Диагностика впч: ВПЧ, вирус папилломы человека – причины появления, симптомы заболевания, диагностика и способы лечения

Гинекология: Вирус папилломы человека ВПЧ

<p>
<b>Вирус папилломы человека </b>относится к семейству Papillomaviridae. Это ДНК-содержащие вирусы, поражающие эпителий кожных покровов и слизистых оболочек.
</p>

Заболевания, вызванные вирусом папилломы человека (ВПЧ), относятся к болезням, передающимся преимущественно половым, редко контактным путем, и проявляются доброкачественными и злокачественными заболеваниями.

Стоит отметить, что передача ВПЧ возможна при любом виде полового контакта: генитально-генитальном, генитально-анальном, мануально-генитальном, орально-генитальном.

Распространенность

По данным Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ), ВПЧ встречается во всех точках земного шара, ежегодно отмечается около 6 млн случаев инфицирования.   До 70–80% сексуально активного населения инфицируется ВПЧ в течение жизни. 

Рак шейки матки, ассоциированный с ВПЧ-инфекцией, занимает одну из ключевых позиций в структуре заболеваемости гинекологическим заболеваниями, эта цифра достигает 600 тысяч случаев в год, половина из которых заканчивается летальным исходом. 

Все ВПЧ делятся на 2 типа:

  1. 1) высокого онкогенного риска (типы 16, 18, 31,33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59) – вызывают развитие рака шейки матки, вульвы, влагалища, анального канала, рака полового члена у мужчин, ротовой полости, ротоглотки.

  2. 2) низкого онкогенного риска (типы 6, 11,42, 43, 44) – вызывают чаще всего развитие аногенитальных бородавок, и в меньшей степени рака влагалища, полового члена, плоскоклеточной карциномы полости рта, ротоглотки и гортани.

Факторы риска

  • ранний сексуальный дебют,

  • промискуитет (беспорядочные половые связи),

  • отказ от барьерной контрацепции,

  • аборты,

  • коинфекция другими заболеваниями, передаваемыми половым путем,

  • снижение иммунитета,

  • низкий социально-экономический статус,

  • табакокурение,

  • длительное применение гормональных контрацептивов.

Клинические проявления

  • появление кондилом, папиллом на коже и слизистых оболочках,

  • зуд, жжение в области поражения,

  • боль при мочеиспускании,

  • диспареуния – боль при половом контакте,

  • посткоитальное кровомазание (после полового контакта),

  • межменструальное кровомазание.

Диагностика

  • подробный сбор анамнеза, жалоб пациентки, осмотр на гинекологическом кресле, «в зеркалах,

  • мазок на онкоцитологию с шейки матки и цервикального канала по Папаниколау (РАР-тест) либо с использованием системы CytoScreen,

  • Digene HPV тест,

  • ПЦР- полимеразная цепная реакция,

  • простая/ расширенная кольпоскопия,

  • биопсия шейки матки с последующим гистологическим исследованием.

Профилактика

  • отказ от промискуитета (беспорядочных половых связей),

  • использование барьерных методов контрацепции,

  • регулярные осмотры у гинеколога с проведением ВПЧ-скрининга, мазка на онкоцитологию с шейки матки и цервикального канала по Папаниколау (РАР-тест) либо с использованием системы CytoScreen (ваш врач акушер-гинеколог обязательно укажет вам на эту необходимость),

  • вакцинопрофилактика. 

Лечение

Удаление новообразований: кондиллом, папиллом:

  • Криодеструкция (замораживание с помощью жидкого азота).

  • Радиоволновое лечение.

  • Лазерное лечение.

  • Электрокоагуляция.

  • Фармакологическое лечение: специфического лечения ВПЧ не существует. Могут применяться: витамины, иммуномодуляторы, противовирусные препараты. Это направление является перспективным для научного изучения.

В молодом возрасте возможна самостоятельная элиминация вируса из организма. 

Вакцинация

В Национальный календарь профилактических прививок РФ не включена вакцинация против ВПЧ, однако на добровольной основе она возможна и необходима.

Для первичной специфической профилактики заболеваний, ассоциированных с ВПЧ-инфекцией, в мире зарегистрированы 3 вакцины:

  • двухвалентная – Церварикс (16,18 типы). Возраст проведения вакцинации: девочки и женщины от 9 до 45 лет.

  • четырехвалентная – Гардасил (16,18,6,11 типы.) Возраст проведения вакцинации: девочки и женщины от 9 до 45 лет, мальчики и мужчины от 9 до 26 лет.

  • девятивалентная – Гардасил 9 (6,11,16,18,31,33,45,52,58 типы). Не сертифицирована в России.


Вирус папилломы человека (ВПЧ) у женщин – статьи о здоровье

Оглавление

ВПЧ (вирус папилломы человека) у женщин является распространенной инфекцией, поражающей слизистые оболочки и кожные покровы. Опасна она тем, что длительное время может «жить» в организме, никак не проявляя себя. Признаки патологии становятся заметны исключительно при снижении иммунитета. Для женщин ВПЧ опасен тем, что может стать причиной развития рака влагалища и шейки матки.

Причины

Вирус папилломы человека передается следующими путями:

  • половым (орально-генитальным, генитальным и анальным)
  • контактно-бытовым (при использовании одних личных предметов, при прикосновениях и др.)

Возможна и передача вируса от матери к ребенку во время родов.

Факторами, способствующими заражению и проявлению признаков заболевания, являются:

  • ранняя половая жизнь и многочисленные половые партнеры
  • несоблюдение элементарных правил гигиены
  • вредные привычки (злоупотребление алкоголем и курение)
  • несвоевременное обращение к гинекологу
  • ослабленный иммунитет
  • стрессы
  • употребление гормональных препаратов
  • травмы слизистых оболочек и кожи
  • беременность
  • выкидыши и аборты
  • дисплазия шейки матки и др.

Зараженный человек зачастую страдает от внешних проявлений вируса. На коже при развитии патологии появляются неэстетичные наросты различных типов.

Признаки

При развитии ВПЧ у женщин образуются:

  • Остроконечные кондиломы. Эти новообразования появляются преимущественно в зоне гениталий и являются одними из самых опасных. Кондиломы имеют бледно-розовый (телесный) цвет и форму сосочка. Со временем они могут перерождаться в злокачественные опухоли
  • Плоские бородавки. Эти образования являются относительно безопасными и доброкачественными. Они образуются преимущественно на лице, кистях и голенях, отличаются небольшим размером и имеют округлую форму. Плоские бородавки не перерождаются в раковые опухоли
  • Бовеноидные папулы. Такие новообразования появляются в зоне промежности и на половых органах. Они имеют розовый или желтый цвет, вид бляшек и немного возвышаются над слизистыми и кожными покровами

Также ВПЧ различных типов у женщин может проявляться в форме дисплазии шейки матки.

Важно! При раннем выявлении заболевания пациентка может быть вылечена.

Диагностика

Для выявления ВПЧ различных типов у женщин применяют метод полимеразной цепной реакции (ПЦР). Для анализа производится забор мазка из влагалища. Метод является достаточно простым в реализации, но отличается высокой чувствительностью.

Для диагностики изменений на шейке матки проводят кольпоскопию. Такое обследование выполняется с применением специального прибора и включает 2 пробы:

  • Тест с раствором уксусной кислоты
  • Тест с применением йодного раствора

После мазка и кольпоскопии может проводиться биопсия подозрительных очагов. Она позволяет дифференцировать добро- и злокачественные новообразования и принять решение о дальнейшей терапии женщины.

Как лечится вирус папилломы человека у женщин?

Следует понимать, что современные разрекламированные препараты, которые направлены на повышение иммунитета, в терапии не эффективны! Они не прошли необходимых исследований и не доказали продуктивность.

Как тогда лечить ВПЧ у женщин?

В настоящий момент эффективных способов терапии просто не существует. Можно только удалить патологические новообразования (папилломы и др.) со слизистых и кожных покровов. Также возможно лечение выявленной дисплазии и иных предраковых состояний и рака. Терапия проводится комплексно, нередко включает оперативные вмешательства и другие способы.

Важно! Лечение вируса папилломы человека у женщин медикаментами невозможно! Если вам предлагают пройти его, советуем сменить клинику и специалиста. Вы лишь напрасно потратите время и допустите развитие процесса распространения потенциально опасного вируса.

Избавиться от новообразований можно достаточно быстро. Вмешательства проводятся стандартным хирургическим путем, с помощью лазера, радионожа, криодеструкции и иных методик. Подходящая методика подбирается индивидуально, с учетом особенностей новообразований.

В МЕДСИ для удаления новообразований при вирусе папилломы человека у женщин применяются следующие методики:

  • Электрокоагуляция. Данная процедура также является относительно безопасной и эффективной. Она заключается в разрушении образования путем воздействия на него тока высокой частоты. Небольшая ранка, получившаяся при процедуре, быстро заживает. Крупного шрама не остается
  • Радиохирургия. Для проведения такой процедуры по удалению новообразований применяется радионож. Данный инструмент способен быстро нагревать ткани и испарять патологические клетки. Радиохирургия особенно актуальна при наличии новообразований на открытых участках тела, так как обеспечивает выраженный эстетический эффект (крупных шрамов не остается)
  • Криодеструкция. Эта методика заключается в удалении новообразований путем воздействия на них жидкого азота. Такое вещество обладает очень низкой температурой и позволяет обеспечить самостоятельное отторжение патологических клеток
  • Хирургическое иссечение. Данная методика применяется при глубоком прорастании образований и их больших размерах. Хирург работает вручную скальпелем, что дает возможность произвести забор патологических клеток и отправить их на гистологическое исследование, позволяющее определить характер папилломы (добро- или злокачественный)

Предлагаемое лечение (удаление) проявлений ВПЧ у женщин не требует существенных временных затрат. Все процедуры проводятся в течение 10-15 минут. Сразу же после удаления новообразований пациентка может вернуться к привычному образу жизни. Обычно ограничения накладываются только на посещение бань, саун и бассейнов. Не рекомендуется мочить ранку и пользоваться различными уходовыми средствами.

Важно! Обо всех особенностях восстановления после удаления новообразований расскажет врач.

Профилактика

Несмотря на то, что лечение вируса папилломы человека у женщин не проводится, возможно предотвратить заражение и появление симптомов заболевания. Для этого необходимо проводить профилактику!

Основным способом эффективной профилактики сегодня является вакцинация. Постановка прививки позволяет обеспечить защиту от заражения и сократить риски опасных для здоровья и жизни последствий развития вируса.

В нашей стране в настоящий момент зарегистрировано 2 препарата для вакцинации: «Церварикс» и «Гардасил». Обе вакцины являются безопасными и эффективными. «Гардасил» является более продуктивной, так как действует против 4 типов вируса.

Вакцинация возможна в возрасте от 9 до 45 лет и подразумевает введение 3 доз препарата. При этом используется схема: 0-2-6. Это значит, что сначала вводится первая доза, через 2 месяца еще одна и через 6 месяцев (с даты первого введения) – третья.

Важно! Вакцинация может проводиться даже пациенткам, у которых уже выявлен вирус папилломы человека. Это обусловлено тем, что женщина может быть заражена лишь определенными типами ВПЧ.

Во многих странах Европы и в США вакцина уже входит в перечень обязательных. При проведенных исследованиях доказана эффективность профилактических мер.

Также пациентке следует регулярно проходить осмотры у гинеколога и необходимые скрининговые обследования. Они позволят своевременно обнаружить симптомы ВПЧ у женщины и принять необходимые меры по предотвращению развития раковых новообразований.

Преимущества обращения в МЕДСИ

  • Возможности для эффективной диагностики ВПЧ. В нашей лаборатории можно сдать анализы, позволяющие выявить присутствие в организме онкогенных категорий ВПЧ. Такое обследование особенно актуально при вакцинации пациентов в возрасте старше 25 лет
  • Опытные специалисты. Наши врачи всегда готовы оказать комплексную поддержку всем категориям пациентов. Они не просто проконсультируют вас, но и проведут диагностику, лечение (удаление выявленных новообразований) и профилактику различных патологий, если в этом имеется необходимость
  • Возможности для удаления новообразований. Мы используем классические и современные технологии. Это позволяет подобрать подходящий способ удаления новообразований для каждого пациента
  • Своевременная вакцинация. Препарат для постановки прививки всегда имеется в наличии. Обратившись к нам, вы не будете вынуждены откладывать вакцинацию. Она возможна в день обращения
  • Использование современного высокоэффективного препарата. Безопасность и продуктивность «Гардасила» подтверждены международными клиническими испытаниями, которые проводились с участием большого количества исследуемых
  • Возможности для лечения предраковых состояний и рака. При необходимости наши пациенты направляются на терапию в Москву

Если вы хотите проконсультироваться с врачом по вопросам ВПЧ у женщин, пройти удаление новообразований, сделать вакцинацию, позвоните по номеру +7 (342) 215-06-30 Специалист ответит на все вопросы.

ВПЧ (вирус папилломы человека) – лечение у женщин в СПб

Инфекция, как правило, проявляет себя в случае снижения иммунитета, а при его удовлетворительном состоянии может десятилетиями пребывать в организме скрыто. Даже при отсутствии клинических проявлений инфицированный человек остается носителем ВПЧ и может заражать других людей. Некоторые типы вируса папилломы человека ассоциируются с высоким риском развития эпителиального рака. 

Специалисты медицинского центра «Таурас-Мед» занимаются вопросами профилактики, диагностики и лечения ВПЧ. В клинике можно пройти обследование на предмет носительства вируса и сделать вакцинацию. Согласно принципам доказательной медицины, лечение инфекции проводится симптоматически. Руководствуясь международными протоколами, врачи центра в персональном порядке подбирают терапевтическую тактику. 

О заболевании

Всего насчитывается около 600 штаммов ВПЧ, около 180 выявляются у людей, более 40 из которых обладают разной степенью онкогенности. Классификация вируса, исходя из способности вызывать неоплазии, условна. Заражение низкоонкогенным штаммом не исключает возможности развития опухоли, так же как и носительство высокоонкогенного типа не считается облигатным признаком грядущего рака. Динамика процесса зависит от исходного состояния организма, активности иммунитета и подверженности другим неблагоприятным факторам. 

Вопрос о том, как передается вирус папилломы человека, хорошо изучен. В настоящее время доказана высокая устойчивость вируса во внешней среде и его способность проникать в организм не только через слизистые оболочки, но и через мельчайшие повреждения на кожных покровах. Это означает, что заразиться можно в быту, при рукопожатии, при совместном использовании предметов и пр. Однако основным путем передачи все же считается половой. Риск заражения повышается при наличии других инфекций с половым путем передачи. Также возможно заражение ребенка от матери в родах (кесарево сечение не исключает инфицирования).

То, как проявляется вирус папилломы человека, обусловлено тропностью возбудителя к эпителиальным клеткам. Размножается он исключительно в поверхностном слое, а персистировать может и в более глубоких слоях (зернистый, базальный). 

Некоторые протеины вируса выключают работу белков, которые регулируют процесс деления клеток и сохранность генетического материала. В результате в области внедрения вируса формируются доброкачественные новообразования. Спустя некоторое время в этом месте начинается выделение зрелых вирусных частиц, что повышает риск распространения инфекции. В случае заражения онкогенным штаммом вируса, как правило, с момента заражения до момента трансформации здоровых клеток в раковые проходит около 10-15 лет. 

Если у Вас остались вопросы, позвоните нам по телефону: +7 812 603-44-71
Администраторы медицинского центра «Таурас-Мед» всегда готовы проконсультировать Вас.

Записаться на прием

Признаки вируса папилломы человека

Как уже было замечено, вирус может годами и десятками лет пребывать в организме, не вызывая специфической симптоматики. Именно так и происходит у 90% носителей инфекции. Симптомы ВПЧ развиваются на фоне иммунодефицита, когда вирус начинает активно делиться. 

Проявления заболевания зависят от штамма возбудителя и места его внедрения в организм. Симптомами ВПЧ являются:

  • Подошвенные бородавки. Внешне напоминают мозоли, однако характеризуются склонностью к внутреннему росту. Такие бородавки выглядят как уплотнение на подошве стопы с кратерообразным углублением в центре и сероватой или желтоватой каймой. Возможно выявление мелких черных точек внутри, что обусловлено некрозом поверхностных капилляров.
  • Обычные бородавки на коже. Представляют собой округлые наросты телесного, розового или коричневого цвета с мозаичной или чешуйчатой поверхностью.
  • Аногенитальные бородавки. Формируются в области ануса, чаще являются множественными. 
  • Папилломы. Новообразования телесного цвета с плоской поверхностью. Чаще выявляются на теле, реже — на половых органах.
  • Кондиломы. Мелкие наросты на тонкой ножке конусообразной формы. Могут формироваться на любых участках тела (чаще в зонах трения на шее, в подмышечной области, на внутренней поверхности бедер) и на гениталиях. Разрастаются с формированием бахромчатых участков, которые напоминают соцветия цветной капусты. 

Вирус папилломы человека является основной причиной развития рака шейки матки у женщин. Клинических проявлений в этом случае может и не быть, косвенно о наличии вируса в шеечном эпителии могут говорить изменения в клетках, выявленные с помощью цитологического исследования.

ВПЧ ассоциируют с раком ануса, полового члена, влагалища и вульвы. 

Диагностика ВПЧ

ВПЧ выявляют лабораторным путем с помощью исследования биоматериала методом полимеразной цепной реакции (ПЦР). Тест направлен на идентификацию ДНК возбудителя, точность исследования достигает 100%. В качестве изучаемого материала может выступать отделяемое из урогенитального тракта, кровь или соскоб с пораженной кожи. Современные лаборатории проводят комплексные анализы, которые позволяют выявить сразу несколько штаммов. При положительных результатах диагностики на вирус папилломы человека следует тщательно следить за состоянием здоровья и своевременно проходить профилактические мероприятия. 

Профилактика осложнений ВПЧ подразумевает регулярные гинекологические и урологические обследования. Женщинам стоит ежегодно сдавать мазок на онкоцитологию (ПАП-тест) и по показаниям проходить обследование методом ПЦР.

Лечение ВПЧ

Специфических методов лечения вируса папилломы человека не существует. Это значит, что нет препаратов, которые могут устранить вирус из организма. В целях профилактики распространения инфекции и для предупреждения развития осложнений проводится симптоматическая терапия и динамическое наблюдение. Доброкачественные образования кожи и слизистых подлежат удалению. Оптимальным способом считается лазерная деструкция. Процедура позволяет полностью убрать измененные ткани и прекратить вирусовыделение в пораженной зоне. 

Динамическое наблюдение помогает своевременно выявить изменения и не допустить развития рака либо провести лечение на ранних этапах(до того, как будет повреждена базальная мембрана эпителия) формирования  злокачественной опухоли щадящими способами.

Где пройти лечение?

Получить профессиональную помощь в борьбе с ВПЧ можно в медицинском центре «Таурас-Мед». Прием ведут опытные высококвалифицированные врачи. В целях лечения применяется передовое оборудование, радиохирургические и лазерные технологии. Записаться к врачу можно по телефону или через специальную форму на сайте. 

Диагностика ВПЧ – цены на лабораторную диагностику ВПЧ у женщин в клинике в Москве

Вылечить папилломавирус раз и навсегда невозможно, по крайней мере, уровень развития современной медицины пока этого не позволяет. Но держать его под контролем вполне возможно. Существует множество методов лечения ВПЧ, направленных на устранение всех видимых проявлений инфекции и минимизации риска развития осложнений, включая онкологию.

ПЦР-диагностика ВПЧ

Для диагностики ВПЧ применяют специальные ВПЧ-тесты, и одним из самых точных является полимеразная цепная реакция (ПЦР). Этот анализ дает возможность не только обнаружить папилломавирус, но и точно установить его тип. Основан такой метод исследования на избирательном многократном копировании определенного участка ДНК. Многие методы диагностики способны выявить белки-маркеры возбудителя, что позволяет говорить о наличии инфекции. Обнаружение участка ДНК вируса папилломы методом ПЦР прямо указывает на присутствие возбудителя.

За генетическую информацию любого живого организма отвечает ДНК, состоящая из последовательности четырех нуклеотидов – А (аденин), Т (тимин), Г (гуанин), Ц (цитозин). Главным правилом генетики является принцип комплиментарности, то есть нуклеотиды соединяются лишь в определенном порядке, а каждое живое создание, включая и ВПЧ, имеет собственный, уникальный набор ДНК.

Именно на обнаружение этого уникального набора генетической информации и направлен анализ ПЦР. Основным достоинством данного метода диагностики является его высокая чувствительность. ПЦР анализ способен обнаружить даже единичные клетки ВПЧ, что невозможно сделать никаким иным методом исследования.

Материалом для анализа ПЦР могут служить:

  • соскобы со слизистых влагалища, уретры, шейки матки;
  • кровь и ее компоненты;
  • любые биологические жидкости (отделяемое влагалища и т. д.).

Постановка реакции комплиментарности занимает всего несколько часов, что позволяет выявить возбудителя уже в день сдачи анализа, а не ожидать неделю, как при бактериологическом посеве. С помощью ПЦР определяется именно возбудитель, то есть непосредственно папилломавирус, а не реакция организма на его внедрение, что позволяет обнаружить инфекционного агента, даже если никаких клинических признаков его присутствия нет.

ВПЧ у женщин

Папилломавирус у женщин проявляется остроконечными и плоскими кондиломами, дисплазией и раком шейки матки. Однако в большинстве клинических случаев ВПЧ никак себя не проявляет и обнаруживается при комплексном обследовании женщины, обычно во время беременности или подготовки к ней.

Продолжительность инкубационного периода после заражения может составлять от пары недель до нескольких лет- все зависит от состояния иммунной системы женщины. Хотя многие проявления ВПЧ часто проходят сами (при условии хорошего иммунитета), для каждой женщины существует риск, что вирус даст толчок патологическим состояниям шейки матки, которые разовьются в инвазивный рак.

Причем на фоне ослабленного иммунитета для его развития достаточно всего 5-10 лет. Поэтому так важно регулярно проходить скрининговые исследования всем сексуально активным женщинам, даже при отсутствии симптомов заболевания.

Лечение ВПЧ

Тактика лечения ВПЧ подбирается индивидуально, с учетом иммунного статуса женщины, наличия сопутствующих патологий и урогенитальных инфекций и т. д. Комплексная терапия включает консервативное и оперативное лечение:

  • неспецифическая противовирусная терапия;
  • иммуностимуляторы;
  • витаминотерапия;
  • удаление папиллом, кондилом, генитальных бородавок.

Специалисты Клиники Современной Медицины обладают большим опытом в области диагностики типа и количественного показателя папилломавируса и его эффективного лечения. Схема терапевтических мероприятий для борьбы с ВПЧ подбирается после детального обследования пациентки и при установлении точного типа вируса и стадии заболевания.

Применение противовирусных препаратов нового поколения и передовых атравматичных оперативных техник позволяет гарантировать максимальный результат лечения и минимизировать возможный риск развития рецидива.

Наш медицинский центр оказывает самый широкий спектр услуг. Вы всегда можете обратится к нам по вопросам лечения гинекологических заболеваний. Мы готовы оказать вам услуги лечения эктропиона шейки матки и лечения эндоцервицита.

Лечение вируса папилломы человека в Самаре – цены на обследование, причины, симптомы и диагностика ВПЧ – клиника Medical On Group

СОВРЕМЕННЫЕ МЕТОДЫ ЛЕЧЕНИЯ

Все методики и препараты, которые используются в «Медикал Он Груп», обладают доказанной эффективностью. Лечение проходит по международным стандартам с использованием современных методик. Это позволяет достичь отличной эффективности при лечении остроконечных кондилом, папиллом и других признаков ВПЧ.

УДАЛЕНИЕ КОНДИЛОМ БЕЗ БОЛИ И СЛЕДОВ

Для удаления наростов используется метод радиоволновой терапии. Радиоволны высокой частоты позволяют точно удалить образование без разрезов и кровотечений. Клетки, пораженные вирусом, практически испаряются с поверхности кожи, и на их месте развивается нормальный эпителий, без образования шрамов.

ВРАЧИ ВЫСОКОЙ КВАЛИФИКАЦИИ

В нашей клинике работают только врачи с многолетним опытом работы, постоянно повышающие квалификацию, добросовестно и тщательно подходящие к лечению пациентов. Внимательное отношение к пациентам, настоящий профессионализм и внимание к деталям позволяют добиться быстрых результатов.

симптомы, типы вируса и лечение в Красноярске

Вирус папилломы человека – это один из самых распространенных групп вирусов, поражающих слизистые оболочки и кожу. Вирус опасен тем, что он способен внедрять свою ДНК в хромосомы человека и быстро распространяться, становясь возбудителем для ракового перерождения клеток и, как следствие, развития злокачественной опухоли. Часто инфекция протекает бессимптомно.

Как передается вирус папилломы?

  1. Половым путем. Можно заразиться также и через анальные и оральные виды половых контактов. Это 16 и 18 типы вирусов. Таким путем появляются остроконечные бородавки, которые располагаются на гениталиях женщин и мужчин. В группу риска входят люди, часто меняющие половых партнеров.
  2. От рождения. Вирус передается от матери к ребенку во время его прохождения через родовые пути. Бородавки часто появляются у малышей в первые годы жизни во рту или на коже.
  3. Путем самозаражения. Часто во время бритья или эпиляции ВПЧ переносится с одного участка тела на другой.
  4. Бытовым способом. Вирус может передаваться через рукопожатие, поцелуй, через повреждения на коже. ВПЧ быстро распространяется во влажной среде, поэтому стоит вести себя аккуратно при посещении общественных мест – саун, бань, спортзалов, туалетов, бассейнов.

Здоровой и сильной иммунной системе не страшен вирус папилломы человека, потому что иммунные клетки организма его уничтожают и заражения не происходит. Однако, существуют факторы, которые способствуют заражению и распространению ВПЧ, среди которых:

  • уменьшение общего иммунитета;
  • переутомление;
  • частые стрессовые ситуации;
  • сбои в гормональной системе;
  • беременность;
  • нарушения метаболизма и обмена веществ.

Существуют три формы проявления ВПЧ:

  1. Клиническая, при которой появляются образования на коже и слизистых оболочках – папилломы, кондиломы, плоские и остроконечные, подошвенные бородавки.
  2. Субклиническая – появление на половых органах незаметных без врачебного осмотра высыпаний. Они могут не ощущаться, либо приносить некоторый дискомфорт пациенту.
  3. Латентная – нет никаких симптомов и внешнего проявления. Определить наличие ВПЧ можно с помощью соскоба эпителия методом ПЦР.

Вирус папилломы у мужчин

Мужчины чаще являются переносчиками заболевания, которое протекает бессимптомно. Часто формируются генитальные папилломы и бородавки на лице из-за повреждений кожи во время бритья и переноса вируса с одного участка тела на другой.

У мужчин строение половых органов обеспечивает целостность кожного покрова, поэтому вероятность заразиться ВПЧ у них меньше, чем у женщин. Также у мужчин меньшая вероятность перехода вируса в злокачественную опухоль, чем у женщин.

Вирус папилломы у женщин


Заболевание может протекать в скрытой форме, либо также, как и у мужчин формируются генитальные папилломы. Опасность ВПЧ для женского организма заключается в том, что он может вызвать образование и бессимптомное развитие злокачественной опухоли шейки матки, вульвы или заднего прохода. Поэтому своевременное обследование и лечение вируса папилломы человека позволяет предотвратить развитие онкологии.

Диагностика вируса

Если вы обнаружили бородавки, высыпания или испытываете неприятные ощущения, обратитесь в первую очередь к своему лечащему терапевту. Однако, зачастую записи к терапевту в городской поликлинике приходится ждать неделями, а после еще несколько часов сидеть в очереди на прием. Поэтому вы можете записаться на консультацию к терапевту в клинике «Медюнион» сегодня и уже завтра пройти осмотр.

Терапевт изучит вашу историю болезни, выяснит жалобы и направит на анализы, а также на прием к узкопрофильному специалисту. В зависимости от локализации заболевания это может быть консультация дерматолога, гинеколога, уролога, колопроктолога, стоматолога, офтальмолога, хирурга. В случае выявления злокачественной опухоли, понадобится посетить онколога. Имеет ли место злокачественное образование, определяется с помощью лабораторных анализов:

  • общий анализ крови;
  • общий анализ мочи;
  • кольпоскопия – для выявления состояния цервикального канала у женщин;
  • ПАП-тест – мазок для диагностики рака шейки матки;
  • гистология ткани – определение наличия опасных клеток в организме;
  • ПЦР – полимеразная цепная реакция. Определение типа вируса;
  • уретроскопия – осмотр уретры у мужчин;
  • биопсия – забор клеток на диагностику.

Как лечить вирус папилломы человека?

Для лечения наростов применяются разные интерфероны. Они обладают противовирусным и иммуномодулирующим действием.

Наличие остроконечных кондилом, папиллом и генитальных бородавок повышает риск развития рака, их удаляют малоинвазивным путем:

  • Радиохирургический способ. Специалист электродом срезает наросты и прижигает сосуды.
  • Электрокоагуляция. Удаление происходит при помощи тока.
  • Для лечения вируса папилломы у женщин используется криокоагуляция. Низкие температуры закиси азота в аппарате разрушают пораженные ткани во влагалище.

Пройдите полное профилактическое обследование или лечение в медицинском центре «Медюнион» и избавьтесь от вируса папилломы человека с помощью опытных специалистов и современных исследований. Для консультации или справки обратитесь по телефону +7 (391) 201-03-03.

Лечение вируса папилломы человека (ВПЧ) у женщин

Анализ ВПЧ. Лечение ВПЧ


Вирус папилломы человека (ВПЧ) является эпителиотропным вирусом, который способен поражать кожные покровы и слизистые половых органов. Папилломавирус или ВПЧ способен повышать онкогенный риск, потому что спустя годы он может активироваться и привести к появлению злокачественных новообразований, то есть к раку. Именно поэтому огромное значение приобретает ВПЧ анализ в Нижнем Новгороде в 2019 году.

Анализ на ВПЧ (вирус папилломы человека) как у мужчин, так и у женщин относится к методикам классической ПЦР-диагностики, позволяющей определять ДНК вирусы. В результате выявляют критическую концентрацию папилломовируса, от которой зависит риск появления злокачественных образований, а также тип вируса.


Лечение рака и его благоприятный прогноз в значительной степени облегчается на начальных этапах, поэтому важна ранняя диагностика ВПЧ.

В Онли Клиник в Нижнем Новгороде цена на анализ вируса папилломы человека стала демократичной, что дает возможность каждому человеку вовремя начать лечение заболевания.

Наименования услуг Цена

Первичная консультация врача акушера гинеколога

1500 р.
ПЦР диагностика ВПЧ 16,18,31,33,35,39,45,51,52,56,58,59 
(типирование и вирусная нагрузка)
1500 р.

Основные типы папилломовируса или ВПЧ

  • Высокий риск возникновения опухоли: 16, 18, 31, 33, 35, 45, 66;
  • Незначительный риск возникновения злокачественных новообразований: 6, 11, 42 — 44, 53 — 55;
  • Неонкогенные типы: 1 — 5.

В Онли Клиник в 2017 году анализы на ВПЧ у женщин стали надежными помощниками врачей, потому что выявляют вирус, его количество и тип, обращая внимание специалиста на возможное появление злокачественных новообразований, то есть рака. При положительном результате необходимо будет назначить дополнительную диагностику для точного определения наличия заболевания. 


Анализ ВПЧ у мужчин не нашел широкого применения, что связывают с анатомическими особенностями их организма — у мужской половины человечества практически нет областей, где могли бы появиться злокачественные новообразования. Именно поэтому достаточно прижечь имеющиеся кондиломы, чтобы наступило полное выздоровление или мужчина остался носителем.

Показания к сдаче анализу ВПЧ для женщин

  • Возраст старше 21 года;
  • Женщины с наличием кровотечений в анамнезе;
  • С 18 лет при высокой сексуальной активности;
  • Неоднократные выкидыши на ранних сроках в анамнезе;
  • Анализ на ВПЧ у мужчин назначают при наличии эпидемиологических показаний.

Цена анализа ВПЧ в диагностическом центре Онли Клиник сможет приятно Вас удивить.

Теперь нет причин экономить на собственном здоровье. Использование точной и современной аппаратуры при проведении анализа на ВПЧ в Нижнем Новгороде позволит обнаружить даже незначительных количеств ДНК папилломовируса.


В Онли Клиник каждый обратившийся сможет сдать анализы ВПЧ и получить консультацию специалиста, который оценит степень тяжести состояния и поставит диагноз. К примеру, появление кондилом может быть свидетельством сниженного иммунитета или хронического многолетнего заболевания.

ВПЧ-инфекция: причина рака у мужчин?

Я слышал, что вирус папилломы человека (ВПЧ), передающийся половым путем, связан с раком шейки матки у женщин. Может ли инфекция ВПЧ увеличить риск рака и у мужчин?

Ответ от Притиша К. Тоша, доктора медицины

Да, но конкретные риски для мужчин отличаются. Инфекция ВПЧ очень распространена, но обычно не вызывает никаких признаков или симптомов ни у одного пола. Однако некоторые типы HPV вызывают остроконечные кондиломы.

Часто иммунная система организма уничтожает вирус без лечения примерно за два года. Но пока вирус не исчезнет, ​​вы можете передать его своим половым партнерам.

Определенные типы ВПЧ , известные как типы высокого риска, могут вызывать персистентную инфекцию. Это те инфекции, которые могут постепенно превратиться в рак. ВПЧ может вызывать рак вульвы, влагалища, шейки матки, полового члена, заднего прохода, задней части рта и верхней части горла (ротоглотки).

Мужчины, инфицированные ВИЧ — вирусом, вызывающим СПИД, — и мужчины, имеющие половые контакты с другими мужчинами, имеют более высокий риск развития рака анального канала, полового члена и горла, связанного с персистирующей инфекцией HPV . В последнее время наблюдается рост заболеваемости раком ротоглотки, особенно у мужчин.

Мужчины могут предотвратить типы HPV , которые вызывают большинство генитальных бородавок и рака анального канала, получив вакцину HPV . Вакцины HPV были первоначально одобрены Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов в качестве вакцин против рака шейки матки для девочек и молодых женщин, а теперь они также одобрены для профилактики рака анального канала, вульвы и влагалища.

Центры по контролю и профилактике заболеваний (CDC) рекомендуют плановую вакцинацию против ВПЧ для девочек и мальчиков в возрасте 11 и 12 лет, хотя ее можно делать уже в возрасте 9 лет. возраст 26 лет. Вакцинация также разрешена для мужчин в возрасте до 45 лет. Лучшее время для вакцинации — до начала половой жизни. Хотя эти вакцины еще не одобрены для профилактики рака полового члена и ротоглотки, связанного с HPV , недавние исследования показывают, что вакцины могут быть эффективны и для предотвращения этих видов рака.

Вы также можете снизить риск заражения ВПЧ , используя презерватив каждый раз, когда занимаетесь сексом, хотя вы все равно можете заразиться ВПЧ в областях, открытых презервативом. Таким образом, использование презервативов не считается заменой вакцинации HPV для тех, кто имеет право на вакцинацию.

С

Притиш К. Тош, MD

Получите самую свежую медицинскую информацию от экспертов Mayo Clinic.

Зарегистрируйтесь бесплатно и будьте в курсе научных достижений, советов по здоровью и актуальных тем, связанных со здоровьем, таких как COVID-19, а также экспертных знаний по управлению здоровьем.

Узнайте больше об использовании данных Mayo Clinic.

Чтобы предоставить вам наиболее актуальную и полезную информацию, а также понять, какие информация полезна, мы можем объединить вашу электронную почту и информацию об использовании веб-сайта с другая информация о вас, которой мы располагаем.Если вы пациент клиники Майо, это может включать защищенную информацию о здоровье. Если мы объединим эту информацию с вашей защищенной медицинской информации, мы будем рассматривать всю эту информацию как информацию и будет использовать или раскрывать эту информацию только так, как указано в нашем уведомлении о практики конфиденциальности. Вы можете отказаться от получения сообщений по электронной почте в любое время, нажав на ссылка для отписки в письме.

Подписаться!

Спасибо за подписку

Наш электронный информационный бюллетень Housecall будет держать вас в курсе самой последней медицинской информации.

Извините, что-то пошло не так с вашей подпиской

Повторите попытку через пару минут

Повторить попытку

  • Дисплазия шейки матки: рак?
авг.21, 2020 Показать ссылки
  1. ВПЧ вопросы и ответы. Центры по контролю и профилактике заболеваний. https://www.cdc.gov/hpv/parents/questions-answers.html. По состоянию на 7 августа 2020 г.
  2. ВПЧ и мужчины — информационный бюллетень CDC. Центры по контролю и профилактике заболеваний. https://www.cdc.gov/std/hpv/stdfact-hpv-and-men.htm. По состоянию на 26 мая 2018 г.
  3. Вентимилья Э. и др. Инфицирование вирусом папилломы человека и вакцинация мужчин. Европейский фокус урологии. 2016;2:355.
  4. Хансен Б.Т. и др.Долгосрочные тенденции заболеваемости раком, связанным с ВПЧ, и случаи, которые можно предотвратить с помощью вакцинации против ВПЧ: исследование на основе регистра в Норвегии. Открытый БМЖ. 2018;8:1. http://bmjopen.bmj.com/content/8/2/e019005. По состоянию на 26 мая 2018 г.
  5. ВПЧ и рак. Национальный институт рака. https://www.cancer.gov/about-cancer/causes-prevention/risk/infectious-agents/hpv-fact-sheet. По состоянию на 14 мая 2018 г.
  6. Оливер С.Э. и др. Факторы риска оральной инфекции ВПЧ среди молодых мужчин, практикующих секс с мужчинами — 2 города, США, 2012-2014 гг.Заболевания, передающиеся половым путем. В прессе. По состоянию на 14 мая 2018 г.
  7. Хаддад Р.И. Рак головы и шеи, ассоциированный с вирусом папилломы человека. https://www.uptodate.com/contents/search. По состоянию на 14 мая 2018 г.
  8. Kidd LC, et al. Связь между вирусом папилломы человека и раком полового члена — последствия для профилактики и лечения. Трансляционная андрология и урология. 2017;6:791.
  9. Bennett JE, et al., ред. Иммунизация. В: Принципы и практика инфекционных заболеваний Манделла, Дугласа и Беннета.8-е изд. Филадельфия, Пенсильвания: Elsevier; 2015. https://www.clinicalkey.com. По состоянию на 29 мая 2018 г.
  10. Осазува-Питерс Н. и др. Не только женское дело! Понимание знаний мужчин и женщин о ВПЧ, вакцине против ВПЧ и раке, связанном с ВПЧ. Профилактическая медицина. 2017;99:299.
Посмотреть больше ответов экспертов

.

Лабораторная диагностика инфекции вирусом папилломы человека в женских половых путях

ВВЕДЕНИЕ

Вирус папилломы человека (ВПЧ), член папилломавируса, представляет собой двухцепочечный ДНК-вирус и оказывает цитопатическое действие на эпителий.Инфекция слизистых половых органов является персистирующей, многоочаговой и может протекать в субклинической форме.

Более 30–40 типов ВПЧ обычно передаются половым путем и поражают аногенитальную область.[1] Некоторые типы ВПЧ, передающиеся половым путем, могут вызывать генитальные бородавки. Персистирующая инфекция типами ВПЧ «высокого риска», отличными от тех, которые вызывают кожные бородавки, может прогрессировать до предраковых поражений и инвазивного рака.[2] ВПЧ-инфекция является причиной почти всех случаев рака шейки матки [3], однако большинство инфекций, вызванных этими типами, не вызывают заболевания.

Все ВПЧ-инфекции связаны с передачей от одного инфицированного человека к другому через прямой кожный контакт. Это может произойти при кожной передаче через эпидермис из-за прямого контакта вируса подошвенных бородавок с поврежденной кожей, половым путем во время полового акта или перорально во время полового акта или поцелуев. Симптоматическая ВПЧ-инфекция — это только верхушка айсберга []. Бессимптомное выделение гораздо чаще встречается у женщин с ВИЧ/СПИДом, а бессимптомное выделение имеет высокий потенциал распространения вируса.Бессимптомное выделение ВПЧ/ДНК из перианальной области, по-видимому, очень распространено, 78,9% у пациентов со СПИДом на поздних стадиях заболевания.[4]

ВПЧ – субклинический, многоочаговый и персистирующий

Не было убедительных доказательств того, что использование презерватива снижает риск ДНК-положительного ВПЧ (субклиническая ВПЧ-инфекция). С другой стороны, риск остроконечных кондилом, CIN 2-3 и инвазивного рака шейки матки снижался при использовании презерватива.[5]

ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА

Традиционные методы диагностики вирусов, такие как электронная микроскопия, культура клеток и некоторые иммунологические методы, не подходят для обнаружения ВПЧ.ВПЧ нельзя культивировать в клеточных культурах. Важные методы диагностики инфекции HPV:

  • Colposcopy и уксусную кислоту теста

  • Biopsy

  • 1

    DNA Test (ПЦР, южный гибридизация блот, в гибридизации на месте)

Кольпоскопия и тест на уксусную кислоту

Кольпоскопия – процедура, проводимая специально обученными врачами в амбулаторных условиях с использованием маломощного микроскопа, кольпоскопа.[6] Кольпоскопия – осмотр шейки матки, влагалища и в некоторых случаях вульвы после применения раствора уксусной кислоты; в сочетании с получением кольпоскопически направленной биопсии всех поражений, подозреваемых в неоплазии. [7] Кольпоскопические данные классифицируются в зависимости от степени ацетобелого поражения, контура поверхности, мозаичного рисунка и пунктуации. Большие отклонения этих параметров связаны с тяжестью поражений.

Тест на уксусную кислоту

  • Замачивание уксусной кислотой подозрительных поражений может повысить степень подозрения при поражениях без классических признаков.

  • Метод включает наложение марлевого тампона, смоченного 3–5% уксусной кислотой, на 5–10 минут при подозрении на поражение полового члена, шейки матки, половых губ или перианальной области.

  • Незаметные плоские поражения гениталий, которые трудно оценить, становятся видимыми. Генитальные бородавки, диспластические и неопластические ткани становятся белыми (ацетобелыми).

  • Ложноположительные результаты встречаются часто и могут быть следствием любых факторов, вызывающих паракератоз (например, кандидоз, псориаз, красный плоский лишай, заживление эпителия, сальных желез).

  • Тест с уксусной кислотой не следует использовать для рутинного скрининга.

  • Его можно использовать для визуализации субклинических генитальных поражений, связанных с ВПЧ, выявления поражений для прицельной биопсии и определения границ поражений во время хирургического лечения.[8]

Использование кольпоскопического скрининга рекомендуется только для

  • реципиентов трансплантатов с ослабленным иммунитетом.

  • Женщины, инфицированные вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ).

  • Женщины с тремя последовательными неадекватными образцами, после трех тестов в серии, сообщенные как пограничные ядерные изменения в плоскоклеточных клетках, и направляются на кольпоскопию после одного теста, сообщенного как пограничные ядерные изменения в эндоцервикальных клетках.

  • Положительный результат цитологического исследования шейки матки на злокачественные клетки или подозрительные клетки, но клинически нормальная шейка матки.

  • Женщины должны быть направлены после двух анализов, у которых обнаружен легкий дискариоз.

  • Женщин необходимо направить на кольпоскопию после одного теста, указывающего на умеренный дискариоз или тяжелый дискариоз, не менее 90% женщин с такими результатами теста должны быть осмотрены в клинике кольпоскопии в течение четырех недель после направления.Женщин необходимо направить на кольпоскопию после одного теста, в котором сообщается о возможной инвазии или обнаружении железистой неоплазии, и 90% должны быть осмотрены в течение двух недель после направления

Биопсия

аномальные участки. На самом деле, биопсия патологических участков является важной частью кольпоскопии, поскольку лечение будет зависеть от того, насколько серьезными являются аномалии в образце биопсии. Если результаты биопсии показывают предрак (дисплазию) или рак, то рекомендуется лечение.Дисплазия может быть легкой, средней или тяжелой степени.

Эксцизионная биопсия рекомендуется, когда кольпоскопия указывает на высокую степень аномалии, когда небольшие кольпоскопические изменения связаны с тяжелым дискариозом или хуже, или когда поражение распространяется в канал.

Наиболее характерным признаком генитальных бородавок является наличие койлоцитов, представляющих собой зрелые плоскоклеточные клетки с четкой перинуклеарной зоной. Ядра койлоцитов могут быть увеличены и гиперхромны, также часто видны двойные ядра.

ДНК-методы

Первоначально использовавшиеся методы обнаружения ВПЧ представляли собой прямую гибридизацию зондов, такую ​​как дот-блоттинг и Саузерн-блоттинг. Помимо того, что они были трудоемкими и длительными, они имели низкую чувствительность, требовали большого количества ДНК в клинических образцах и в значительной степени были вытеснены технологией амплификации, которая позволила обнаруживать небольшое количество копий вируса в клинических образцах. Установленным рутинным методом обнаружения вирусов является гибридизация вирусных нуклеиновых кислот.Двумя основными методами являются:

Гибридный анализ ДНК ВПЧ 2 (hc2)

HC2 в сочетании с тестом Папаниколау теперь одобрен FDA.[9] Поскольку тест Hybrid Capture 2, одобренный FDA, может обнаруживать всего 1 пг ДНК ВПЧ/мл; его чувствительность и специфичность практически сопоставимы с методами обнаружения на основе ПЦР. Преимуществами теста Hybrid Capture 2 являются относительно простое обращение и хорошая воспроизводимость результатов, что делает этот тест лучшим стандартизированным методом обнаружения ВПЧ.Хотя точный тип ВПЧ определить невозможно, «низкий риск» (6, 11, 42, 43, 44) и «высокий риск» (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 68) выявляются группы генотипов ВПЧ (HR HPV и LR HPV).

Полимеразная цепная реакция

ПЦР представляет собой анализ селективной целевой амплификации, способный к экспоненциальному и воспроизводимому увеличению последовательностей ВПЧ, присутствующих в биологических образцах. Процесс амплификации теоретически может произвести один миллиард копий из одной двухцепочечной молекулы ДНК после 30 циклов амплификации.[10]

Мазок Папаниколау или ПАП-тест

  • Это скрининг-тест, впервые описанный Папаниколау и Траутом.

  • Помимо предраковых и злокачественных изменений, также могут быть обнаружены вирусные инфекции, такие как инфекция ВПЧ и герпес.

  • Положительный тест требует дополнительных подтверждающих тестов, таких как колоноскопия, биопсия шейки матки и тесты ДНК, такие как ПЦР.

Процедура
  • Пациентку укладывают на спину и обнажают шейку матки с помощью зеркала Куско, беря соскоб из чешуйчато-столбчатого перехода с помощью шпателя Эйра, вращая его вокруг.

  • Соскоб наносят на предметное стекло, фиксируя 95% этиловым спиртом и эфиром, или фиксирующим спреем (цитоспрей).

  • Для цитологического исследования берут соскоб с верхнелатеральной части стенки влагалища.

Пересмотренные рекомендации ACOG по мазкам Папаниколау[11]

  • Женщины в возрасте от 21 до 30 лет должны проходить скрининг каждые два года вместо ежегодного, используя стандартную цитологию Папаниколау или жидкостную цитологию.

  • Женщины в возрасте 30 лет и старше, у которых три последовательных отрицательных результата цитологического исследования шейки матки, могут проходить скрининг один раз в три года с помощью мазка Папаниколау или жидкостной цитологии.

  • Женщинам с определенными факторами риска может потребоваться более частый скрининг, в том числе ВИЧ-инфицированные, с иммуносупрессией, подвергшиеся воздействию диэтилстильбестрола (DES) в период внутриутробного развития и получавшие лечение по поводу цервикальной интраэпителиальной неоплазии (CIN) 2, CIN 3, или рак шейки матки.

КО ВПЧ/ВИЧ – ИНФЕКЦИЯ

Интраэпителиальная неоплазия (ИЭН) часто встречается у инфицированных ВПЧ пациентов с ВИЧ/СПИДом. Клинических маркеров, позволяющих диагностировать раннюю ИЭН, не существует, поэтому перед лечением необходимо провести биопсию и генотипирование всех ВИЧ-позитивных пациентов с остроконечными кондиломами.

Как диагностируется вирус папилломы человека (ВПЧ)

Диагностика вируса папилломы человека (ВПЧ) включает не только обнаружение вируса, но и определение , какие из более чем 100 родственных вирусов, составляющих ВПЧ, присутствуют. Хотя большинство из них относительно безвредны, особенно важно выяснить, связана ли инфекция с одним из 14 идентифицированных штаммов высокого риска, тесно связанных с раком. Врачи будут использовать мазок Папаниколау, тест на ВПЧ или биопсию — наряду с их клиническим суждением — для постановки диагноза и, надеюсь, выявления любых случаев высокого риска, прежде чем они станут проблемой.То, как кто-то проходит скрининг и тестирование, зависит от его пола, возраста и даже сексуальной ориентации.

Однако проблема с диагностикой заключается в том, что ВПЧ часто не дает явных признаков инфекции, что может побудить людей отложить тестирование. В некоторых случаях у людей может быть впервые диагностирован ВПЧ, когда у них диагностирован родственный рак.

Иллюстрация Verywell

Тесты для женщин

Тестирование на ВПЧ можно проводить во время гинекологического осмотра — либо отдельно, либо одновременно с мазком Папаниколау.Это может быть сделано во время обычного гинекологического осмотра или специально при подозрении на ВПЧ.

Во время мазка Папаниколау клетки осторожно соскабливают с шейки матки и исследуют под микроскопом, чтобы проверить наличие признаков дисплазии, которая может возникнуть в результате инфекции ВПЧ. Также будет проведен визуальный осмотр для выявления генитальных бородавок (которые обычно имеют вид цветной капусты, но также могут быть плоскими и телесного цвета). Помните, однако, что отсутствие бородавок не означает, что вы свободны от ВПЧ.

Другой тест, называемый тестом на ВПЧ, проверяет фактический вирус, а не изменения в клетках шейки матки. Он используется у женщин в возрасте 30–65 лет либо в ответ на аномальный мазок Папаниколау, либо как часть рутинного скрининга. Его можно проводить одновременно и даже с тем же мазком, что и мазок Папаниколау (практика, известная как совместное тестирование).

Рекомендации

Рекомендации по скринингу на ВПЧ могут варьироваться в зависимости от возраста женщины и других факторов:

  • Женщинам в возрасте от 21 до 29 лет рекомендуется сдавать мазок Папаниколау каждые три года.Тем не менее, тестирование на ВПЧ не проводится рутинно, но может быть добавлено автоматически, если мазок Папаниколау не соответствует норме (рефлекторное тестирование на ВПЧ), поскольку ВПЧ-инфекции распространены среди женщин в возрасте 20 лет и редко приводят к раку. В течение этого времени большинство инфекций ВПЧ будут кратковременными и исчезнут сами по себе без долгосрочных последствий.
  • Женщинам в возрасте от 30 до 65 лет можно проводить либо мазок Папаниколау каждые три года, либо один тест на ВПЧ можно проводить каждые пять лет, либо совместное тестирование с мазком Папаниколау и тестом на ВПЧ можно проводить каждые пять лет.
  • ВИЧ-инфицированные женщины в возрасте от 21 до 29 лет должны сдавать мазок Папаниколау каждые 12 месяцев при первом диагнозе. После трех нормальных результатов тестирование может быть расширено до одного мазка Папаниколау каждые три года, если результаты нормальные.

Пап-тесты и тесты на ВПЧ занимают всего несколько минут. Результаты Папаниколау обычно возвращаются через две недели; Результаты теста на ВПЧ могут занять больше времени. Оба обычно покрываются страховкой.

Одним из самых больших факторов риска рака шейки матки является отсутствие регулярного скрининга.Чтобы избежать осложнений, вызванных ВПЧ, женщины должны следовать приведенному выше графику скрининга и сообщать своим врачам о любых бородавках, поражениях или других аномалиях, которые развились в половых органах или анусе.

Тесты для мужчин

О большинстве инфекций ВПЧ у мужчин свидетельствует появление одной или нескольких бородавок на половом члене, мошонке, бедрах, в паху или анусе. Однако, если бородавка интернализирована, ее часто можно идентифицировать только при осмотре анального канала с помощью аноскопа и/или с помощью мазка Папаниколау из анального канала.

Анальный мазок Папаниколау использует ту же технологию, что и мазок из шейки матки, и используется для выявления дисплазии в клетках, взятых из заднего прохода. Тест может быть важным инструментом для мужчин, которые занимаются рецептивным анальным сексом, поскольку внутренние бородавки часто не ощущаются.

Рекомендации

Несмотря на это, Центры по контролю и профилактике заболеваний (CDC) в настоящее время не рекомендуют рутинный анальный скрининг Папаниколау у мужчин, поскольку недостаточно данных, чтобы рекомендовать этот тип скрининга анального рака для тех, кто находится в группе риска.Кроме того, в отличие от тестов на ВПЧ, используемых у женщин, в настоящее время не существует такого теста для подтверждения анальной или оральной инфекции.

С этой целью CDC признает, что некоторые медицинские работники проводят мазок Папаниколау из анального отверстия у тех, кто может подвергаться повышенному риску, включая мужчин, имеющих половые контакты с мужчинами (МСМ), которые занимаются рецептивным анальным сексом, и мужчин с ВИЧ. МСМ, инфицированные ВИЧ, особенно подвержены риску. Эта группа имеет в 37 раз больший риск анального рака по сравнению с населением в целом.

В отсутствие руководств по скринингу вы должны защищать себя сами и, при необходимости, обращаться за помощью к врачу или в клинику, специализирующуюся на мужском здоровье или помощи, ориентированной на МСМ.

Как правило, эти тесты , а не покрываются страховкой.

Биопсия остроконечных кондилом

Если бородавка выглядит подозрительно или ее трудно идентифицировать, врач может провести биопсию, чтобы взять образец ткани для анализа в лаборатории. В то время как инъекция анестетика, используемая для обезболивания кожи, может быть болезненной, сама процедура, как правило, безболезненна.

После удаления ткань можно исследовать под микроскопом. Затем лаборатория либо скажет вам, что аномальных клеток нет (это означает, что все в порядке), либо что аномальные клетки, называемые койлоцитами, есть. Койлоциты кажутся полыми или вогнутыми под микроскопом и характерны для инфекции ВПЧ.

Биопсия остроконечных кондилом может быть показана, если:

  • Диагноз ВПЧ неясен
  • Бородавка кровоточит, воспалена или имеет нетипичный вид
  • У человека ВИЧ или ослабленный иммунитет
  • Состояние ухудшилось после предыдущего обследования

Если тест на ВПЧ положительный

Точно так же, как отсутствие бородавок не означает, что вы свободны от ВПЧ, наличие генитальной бородавки не означает, что вы заболеете раком.

Если нет признаков неоплазии (неконтролируемого аномального роста клеток), врач будет рассматривать положительный результат скрининга на ВПЧ как «тревожный сигнал» и продолжать внимательно следить за состоянием.

Руководство для обсуждения HPV Doctor

Получите наш печатный справочник для вашего следующего визита к врачу, чтобы помочь вам задать правильные вопросы.

Отправить руководство по электронной почте

Отправить себе или близкому человеку.

Зарегистрироваться

Это руководство для обсуждения с доктором было отправлено на {{form.Эл. адрес}}.

Произошла ошибка. Пожалуйста, попробуйте еще раз.

Хотя со временем дисплазия может перейти в рак, риск сильно варьируется. Дисплазия низкой степени обычно проходит сама по себе без лечения. Напротив, дисплазия высокой степени без лечения может перерасти в раннюю форму рака, известную как карцинома in situ (CIS).

В том маловероятном случае, если будет диагностирован рак или предрак, вас направят к онкологу для определения стадии заболевания и определения соответствующего курса лечения.К счастью, ранняя диагностика почти всегда обеспечивает больший успех лечения.

Часто задаваемые вопросы

  • Насколько распространены ложноположительные тесты на ВПЧ?

    Совместное тестирование на ВПЧ и Папаниколау может привести к более высокому уровню ложноположительных результатов, чем только тест на ВПЧ. Поскольку этот скрининг-тест предназначен для выявления ВПЧ высокого риска, ложноположительный результат обычно означает, что присутствующий тип ВПЧ не представляет высокого риска развития рака, что может привести к ненужному беспокойству и лечению.

  • Через какое время после контакта с ВПЧ появляются симптомы?

    Могут пройти годы, прежде чем появятся симптомы после контакта с ВПЧ, а у некоторых людей симптомы никогда не проявляются. Другие узнают, что у них есть ВПЧ, только после того, как возникают более серьезные проблемы, такие как генитальные бородавки или рак, поэтому профилактика очень важна.

  • Как вы проводите тест на оральный ВПЧ?

    Не существует утвержденного теста для проверки на пероральный ВПЧ (во рту или горле).Тем не менее, признаки и симптомы могут включать язву, которая не проходит в течение трех недель, изменение цвета во рту, затрудненное глотание, опухшие миндалины, постоянный кашель или боль в горле, а также онемение во рту или на губах.

  • Насколько распространен ВПЧ?

    ВПЧ очень распространен. По данным CDC, в 2018 году в США было зарегистрировано 43 миллиона случаев заражения.

Молекулярная диагностика вируса папилломы человека | Лабораторная медицина

Аннотация

Цель:

Вирус папилломы человека (ВПЧ) является наиболее распространенной инфекцией, передающейся половым путем в Соединенных Штатах.В этом обзоре обобщаются методы молекулярного тестирования, используемые в настоящее время для обнаружения и генотипирования ДНК ВПЧ, и обсуждаются возможные будущие подходы.

Резюме:

Существует более 100 различных типов ВПЧ, которые подразделяются на категории низкого и высокого риска в зависимости от клинической картины. Типы с низким риском могут вызывать бородавки, а типы с высоким риском связаны с раком шейки матки. Доступные методы обнаружения и генотипирования ВПЧ включают методы амплификации как мишени, так и сигнала.

Заключение:

Методы молекулярной диагностики позволяют идентифицировать множество уникальных типов ВПЧ высокого риска, что может привести к более точной диагностике и планам лечения пациентов. Использование этих диагностических методов требует рассмотрения общепринятых рекомендаций по ведению женщин с нормальными и аномальными результатами скрининга шейки матки, а также рассмотрения клинической чувствительности и диагностической полезности анализа.

Вирус папилломы человека (ВПЧ) является наиболее распространенной инфекцией, передающейся половым путем в Соединенных Штатах, поражающей мужчин и женщин. 1 По оценкам, более 24 миллионов мужчин и женщин в Соединенных Штатах в настоящее время инфицированы ВПЧ. 2,3 Ежегодно в США регистрируется более 4 миллионов новых случаев заражения ВПЧ, и в любой момент времени инфицировано около 1–10% сексуально активного населения США. 4,5 Существует 2 категории ВПЧ: инфекции, передающиеся через кожный контакт, и инфекции, передающиеся половым путем. Как правило, инфекция ВПЧ носит транзиторный характер, и иммунная система может избавиться от инфекции в течение 2 лет. 6 В настоящее время известно более 100 различных известных генотипов ВПЧ, которые были сгруппированы в категории низкого и высокого риска и определены как вызывающие инфекции слизистых оболочек или кожи. 7 Типы ВПЧ, передающиеся через контакт с кожей, обычно вызывают кожные бородавки, особенно у детей. Наиболее распространенным заболеванием, передающимся половым путем, вызываемым ВПЧ, являются генитальные бородавки (остроконечные кондиломы), похожие на бородавки наросты на слизистой оболочке шейки матки или вульвы у женщин или на головке полового члена или крайней плоти у мужчин. 4 Бородавки, как правило, являются результатом заражения типами ВПЧ низкого риска, включая 6, 11, 32, 40, 42, 44, 54, 55, 61, 62, 64, 71, 72, 74, 81, 83 , 84, 87, 89 и 91. 8,9 Типы ВПЧ высокого риска включают 16, 18, 26, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 53, 56, 58, 59, 66, 67, 68, 69, 70, 73, 82, 85 и ИС39. 8,9 Штаммы высокого риска вызывают дисплазию шейки матки и могут приводить к развитию нескольких видов рака, включая рак шейки матки, вульвы, влагалища, ануса и полового члена. 10 Наиболее распространенным из них является рак шейки матки, ассоциированный с ВПЧ.

Рак шейки матки и мазок Папаниколау

Развитие рака шейки матки после ВПЧ-инфекции связано с рядом других обстоятельств, включая генные мутации, и происходит через много лет после первоначальной ВПЧ-инфекции. Вирус папилломы человека является необходимым фактором, но недостаточным для развития дисплазии или карциномы. Заболевание обычно развивается при персистирующей ВПЧ-инфекции эпителия шейки матки. 11,12 Заражение штаммом ВПЧ высокого риска не является вердиктом для развития рака шейки матки, но дисплазия шейки матки, связанная с ВПЧ-инфекцией, может стать злокачественной. 13 Часто женщины инфицированы ВПЧ, и у них никогда не развиваются серьезные или даже очевидные осложнения, хотя это не должно уменьшать потребность в регулярных обследованиях на предмет рака шейки матки.

Окрашивание по Папаниколау (Пап) является золотым стандартом для выявления аномальных клеток эпителия шейки матки с помощью микроскопического анализа обычных цервикальных мазков или клеточных суспензий из среды жидкой цитологии. 13 В 1930-х годах рак шейки матки был основной причиной смерти женщин от рака в Соединенных Штатах. К 2000 году этот показатель снизился почти на 90%, в основном потому, что широкое распространение регулярных цитологических исследований шейки матки или мазков Папаниколау привело к снижению заболеваемости раком шейки матки. 4 В настоящее время осмотр шейки матки и мазок Папаниколау остаются предпочтительным методом скрининга для большинства женщин. Морфологические данные цитологического анализа определяют уровень риска развития злокачественных новообразований шейки матки.Эпителиальные клетки шейки матки, определенные как атипичные или аномальные, но еще не определенные как неопластические, получают термин «атипичные плоскоклеточные клетки неопределенного значения» (ASCUS) или «не могут исключать поражения высокой степени» (ASC-H). Большинство случаев ASCUS сигнализируют о наличии низкосортных плоскоклеточных интраэпителиальных поражений (LSIL), которые обычно связаны с транзиторными, саморазрешающимися инфекциями ВПЧ. Однако некоторые результаты ASCUS связаны с основным заболеванием высокой степени тяжести, включая цервикальную интраэпителиальную неоплазию (CIN). 14 Женщины старше 30 лет с персистирующей инфекцией типами ВПЧ высокого риска подвергаются наибольшему риску развития рака шейки матки. 15 Молекулярные диагностические тесты на ВПЧ могут дополнить скрининг рака шейки матки при использовании в сочетании с мазком Папаниколау.

В 2006 г. Американское общество кольпоскопии и патологии шейки матки (ASCCP) опубликовало рекомендации по ведению женщин с неоплазией шейки матки или патологическими результатами скрининговых тестов на рак шейки матки. 16 Эти рекомендации в значительной степени основаны на результатах исследования сортировки ASCUS/LSIL Национального института рака (ALTS), которое представляло собой крупное многоцентровое клиническое исследование, предназначенное для оценки 3 методов лечения: немедленная кольпоскопия (исследование шейки матки), цитологическое исследование -вверх и сортировка с помощью тестирования ДНК ВПЧ. 17 В согласованных рекомендациях ASCCP говорится, что женщина старше 30 лет с отрицательным результатом цитологического исследования должна пройти скрининг на инфекцию HR-HPV. Если положительный результат на штамм высокого риска, повторный скрининг и цитологическое исследование Папаниколау следует повторить через 12 месяцев с последующей кольпоскопией, если положительный статус ВПЧ сохраняется. В 2009 году, после утверждения первого теста на определение генотипа ВПЧ, ASCCP предположил, что женщина в возрасте 30 лет и старше с положительным результатом на HR-ВПЧ, но с отрицательным результатом цитологического исследования, получит клиническую пользу от анализа, который специально выявляет генотипы ВПЧ 16 и 18.В случае положительного результата на ВПЧ 16/18 следует немедленно провести кольпоскопию, а в случае отрицательного результата – повторную цитологию и анализ на ВПЧ высокого риска через 1 год. Женщины старше 30 лет без признаков ДНК ВПЧ высокого риска должны пройти повторный скрининг на ВПЧ через 3 года. Тестирование и генотипирование ДНК ВПЧ высокого риска не рекомендуется подросткам младше 20 лет или женщинам 21 года и старше с цитологическим исследованием ASC-H, LSIL или плоскоклеточного внутриэпителиального поражения высокой степени (HSIL). 16 Эта рекомендация основана на результатах исследования ALTS, в котором сделан вывод о том, что тестирование на ВПЧ не имеет значения при клиническом ведении женщин с LSIL, и вместо этого этим женщинам следует немедленно пройти кольпоскопию. 18 Тестирование на вирус папилломы человека также не показано женщинам, рассматривающим возможность вакцинации против ВПЧ, для рутинного скрининга на ЗППП или в рамках случая сексуального насилия. 16

Скрининг на вирус папилломы человека менее эффективен с клинической точки зрения для молодых женщин, поскольку женщины в возрасте до 30 лет имеют высокую заболеваемость ВПЧ-инфекцией, большинство из которых излечиваются спонтанно и никогда не вызывают рак. Согласно популяционным данным Национального обследования состояния здоровья и питания (NHANES) за 2003–2004 гг., общая распространенность ВПЧ, включая типы высокого и низкого риска, составила 26.8% среди женщин США в возрасте от 14 до 59 лет, с пиком в 44,8% в возрасте от 20 до 24 лет. 19 Таким образом, скрининг молодых женщин на ВПЧ часто выявляет инфекцию ВПЧ, но мало коррелирует с частотой аномалий шейки матки или рака. Более эффективным подходом к охране репродуктивного здоровья в этой возрастной группе является профилактика ВПЧ-инфекции путем вакцинации.

Вакцина против ВПЧ

В 2006 году Управление по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов (FDA) одобрило профилактическую вакцину против ВПЧ.Вакцина Gardasil (Merck, Whitehouse Station, NJ) представляет собой серию из 3 прививок, вводимых в течение 6-месячного периода, которые помогают защититься от 4 распространенных типов ВПЧ: 6, 11, 16 и 18. Известны типы 6 и 11. вызывают около 90% случаев остроконечных кондилом, 20 и типы 16 и 18 связаны с 70% случаев рака шейки матки. 21,22 Вакцина показана женщинам в возрасте от 9 до 26 лет. Вакцину можно вводить до или после начала половой жизни. С октября 2009 года вакцина также показана для профилактики генитальных бородавок у мальчиков и мужчин в возрасте от 9 до 26 лет. 23 Также в октябре 2009 года FDA одобрило новую вакцину против ВПЧ под названием Церварикс (GlaxoSmithKline, Лондон, Великобритания). Церварикс предотвращает только 2 штамма высокого риска, ВПЧ 16 и 18, и показан для профилактики рака шейки матки и аномалий у женщин в возрасте от 10 до 25 лет. 24 Церварикс доступен в Европе с 2007 года, но не защищает от ВПЧ типов 6 и 11, наиболее частых причин остроконечных кондилом. Медицинские организации, такие как Американская академия педиатрии, Центры по контролю и профилактике заболеваний (CDC) и Американский колледж акушеров и гинекологов, рекомендуют вакцинацию против ВПЧ для профилактики рака шейки матки, хотя регулярные обследования на рак шейки матки по-прежнему необходимы после вакцинации.

Рисунок 1

Геном ВПЧ. Геном ВПЧ представляет собой кольцевую молекулу примерно из 7900 пар оснований. На схеме показано приблизительное расположение 8 перекрывающихся рамок считывания в линейной ориентации. Ген L1, кодирующий капсидный белок вируса, является основной мишенью для амплификации и обнаружения ДНК ВПЧ. Гены Е6 и Е7 отвечают за роль ВПЧ в развитии рака шейки матки.

Рисунок 1

Геном ВПЧ. Геном ВПЧ представляет собой кольцевую молекулу примерно из 7900 пар оснований.На схеме показано приблизительное расположение 8 перекрывающихся рамок считывания в линейной ориентации. Ген L1, кодирующий капсидный белок вируса, является основной мишенью для амплификации и обнаружения ДНК ВПЧ. Гены Е6 и Е7 отвечают за роль ВПЧ в развитии рака шейки матки.

Таблица 1

Краткий обзор методов молекулярной диагностики ВПЧ

6 6 6 6 PapilloCheck (Greiner Bio-One)  6 Cervista HPV HR (Hologic) V 6 Cervista18 (Hologic)
Тест . Принцип . Комментарии . Штаммы с низким уровнем риска . Штаммы высокого риска .
Обратный линейный блот (Roche) Целевая амплификация; генотипирование; консенсусная ПЦР и линейный блот Только для научных исследований 6, 11, 61, 62, 64, 67, 69, 72, 81, 89 16, 18, 26, 31, 33, 35, 39, 40, 42 , 45, 51–59, 66, 68, 73, 82, 83, 84 
Тест генотипирования HPV LINEAR ARRAY (Roche)  Целевая амплификация; генотипирование; ПЦР с последующей гибридизацией линий Маркировка СЕ для использования в Европе 6, 11, 40, 42, 53, 54, 55, 61, 62, 64, 67, 69, 70, 71, 72, 81, 84, IS39, CP6108  16, 18, 26, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66, 68, 73, 82, 83 
Генотипирование HPV Extra (Инногенетика)  Целевая амплификация; генотипирование; Праймеры SPF10 для региона L1, обратная гибридизация Маркировка CE для использования в Европе 6, 11, 40, 43, 44, 54, 70 16, 18, 26, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 53, 56, 58, 59, 66, 68, 69, 71, 73, 74, 82
AMPLICOR HPV (Roche) Целевая амплификация; обнаружение; ПЦР и гибридизация нуклеиновых кислот  Маркировка СЕ для использования в Европе  Не применимо  16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 68 
Целевая амплификация E1 для генотипирования; ПЦР/ДНК-матрица Маркировка CE для использования в Европе 6, 11, 40, 42, 43, 44 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 53, 56 , 58, 59, 66, 68, 70, 73, 82 
Набор для генотипирования Multiplex HPV (Multimetrix)  Целевая амплификация; генотипирование; ПЦР и массив флуоресцентных шариков Только для научных исследований 6, 11, 42, 43, 44, 70 16, 18, 26, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 53, 56, 58 , 59, 66, 68, 73, 82 
GenoID Анализ ВПЧ в реальном времени (GenoID)  Целевая амплификация для обнаружения или полугенотипирования; ПЦР в реальном времени Маркировка CE для использования в Европе 6, 11, 42, 43, 44 (только Lightcycler) 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66, 68
Digene Hybrid Capture II (HC2) HR HPV DNA Test (Digene/Qiagen) Усиление сигнала для обнаружения; гибридный захват, полуколичественный Одобрено FDA Н/Д 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 68
6 II (HC2) Тест на ДНК ВПЧ (Digene/Qiagen)  Амплификация сигнала для обнаружения; гибридный захват, полуколичественный одобрен FDA 6, 11, 42, 43, 44 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 18 905
CareHPV (Qiagen) Усиление сигнала для обнаружения; экспресс-тест на HC2 Для использования в развивающихся странах Н/Д 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66, 68
Усиление сигнала для обнаружения; Технология Invader Одобрено FDA Н/Д 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66, 68 HP
Амплификация сигнала для генотипирования; Технология Invader Одобрено FDA Н/Д 16, 18
6 6 6 6 PapilloCheck (Greiner Bio-One)  6 Cervista HPV HR (Hologic) V 6 Cervista18 (Hologic)
Тест . Принцип . Комментарии . Штаммы с низким уровнем риска . Штаммы высокого риска .
Обратный линейный блот (Roche) Целевая амплификация; генотипирование; консенсусная ПЦР и линейный блот Только для научных исследований 6, 11, 61, 62, 64, 67, 69, 72, 81, 89 16, 18, 26, 31, 33, 35, 39, 40, 42 , 45, 51–59, 66, 68, 73, 82, 83, 84 
Тест генотипирования HPV LINEAR ARRAY (Roche)  Целевая амплификация; генотипирование; ПЦР с последующей гибридизацией линий Маркировка СЕ для использования в Европе 6, 11, 40, 42, 53, 54, 55, 61, 62, 64, 67, 69, 70, 71, 72, 81, 84, IS39, CP6108  16, 18, 26, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66, 68, 73, 82, 83 
Генотипирование HPV Extra (Инногенетика)  Целевая амплификация; генотипирование; Праймеры SPF10 для региона L1, обратная гибридизация Маркировка CE для использования в Европе 6, 11, 40, 43, 44, 54, 70 16, 18, 26, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 53, 56, 58, 59, 66, 68, 69, 71, 73, 74, 82
AMPLICOR HPV (Roche) Целевая амплификация; обнаружение; ПЦР и гибридизация нуклеиновых кислот  Маркировка СЕ для использования в Европе  Не применимо  16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 68 
Целевая амплификация E1 для генотипирования; ПЦР/ДНК-матрица Маркировка CE для использования в Европе 6, 11, 40, 42, 43, 44 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 53, 56 , 58, 59, 66, 68, 70, 73, 82 
Набор для генотипирования Multiplex HPV (Multimetrix)  Целевая амплификация; генотипирование; ПЦР и массив флуоресцентных шариков Только для научных исследований 6, 11, 42, 43, 44, 70 16, 18, 26, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 53, 56, 58 , 59, 66, 68, 73, 82 
GenoID Анализ ВПЧ в реальном времени (GenoID)  Целевая амплификация для обнаружения или полугенотипирования; ПЦР в реальном времени Маркировка CE для использования в Европе 6, 11, 42, 43, 44 (только Lightcycler) 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66, 68
Digene Hybrid Capture II (HC2) HR HPV DNA Test (Digene/Qiagen) Усиление сигнала для обнаружения; гибридный захват, полуколичественный Одобрено FDA Н/Д 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 68
6 II (HC2) Тест на ДНК ВПЧ (Digene/Qiagen)  Амплификация сигнала для обнаружения; гибридный захват, полуколичественный одобрен FDA 6, 11, 42, 43, 44 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 18 905
CareHPV (Qiagen) Усиление сигнала для обнаружения; экспресс-тест на HC2 Для использования в развивающихся странах Н/Д 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66, 68
Усиление сигнала для обнаружения; Технология Invader Одобрено FDA Н/Д 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66, 68 HP
Амплификация сигнала для генотипирования; Технология Invader Одобрено FDA Н/Д 16, 18
. Принцип . Комментарии . Штаммы с низким уровнем риска . Штаммы высокого риска . Обратный линейный блот (Roche) Целевая амплификация; генотипирование; консенсусная ПЦР и линейный блот Только для научных исследований 6, 11, 61, 62, 64, 67, 69, 72, 81, 89 16, 18, 26, 31, 33, 35, 39, 40, 42 , 45, 51–59, 66, 68, 73, 82, 83, 84  Тест генотипирования HPV LINEAR ARRAY (Roche)  Целевая амплификация; генотипирование; ПЦР с последующей гибридизацией линий Маркировка СЕ для использования в Европе 6, 11, 40, 42, 53, 54, 55, 61, 62, 64, 67, 69, 70, 71, 72, 81, 84, IS39, CP6108  16, 18, 26, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66, 68, 73, 82, 83  Генотипирование HPV Extra (Инногенетика)  Целевая амплификация; генотипирование; Праймеры SPF10 для региона L1, обратная гибридизация Маркировка CE для использования в Европе 6, 11, 40, 43, 44, 54, 70 16, 18, 26, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 53, 56, 58, 59, 66, 68, 69, 71, 73, 74, 82 AMPLICOR HPV (Roche) Целевая амплификация; обнаружение; ПЦР и гибридизация нуклеиновых кислот  Маркировка СЕ для использования в Европе  Не применимо  16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 68  6 6 6 6 PapilloCheck (Greiner Bio-One)  Целевая амплификация E1 для генотипирования; ПЦР/ДНК-матрица Маркировка CE для использования в Европе 6, 11, 40, 42, 43, 44 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 53, 56 , 58, 59, 66, 68, 70, 73, 82  Набор для генотипирования Multiplex HPV (Multimetrix)  Целевая амплификация; генотипирование; ПЦР и массив флуоресцентных шариков Только для научных исследований 6, 11, 42, 43, 44, 70 16, 18, 26, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 53, 56, 58 , 59, 66, 68, 73, 82  GenoID Анализ ВПЧ в реальном времени (GenoID)  Целевая амплификация для обнаружения или полугенотипирования; ПЦР в реальном времени Маркировка CE для использования в Европе 6, 11, 42, 43, 44 (только Lightcycler) 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66, 68 Digene Hybrid Capture II (HC2) HR HPV DNA Test (Digene/Qiagen) Усиление сигнала для обнаружения; гибридный захват, полуколичественный Одобрено FDA Н/Д 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 68 6 II (HC2) Тест на ДНК ВПЧ (Digene/Qiagen)  Амплификация сигнала для обнаружения; гибридный захват, полуколичественный одобрен FDA 6, 11, 42, 43, 44 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 18 905 CareHPV (Qiagen) Усиление сигнала для обнаружения; экспресс-тест на HC2 Для использования в развивающихся странах Н/Д 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66, 68 6 Cervista HPV HR (Hologic) Усиление сигнала для обнаружения; Технология Invader Одобрено FDA Н/Д 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66, 68 HP V 6 Cervista18 (Hologic) Амплификация сигнала для генотипирования; Технология Invader Одобрено FDA Н/Д 16, 18 6 6 6 6 PapilloCheck (Greiner Bio-One)  6 Cervista HPV HR (Hologic) V 6 Cervista18 (Hologic)
Тест . Принцип . Комментарии . Штаммы с низким уровнем риска . Штаммы высокого риска .
Обратный линейный блот (Roche) Целевая амплификация; генотипирование; консенсусная ПЦР и линейный блот Только для научных исследований 6, 11, 61, 62, 64, 67, 69, 72, 81, 89 16, 18, 26, 31, 33, 35, 39, 40, 42 , 45, 51–59, 66, 68, 73, 82, 83, 84 
Тест генотипирования HPV LINEAR ARRAY (Roche)  Целевая амплификация; генотипирование; ПЦР с последующей гибридизацией линий Маркировка СЕ для использования в Европе 6, 11, 40, 42, 53, 54, 55, 61, 62, 64, 67, 69, 70, 71, 72, 81, 84, IS39, CP6108  16, 18, 26, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66, 68, 73, 82, 83 
Генотипирование HPV Extra (Инногенетика)  Целевая амплификация; генотипирование; Праймеры SPF10 для региона L1, обратная гибридизация Маркировка CE для использования в Европе 6, 11, 40, 43, 44, 54, 70 16, 18, 26, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 53, 56, 58, 59, 66, 68, 69, 71, 73, 74, 82
AMPLICOR HPV (Roche) Целевая амплификация; обнаружение; ПЦР и гибридизация нуклеиновых кислот  Маркировка СЕ для использования в Европе  Не применимо  16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 68 
Целевая амплификация E1 для генотипирования; ПЦР/ДНК-матрица Маркировка CE для использования в Европе 6, 11, 40, 42, 43, 44 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 53, 56 , 58, 59, 66, 68, 70, 73, 82 
Набор для генотипирования Multiplex HPV (Multimetrix)  Целевая амплификация; генотипирование; ПЦР и массив флуоресцентных шариков Только для научных исследований 6, 11, 42, 43, 44, 70 16, 18, 26, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 53, 56, 58 , 59, 66, 68, 73, 82 
GenoID Анализ ВПЧ в реальном времени (GenoID)  Целевая амплификация для обнаружения или полугенотипирования; ПЦР в реальном времени Маркировка CE для использования в Европе 6, 11, 42, 43, 44 (только Lightcycler) 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66, 68
Digene Hybrid Capture II (HC2) HR HPV DNA Test (Digene/Qiagen) Усиление сигнала для обнаружения; гибридный захват, полуколичественный Одобрено FDA Н/Д 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 68
6 II (HC2) Тест на ДНК ВПЧ (Digene/Qiagen)  Амплификация сигнала для обнаружения; гибридный захват, полуколичественный одобрен FDA 6, 11, 42, 43, 44 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 18 905
CareHPV (Qiagen) Усиление сигнала для обнаружения; экспресс-тест на HC2 Для использования в развивающихся странах Н/Д 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66, 68
Усиление сигнала для обнаружения; Технология Invader Одобрено FDA Н/Д 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66, 68 HP
Амплификация сигнала для генотипирования; Технология Invader  Одобрено FDA  Н/Д  16, 18 

Молекулярная диагностика

Для тех женщин, которые, как считается, получают пользу от скрининга на ВПЧ, существует ряд молекулярных диагностических тестов для выявления ВПЧ.Из-за невозможности культивирования ВПЧ в лаборатории молекулярные методы являются единственным доступным методом обнаружения ДНК ВПЧ. Геном ВПЧ является двухцепочечным и кольцевым, его длина составляет примерно 7900 п.н. 13 На рис. 1 представлен обобщенный геном ВПЧ в линейной форме. Вирус ВПЧ имеет 8 перекрывающихся рамок считывания или генов, классифицируемых как ранние или поздние, в зависимости от того, когда они экспрессируются. Ранние гены, E1 и E2, участвуют в репликации и транскрипции генома, тогда как ген E4 способствует продуктивной фазе жизненного цикла вируса.Онкопротеины Е6 и Е7 образуют комплексы с опухолевыми супрессорами 13,25 и, таким образом, могут приводить к трансформации клеток-хозяев и развитию рака шейки матки. 26 Поздние гены L1 и L2 кодируют капсидные белки вируса. 25 Большинство анализов ВПЧ нацелены на область L1 для классификации генотипов ВПЧ, хотя также используется ген Е1.

Основными диагностическими методами обнаружения и генотипирования ВПЧ являются амплификация мишени, амплификация сигнала и амплификация зонда.Целевая амплификация дублирует фрагменты ДНК из последовательности целевого гена. Наиболее известным примером этого является полимеразная цепная реакция (ПЦР). Усиление сигнала использует технологию разветвленной ДНК или гибридный захват для увеличения сигнала, пропорционального ДНК, до обнаруживаемых уровней. Амплификация зонда включает такие технологии, как цепная реакция лигазы, которая амплифицирует зонд. 27 Традиционные методы молекулярной неамплификации включают Саузерн-блот-гибридизацию, гибридизацию in situ и дот-блоттинг.Эти методы без усиления обычно требуют больше времени, уровня навыков и необходимого оборудования, и их превосходят более чувствительные и надежные методы. В этом обзоре основное внимание уделяется наиболее часто используемым методам: методам на основе ПЦР и методам амплификации сигнала. Таблица 1 представляет собой сводку методов молекулярной диагностики, используемых для выявления и генотипирования ВПЧ.

Методы усиления цели

Полимеразная цепная реакция

Полимеразная цепная реакция является наиболее часто используемым методом обнаружения ДНК ВПЧ.Теоретически ПЦР может взять один двухцепочечный фрагмент ДНК и амплифицировать его до 1 миллиарда копий после 30 циклов. 18 Полимеразная цепная реакция состоит из следующих 3 основных стадий: денатурация, отжиг и удлинение. Денатурация происходит при 95°C и расплавляет двухцепочечную ДНК на 2 отдельные нити. Стадия отжига происходит примерно при 55°C и включает связывание праймеров с ДНК-мишенью. Для стадии удлинения температуру повышают до 72°C, и ДНК-полимераза продуцирует комплементарные нити ДНК.Как правило, в процедурах ПЦР для обнаружения ВПЧ используются праймеры, нацеленные на ген вирусного капсида L1, которые могут обнаруживать многочисленные типы ВПЧ. 18 Обычно используемые наборы консенсусных праймеров L1 включают PGMY09/11, GP5+/6+ и SPF10, а также ряд патентованных праймеров, способных идентифицировать широкий спектр типов ВПЧ с 1 амплификации. 13,28 Типоспецифическая ПЦР, как следует из названия, амплифицирует один генотип ВПЧ путем нацеливания на типоспецифическую последовательность ДНК. Для типоспецифичной ПЦР может потребоваться несколько повторов ПЦР, чтобы определить конкретную последовательность, существующую в образце. 28 Ниже обсуждаются различные применения целевой амплификации для обнаружения и генотипирования ВПЧ.

Обратный линейный блот и линейный массив

Блот-анализ с обратной линией от Roche Molecular Systems (Аламеда, Калифорния) был одним из первых широко используемых методов-прототипов. В анализе линейного блоттинга используется ПЦР на основе консенсусных праймеров L1 с праймерами PGMY09/11. Зонды для нескольких типов ВПЧ фиксируются на мембранной полоске, и продукт ПЦР гибридизуется с полоской с последующим визуальным обнаружением.Анализ выявляет 27 различных типов ВПЧ, а расширенная версия добавляет 11 типов с низким уровнем риска, в том числе от 61, 62, 64, 67, 69 до 72, 81, 82 и 89. только тест, и оригинальный анализ теперь коммерциализируется как тест на генотипирование HPV Linear Array. 29 Тест генотипирования HPV Linear Array (Roche Diagnostics, Индианаполис, Индиана) позволяет идентифицировать 37 типов HPV, 14 из которых относятся к генотипам высокого риска. Linear Array также включает праймеры PGMY и является широко используемым методом генотипирования ВПЧ с использованием полосок для гибридизации.Результаты считываются невооруженным глазом по видимой полосе в определенных областях гибридизационной полосы. Эта субъективность может повлиять на интерпретацию результатов, и в настоящее время оцениваются методы автоматизации для устранения субъективности, связанной с чтением этих результатов. 30 Линейный матричный тест имеет маркировку CE для диагностического использования in vitro в Европе. Этот тест, наряду с другим методом обнаружения ВПЧ от Roche (Amplicor, ниже), был принят на рассмотрение FDA, но еще не одобрен.

Другой имеющийся в продаже тест, INNO-LiPA HPV Genotyping Extra (Innogenetics, Гент, Бельгия), использует принципы гибридизации блотов с обратной линией. Тест INNO-LiPA амплифицирует ДНК ВПЧ с праймерами SPF10 в области L1. Зонды закрепляют на мембранных полосках линиями, характерными для последовательности, и визуализируют в виде лиловых/коричневых полос. Тест INNO-LiPA может обнаруживать и различать 24 типа ВПЧ низкого и высокого риска. 31 INNO-LiPA HPV имеет маркировку CE для использования в Европе.

Ампликор ВПЧ

Тест Amplicor HPV от Roche Molecular Systems представляет собой набор на основе ПЦР, который может идентифицировать 13 типов HPV высокого риска.Эта система амплифицирует ДНК-мишень с помощью ПЦР с последующей гибридизацией нуклеиновых кислот. 32 Используется 96-микролуночный планшет, для тестирования которого требуется только небольшой образец объемом 250 мкл. Анализ Amplicor обнаружит ВПЧ, но не определит конкретный генотип. В исследовании, сравнивающем Amplicor с анализом Hybrid Capture II Assay (HC2, обсуждаемым ниже) для обнаружения этих конкретных 13 типов ВПЧ высокого риска, было обнаружено, что соответствие составляет 83,3%, при этом Amplicor дает больше положительных результатов, чем HC2 (39,3% против HC2). 32.1%), но общее согласие 2 оказалось равным 97,5%. 32 Как уже упоминалось, Amplicor ожидает одобрения FDA, но в настоящее время имеет маркировку CE в Европе.

ПапиллоЧек

Недавно для генотипирования ВПЧ стал доступен коммерческий тест на основе ДНК-матриц под названием PapilloCheck (Greiner Bio-One, Монро, Северная Каролина). PapilloCheck определяет 24 типа ВПЧ низкого и высокого риска. PapilloCheck имеет возможность обнаруживать и идентифицировать все 24 типа одновременно, и компания рекламирует высокую специфичность и чувствительность. 33 Генотипирование с помощью этого метода основано на ПЦР-амплификации гена Е1 группой новых Е1-специфичных праймеров с последующей гибридизацией с ДНК-чипом с иммобилизованными олигозондами ВПЧ. Установка ДНК-чипа PapilloCheck позволяет тестировать 12 образцов одновременно и помогает исключить ложноположительные и ложноотрицательные результаты. Лазерный сканер CheckScanner используется для обнаружения возбуждения от флуоресцентно меченных зондов, которые связываются с праймерами ВПЧ. Программное обеспечение для создания отчетов CheckReport автоматически считывает результаты и сообщает о них. 33 Анализ PapilloCheck оказался сопоставимым с тестом Roche Linear Array, хотя между тестами были различия в частоте обнаружения определенных генотипов. 34

Набор для мультиплексного генотипирования ВПЧ

Еще одним новым тестом для генотипирования является набор Multiplex Genotyping Kit (Multimetrix, Heidelberg, Germany). Мультиплексный тест представляет собой массив флуоресцентных шариков на основе ПЦР, который может обнаруживать 24 типа ВПЧ низкого и высокого риска. Продукты ПЦР смешивают со смесью гранул набора Multiplex HPV Genotyping Kit.Эта смесь шариков включает 26 популяций шариков, прикрепленных к 24 зондам ВПЧ, 1 зонду β-глобина и 1 контрольному зонду. После того, как продукты ПЦР гибридизованы, их метят с помощью R-фикоэритрина, меченного стрептавидином, и считывают на анализаторе Luminex. 35 Индивидуальные сигнатуры шариков позволяют распознать типы ВПЧ. В настоящее время набор Multiplex HPV Genotyping Kit доступен только для исследовательских целей, но он показал высокую чувствительность при применении в крупномасштабных эпидемиологических исследованиях и потенциальном использовании в будущем для рутинной диагностики ВПЧ. 36

ПЦР в реальном времени

ПЦР в реальном времени представляет собой высокочувствительный метод целевой амплификации, доступный для обнаружения ДНК ВПЧ. ПЦР в реальном времени сочетает флуоресцентные зонды с праймерами для ПЦР, что позволяет точно определить количество вируса, присутствующего в образце. Оценка вирусной нагрузки ВПЧ является особым преимуществом ПЦР в реальном времени с использованием ядерного генома для контроля клеточного состава образца. 18 Однако значение вирусной нагрузки для ВПЧ все еще определяется.Имеющийся в продаже набор, использующий ПЦР в реальном времени, представляет собой анализ GenoID. Этот комплект идентифицирует 14 типов с высоким риском и 5 типов с низким уровнем риска, и его выполнение занимает менее 3 часов. Анализ GenoID был разработан для 3 различных платформ ПЦР в реальном времени: Roche LightCycler 2, Applied Biosystems 7900 HT и Corbett Rotor-Gene 6600. Как и все предыдущие коммерчески доступные тесты целевой амплификации, набор GenoID не одобрен FDA. Тем не менее, он имеет маркировку CE для диагностического использования in vitro в Европе.

Методы усиления сигнала

Анализ гибридного захвата

Гибридный захват — это метод усиления сигнала, означающий, что хемилюминесцентный или флуоресцентный сигнал усиливается для облегчения обнаружения, а не ДНК-мишени, амплифицируемой с помощью ПЦР. Первоначальный анализ гибридного захвата (HC1) был одобрен FDA в 1995 г. Компания Digene разработала вторую версию, HC2, 37 , которая также была одобрена FDA в 1999 г. Hybrid Capture II остается текущим золотым стандартом в диагностике ВПЧ и является наиболее широко используемый анализ на ВПЧ в клинических лабораториях США.Анализ HC2 использует гибридизацию нуклеиновых кислот и хемилюминесцентное обнаружение на микропланшетах. Образцы, содержащие ДНК ВПЧ, гибридизуют с РНК-зондом, специфичным для ВПЧ, создавая гибридную молекулу ДНК:РНК. Лунка микропланшета покрыта антителами, которые связывают гибриды ДНК:РНК, таким образом захватывая гибридные молекулы на микропланшете. Антитела, конъюгированные с щелочной фосфатазой, связывают гибридные молекулы, и при добавлении хемилюминесцентного субстрата регистрируется сигнал. Усиление сигнала происходит потому, что несколько молекул щелочной фосфатазы конъюгированы с каждым антителом, и несколько конъюгированных антител могут связываться с каждым захваченным гибридом.На рис. 2 схематично показан принцип гибридной технологии захвата. Существует 2 анализа Digene: 1, который обнаруживает 5 типов с низким и 13 типами с высоким риском, 38 , и другой, который обнаруживает только 13 типов с высоким риском. 39 Эти тесты полезны только для обнаружения ВПЧ, а не для специфического генотипирования. Digene теперь объединен с Qiagen, но тесты сохраняют префикс Digene. Наиболее часто используемым анализом является анализ высокого риска HC2 из-за его клинической полезности для выявления рака шейки матки.Hybrid Capture II одобрен для использования со средой для жидкой цитологии ThinPrep или набором Digene для сбора образцов из шейки матки. Среда для жидкой цитологии SurePath использовалась с HC2, хотя ее использование считается не по прямому назначению и требует тщательной проверки в лаборатории до тех пор, пока не будет получено одобрение FDA.

Рисунок 2

Схема гибридного захвата. На схеме показаны основные этапы анализа гибридного захвата. (A) Двухцепочечная ДНК мишени денатурируется, (B) с последующей гибридизацией зонда РНК, специфичного для мишени, с образованием гибрида ДНК:РНК.(C) Гибрид наносят на микропланшет, покрытый комплексами ДНК: РНК, связывающими антитела, таким образом захватывая гибрид. (D) Антитела, конъюгированные с щелочной фосфатазой, связывают захваченные гибриды. (E) Добавляется хемилюминесцентный субстрат, что приводит к обнаруживаемому сигналу, пропорциональному количеству ДНК-мишени.

Рисунок 2

Схема гибридного захвата. На схеме показаны основные этапы анализа гибридного захвата. (A) Двухцепочечная ДНК мишени денатурируется, (B) с последующей гибридизацией зонда РНК, специфичного для мишени, с образованием гибрида ДНК:РНК.(C) Гибрид наносят на микропланшет, покрытый комплексами ДНК: РНК, связывающими антитела, таким образом захватывая гибрид. (D) Антитела, конъюгированные с щелочной фосфатазой, связывают захваченные гибриды. (E) Добавляется хемилюминесцентный субстрат, что приводит к обнаруживаемому сигналу, пропорциональному количеству ДНК-мишени.

CareHPV

Признавая отсутствие надлежащего скрининга рака шейки матки в развивающихся странах, 27 Qiagen разработала тест под названием CareHPV, который является побочным продуктом HC2.В настоящее время наиболее распространенным методом скрининга рака шейки матки в слаборазвитых странах является визуальный осмотр шейки матки с уксусом. CareHPV представляет собой быструю и точную альтернативу этому менее стандартизированному методу. CareHPV занимает примерно 2 часа 30 минут и предназначен для использования лицами с минимальной подготовкой в ​​далеко не идеальных условиях в развивающихся странах. Он включает в себя собственный источник воды, допускает гибкий диапазон температур и не требует дорогостоящего оборудования. Короткое время позволяет клиницистам наблюдать за пациентами в течение одного визита, повышая уровень последующего ухода.Было показано, что CareHPV обеспечивает точность на 90 % и стала намного более доступной. 40 В настоящее время проводятся пилотные исследования по оценке CareHPV в различных частях мира, многие из которых финансируются Фондом Билла и Мелинды Гейтс.

Cervista HPV HR и Cervista HPV 16/18

После 10-летнего перерыва в одобрении FDA тестов на ВПЧ в марте 2009 года FDA одобрило тест Cervista HPV HR (Third Wave Technologies, теперь Hologic, Bedford, MA) для выявления 14 типов ВПЧ высокого риска.Также был одобрен тест на генотип Cervista HPV 16/18. Одобрение FDA теста Cervista HPV 16/18 знаменует собой первый одобренный FDA тест на генотипирование ВПЧ. 16 Cervista HPV HR и Cervista HPV 16/18 одобрены для скрининга женщин с ASCUS и в сочетании с цитологией у пациентов старше 30 лет для определения наличия типов высокого риска.

Технология Invader теста Cervista представляет собой уникальный метод усиления сигнала с использованием двух одновременных изотермических реакций.На рис. 3 обобщена последовательность событий при обнаружении целевой последовательности ДНК с использованием технологии Invader. ДНК-зонд, включающий специфичную для последовательности область, связывается с молекулой ДНК ВПЧ. Кроме того, запатентованный зонд Invader также связывается с последовательностью-мишенью, что приводит к перекрывающейся структуре из 1 основания на ключевом нуклеотиде. Запатентованные ферменты расщепляют зонд, высвобождая 5’-олиголоскут. 41 Для каждой молекулы расщепляется несколько зондов, что приводит к усилению сигнала.При этом каждый лоскут ведет себя как олигоиндикатор Invader в сочетании с зондом переноса энергии резонанса флуоресценции (FRET). Зонд FRET включает молекулу флуорофора в непосредственной близости от молекулы гасителя. При связывании лоскута с зондом FRET происходит другая реакция расщепления, высвобождающая флуорофор из его гасителя. Это приводит к детектируемому флуоресцентному сигналу. 42

Ряд исследований показал, что технология Invader, используемая в тесте Cervista, как минимум сравнима с HC2 по способности точно обнаруживать ВПЧ высокого риска, а анализ Cervista может дополнительно демонстрировать повышенную специфичность. 43–45 Некоторые преимущества анализа Cervista включают низкую перекрестную реактивность или отсутствие перекрестной реактивности с генотипами ВПЧ низкого риска, добавление внутреннего контроля для оценки содержания и целостности ДНК, а также меньшие требуемые объемы образцов.

Обсуждение и дальнейшие направления

Исследователям выгодно иметь под рукой множество молекулярных диагностических тестов; тем не менее, клинические лаборатории в Соединенных Штатах имеют более ограниченный выбор одобренных FDA тестов на ВПЧ.Многие наборы для диагностики ВПЧ, доступные в таких регионах, как Европа и Канада, не были одобрены для клинического использования в Соединенных Штатах. Тест Amplicor HPV, тест Linear Array HPV Genotyping, тест PapilloCheck и тест INNO-LiPA HPV являются примерами наборов, одобренных для использования в других странах мира, но еще не одобренных в Соединенных Штатах. Однако в 2009 году FDA одобрило первый за более чем десятилетие тест ДНК ВПЧ высокого риска. Одобрение Cervista HPV HR и Cervista HPV 16/18 является отправной точкой для внедрения большего количества тестов на основе наборов, одобренных FDA, для выявления типов ВПЧ высокого риска.Между тем, лаборатории могут предпочесть использовать неутвержденные тесты в качестве реагентов, специфичных для аналитов (ASR), или домашних напитков, хотя в этих случаях требуется более обширная валидация.

Другим потенциальным методом скрининга рака шейки матки является использование ПЦР с обратной транскриптазой (ОТ) для обнаружения мРНК ВПЧ. ПЦР с обратной транскриптазой включает этап RT перед выполнением базовой конечной точки или количественной ПЦР в реальном времени. Используя этот метод, можно выяснить уровень конечной продукции белка интересующего гена.Сверхэкспрессия генов HPV E6 и E7 показана при канцерогенезе, вызванном HPV, что делает эти гены потенциальной мерой вирулентности. Мониторинг уровней экспрессии этих генов может позволить проводить скрининг и мониторинг прогрессирования рака. 46 ПЦР с обратной транскриптазой может обнаруживать мРНК в гораздо меньших количествах, чем другие методы мРНК, такие как нозерн-блоттинг. Однако в настоящее время методы ОТ-ПЦР не оптимизированы для использования в крупномасштабном тестировании на ВПЧ. 47 Большинство широко используемых технологий обнаружения ВПЧ основаны на ДНК, однако обнаружение экспрессии онкогенов ВПЧ может иметь большое клиническое значение. 13

Независимо от используемого технического метода при оценке диагностических методов скрининга на ВПЧ необходимо тщательное рассмотрение. Большинство тестов на инфекционные заболевания стремятся к максимально возможной аналитической чувствительности, и ПЦР обычно является оптимальным методом для достижения этого стандарта. Однако более важным стандартом скрининга на ВПЧ является не аналитическая чувствительность, а клиническая чувствительность и специфичность. Клиническая полезность скрининга на ВПЧ основана на прогнозировании рака шейки матки, а не просто на присутствии вируса.Обнаружение вируса ВПЧ имеет мало клинического значения, особенно у молодых людей, потому что подавляющее большинство этих случаев проходят самостоятельно и никогда не перерастают в рак. Таким образом, высокая чувствительность ПЦР является недостатком скрининга на ВПЧ, поскольку ПЦР может обнаруживать даже незначительные количества вируса, которые могут не иметь клинического значения. Методы полимеразной цепной реакции требуют, чтобы лаборатории определяли порог обнаружения, соответствующий клинически значимому результату. Точно так же обнаружение неканцерогенных штаммов ВПЧ с низким уровнем риска практически не имеет клинической ценности.Информация о наличии штамма ВПЧ низкого риска не влияет на клиническое ведение пациента с кожными или слизистыми бородавками. Чтобы предотвратить ненужные лабораторные исследования, клиницисты также должны учитывать рекомендации ASCCP по ведению женщин с цитологическими отклонениями или без них. Новые тесты на ВПЧ высокого риска также должны пройти валидацию, как предложили Столер и его коллеги, чтобы иметь достаточно высокую клиническую чувствительность для выявления аномалий шейки матки. 48

Рисунок 3

Схема технологии захватчиков.На схеме показаны основные этапы анализа усиления сигнала с использованием технологии Invader. ДНК-мишень денатурируется, и специфичный для последовательности зонд связывается с олигонуклеотидом Invader. (A) Образование этого комплекса приводит к расщеплению в указанном месте. (B) Расщепление освобождает свободный лоскут молекулы зонда. Из каждой молекулы ДНК-мишени создается несколько лоскутов. (C) Лоскут затем связывается с зондом FRET, что приводит к расщеплению в указанном месте. (D) Флуорофор F высвобождается из гасителя Q, вызывая флуоресцентный сигнал, пропорциональный количеству ДНК-мишени.

Рисунок 3

Схема технологии Invader. На схеме показаны основные этапы анализа усиления сигнала с использованием технологии Invader. ДНК-мишень денатурируется, и специфичный для последовательности зонд связывается с олигонуклеотидом Invader. (A) Образование этого комплекса приводит к расщеплению в указанном месте. (B) Расщепление освобождает свободный лоскут молекулы зонда. Из каждой молекулы ДНК-мишени создается несколько лоскутов. (C) Лоскут затем связывается с зондом FRET, что приводит к расщеплению в указанном месте.(D) Флуорофор F высвобождается из гасителя Q, вызывая флуоресцентный сигнал, пропорциональный количеству ДНК-мишени.

Клиническая лаборатория должна оценить множество факторов при принятии соответствующего теста на ВПЧ, включая учет обслуживаемой популяции. Например, в неблагополучных районах скрининговые тесты на ВПЧ с далеко не оптимальной клинической чувствительностью и специфичностью могут по-прежнему намного превосходить современные методы скрининга рака шейки матки. По мере появления новых данных недавно разработанных методов скрининга на ВПЧ исследователи и клиницисты будут продолжать стремиться к цели раннего и точного выявления рака шейки матки.

Каталожные номера

2

.

Основы молекулярной диагностики

. 1-е изд.

Сент-Луис, Миссури

:

Сондерс Эльзевир

;

2007

.3

.

Заболевания, передающиеся половым путем, среди американской молодежи: оценки заболеваемости и распространенности, 2000 г.

.

Perspect Sex Reprod Health

.

2004

;

36

:

6

10

.4

.

Природа болезни: патология для медицинских работников

.

Балтимор, Мэриленд

:

Липпинкотт Уильямс и Уилкинс

;

2007

.5

.

Эпидемиология генитальной папилломавирусной инфекции

.

Эпидемиол Ред.

.

1988

;

10

:

122

163

.6

.

Естественное течение ВПЧ-инфекции шейки матки: нерешенные вопросы

.

Nat Rev Рак

.

2007

;

7

:

11

22

.7

и другие.

Классификация папилломавирусов

.

Вирусология

.

2004

;

324

:

17

27

.8

и другие.

Эпидемиологическая классификация типов вируса папилломы человека, связанных с раком шейки матки

.

N Английский J Med

.

2003

;

348

:

518

527

.9

и другие.

Глава 1: ВПЧ в этиологии рака человека

.

Вакцина

.

2006

;

24

(

доп. 3

):

S3/1

10

.10

ВПЧ и рак

. Веб-сайт Центров по контролю и профилактике заболеваний. Доступно по адресу: www.cdc.gov/hpv/cancer.html. По состоянию на 16 марта 2010 г.

11

и другие.

Вирус папилломы человека является необходимой причиной инвазивного рака шейки матки во всем мире

.

Дж Патол

.

1999

;

189

:

12

19

.12

и другие.

Опосредованная ВПЧ трансформация аногенитального тракта

.

Дж Клин Вирол

.

2005

;

32

(

доп. 1

):

S25

S33

.13

и другие.

Молекулярная диагностика инфекций, вызванных вирусом папилломы человека (ВПЧ)

.

Дж Клин Вирол

.

2005

;

32

(

доп. 1

):

S43

S51

.14

и другие.

Система Bethesda 2001: Терминология для сообщения результатов цитологии шейки матки

.

ЯМА

.

2002

;

287

:

2114

2119

.15

и другие.

Оценка тестирования на вирус папилломы человека при первичном скрининге аномалий шейки матки: сравнение чувствительности, специфичности и частоты направления

.

ЯМА

.

2002

;

288

:

1749

1757

.16

Согласованные рекомендации по ведению женщин с аномальными скрининговыми тестами на рак шейки матки

. Веб-сайт Американского общества кольпоскопии и патологии шейки матки. Доступно по адресу: www.asccp.org/consensus.shtml. По состоянию на 16 марта 2010 г.

17

.

На сегодняшний день результаты исследования сортировки ASCUS-LSIL (ALTS)

.

Лаборатория Arch Pathol Med

.

2003

;

127

:

946

949

.18

.

Глава 7: Методы выявления ВПЧ-инфекции и их клиническое применение

.

Международный журнал гинекологии и акушерства

.

2006

;

94

(

доп. 1

):

S71

S80

.19

и другие.

Распространенность инфекции ВПЧ среди женщин в США

.

ЯМА

.

2007

;

297

:

813

819

.20

и другие.

Обнаружение множественных типов вируса папилломы человека в остроконечных кондиломах у здоровых в остальном пациентов и пациентов с ослабленным иммунитетом

.

Дж Клин Микробиол

.

1999

;

37

:

3316

3322

.21

и другие.

Распределение типов вируса папилломы человека при инвазивном раке шейки матки и поражениях шейки матки высокой степени злокачественности: обновление метаанализа

.

Int J Рак

.

2007

;

121

:

621

632

.22

.

Вирус папилломы человека: бремя инфекции

.

Акушерство Gynecol Surv

.

2006

;

61

(

доп. 1

):

S3

S14

.25

и другие.

Вирус папилломы человека и рак шейки матки

.

Ланцет

.

2007

;

370

:

890

907

.26

и другие.

Дифференциальная локализация продуктов сплайсинга HPV16 E6 с E6-ассоциированным белком

.

Вирол Дж

.

2005

;

2

:

50

.28

.

Новые диагностические тесты на ВПЧ в развитых и развивающихся странах

.

MLO Med Lab Obs

.

2008

;

40

:

48

,

50

,

52

53

.30

и другие.

Оценка линейного генотипирования вируса папилломы человека с использованием программного обеспечения для автоматической оптической визуализации

.

Дж Клин Микробиол

.

2008

;

46

:

2759

2765

.31

INNO-LiPA HPV Genotyping Extra [вкладыш]

.

Гент, Бельгия

:

Innogenetics

;

2007

.32

и другие.

Сравнение анализа Digene HC2 и теста Roche AMPLICOR на вирус папилломы человека (ВПЧ) для выявления генотипов ВПЧ высокого риска в образцах шейки матки

.

Дж Клин Микробиол

.

2006

;

44

:

2141

2146

.34

и другие.

Аналитическая оценка теста PapilloCheck, нового коммерческого ДНК-чипа для обнаружения и генотипирования вируса папилломы человека

.

J Вирол Методы

.

2009

;

156

:

77

83

.35

Набор для мультиплексного генотипирования ВПЧ для исследований в области эпидемиологии [вкладыш]

. В: Мультиметрикс, изд.

Гейдельберг, Германия

.36

и другие.

Мультиплексное генотипирование вирусов папилломы человека на основе гранул

.

Дж Клин Микробиол

.

2006

;

44

:

504

512

.37

и другие.

Гибридный захват II, новый чувствительный тест для обнаружения вируса папилломы человека. Сравнение с гибридным захватом I и ПЦР приводит к поражению шейки матки

.

Дж Клин Патол

.

1998

;

51

:

737

740

.38

Анализ ДНК ВПЧ hc2 [вкладыш]

.

Gaithersburg, MD

:

Digene

;

2007

.39

Гибридный анализ ДНК ВПЧ высокого риска Capture 2 [вкладыш]

.

Gaithersburg, MD

:

Digene

;

2007

.40

и другие.

Новый тест ДНК ВПЧ для скрининга рака шейки матки в развивающихся регионах: поперечное исследование клинической точности в сельских районах Китая

.

Ланцет Онкол

.

2008

;

9

:

929

936

.41

и другие.

Идентификация полиморфизма и количественное определение геномной ДНК путем инвазивного расщепления олигонуклеотидных зондов

.

Нат Биотехнолог

.

1999

;

17

:

292

296

.43

.

Сравнение теста на вирус папилломы человека (ВПЧ) Third Wave Invader и гибридного анализа Digene HPV Capture 2 для обнаружения ДНК ВПЧ высокого риска

.

Дж Клин Микробиол

.

2008

;

46

:

1641

1646

.44

и другие.

Обнаружение ДНК папилломавируса высокого риска с использованием коммерческих реагентов, основанных на технологии захватчиков, специфичных для аналитов, после автоматизированной экстракции ДНК из цервикальных мазков в среде ThinPrep

.

Дж Клин Микробиол

.

2007

;

45

:

4067

4069

.45

.

Сравнительный обзор разработанных в лаборатории тестов с использованием реагентов Invader, специфичных для анализируемых ВПЧ, для обнаружения вируса папилломы человека высокого риска

.

Дж Клин Вирол

.

2009

;

45

(

доп. 1

):

S73

S77

.46

и другие.

Глава 10: Новые аспекты скрининга рака шейки матки

.

Вакцина

.

2006

;

24

(

доп. 3

):

S3/90

97

.47

.

Тестирование мРНК вируса папилломы человека E6/E7 в качестве прогностического маркера карциномы шейки матки

.

Expert Rev Mol Diagn

.

2008

;

8

:

405

415

.48

и другие.

Расширенное использование тестирования на ВПЧ в гинекологической практике в соответствии с руководством ASCCP требует использования хорошо проверенных анализов

.

Ам Дж. Клин Патол

.

2007

;

127

:

335

337

.

Сокращения

  • HPV

  • ASCUS

    ATYPICAL Спортивные клетки неопределенного значения

  • ASC-H

    не могут исключать высококачественные поражения

  • LSIL

    с плоками эпителиальные поражения

  • CIN

    цервикальной интраэпителиальной неоплазии

  • ASCCP

    американское общество по кольпоскопии и патологии шейки матки

  • ALTS

  • HSIL

    высокого класса плоскоклеточный интраэпителиальной поражения

  • NHANES

    Национальное здравоохранение и обследование осмотра питания

  • CDC

  • CDC

    Центры для контроля и профилактики заболеваний

    2

  • PCR

    2
  • HC1

  • HC2

  • FLO Ренесцентный резонансный перенос энергии

     
  • FDA

    Управление по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов

  •  
  • ASR

    специфические реагенты для аналитов

  •  
  • RT

    © Американское общество клинических патологов

    ВОЗ рекомендует анализ ДНК в качестве метода скрининга первого выбора для профилактики рака шейки матки

    Тестирование на вирус папилломы человека (ВПЧ) на основе ДНК оказалось более эффективным, чем широко используемые сегодня методы скрининга, направленные на выявление и предотвращение рака шейки матки, основной причины смерти женщин во всем мире.Недавно опубликованное «Руководство ВОЗ по скринингу и лечению предраковых поражений шейки матки с целью профилактики рака шейки матки» рекомендует использовать такое ДНК-тестирование на ВПЧ в качестве метода скрининга первого выбора.

    В 2020 г. во всем мире рак шейки матки был диагностирован более чем у 600 000 женщин, и около 342 000 женщин умерли от этого заболевания. В Европейском регионе ВОЗ ежегодно от рака шейки матки умирают 30 000 женщин.

    «Эти смерти можно избежать. Благодаря скринингу и, в частности, использованию новых тестов на основе ДНК ВПЧ рак шейки матки можно либо предотвратить, либо обнаружить на ранних стадиях и вылечить.ВОЗ обновила свои рекомендации по скринингу и лечению рака шейки матки, пояснив, что тесты на основе ДНК ВПЧ более эффективны, чем цитологические тесты, особенно для стран с низким и средним уровнем дохода, поскольку они менее подвержены проблемам с качеством». – сказала д-р Marilys Corbex, старший технический специалист по неинфекционным заболеваниям, ЕРБ ВОЗ.

    Выявление вызывающего рак вируса

    Рак шейки матки вызывается ВПЧ, очень распространенной группой вирусов, которые не имеют симптомов, которые легко обнаружить, поражая кожу во рту, горле или области половых органов.

    Всего 2 штамма ВПЧ высокого риска (16 и 18) вызывают более 70% случаев рака шейки матки, но при достаточно раннем обнаружении их можно лечить. Поэтому, наряду с общенациональной вакцинацией девочек от ВПЧ, ВОЗ рекомендует странам обеспечить регулярное ДНК-тестирование на ВПЧ для выявления женщин, у которых есть предрак шейки матки или которые находятся в группе риска.

    Тесты на основе ДНК ВПЧ оказались более эффективными в профилактике рака шейки матки, чем методы, широко используемые сегодня в Европейском регионе и основанные на цитологии (широко известные как «мазок Папаниколау»).Тестирование на основе ДНК также менее подвержено человеческим ошибкам, в отличие от тестов, основанных на визуальном осмотре. Анализ ДНК ВПЧ является объективной диагностикой, не оставляющей места для интерпретации результатов.

    Рекомендации ВОЗ для различных групп населения

    Новое руководство ВОЗ по профилактике рака шейки матки обновляет предыдущее руководство, опубликованное в 2013 году. женщин, живущих с ВИЧ.

    Таким образом, есть 2 основных изменения:

    • Для женщин в целом рекомендуется выявление ДНК ВПЧ в качестве основного метода скрининга – начиная с 30-летнего возраста, с регулярным тестированием каждые 5–10 лет.
    • Женщинам, живущим с ВИЧ, ВОЗ рекомендует проводить выявление ДНК ВПЧ, начиная с 25-летнего возраста, с регулярным скринингом каждые 3–5 лет.

    Уничтожение опасного для жизни рака

    «Тесты ДНК ВПЧ являются относительно новыми инструментами, и некоторые страны только начинают внедрять их как часть своих систем скрининга рака шейки матки.ВОЗ поощряет и поддерживает эти изменения», — сказал д-р Корбекс. «Кроме того, тесты ДНК позволяют перестроить программы скрининга для повышения их качества, что необходимо на пути к ликвидации рака как опасного для жизни заболевания в Европейском регионе ВОЗ и за его пределами».

    «Скрининг — это не только сам тест, это все, что происходит после него в тех случаях, когда у женщины положительный результат теста на рак шейки матки. Если дальнейшие компоненты диагностики и лечения не будут идеально организованы и не будут выполняться с высокими стандартами качества, передовые методы тестирования можно будет считать бесполезными», — добавил д-р Корбекс.

    В странах с эффективными программами скрининга и лечения рака шейки матки на основе цитологии смертность от рака шейки матки за последние 50 лет снизилась в пять раз. Тем не менее, этот подход не был столь успешным в странах с низким и средним уровнем дохода.

    Скрининг-тесты на основе ДНК ВПЧ более экономичны и подходят для всех условий, регионов и стран. Это соответствует Европейской программе работы ВОЗ на 2020–2025 гг., которая основана на идее о том, что здоровье является универсальной ценностью, и никто не должен быть забыт в доступе к медицинской помощи.

    В 2020 г. ВОЗ запустила Глобальную стратегию по ускорению ликвидации рака шейки матки. Цели стратегии: к 2030 году:

    • провести вакцинацию против ВПЧ 90% девочек, отвечающих критериям;
    • для скрининга 70% подходящих женщин не менее двух раз в жизни;
    • для эффективного лечения 90% пациентов с положительным скрининговым тестом или поражением шейки матки, включая паллиативную помощь при необходимости.

    Анализ на ВПЧ не дает результатов в два раза большему количеству женщин, у которых развивается рак шейки матки, по данным исследования Quest Diagnostics Health Trends™

    Тест на ВПЧ не дает результатов вдвое большему количеству женщин, у которых развивается рак шейки матки, чем при совместном тестировании, исследование Quest Diagnostics Health Trends™

    Крупнейший исследование национально репрезентативной американской популяции демонстрирует, что совместное тестирование превосходит только ВПЧ или Пап-тест в выявлении рака и предраковых состояний у женщин 30 лет и старше

    СЕКАУК, Н.J., 8 июля 2020 г. /PRNewswire/ — Исследование Health Trends™, проведенное исследователями из Quest Diagnostics (NYSE: DGX) и Медицинского центра Университета Питтсбурга (UPMC), предоставляет новые доказательства того, что скрининговый тест на ВПЧ значительно реже выявить рак шейки матки и предрак, чем совместное тестирование, метод, который сочетает ВПЧ и Папаниколау (тест Папаниколау с помощью жидкостной цитологии) с использованием одного и того же образца.

    Это важное исследование, потому что оно является крупнейшим на сегодняшний день для оценки эффективности рекомендуемых в руководствах методов скрининга рака шейки матки у разнообразной популяции американских женщин в условиях реальной медицинской помощи.Он выявляет резкие различия в эффективности различных рекомендуемых методов выявления рака и предраковых состояний у женщин в возрасте 30 лет и старше.

    Опубликованное онлайн сегодня в Американском журнале клинической патологии , рецензируемое исследование оценивает уровень чувствительности только ВПЧ, только Папаниколау и совместного тестирования (ВПЧ и Пап-тест вместе) в выявлении рака и предрака шейки матки почти у 19 миллионов человек. – идентифицированные результаты cotest, проведенного Quest Diagnostics от имени 13.6 миллионов женщин в Соединенных Штатах с 2010 по 2018 год. Из этих случаев у 1259 был диагностирован рак шейки матки, что вдвое превышает количество диагностированных случаев рака по данным следующего крупнейшего исследования. v

    «Этот анализ тенденций в области здравоохранения среди значительно большой и разнообразной популяции убедительно подтверждает критическую роль совместного тестирования как метода скрининга рака и предраковых состояний для женщин 30 лет и старше», — сказал Р. Маршалл Остин, доктор медицинских наук, почетный профессор патологии, университет. Медицинского центра Питтсбурга (UPMC).«Это должно положить конец любому представлению о том, что один только ВПЧ достигает той же планки для качественного скрининга рака».

    Испытывать HPV

    идентифицирует генетический материал людского вируса papillomavirus, который может причинить цервикальный рак, пока Pap определяет клеточные изменения на cervix может быть или стать раком. Целевая группа по профилактическим услугам США (USPSTF) рекомендует проводить скрининг у женщин в возрасте 30–65 лет каждые три года с помощью Папаниколау, каждые пять лет с котестированием или каждые пять лет с первичным тестированием на ВПЧ.

    Среди основных выводов:

    • Одно только тестирование на ВПЧ и Папаниколау не позволяет выявить в два раза больше женщин, у которых развивается рак шейки матки, чем совместное тестирование . Из 1615 котестов, проведенных в любое время до постановки диагноза рака, 86,9% были положительными при котестировании, а показатель необнаружения (также известный как ложноотрицательный) составил около 13,1%. Для сравнения, только тесты Папаниколау и ВПЧ имели показатели необнаружения почти в два раза выше: Папаниколау — 26,4 процента, а ВПЧ — 28,4 процента.
       
    • Совместное тестирование выявило значительно больше женщин, у которых развилась подтвержденная биопсией аденокарцинома , типичная агрессивная форма рака шейки матки, идентифицировано 82.3 процента этого рака по сравнению с 61,2 процентами ВПЧ и 59,7 процентами Папаниколау.
       
    • Тестирование на ВПЧ не позволяет выявить рак у каждой пятой женщины, если оно проводится в течение года после постановки диагноза рака.  Среди женщин, прошедших скрининг в течение одного года после постановки диагноза рака, показатель необнаружения только при тестировании на ВПЧ составил 22,5%, что почти в 1,5 раза выше, чем при Пап-тестировании (14,9%), и в четыре раза выше, чем при совместном тестировании (5,9%).
       
    • Совместное тестирование выявило больше женщин, у которых развились предраковые заболевания, подтвержденные биопсией, чем только ВПЧ или Папаниколау , идентифицировав 95.6 процентов этих предраковых заболеваний, по сравнению с 92,6 процентами ВПЧ и 77,9 процентами Папаниколау.  

    Согласно отчету, опубликованному в январе 2020 года Американским онкологическим обществом, рак шейки матки является второй ведущей причиной смерти от рака среди женщин в возрасте 20–39 лет в стране, вызывая 10 преждевременных смертей в неделю в этой возрастной группе. и

    «Хотя широкомасштабный скрининг помог сократить смертность от рака шейки матки на три четверти за последние 80 лет ii , это заболевание все еще слишком распространено», — сказал соавтор Харви В.Кауфман, доктор медицинских наук, старший медицинский директор и директор программы исследований тенденций в области здравоохранения, Quest Diagnostics. «Поскольку большинство случаев рака шейки матки развиваются при отсутствии регулярного скрининга, предоставление женщинам доступа к наиболее надежному методу скрининга, котестированию, когда они проходят скрининг, является важным шагом в снижении смертности от этого заболевания».

    Исследование Health Trends основано на предыдущих исследованиях

    Новые результаты подтверждают предыдущее исследование Quest Diagnostics, опубликованное в Cancer Cytopathology в 2015 году, журнале Американского онкологического общества, которое показало, что скрининг шейки матки только на ВПЧ не выявил бы примерно 19 процентов из 526 женщин, у которых развился подтвержденный рак шейки матки.Анализ данных Женской больницы Маги (MWH) Медицинского центра Университета Питтсбурга (UPMC) показал более высокий процент положительных результатов Папаниколау, чем ВПЧ-тестов, среди 109 результатов совместного тестирования в течение 12 месяцев после постановки диагноза рака, аналогично текущему Quest Diagnostics Health. Изучение трендов. III

    Для сравнения, анализ регионального набора данных Kaiser Permanente Northern California (KPNC) также показал, что совместное тестирование превосходит другие методы, но авторы этого исследования пришли к выводу, что «вклад цитологии в скрининг очень мал.” iv  Данные KPNC также были ограничены в способности идентифицировать цитологические аномалии, связанные с подтвержденными аденокарциномами, агрессивным раком, по сравнению с данными Quest и MWH. против

    «Важно согласовать аналогичные выводы Quest Diagnostics и Magee-Women’s Hospital с различными выводами Kaiser Permanente в Северной Калифорнии», — сказал Ли Х. Хилборн, доктор медицинских наук, профессор патологии и лабораторной медицины Калифорнийского университета в Лос-Анджелесе, старший медицинский директор. , Квест Диагностика.«KPNC имеет образцовую модель ухода, но сама эта сила может ограничить полезность данных KPNC для выводов о реальном опыте ухода за большинством американских женщин, которые получают помощь в менее интегрированных медицинских учреждениях».

    «Для женщин, которые в противном случае могут вообще не проходить скрининг, нет никаких сомнений в том, что цитология или первичный ВПЧ являются полезными технологиями скрининга», — сказал Дамиан П. Алагия, III, доктор медицинских наук, старший медицинский директор организации Woman’s Health компании Quest Diagnostics. «Тем не менее, это не должно затмевать тот факт, что совместное тестирование — это, по сути, лучший вариант скрининга для женщин, и он широко доступен в США.С.”

    Сильные стороны и ограничения исследования
    Сильные стороны исследования включают большой, лонгитюдный, национальный репрезентативный размер выборки и исследуемую популяцию, которая, как считается, отражает взрослых женщин в Соединенных Штатах. Период исследования охватывает девять лет (2010-2018 гг.). Исследование было ограничено только женщинами, которые обратились за медицинской помощью и были направлены в лабораторные службы Quest Diagnostics. Исследование Quest Diagnostics Health Trends было признано Западным институциональным наблюдательным советом исключенным.

    О Health Trends™
    Quest Diagnostics Health Trends™ — это серия научных отчетов, в которых на основе анализа объективных клинических лабораторных данных содержится информация о вопросах здравоохранения, позволяющая улучшить уход за пациентами, управление здоровьем населения и политику общественного здравоохранения. Отчеты основаны на базе данных Quest Diagnostics, содержащей более 50 миллиардов обезличенных результатов лабораторных анализов, которая считается крупнейшей в своем роде в области здравоохранения. Health Trends позволили получить новые идеи, которые помогут в лечении аллергии и астмы, мониторинге лекарств, отпускаемых по рецепту, диабете, болезни Лайма, сердечных заболеваниях, гриппе и оздоровлении на рабочем месте.Quest Diagnostics также выпускает Индекс тестирования на наркотики (DTI) ™, серию отчетов о национальных тенденциях положительного отношения к наркотикам на рабочем месте, основанных на данных тестирования на наркотики на рабочем месте работодателя компании. www.QuestDiagnostics.com/HealthTrends

    О Quest Diagnostics 
    Quest Diagnostics дает людям возможность принимать меры для улучшения показателей здоровья. Наши диагностические данные, основанные на крупнейшей в мире базе данных клинических лабораторных результатов, открывают новые возможности для выявления и лечения заболеваний, вдохновляют на здоровое поведение и улучшают управление здравоохранением.Quest ежегодно обслуживает каждого третьего взрослого американца и половину врачей и больниц в Соединенных Штатах, и наши 47 000 сотрудников понимают, что в правильных руках и в правильном контексте наши диагностические идеи могут вдохновлять на действия, которые меняют жизнь. www.QuestDiagnostics.com

     

    и Сигель Р.Л., Миллер К.Д. и Джемаль, А. (2020), Статистика рака, 2020. CA A Cancer J Clin, 70: 7-30. doi:10.3322/caac.21590

    ii  Статистика рака шейки матки. Исследование рака. Октябрь 2014 г. «Смертность от рака шейки матки за последние пятьдесят лет снизилась на 74 %.  Далее: рутинное Пэт-тестирование на ВПЧ может снизить заболеваемость раком шейки матки на 80 %. Antilla AM, et al. Annals of Oncology 2010 ;21(3):448-58

    iii Остин Р.М., Ониско А., Чжао С. Расширенное выявление рака шейки матки и предраковых состояний за счет использования жидкостной цитологии с визуализацией в рутинной цитологии и совместного тестирования на ВПЧ. Am J Clin Pathol 2018; 150:385-392.

    iv Шиффман М., Кинни В.К., Чунг Л.С. и соавт. Относительная эффективность компонентов совместного тестирования на ВПЧ и цитологии при скрининге шейки матки. J Natl Cancer Inst 2018; 110:501-508.

    против Адегоке О., Куласингам С., Вирниг Б. Тенденции рака шейки матки в Соединенных Штатах: 35-летний популяционный анализ. J Женское здоровье.  2012;21(10):1031-1037.

     

    ИСТОЧНИК Quest Diagnostics

    Для получения дополнительной информации: СМИ: Ким Городе [email protected]ком; Инвесторы: Shawn Bevec 973-520-2900

    Простой и быстрый диагностический метод для обнаружения 13 типов вируса папилломы человека высокого риска (HR-HPV) с использованием технологии CRISPR-Cas12a

    В соответствии с выпущенными рекомендациями по тестированию нуклеиновых кислот ВПЧ Согласно Китайскому управлению по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов (CFDA) в 2015 г., 13 типов ВПЧ-ВПЧ (типы 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 68) должны быть выявляется при разработке диагностического теста. Поэтому мы разработали пул, который включает 13 пар праймеров RPA, нацеленных на консервативную область L1 HR-HPV (таблица S1).Для обеспечения быстрой и чувствительной реакции RPA все праймеры были синтезированы длиной от 30 до 36 олигонуклеотидов. Кинетическая кривая флуоресценции реакции Cas12a показала, что только несколько типов ВПЧ генерировали сильный сигнал, что указывает на слабую амплификацию большинства типов ВПЧ с этим пулом праймеров (рис. S1). Это может быть связано с образованием димеров праймеров, которые расходуют материалы в реакции и тем самым снижают интенсивность специфической амплификации. Мы предположили, что более короткие и вырожденные праймеры могут уменьшить сложность пула праймеров и впоследствии увеличить амплификацию.Обычно используемые наборы праймеров для ПЦР соответствуют таким требованиям, но неизвестно, совместимы ли они с системой RPA. В качестве проверки концепции мы сначала оценили комбинацию праймеров SPF1A, SPF1B и SPF2D (рис. 2A, таблица S2), в которую был включен инозин для уменьшения несовпадений с мишенями 16 . Однако при тестировании геномной ДНК из клеток siHA, положительных на HPV16, сигнала не наблюдалось (рис. S2). Затем мы оценили другой широко используемый набор праймеров GP5/GP6 для 6 типов обнаружения HR-HPV.Хотя этот набор праймеров был способен амплифицировать HPV16, HPV18 и HPV31, он не смог обнаружить HPV33, HPV35 и HPV39, что позволяет предположить, что он не является идеальным кандидатом для всех 13 типов обнаружения HR-HPV (рис. S3).

    Рисунок 2

    Оценка пула праймеров PGMY/GP6+ . ( A ) Схема, показывающая относительное положение наборов праймеров, находящихся в консервативной области L1 ВПЧ. ( B ) Плазмиды с разным числом копий HPV16 и HPV18 амплифицировали с помощью реакции RPA с использованием пула праймеров PGMY/GP6+ . NTC управление без шаблона. ( C ) Флуоресцентное обнаружение ВПЧ в режиме реального времени с помощью пула crРНК, содержащего 11 crРНК. Для одной реакции использовали по 5 мкг каждой отдельной плазмиды ВПЧ. NTC управление без шаблона. ( D ) Пул PGMY/GP6+  был протестирован с использованием 10 000 копий указанных плазмид HPV для каждой реакции RPA. Реакцию RPA проводили при 37 °C в течение 20 мин с последующим обнаружением Cas12a при 37 °C в течение до 60 мин. NTC управление без шаблона.( E ) Выравнивание нуклеотидных последовательностей GP6+  (позиции с 5879 по 5903 в соответствии с последовательностью HPV16, инвентарный номер Genbank NC_001526.4) с 13 генотипами HR-HPV. Генотипы ВПЧ указаны цифрами слева. Точки указывают на наличие нуклеотидов, идентичных верхней последовательности (GP6+). Типы ВПЧ со слабой амплификацией пулом праймеров показаны прямоугольником.

    Затем мы применили пул праймеров PGMY/GP6+  для обнаружения плазмид HPV16 и HPV18 (рис. 2A). Как показано на рис. 2B, этот пул может обнаруживать оба типа с высокой чувствительностью (100 копий для одной реакции).Все crРНК, нацеленные на последовательности, фланкированные PGMY/GP6+ , были сконструированы и проверены с использованием 5 мкг отдельной плазмиды ВПЧ (рис. 2C). Пул праймеров был дополнительно протестирован на остальные HR-HPV с использованием 10 000 копий для амплификации RPA в реакции. Результат показал, что большинство типов были эффективно амплифицированы, кроме HPV31, 39, 51, 56, 59, 68 (рис. 2D). После сопоставления последовательности GP6+ с геномной последовательностью этих шести типов ВПЧ мы обнаружили значительные несоответствия, которые могут привести к неудаче амплификации (рис.2Е). Чтобы расширить спектр этого пула праймеров для других HR-HPV, мы добавили в пул дополнительные четыре праймера, которые лучше соответствуют этим шести типам HPV. В новом пуле все 13 типов HR-HPV были успешно обнаружены при использовании 10 000 копий плазмиды для каждой реакции RPA (рис. 3).

    Рисунок 3

    Оценка улучшенного пула праймеров PGMY/GP6+ . Пул праймеров PGMY/GP6+  был дополнен дополнительными четырьмя праймерами, имеющими меньше несовпадений с HPV31, 39, 51, 56, 59, 68.Новый пул тестировали с использованием 10 000 копий плазмиды для каждой реакции RPA. NTC управление без шаблона.

    Впоследствии была проанализирована чувствительность нашего анализа, и результаты показали, что он способен обнаруживать все типы ВПЧ в реакции, содержащей 500 копий плазмиды (рис. 4). Была достигнута гораздо более высокая чувствительность к ВПЧ 16, 18, 31, 35, 52 и 68, где предел обнаружения (LoD) составлял 100 копий для данной реакции (рис. 4). Наш анализ кажется не таким чувствительным, как те, о которых сообщалось, в которых наблюдался LoD одиночной молекулы 14,17 .Множественная амплификация RPA может быть причиной снижения чувствительности анализа, что согласуется с исследованием Zachary et al. 18 . Использование более коротких праймеров может быть еще одной причиной более высокого показателя LoD в нашем анализе, поскольку более короткие праймеры будут менее эффективны в амплификации мишеней. Окончательный оптимизированный пул праймеров включает всего десять праймеров (5 PGMY11 и 5 GP6+, таблица S3), а пул crРНК состоит из 11 crРНК, причем одна crРНК распознает три типа HPV (HPV18, 31, 33, таблица S4).Согласно инструкции, описанной в протоколе Twist-Dx, общее количество олигонуклеотидов в реакционной смеси не должно превышать 1000 нМ. Однако концентрация праймеров в текущем исследовании (всего 4000 нМ) была намного выше стандартной, поэтому мы титровали праймеры в реакциях на обнаружение ВПЧ16. Результат показал, что 4000 нМ праймеров в реакции генерировали самый сильный сигнал, что указывает на самую высокую эффективность амплификации при этой концентрации (рис. S4).

    Рисунок 4

    Серийные разведения указанной плазмиды ВПЧ для определения предела обнаружения. После амплификации RPA при 37 °C в течение 20 минут с использованием 10 000 копий плазмиды для каждой реакции 10 мкл продукта переносили в 40 мкл смеси Cas12a для анализа расщепления. NTC управление без шаблона.

    Затем мы сравнили чувствительность метода на основе RPA-Cas12a с методом, основанным только на RPA, путем обнаружения плазмиды HPV16. Подход, основанный только на RPA, продемонстрировал более низкую чувствительность, чем анализ на основе RPA-Cas12a, с LoD 10 4 копий в реакции (рис.С5). Также была оценена производительность обнаружения только Cas12a для HPV16 без амплификации RPA, и результаты показали, что он может обнаруживать всего 0,1 мкг (что эквивалентно примерно 10 9 копий) плазмид HPV16 в реакции. Однако когда количество плазмиды уменьшалось до 0,01 мкг и 0,001 мкг на реакцию, сигнал почти не обнаруживался (рис. S6). Эти результаты вместе иллюстрируют необходимость сочетания амплификации RPA с технологией Cas12a.

    Для выявления возможных ложноположительных результатов, специфичности нашего анализа к 8 другим типам ВПЧ (ВПЧ 6, 11, 26, 44, 54, 55, 61, 67) и 7 другим патогенам, обычно присутствующим во влагалище (chlamydia trachomatis, mycoplasma hominis). , trichomonas vaginalis, treponema pallidum, Streptococcus pyogenes, Candida albicans, вирус простого герпеса).Как показано на рис. 5, перекрестной реактивности с ВПЧ-ВПЧ и тестируемыми патогенами не наблюдалось, что указывает на высокую специфичность анализа.

    Рисунок 5

    Оценка специфичности анализа RPA-CRISPR. Только ДНК из HR-HPV продуцировала сигналы, тогда как плазмиды из вагинальных патогенов, других HPV и отрицательного контроля не давали каких-либо обнаруженных сигналов. Положительный контроль был получен путем амплификации смеси ВПЧ, где было смешано в общей сложности 13 HR-ВПЧ в концентрации 10000 копий/мкл для каждого типа. NTC управление без шаблона.

    Наконец, клиническая эффективность системы была подтверждена анализом материалов соскобов шейки матки. Все положительные образцы были положительными только для одного типа ВПЧ-ВПЧ, но либо положительными, либо отрицательными для других типов ВПЧ, определенных с помощью мультиплексного ПЦР-тестирования на ВПЧ. Отрицательные образцы были протестированы как отрицательные с помощью мультиплексной ПЦР на ВПЧ. Все образцы, положительные к ПЦР, были признаны положительными в нашем анализе, а все отрицательные образцы были отрицательными в нашем анализе на обнаружение 13 типов HR-HPV (рис.6, С7). Хотя разработанный тест имел 100% положительных и отрицательных совпадений по сравнению с анализом qPCR, результаты следует интерпретировать с осторожностью из-за ограниченного количества образцов для каждого типа. Большая когорта была бы полезна для лучшего понимания чувствительности и специфичности анализа в будущих исследованиях.

    Рисунок 6

    Клиническая проверка. Для тестирования каждого типа использовали три положительных и три отрицательных образца, идентифицированных с помощью количественной ПЦР. Разработанный анализ имел 100% положительных и отрицательных совпадений по сравнению с анализом qPCR для обнаружения 13 типов HR-HPV. P положительный, N отрицательный.

    Таким образом, мы сообщаем о разработке метода негенотипирования на основе RPA-Cas12a для обнаружения 13 типов HR-HPV, который может служить полезным инструментом для скрининга рака шейки матки. Этот метод также может помочь в диагностике других видов рака, связанных с ВПЧ, таких как опухоли головы и шеи. В отличие от общего снижения заболеваемости раком головы и шеи в Соединенных Штатах, заболеваемость раком ротоглотки, ассоциированным с ВПЧ, увеличивается, что подчеркивает важность этой этиологической ассоциации 19 .Исследование, проведенное в США, показало, что в период с 1973 по 2004 год заболеваемость раком ротоглотки (наиболее вероятно, связанный с ВПЧ) ежегодно увеличивалась на 1,3% для рака основания языка и на 0,6% для рака миндалин 19 . Подход ПЦР остается основным методом выявления инфекции ВПЧ для этих заболеваний, и ограниченная доступность теста ПЦР может способствовать увеличению частоты этих заболеваний 20 . Поскольку предлагаемая система намного удобнее, чем подход ПЦР, использование нашей системы может помочь обратить эту тенденцию вспять.

    Было показано, что анализ ДНК ВПЧ дает более высокие результаты в выявлении рака шейки матки, чем обычно используемый цитологический тест Папаниколау 21 . Однако текущие тесты на ВПЧ, такие как анализ на ВПЧ Cepheid Xpert и тест на ВПЧ cobas от Roche, требуют хорошо обученного персонала, дорогих инструментов и длительного времени реакции (обычно более 2 ч), что не подходит для приложений с низким уровнем ресурсов. настройки 22 . Помимо тестирования на ВПЧ на основе ПЦР, также были разработаны несколько анализов на основе изотермической амплификации, таких как LAMP- и RPA-опосредованные тесты на ВПЧ 3,23,24,25,26 .Тем не менее, все эти методы могут обнаруживать только один тип ВПЧ в реакции, что значительно ограничивает возможности их применения для обнаружения ВПЧ, поскольку известно, что более 10 типов ВПЧ тесно связаны с опухолями 19,27 . Чен и др. объединили амплификацию RPA с новой системой CRISPR и создали анализ для обнаружения HPV16 и HPV18 (называемый DETECTOR) 11 . Хотя DETECTOR продемонстрировал высокую точность, сравнимую с точностью метода ПЦР, эта система также столкнулась с теми же ограничениями.Предлагаемый нами метод позволил одновременно обнаружить 13 типов ВПЧ-ВПЧ в одной реакции, что может быть очень полезным инструментом для диагностических целей.

    Настоящее исследование обеспечивает простой подход к тестированию ВПЧ-ВПЧ, однако этот метод без генотипирования может столкнуться с существенными ограничениями, поскольку он не способен генотипировать наиболее канцерогенные типы ВПЧ HPV16 и HPV18. Чтобы преодолеть это, можно было провести дополнительные реакции с наборами праймеров PGMY11-B и GP6+  для HPV16 и PGMY11-A и GP6+  для HPV18 (данные не показаны).Кроме того, наш метод требует операции открытия трубки для переноса реакции RPA на расщепление Cas12a, и это может привести к образованию аэрозоля и вызвать ложноположительные результаты. Во избежание контаминации ампликона вскрытие пробирки должно производиться строго в отдельном месте. Альтернативной стратегией было добавление фермента Cas на внутреннюю стенку пробирки с последующей стадией центрифугирования, чтобы начать обнаружение Cas12a после амплификации RPA 28 . Кроме того, текущая версия этого анализа не включает реакцию внутреннего контроля, поэтому возможны ложноотрицательные результаты из-за низкого качества образца.Реакция на β-актин или GAPDH может быть принята, чтобы гарантировать качество анализа.

    В нашей работе также представлена ​​новая концепция использования амплификации нуклеиновых кислот на основе RPA. В предыдущем исследовании было реализовано триплексное обнаружение с использованием технологии RPA, несмотря на то, что чувствительность была значительно снижена по сравнению с одиночным обнаружением 18 . Тем не менее, сталкиваясь с большим количеством типов патогенов, по-прежнему сложно применять методы, основанные на изотермической амплификации, для обнаружения нуклеиновых кислот, особенно при использовании метода RPA.Это может быть связано с образованием димеров праймеров, запускаемых второй структурой праймеров, в результате слишком большого количества праймеров в одной реакции. В настоящем исследовании мы создали пул праймеров и пул crRNA, которые способны обнаруживать 13 типов HR-HPV в реакции. Успешное применение нашего метода можно объяснить использованием вырожденных праймеров для ПЦР, которые короче и менее сложны по сравнению с обычно используемыми праймерами RPA. Таким образом, эта новая методология может быть расширена для выявления множественных инфекций, вызванных другими патогенами, помимо ВПЧ.Для облегчения комплексных приложений необходима интеграция текущего метода с микрофлюидной системой, потому что во многих случаях диагностические технологии должны иметь возможность одновременно тестировать множество целей. Сюн и др. сообщил о центробежной микрожидкостной системе, которая могла обнаруживать 32 цели в одном чипе 29 . В сочетании с микрожидкостной системой возможности нашего метода могут быть дополнительно расширены для обнаружения множественных инфекций, таких как обнаружение HR-HPV вместе с другими вагинальными патогенами в одном анализе.

  • Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован.