань из северного Китая и отличаются своими уникальными традициями и культурой. Физические характеристики хакка отличаются от характеристик населения северного и южного Китая (13). Однако до сих пор не сообщалось о распространенности и распределении генотипов ВПЧ у женщин племени хакка.

Чтобы оценить эффективность будущей программы вакцинации против ВПЧ, в настоящем исследовании мы выбрали женщин племени хакка, проживающих в городе Хэюань в провинции Гуандун, для изучения распространенности и распределения их генотипов ВПЧ.


Методы

Район исследования и население

Все участники были выявлены в рамках Программы скрининга рака шейки матки в Хэюане и набраны из Женской и детской больницы Хэюаня с января 2012 г. по декабрь 2012 г. Программа представляет собой комплексную программу общественного здравоохранения, которая помогает женщинам, проживающим в Хэюане, получить доступ к раку шейки матки. услуги скрининга. С самого начала в программе проверки приняли участие 8 284 из 736 000 зарегистрированных женщин хакка в Хэюане.Участники были разделены на девять подгрупп в зависимости от их возраста (18–24, 25–29, 30–34, 35–39, 40–44, 45–49, 50–54, 55–59 и 60–65 лет). ).

Образцы пациентов и соответствующая клиническая информация были получены в соответствии с протоколами, утвержденными Этическим комитетом больницы. Все пациенты дали письменное информированное согласие. Участники были исключены по следующим причинам: тотальная гистерэктомия в анамнезе, острое воспаление половых органов, девственность, половые сношения в предыдущие 3 дня или беременность.После исключения геномная ДНК для обнаружения и генотипирования ВПЧ была успешно извлечена из оставшихся 8 177 женщин.

Интервью с анкетой

Участницы были опрошены обученным интервьюером с помощью стандартизированной анкеты, которая была разработана для записи общих демографических данных, физического и психического состояния, семейного положения (да или нет), менструального статуса и истории деторождения. Интервью было проведено лицом к лицу на местном языке.

Сбор образцов шейки матки

Все образцы шейки матки были собраны обученными врачами. Врачи сначала удаляли выделения ватными тампонами, а затем собирали отслоившиеся клетки шейки матки с помощью цервикальной щетки [Пекинский институт геномики (BGI), Шэньчжэнь, Китай]. Щетку вводили на 1–1,5 см в эндоцервикальный канал и вращали от 3 до 5 полных оборотов. Каждую щеточку, содержащую клеточный материал, хорошо смешивали с 1,5 мл транспортной среды для образцов и сразу же хранили при 4 °C.Все образцы были промаркированы кодовым номером.

Обнаружение ВПЧ и генотипирование

Обнаружение и генотипирование ВПЧ

выполняли с использованием платформы MassARRAY (Sequenom, Сандиего, Калифорния, США), то есть времяпролетного масс-спектрометра с лазерной десорбцией/ионизацией с использованием матрицы, как описано ранее (14,15). Образцы ДНК ВПЧ были извлечены из образцов шейки матки с использованием коммерческого набора магнитных шариков (Chemagen, Pekinelmer, Waltham, MA, USA) в соответствии с инструкциями производителя и амплифицированы с помощью технологии полимеразной цепной реакции (ПЦР).Было успешно секвенировано и идентифицировано 16 генотипов ВПЧ, в том числе 14 генотипов высокого риска (ВПЧ-16, -18, -31, -33, -35, -39, -45, -51, -52, -56, -58, – 59, -66 и -68) и 2 типа низкого риска (ВПЧ-6 и -11). Вся экстракция ДНК, ПЦР-амплификация, рекомбинация плазмид ВПЧ, обнаружение масс-спектра и анализ данных были выполнены BGI в Шэньчжэне.

Статистический анализ

Все статистические анализы были выполнены с использованием статистического пакета SPSS 17.0 (IBM, Armonk, NY, USA) для Windows.


Результаты

Распространенность конкретных генотипов ВПЧ

Средний возраст участников составил 41,34 года (диапазон от 18 до 65 лет). Среди 8 177 подходящих участников скрининг генотипа показал, что 1 003 женщины были ВПЧ-позитивными. Общая распространенность ВПЧ составила 12,27% (1003/8177).

Среди 1003 ВПЧ-позитивных женщин 82,75% (830/1003) были инфицированы только одним генотипом ВПЧ, а 17,25% (173/1003) были инфицированы двумя или более ( Таблица 1 ).Из тех, у кого более одного, 82,08% (142/173) были инфицированы двумя генотипами, 15,61% (27/173) тремя, 1,73% (3/173) четырьмя и только один субъект пятью. Пациенты с инфекциями множественного генотипа ВПЧ были классифицированы как все с высоким риском, все с низким риском или сочетанием высокого и низкого риска.

Таблица 1 Распределение множественных ВПЧ-инфекций у ВПЧ-положительных субъектов по количеству случаев
Полная таблица

ВПЧ-52 был наиболее часто выявляемым генотипом, на его долю приходилось 26.81% (269/1003) положительных образцов, за которыми следуют ВПЧ-16 (17,54%), ВПЧ-58 (14,25%), ВПЧ-18 (10,16%), ВПЧ-68 (8,27%), ВПЧ-39 ( 5,68%) и ВПЧ-51 (5,38%). Другие генотипы ВПЧ (-33, -31, -56, -6, -45, -66, -59, -35 и -11) наблюдались менее чем в 5% положительных образцов ( Рисунок 1 ).

Рисунок 1 Распределение типов ВПЧ среди 1003 ВПЧ-положительных женщин племени хакка. ВПЧ, вирус папилломы человека.

Возрастная распространенность общей инфекции ВПЧ

Интересно, что характер распространенности ВПЧ-инфекции в зависимости от возраста представлял собой U-образную кривую (, таблица 2, ).Участники старше 60 лет имели самую высокую распространенность ВПЧ (25%). Участники моложе 24 лет имели второе место по распространенности (22,3%). Распространенность ВПЧ в этих двух группах была заметно выше, чем в группах среднего возраста (от 25 до 59 лет).

Таблица 2 Повозрастной показатель распространенности положительной ВПЧ-инфекции среди 8177 женщин
Полная таблица

Подобно общей картине распределения распространенности ВПЧ, также наблюдалась 2-пиковая (бимодальная) картина распространенности ВПЧ высокого риска, с первым пиком в возрасте 18-24 лет (26.27%) и второй пик в возрасте 60-65 лет (23,36%; , табл. 2 ). Распространенность обоих этих пиков была значительно выше, чем в других возрастных группах.

Возрастная распространенность конкретных типов ВПЧ

Всего выявлено 16 генотипов ВПЧ. ВПЧ-52 был наиболее распространенным типом, идентифицированным в 6 из 9 возрастных групп, то есть во всех, кроме возрастных групп 18–24, 35–39 и 60–65 лет (, рис. 2, ). Комбинированные инфекции ВПЧ-52, ВПЧ-16 и ВПЧ-58 составили 7.19% всех случаев без очевидной связи с какой-либо возрастной группой. Комбинированная инфекция ВПЧ-16 и ВПЧ-18 составила 3,40% всех случаев, при этом явной связи с возрастной группой не наблюдалось. Комбинированные генотипы ВПЧ -52, -16 и -18, а также генотипы ВПЧ -58 и -68 были одинаково распространены параллельно как наиболее распространенные генотипы в возрастной группе 18–24 лет (19,48%) и в возрасте 60 лет. – группа 65 лет (17,5%). В то время как ВПЧ-16 был наиболее распространенным генотипом среди лиц в возрасте 35–39 лет.

Рисунок 2 Возрастная распространенность комбинированных генотипов ВПЧ ВПЧ-16 + ВПЧ-18; ВПЧ-52 + ВПЧ-16 + ВПЧ-18 + ВПЧ-58 + ВПЧ-68; и ВПЧ-52 + ВПЧ-16 + ВПЧ-58.ВПЧ, вирус папилломы человека.

ВПЧ-52, ВПЧ-16 и ВПЧ-18 были тремя наиболее распространенными типами у лиц в возрасте 18–34 лет ( Рисунок 3 ). ВПЧ-52, ВПЧ-16, ВПЧ-58 были тремя наиболее распространенными типами в пяти возрастных группах, охватывающих возраст 35-59 лет. Некоторые генотипы ВПЧ выявлялись только в определенных возрастных группах.

Рисунок 3 Наиболее распространенные генотипы HR-HPV в каждой возрастной группе. ВПЧ, вирус папилломы человека.


Обсуждение

Насколько нам известно, это первое крупномасштабное исследование по изучению генотипов ВПЧ-инфекции у людей племени хакка в Хэюане.Мы обнаружили, что общая распространенность ВПЧ составила 12,27%, что отличается от показателей других городов провинции Гуандун (6-8). Это может быть связано с тем, что, во-первых, образцы в настоящем исследовании были собраны у населения в целом, набранного из городского или прилегающего района Хэюаня, в то время как другие исследователи собрали образцы у населения в клиниках. Во-вторых, в предыдущих исследованиях использовали ПЦР и тест GenoArray для обнаружения и генотипирования ВПЧ, а мы использовали MassARRAY (Sequenom, Сан-Диего, Калифорния, США).Кроме того, в нашем исследовании было выявлено 16 генотипов ВПЧ, в том числе 14 генотипов высокого риска и 2 генотипа низкого риска. Однако в предыдущих исследованиях было обнаружено несколько других генотипов ВПЧ (16).

Предыдущий метаанализ показал, что во всем мире распространенность ВПЧ была самой высокой в ​​более молодых возрастных категориях (<34 лет), со вторым пиком в более старших возрастных категориях (≥45 лет) (4). Мы наблюдали аналогичную картину с пиками распространенности среди лиц в возрасте 18–24 или 60–65 лет. Лю и др. .(6) также сообщили, что в Гонконге пик распространенности ВПЧ-инфекции приходится на возраст 20–29 лет и старше 60 лет. Хотя механизм связи между инфекцией ВПЧ и возрастом неясен, мы предполагаем, что есть несколько возможных причин. Во-первых, это может быть частично связано с более низким уровнем гормонов и более слабой иммунной функцией у женщин в пременопаузе и постменопаузе, которые, следовательно, имеют более низкую способность противостоять инфекции ВПЧ. Во-вторых, другие неизвестные инфекции могут увеличить вероятность заражения ВПЧ.Эти множественные инфекции могут повлиять на восприимчивость женщины к ВПЧ или его стойкость (17). Ли и др. . показали, что изменения микробиоты влагалища у женщин в постменопаузе делают их более восприимчивыми к ВПЧ-инфекции (18). Другое исследование показало, что бактериальный вагиноз был связан с восприимчивостью к инфекции ВПЧ (19). Кроме того, социальная деятельность молодых возрастных групп может снизить иммунитет к ВПЧ и увеличить вероятность заражения.

Сообщалось, что во всем мире ВПЧ-16 является генотипом с самой высокой распространенностью, за ним следуют ВПЧ-18 и ВПЧ-31.Поэтому большинство вакцин против ВПЧ действуют как против ВПЧ-16, так и против ВПЧ-18. Однако в настоящем исследовании мы обнаружили, что ВПЧ-52 был наиболее распространенным генотипом ВПЧ в Хакке, что согласуется с результатами, полученными в Тайване и Японии (4), а также в соседних городах Гуанчжоу (6), Чаочжоу ( 7) и Макао (12). Однако генотипом с наибольшей распространенностью в Гонконге и Шэньчжэне является ВПЧ-16 (6,8).

Кроме того, в настоящем исследовании ВПЧ-52 был наиболее распространенным генотипом ВПЧ в 6 из 9 возрастных групп, а общая распространенность ВПЧ-52 составила 3.29% (269/8177). Это намного выше, чем в Северной Америке, Африке и Восточной Азии, где распространенность ВПЧ-52 составляет 2,1%, 2,4% и 0,7% соответственно (4). Наше исследование показывает, что разработка вакцин против ВПЧ-52 имеет важное значение, особенно в Китае.

В этом исследовании множественные ВПЧ-инфекции были выявлены в 17,25% (173/1003) положительных образцов, а возрастная распространенность множественных ВПЧ-инфекций также демонстрировала пики в возрасте 18–24 и 60–65 лет. Мы предполагаем, что снижение иммунного надзора в младшей и старшей возрастных группах может увеличить риск множественных инфекций ВПЧ.Пирис и др. . (20) также показали, что множественные ВПЧ-инфекции с большей вероятностью вызывают гистологические поражения высокой степени у девочек-подростков и женщин моложе 24 лет. Также следует отметить, что ВПЧ обладает способностью избегать защиты хозяина. Согласно предыдущим исследованиям, люди, инфицированные >2 генотипами ВПЧ, могут иметь повышенный риск развития рака шейки матки (17). Однако взаимодействие различных генотипов при коинфекциях остается неясным, и необходимы будущие исследования, чтобы проверить, существуют ли скоординированные механизмы при коинфекциях.

Хотя мы получили несколько новых результатов в настоящем исследовании, остаются другие важные факторы, которые следует учитывать. Во-первых, мы собрали образцы всего женского населения, а не конкретно больных раком шейки матки. Поэтому результаты и выводы, сделанные в этом исследовании, могут быть неприменимы для оценки распространенности генотипа ВПЧ у женщин, страдающих раком шейки матки. Во-вторых, ВПЧ также вызывает заболевания у мужчин, в том числе рак полового члена; Смит и др. (2) сообщили, что общая распространенность ВПЧ среди мужчин составила 16%. Однако в задачи нашего исследования не входило определение гендерной распространенности ВПЧ-инфекции. Было бы интересно в будущих исследованиях выяснить, соответствует ли распространенность инфекции ВПЧ среди мужчин распространенности инфекции среди женщин, поскольку вакцинация мужчин также считается важной в Соединенных Штатах. Наконец, предыдущие исследования показали, что сексуальное поведение и количество половых партнеров связаны с инфекцией ВПЧ (1).Мы не собирали такую ​​информацию об образе жизни и поэтому не могли оценить роль образа жизни в инфекции ВПЧ. Недостаток информации об образе жизни затрудняет практическое руководство для населения по профилактике инфекции ВПЧ.


Выводы

В заключение, наши результаты показывают, что программа скрининга на инфекцию ВПЧ, а также на рак шейки матки необходима как для пожилых, так и для молодых женщин. Вакцинация и просветительские кампании в отношении инфекции ВПЧ должны начинаться среди более молодых женщин.Текущие результаты должны быть полезными и полезными для разработки вакцин и реализации программ вакцинации.


Благодарности

Мы благодарим Пекинский институт геномики (BGI) в Шэньчжэне за поддержку в обнаружении и генотипировании ВПЧ, а также компанию Medjaden Bioscience за редактирование рукописи. Мы также благодарим доктора Чжунжэнь Ду за критический обзор рукописи. Мы благодарны всем участникам программы скрининга рака шейки матки в Хэюане.


Конфликт интересов: У авторов нет конфликта интересов, о котором следует заявить.

Этическое заявление: Исследование было одобрено этическим комитетом больницы, и от всех пациентов было получено письменное информированное согласие.


Каталожные номера

  1. Vinodhini K, Shanmughapriya S, Das BC, et al. Распространенность и факторы риска ВПЧ-инфекции среди женщин различных провинций мира.Arch Gynecol Obstet 2012;285:771-7. [Перекрестная ссылка] [PubMed]
  2. Smith JS, Gilbert PA, Melendy A, et al. Возрастная распространенность папилломавирусной инфекции у мужчин: глобальный обзор. J Adolesc Health 2011;48:540-52. [Перекрестная ссылка] [PubMed]
  3. де Фрейтас А.С., Гургель А.П., Шагас Б.С. и др. Восприимчивость к раку шейки матки: обзор. Gynecol Oncol 2012;126:304-11. [Перекрестная ссылка] [PubMed]
  4. де Санхосе С., Диас М., Кастельсаге Х. и др. Всемирная распространенность и распределение генотипов ДНК вируса папилломы шейки матки у женщин с нормальной цитологией: метаанализ.Ланцет Infect Dis 2007;7:453-9. [Перекрестная ссылка] [PubMed]
  5. Форман Д., де Мартель С., Лейси С.Дж. и др. Глобальное бремя вируса папилломы человека и связанных с ним заболеваний. Вакцина 2012;30 Приложение 5:F12-23. [Перекрестная ссылка] [PubMed]
  6. Лю С.С., Чан К.И., Леунг Р.К. и др. Распространенность и факторы риска заражения вирусом папилломы человека (ВПЧ) у женщин южного Китая — популяционное исследование. PLoS One 2011;6:e19244. [Перекрестная ссылка] [PubMed]
  7. Chen Q, Luo ZY, Lin M, et al.Распространенность и распределение генотипов инфекций, вызванных вирусом папилломы человека, у женщин, посещающих больницы в Чаочжоу, провинция Гуандун. Asian Pac J Cancer Prev 2012; 13: 1519-24. [Перекрестная ссылка] [PubMed]
  8. Ву Р.Ф., Дай М., Цяо Ю.Л. и др. Вирус папилломы человека у женщин в городе Шэньчжэнь, Китайская Народная Республика, население, типичное для недавней китайской урбанизации. Int J Рак 2007; 121: 1306-11. [Перекрестная ссылка] [PubMed]
  9. Чжан Р., Ши Т.Ю., Рен Ю. и др. Факторы риска заражения вирусом папилломы человека в пригородах Шанхая: популяционное исследование с участием 10 000 женщин.Дж. Клин Вирол 2013; 58: 144-8. [Перекрестная ссылка] [PubMed]
  10. Ye J, Cheng X, Chen X и др. Распространенность и профиль риска папилломавирусной инфекции шейки матки в провинции Чжэцзян, юго-восточный Китай: популяционное исследование. Вирол Дж. 2010; 7:66. [Перекрестная ссылка] [PubMed]
  11. Ли Л.К., Дай М., Клиффорд Г.М. и др. Папилломавирусная инфекция человека в городе Шэньян, Китайская Народная Республика: популяционное исследование. Бр Дж Рак 2006;95:1593-7. [Перекрестная ссылка] [PubMed]
  12. Чуй С.Х., Сето Ю.Т., Лам CW.Вирус папилломы человека у женщин Макао. Общественное здравоохранение 2012;126:600-4. [Перекрестная ссылка] [PubMed]
  13. Чжэн Л., Ли Ю., Лу С. и др. Физические характеристики китайской хакка. Sci China Life Sci 2013; 56: 541-51. [Перекрестная ссылка] [PubMed]
  14. Цзин Л., Чжун С., Чжун З. и др. Распространенность папилломавирусной инфекции в провинции Гуандун, Китай: популяционный опрос 78 355 женщин. Sex Transm Dis 2014; 41: 732-8. [Перекрестная ссылка] [PubMed]
  15. Yi X, Li J, Yu S, et al.Новая система масс-спектрометрии на основе ПЦР для ВПЧ высокого риска, часть I: методы. Ам Дж. Клин Патол 2011; 136: 913-9. [Перекрестная ссылка] [PubMed]
  16. Chen Z, Wang Q, Ding X и др. Характеристики распространенности ВПЧ в провинции Сычуань, Китай. Int J Gynaecol Obstet 2015;131:277-80. [Перекрестная ссылка] [PubMed]
  17. Ведам В., Диви Р.Л., Старкс В.Л. и др. Technol Cancer Res Treat 2014; 13:177-94. [ПубМед]
  18. Ли Дж. Э., Ли С., Ли Х. и др. Ассоциация вагинальной микробиоты с папилломавирусной инфекцией в когорте корейских близнецов.PLoS One 2013;8:e63514. [Перекрестная ссылка] [PubMed]
  19. Олсворт Дж. Э., Льюис В. А., Пейперт Дж. Ф. Вирусные инфекции, передающиеся половым путем, и бактериальный вагиноз: данные Национального обследования состояния здоровья и питания за 2001–2004 гг. Sex Transm Dis 2008; 35: 791-6. [Перекрестная ссылка] [PubMed]
  20. Пирис С., Браво В., Альварес С. и др. Естественное течение гистологически умеренной дисплазии шейки матки у подростков и молодых женщин. Onco Targets Ther 2014;7:2101-6. [PubMed]

Цитируйте эту статью как: Zeng XX, Yan LX, Huang XX, He CH, Liu WG, Yuan WQ, Qiu YP, Liu ZX.Распространенность и распределение генотипов вируса папилломы человека среди женщин племени хакка в Китае. Энн Трансл Мед 2016;4(15):276. doi: 10.21037/атм.2016.05.49

Множественные ВПЧ-инфекции высокого риска распространены среди неоплазии шейки матки и у молодых женщин, проходящих скрининг шейки матки

Внедрение программ скрининга шейки матки на основе цитологии снизило заболеваемость раком шейки матки во всем мире. Следовательно, приветствуется разработка усовершенствованных методов подготовки цитологических препаратов, таких как жидкостная цитология (ЖЦ) и подготовка тонкослойных препаратов.Добавление тестирования на вирус папилломы человека высокого риска (HR-HPV) может еще больше повысить точность программ скрининга. Накапливающиеся данные свидетельствуют о том, что обнаружение персистирующей инфекции одним и тем же типом ВПЧ-ВПЧ выявляет лиц с повышенным риском прогрессирования заболевания, 1, 2 , однако степень и важность множественных инфекций ВПЧ-ВПЧ в прогрессировании неоплазии шейки матки и его управление остается неизвестным. Для изучения этих вопросов необходимо использовать методы генотипирования, которые позволяют отслеживать персистенцию конкретных типов ВПЧ и выявлять инфекции несколькими типами HR-ВПЧ.

«Накапливающиеся данные свидетельствуют о том, что обнаружение персистирующей инфекции одним и тем же типом вируса папилломы человека высокого риска (HR-HPV) выявит лиц с повышенным риском прогрессирования заболевания, однако степень и важность множественных инфекций HR-HPV в прогрессировании неоплазии шейки матки и его руководство остаются неизвестными»

Недавняя директива, изданная шотландским исполнительным органом, способствовала развертыванию цервикального LBC для использования в первичной медико-санитарной помощи в Шотландии.Остаточный материал из образцов LBC является идеальной матрицей для тестирования на ВПЧ. Мы исследовали распространенность и разнообразие ВПЧ-инфекции в популяции, проходящей рутинный скрининг шейки матки в Шотландии, с использованием остаточного материала из образцов LBC. Степень множественных инфекций ВПЧ оценивали и сравнивали с цитологической оценкой неоплазии. Результаты представляют собой исходные данные продольного исследования, предназначенного для изучения влияния обнаружения ВПЧ, множественной инфекции ВПЧ и персистенции определенного типа ВПЧ на прогрессирование неоплазии шейки матки.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Коллекция образцов и предметы

LBC действует с 1999 г. в 15 учреждениях первичной медико-санитарной помощи в Эдинбурге, и на сегодняшний день получено более 23 000 образцов. Этот метод отличается от традиционного мазка Папаниколау тем, что после взятия образца шейки матки его не помещают на предметное стекло, а промывают во флаконе, содержащем раствор цитологического консерванта на спиртовой основе. Небольшой объем полученной клеточной суспензии затем обрабатывается роботизированным устройством для получения предметного стекла с плоским слоем.Утверждается, что этот метод повышает точность цитологической оценки. Он также имеет то преимущество, что остаточная суспензия, не используемая для цитологии, может служить матрицей для микробиологического исследования. Было получено одобрение местного комитета по этике исследований для микробиологического тестирования и получено информированное согласие. В 2000 году мы выбрали подмножество из 3444 случайно отобранных образцов (возрастной диапазон 16,5–78 лет, средний возраст 36,6 лет) для определения распространенности ВПЧ. Персонал первичной медико-санитарной помощи выполнил сбор образцов, плоские предметные стекла были созданы с помощью процедуры ThinPrep®, а цитологическая классификация была выполнена в соответствии с рекомендациями Британского общества клинической цитологии.После цитологического исследования остаточные клетки в образцах центрифугировали при 2800 × g в течение 10 минут и хранили в виде клеточных осадков при -70°C в лизирующем буфере (Qiagen Ltd, Кроули, Западный Суссекс, Великобритания) перед экстракцией нуклеиновой кислоты и ВПЧ. обнаружение.

Обнаружение ВПЧ и генотипирование

Вкратце, автоматизированную экстракцию нуклеиновых кислот из клеточных осадков выполняли на BioRobot 9604® (Qiagen Ltd) с использованием 96-луночных планшетов с силикагелем и реагентов, входящих в состав набора QIAamp® 96 DNA Swab BioRobot.Роботизированный протокол, оптимизированный для образцов LBC, был выполнен, как описано ранее. 3 Обнаружение ВПЧ проводилось с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР) в реальном времени с использованием консенсусных праймеров для ПЦР GP5+/GP6+ на приборе LightCycler™, как описано ранее. 4 Генотипирование ВПЧ-позитивных образцов проводили с помощью линейного анализа гибридизации (LA), 5, 6 , который включал гибридизацию продуктов ПЦР с полоской, содержащей два уровня контрольных зондов β-глобина, 18 зондов HR-HPV (16, 18, 26, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 55, 56, 58, 59, 68, 73, 82, 83) и девять зондов ВПЧ низкого риска (LR-HPV) ( 6, 11, 40, 42, 53, 54, 57, 66, 84) (E McGoogan, неопубликованные данные, 2003 г.). 6 Тип ВПЧ описывался как «тип X», если образец был положительным при ПЦР в реальном времени, но отрицательным при анализе LA.

Измерения распространенности

Женщины были стратифицированы в соответствии с их одновременной степенью цитологического исследования шейки матки, возрастом, обнаружением типа (типов) LR-HPV или HR-HPV и наличием множественных инфекций HPV. Долю множественных инфекций HR-HPV оценивали в зависимости от тяжести неоплазии шейки матки и сравнивали с данными пациентов, инфицированных одним типом HR-HPV.Генотипы ВПЧ ранжировали по частоте обнаружения во всех положительных образцах, а затем по их частоте в цитологически отрицательных образцах, пограничном дискариозе, легком дискариозе и дискариозе высокой степени. Образцы, классифицированные как имеющие дискириоз высокой степени, демонстрировали умеренный или тяжелый дискариоз или признаки подозрения на инвазию.

Статистический анализ данных

При определении распространенности типов HR-HPV и LR-HPV женщины учитывались более одного раза, если у них была множественная инфекция со смесью обоих.Распространенность отдельных типов ВПЧ определяли по их проявлению как при одиночной, так и при множественной инфекции. Множественная ВПЧ-инфекция определялась как обнаружение двух или более типов ВПЧ. Множественная инфекция HR-HPV определялась как наличие двух или более типов HR-HPV с дополнительными типами LR-HPV или без них. Чтобы изучить взаимосвязь между ВПЧ-инфекцией и тяжестью цитологической степени неоплазии шейки матки, а также оценить, была ли значимой разница в возрасте между ВПЧ-положительными и ВПЧ-отрицательными группами, были выполнены тесты χ 2 для линейного тренда и U-тесты Манна-Уитни. .Прочность ассоциации множественных инфекций HR-HPV, в отличие от одиночной инфекции HR-HPV, с цитологической степенью неоплазии шейки матки анализировали с помощью теста χ 2 . Вся статистика была выполнена с использованием программного обеспечения SPSS v11.

РЕЗУЛЬТАТЫ

Цитологический анализ образцов шейки матки

Из 3444 образцов шейки матки, проанализированных с помощью тестирования на ВПЧ и цитологической оценки дискариоза, примерно 10% имели некоторую степень цитологической неопластической аномалии, в том числе 3.3% — пограничный дискариоз, 3,7% — легкий дискариоз и 2,7% — дискариоз высокой степени. Только 0,5% образцов были признаны неудовлетворительными по цитологической оценке (таблица 1).

Таблица 1

Распространенность ВПЧ среди населения, проводящего рутинный скрининг шейки матки в Эдинбурге и Лотиане

Распространенность ВПЧ

ДНК ВПЧ было обнаружено в 705 из 3444 протестированных образцов (20%). Из положительных образцов ВПЧ 114 (16%) были классифицированы как тип X.Таким образом, тенденции распределения типов HR-HPV и LR-HPV в популяции были взяты из оставшихся 591, которые можно было идентифицировать с помощью анализа LA. Пригодность образцов для тестирования на ВПЧ была подтверждена положительными результатами на β-глобин.

Как подробно показано в таблице 1, в целом типы HR-HPV были более распространены, чем типы LR-HPV, даже у лиц, у которых не было обнаружено неоплазии шейки матки. Типы LR-HPV и HR-HPV были обнаружены у 187 (26,5%) и 540 (76,6%) из всех 705 ВПЧ-позитивных лиц, соответственно (что составляет 5.5% и 15,7% от общей численности населения в 3444 человека соответственно). Типы LR-ВПЧ были обнаружены только у 10 из 94 (10,6%) пациентов с дискариозом высокой степени, всегда как часть смешанной инфекции, по крайней мере, с одним другим типом HR-ВПЧ. Исключительно LR-ВПЧ-инфекции у пациентов с дискариозом высокой степени не обнаружены. Распространенность неизвестных/нетипируемых ВПЧ-инфекций при оценке отдельно от ВР-ВПЧ-инфекций не коррелировала с возрастом или цитологическим статусом (таблица 1).

С увеличением тяжести цитологической степени дискариоза увеличивалась распространенность HR-HPV (p < 0.001), при этом HR-HPV обнаружен у 86 из 94 (91,5%) пациентов с дискариозом высокой степени по сравнению с 112 из 129 (86,8%) пациентов с легким дискариозом и 82 из 114 (71,9%) с пограничным дискариозом (таблица 1). ). Когда LR-HPV и неизвестные типы HPV были включены в группу с положительной реакцией на HPV, была выявлена ​​связь между присутствием HPV («любого» типа) и признаками дискариоза. Выявление ВПЧ снижалось с возрастом, при этом наибольшая распространенность (либо HR-HPV, либо LR-HPV, либо «любой» HPV) была обнаружена у женщин моложе 25 лет.Средний возраст тех, у кого ВПЧ положительный (26,610 лет) и отрицательный (37,490 лет), значительно различался (p < 0,001)

Множественные инфекции ВПЧ

Распространенность множественных ВПЧ-инфекций в этой популяции была высокой: 43,3% ВПЧ-положительных образцов гибридизировались более чем с одним типом ВПЧ в анализе LA (таблица 2; рис. 1). Наиболее распространенным типом множественной инфекции ВПЧ были только типы ВПЧ-ВПЧ (таблица 3), с 164 из 705 (23.3%) (705 — общее число выявленных ВПЧ-положительных инфекций), подпадающих под эту категорию. Типы HR-HPV и LR-HPV были обнаружены вместе у 136 из 705 (19,3%), тогда как множественные инфекции исключительно LR-HPV были обнаружены только у шести из 705 (0,8%). Инфекции несколькими типами HR-HPV были обнаружены в 105 из 3089 (3,4%) образцов, отрицательных на неоплазию, и в 38 из 114 (33,3%), 54 из 129 (41,8%) и 38 из 94 (40,4%) образцов с пограничный дискариоз легкой или высокой степени. Не было выявлено повышенной связи (по тесту χ 2 ) между множественной инфекцией ВПЧ-ВПЧ и тяжестью неоплазии по сравнению с единичными инфекциями ВПЧ-ВПЧ, которые были выявлены у 152 (4.9 %) отрицательных проб, но у 44 (38,6 %), 58 (45,0 %) и 48 (51,1 %) пациентов с пограничным, легким и тяжелым дискариозом соответственно. Чуть менее половины инфекций HR-HPV были положительными для более чем одного типа HR-HPV при всех цитологических степенях дискариоза (рис. 1). Также было обнаружено, что распространенность множественных инфекций ВПЧ (всех типов) и множественных инфекций ВПЧ-ВПЧ снижается с увеличением возраста (p < 0,001) (таблица 2).

Таблица 2

Распространенность множественных ВПЧ-инфекций в зависимости от цитологической степени дискариоза и возраста

Таблица 3

Распространение множественной инфекции, содержащей исключительно типы HR-HPV, типы LR и HR-HPV и исключительно типы LR-HPV

Рисунок 1

Распространенность единичных и множественных инфекций, вызываемых вирусом папилломы человека высокого риска (HR-HPV), связанных с одновременной цитологической степенью дискариоза.Отрицательный, отрицательный на дискариоз; Борд, пограничный дискариоз; Легкий, легкий дискариоз; Дискариоз высокой степени, средней или тяжелой степени или подозрение на инвазию.

Обнаружение определенного типа ВПЧ

Большое разнообразие инфекционных типов HR-HPV было выявлено с каждым типом HR-HPV, обнаруженным в анализе LA (таблица 4). В целом, наиболее распространенными типами ВПЧ-ВПЧ были 16 > 18 > 51 > 31 > 52, при этом ВПЧ-16 обнаруживался у 222 из 705 (31,5%) ВПЧ-положительных лиц, что составляет распространенность 6.4% всего населения. Напротив, типы ВПЧ 18, 51, 31 и 52 были обнаружены в меньшем количестве образцов, в пределах от 2,2% до 1,8% от общей популяции. Когда HR-ВПЧ-специфическая инфекция была стратифицирована по цитологической степени дискариоза, ВПЧ-16 показал распространенность 105 из 3089 (3,4%), 69 из 243 (28,0%) и 46 из 94 (48,9%) в образцах с отрицательным, низкой степени (объединенные образцы пограничного и легкого дискариоза) и высокой степени дискариоза, соответственно, тогда как распространенность ВПЧ-18 составила 1.4%, 9,5% и 11,7% для этих трех групп. ВПЧ-31 был вторым наиболее распространенным типом ВПЧ-ВПЧ при дискариозе высокой степени (17 из 94; 18,0%). Интересно, что ВПЧ-73 был обнаружен в 10,6% образцов с высокой степенью дискариоза и только в 5,8% с низкой степенью дискариоза (таблица 3).

Таблица 4

Распространенность типов ВПЧ-ВПЧ в популяции пациентов, прошедших рутинный скрининг шейки матки в Эдинбурге и Лотиане, стратифицированная в соответствии с цитологической степенью дискариоза

ОБСУЖДЕНИЕ

Из-за очень низкого процента (0.5%) цитологически неудовлетворительных отчетов в этой популяции, эта работа поддерживает использование LBC для скрининга шейки матки. Дополнительная работа по классификации 17 880 образцов лейкоцитов, собранных в той же популяции скрининга шейки матки, выявила только 0,6% неудовлетворительных результатов, в отличие от 10% неудовлетворительных образцов, когда были оценены 8670 обычных мазков Папаниколау за предыдущий год (E McGoogan, неопубликованные данные, 2003). Эти данные означают, что скрининг LBC может привести к снижению затрат на первичную помощь и уменьшению беспокойства пациентов. 7 Эффективное время выполнения анализа LBC в сочетании с применением высокопроизводительной системы выделения нуклеиновых кислот, как это было показано в нашем исследовании, подтверждает практичность тестирования на ВПЧ в рутинных условиях.

С глобальной точки зрения Эдинбург представляет собой стабильное, в основном белое население с низкой заболеваемостью раком шейки матки, оцениваемой в 4,3 случая смерти на 100 000 человек. Однако общая распространенность всех типов ВПЧ среди населения была довольно высокой (20%) и близка к той, что обнаружена в популяциях «высокого риска», таких как Колумбия (14.9%) и Парагвай (20%). 8, 9 Однако оценки распространенности ВПЧ значительно различаются, как показано в исследовании, проведенном в США, где 39,2% из 3863 женщин в возрасте 18–40 лет, посещавших обычную гинекологическую клинику, были ВПЧ-позитивными. 10 Очевидное несоответствие в распространенности усиливает аргументы в пользу проведения эпидемиологической оценки популяции за популяцией.

Как и в случае с HR-ВПЧ, распространенность LR-ВПЧ была значительно выше у молодых женщин, которые обычно имеют более высокий уровень сексуальной активности. 11, 12 Второй пик распространенности ВПЧ у женщин в перименопаузе не был очевиден в этой популяции (как было описано ранее, 13, 14 ), что противоречит выводам Chan et al , 15 Большинство инфекций ВПЧ в этой возрастной группе не были LR-ВПЧ.

типа HR-HPV выявлялись чаще, чем типы LR-HPV у женщин всех возрастов и степеней дискариоза. Разнообразие типов ВПЧ было широким и составляло примерно 9.3% населения дали положительный результат на тип ВПЧ-ВПЧ, отличный от ВПЧ-16 (обнаруженный у 6,4% населения). Большинство этих инфекций были обнаружены у молодых женщин, и многие из них, вероятно, будут излечены. Тем не менее, даже среди ВПЧ-позитивных женщин с неоплазией высокой степени более 50% содержали тип или типы ВПЧ, отличные от ВПЧ-16. В частности, у 29 из 1775 (1,6%) женщин старше 35 лет, участвовавших в нашем исследовании, была обнаружена неоплазия высокой степени. Из них 12 были инфицированы ВПЧ-16, 14 имели тип или типы ВПЧ-ВПЧ, отличные от ВПЧ-16, и трое были инфицированы типом Х, что подтверждает высокую распространенность и разнообразие онкогенных типов ВПЧ.

«Мы обнаружили, что ВПЧ-26, ранее описанный как вероятно канцерогенный, был единственным типом, обнаруживаемым исключительно в образцах с цитологическими отклонениями, что подтверждает эту классификацию»

Неожиданно HPV-31 обнаруживался чаще, чем HPV-18, при дискариозе высокой степени. ВПЧ-73 был обнаружен в той же пропорции, что и ВПЧ-18, при неоплазии высокой степени, закрепляя его статус «высокого риска», как описано в недавней статье Muñoz et al . 16 Кроме того, мы обнаружили, что ВПЧ-26, ранее описанный как «вероятно канцерогенный», 16 был единственным типом, обнаруживаемым исключительно в образцах с цитологическими отклонениями, что подтверждает эту классификацию. Если тестирование на ВПЧ должно быть включено в программы скрининга, следует проводить тесты широкого спектра до тех пор, пока не будет установлено истинное влияние персистенции менее распространенных типов ВПЧ-ВПЧ на неопластическую прогрессию.

Наиболее поразительной особенностью, которую мы отметили, была высокая распространенность множественных инфекций HR-HPV при всех стадиях неоплазии шейки матки.В настоящее время в литературе нет единого мнения о масштабах и последствиях множественных ВПЧ-инфекций, при этом сообщаемая распространенность варьирует от 17,5% в популяции гинекологических клиник, 10 до 46% при биопсии рака, 17 и 58,9 % у женщин с дисплазией низкой степени. 18 Люди, инфицированные вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ), часто инфицированы несколькими ВПЧ, при этом сообщаемые цифры доходят до 80%. 19 Действительно, обнаружение множественных инфекций ВПЧ было предложено одной группой в качестве прогностического показателя неоплазии высокой степени у ВИЧ-инфицированных женщин (U Weiland et al .Генитальные инфекции с множественными типами ВПЧ встречаются часто, больше связаны с SIL и чаще встречаются у ВИЧ-позитивных пациентов. Тезисы 20-й Международной конференции по вирусам папилломы, Париж, Франция, 2002:75). Кроме того, в исследовании иммунокомпетентных женщин было обнаружено, что множественные ВПЧ-инфекции приводят к повышенному отношению шансов риска дисплазии, которое уступает только ВПЧ-16. 20 Также сообщалось о значительных различиях в среднем количестве типов ВПЧ, обнаруженных между цитологически нормальными и диспластическими образцами. 21 Напротив, Rolón et al не обнаружили значительно более высокого риска развития рака у женщин с множественными инфекциями ВПЧ по сравнению с женщинами, инфицированными одним типом ВПЧ. 9

Сообщения домой
  • Отмечалась высокая распространенность множественных инфекций, вызванных вирусом папилломы человека высокого риска (HR-HPV), как при высокой, так и при низкой степени неоплазии шейки матки, что отражает распространенную передачу множественных HR-HPV половым путем

  • Множественные инфекции ВПЧ-ВПЧ были наиболее распространены среди молодых женщин, что позволяет предположить, что более высокая сексуальная активность связана с передачей половым путем нескольких типов ВПЧ-ВПЧ

  • Проспективные когортные исследования, которые связывают последовательную потерю или появление типов ВПЧ с цитологическим анализом, необходимы для оценки влияния множественных инфекций ВПЧ-ВПЧ на неопластическое прогрессирование

«Ключевой вывод здесь о высокой распространенности множественных типов вируса папилломы человека высокого риска (HR-HPV) во всех стадиях неоплазии шейки матки подчеркивает отсутствие совместной канцерогенной связи между отдельными парами или группами типов HR-HPV»

Поперечный анализ наших данных показал, что обнаружение множественных инфекций ВПЧ с типами HR-ВПЧ не было значительно лучшим предиктором неоплазии шейки матки высокой степени, чем единичная инфекция HR-ВПЧ.Кроме того, множественные инфекции ВПЧ-ВПЧ чаще выявлялись у молодых женщин, которые с большей вероятностью могут быть инфицированы ВПЧ как таковым, что позволяет предположить, что более высокая сексуальная активность связана с передачей половым путем нескольких типов ВПЧ-ВПЧ, возможно, чаще, чем это было ранее. мысль. Thomas et al. показали, что нет более или менее вероятного одновременного заражения двумя типами ВПЧ, чем любыми другими двумя типами. 22 Rousseau et al предположили, что персистенция ВПЧ-инфекции может быть независимой от коинфекции несколькими типами ВПЧ на исходном уровне, 23 и Chaouki et al предположили, что различные типы ВПЧ не действуют совместно при неопластической трансформации. 24 Таким образом, основной вывод о высокой распространенности множественных типов ВПЧ-ВПЧ при всех стадиях неоплазии шейки матки подчеркивает отсутствие совместной канцерогенной связи между отдельными парами или группами типов ВПЧ-ВПЧ. Это открытие, вероятно, отражает общую передачу нескольких типов ВПЧ-ВПЧ половым путем. Мы надеемся, что вторая фаза нашего лонгитюдного исследования позволит дополнительно рассмотреть значение множественных инфекций HR-HPV для прогрессирования неоплазии шейки матки.

Благодарности

Авторы выражают благодарность компаниям Qiagen Ltd, Великобритания, и Roche Molecular Systems (в частности, д-ру J Kornegay), Калифорния, за техническую помощь в процедурах выделения нуклеиновых кислот и молекулярного типирования соответственно.Мы также благодарны П. Кэмпбелл-Джонс за ее знание PENS и за полезные комментарии во время подготовки рукописи, а также К. Грэму из Центра клинических исследований Welcome Trust за помощь в статистическом анализе. Работа финансировалась за счет гранта главного научного отдела исполнительной власти Шотландии CZB/4/33.

ССЫЛКИ

  1. Zielinski GD , Snijders PJ, Rozendaal L, et al. Присутствие ВПЧ предшествует аномальной цитологии у женщин, у которых развивается рак шейки матки, и сигнализирует о ложноотрицательных мазках.Бр Дж. Рак 2001; 85: 298–404.

  2. Kjaer SK , van den Brule AC, Paul G, и др. Типоспецифическая персистенция вируса папилломы человека (ВПЧ) высокого риска как показатель плоскоклеточных интраэпителиальных поражений высокой степени у молодых женщин: проспективное последующее исследование на основе популяции. BMJ 2002; 325: 572–6.

  3. Cuschieri KS , Seagar AL, Moore C, et al. Разработка автоматизированной процедуры выделения ДНК вируса папилломы человека в жидких цитологических образцах. J Virol Methods 2003;107:107–13.

  4. Cubie HA , Seagar AL, McGoogan EM, и др. Быстрая ПЦР в реальном времени для различения вирусов папилломы человека высокого риска типов 16 и 18. Mol Pathol 2001;54:24–9.

  5. Gravitt PE , Peyton CL, Apple RJ, и др. Генотипирование 27 типов вирусов папилломы человека с использованием продуктов консенсусной ПЦР L1 путем однократной гибридизации с обнаружением блоттинга с обратной линией. J Clin Microbiol 1998;36:3020–7.

  6. Gravitt PE , Peyton CL, Alessi TQ, и др. Улучшенная амплификация вирусов генитальной папилломы человека. J Clin Microbiol 2000;38:357–61.

  7. Уитли М.В. . Жидкостная цитология: успех.BMJ2003;327:161–2 ответ автора 162.

  8. Molano M , Posso H, Weiderpass E, и др. Распространенность и детерминанты инфекции ВПЧ среди колумбийских женщин с нормальной цитологией. Бр Дж. Рак 2002; 87: 324–33.

  9. Rolón PA , Smith JS, Muñoz N, et al. Папилломавирусная инфекция человека и инвазивный рак шейки матки в Парагвае. Int J Cancer 2000; 85: 486–91.

  10. Peyton CL , Gravitt PE, Hunt WC, и др. Детерминанты выявления вируса генитальной папилломы человека у населения США. J Infect Dis 2001;183:1554–64.

  11. Burk RD , Kelly P, Feldman J, et al. Снижение распространенности цервиковагинальной папилломавирусной инфекции человека с возрастом не зависит от других факторов риска. Sex Transm Dis 1993; 20: 333–41.

  12. Melkert PWJ , Hopman E, van den Brule AJC, и др. Распространенность ВПЧ в цитоморфологически нормальных мазках из шейки матки, определяемая с помощью полимеразной цепной реакции, зависит от возраста. Int J Cancer 1993; 53: 919–23.

  13. Cuzick J , Berverley E, Ho L, et al. Тестирование на ВПЧ при первичном скрининге пожилых женщин. Бр Дж. Рак 1999; 81: 554–58.

  14. Muñoz N , Kato I, Bosch FX, и др. Фактор риска обнаружения ВПЧ у женщин среднего возраста. Sex Transm Dis 1996; 23: 743–9.

  15. Chan PKS , Chang AR, Cheung JLK, и др. Детерминанты папилломавирусной инфекции шейки матки: различия между типами высокого и низкого онкогенного риска. J Infect Dis 2002; 185: 28–35.

  16. Muñoz N , Bosch FX, de Sanjose S, и др. Эпидемиологическая классификация типов вируса папилломы человека, связанных с раком шейки матки. N Engl J Med 2003; 348: 518–27.

  17. Bachtiary B , Obermair A, Dreier, et al. Влияние множественной инфекции на ответ на лечение и выживаемость пациентов, получающих радикальную лучевую терапию по поводу рака шейки матки. Int J Cancer 2002; 102: 237–43.

  18. Группа ALTS .Тестирование на вирус папилломы человека для сортировки женщин с цитологическими признаками низкодифференцированных плоскоклеточных интраэпителиальных поражений: исходные данные рандомизированного исследования. J Natl Cancer Inst2000;92:397–402.

  19. Levi JE , Kleter B, Quint WG, и др. Высокая распространенность инфекций, вызванных вирусом папилломы человека (ВПЧ), и высокая частота множественных генотипов ВПЧ у женщин, инфицированных вирусом иммунодефицита человека, в Бразилии. J Clin Microbiol 2002;9:3341–5.

  20. Becker TM , Wheeler CM, McGrough NS, и др. Заболевания, передающиеся половым путем, и другие факторы риска дисплазии шейки матки среди белых женщин выходцев из Юго-Западного испаноязычного и неиспаноязычного происхождения. ДЖАМА 1994; 271:1181–8.

  21. Файф KH , Craner HM, Schroeder JM, и др. Обнаружение нескольких типов вируса папилломы человека в нижних отделах половых путей коррелирует с дисплазией шейки матки.J Med Virol 2001;64:550–9.

  22. Томас К.К. , Хьюз Дж.П., Кайперс Дж.М., и др. Параллельное и последовательное заражение различными типами генитального вируса папилломы человека. J Infect Dis 2000;182:1097–102.

  23. Rousseau MC , Pereira JS, Prado JCM, и др. Коинфекция шейки матки типами вируса папилломы человека как предиктор приобретения и персистенции ВПЧ-инфекции.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован.