МУНИЦИПАЛЬНОЕ АВТОНОМНОЕ ОБЩЕОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ СРЕДНЯЯ ОБЩЕОБРАЗОВАТЕЛЬНАЯ ШКОЛА №3

Адрианол капли назальные для взрослых 10 мл

Форма выпуска, состав и упаковка

Вспомогательные вещества: метилцеллюлоза М.Н.В. 10000, фенилртути (II) борат, этанол 96%, глицерол, аммиак водный, лимонной кислоты моногидрат, натрия гидрофосфата дигидрат, вода очищенная.

10 мл – флакон-капельницы пластиковые (1) – пачки картонные.

Вспомогательные вещества: аммиак водный, глицерол, лимонной кислоты моногидрат, метилцеллюлоза М.Н.В. 10000, натрия гидрофосфата дигидрат, фенилртути (II) борат, этанол 96%, вода очищенная.

10 мл – флакон-капельницы пластиковые (1) – пачки картонные.

Клинико-фармакологическая группа: Сосудосуживающий препарат для местного применения в ЛОР-практике Регистрационные №№:

• капли назальн. 1 мг+1.5 мг/1 мл: фл.-капельн. 10 мл – П N013655/01, 14.03.08
• капли назальные (д/детей) 500 мкг+500 мкг/1 мл: фл.-капельн. 10 мл – П N013655/02, 14.03.08

  ---

  Описание лекарственного препарата АДРИАНОЛ^® основано на официально утвержденной инструкции по применению препарата АДРИАНОЛ^® для специалистов и утверждено компанией-производителем для издания 2008 года.

  ---

   |  Показания  |  Режим дозирования  |  Побочное действие  |  Противопоказания  |  Условия отпуска из аптек  |  Условия хранения и сроки годности

  ---

  Показания к применению препарата АДРИАНОЛ^®

  Острый и хронический ринит, синусит.

  Применяется в качестве вспомогательного противоотечного средства во время диагностических процедур и хирургических манипуляций.

  Режим дозирования

  Взрослые и дети школьного возраста: по 1-3 капли в каждый носовой ход 4 раза в день.

  Дети от 1 до 5 лет (детская форма): по 2 капли в каждый носовой ход 3 раза в день. Дети грудного возраста (детская форма): по 1 капле в каждый носовой ход за 30 минут до начала кормления.

  Длительность применения препарата – не более 1 недели, затем необходим перерыв на несколько дней.

  Побочное действие

  Побочные явления возникают редко и проявляются в виде жжения, болезненности или сухости слизистой оболочки носа.

  Противопоказания к применению препарата АДРИАНОЛ^®

  — повышенная индивидуальная чувствительность;

  — тиреотоксикоз;

  — феохромоцитома;

  — глаукома;

  — тяжелые поражения почек;

  — артериальная гипертензия;

  — ишемическая болезнь сердца;

  — атрофический ринит;

  — атеросклероз.

  Применение при нарушениях функции почек

  Адрианол нельзя применять при тяжелых поражениях почек.

  Условия отпуска из аптек

  Препарат разрешен к применению в качестве средства безрецептурного отпуска.

  Условия и сроки хранения

  Хранить в сухом, защищенном от света, недоступном для детей месте при температуре не выше 25°С.

  Срок годности – 3 года. Не использовать по истечении срока годности.

капли в нос для детей

Насморк появляется как у деток, так и у взрослых по разным причинам. Это может быть и аллергическая реакция, и проявление простудных заболеваний. Для облегчения этого неприятного состояния, связанного с простудой, придумано множество препаратов, как на основе сырья растительного происхождения, так и с химическими компонентами. Адрианол – это капли в нос для детей любого возраста, которые рекомендуют многие педиатры.

Эти капли относятся к категории сосудосужающих препаратов, что гарантирует снижение отека слизистой оболочки и облегчает дыхание. Действующими веществами Адрианола для детей являются тримазолин и фенилэфрин, которые отлично себя зарекомендовали при лечении острого и хронического ринита, синусита, а также при подготовке к отоларингологическим операциям или процедурам. Для детей капли Адрианол выпускаются во флаконах с дозировкой тримазолина гидрохлорида и фенилэфрин гидрохлорида по 500 мкг.

Инструкция по применению Адрианола для детей

В зависимости от возраста малыша эти капли назначаются в разных дозировках:

• для новорожденных и карапузов до года рекомендуется применять препарат за полчаса перед каждым кормлением (не чаще 4 раз в сутки) в дозировке: 1 капля в каждый носовой проход;
• для малышей дошкольного возраста (от года до пяти лет) лекарство следует применять по схеме: по две капли Адрианола в каждый из носовых проходов три раза в день;
• для ребят старше пятилетнего возраста препарат применяют 4 раза в день по три капли в каждый из носовых проходов.

Кроме этого, стоит учесть тот факт, что, как и любые капли, Адрианол для детей может вызвать привыкание, поэтому его не рекомендуют беспрерывно использовать более недели.

Если внимательно изучить инструкцию, то Адрианол для детей не может быть использован, если у ребенка есть аллергия на компоненты лекарства, а также при наличии следующих заболеваний:

• артрофический ринит;
• патология почек;
• глаукома;
• феохромоцитома;
• артериальная гипертензия;
• тиреотоксикоз;
• ИБС.

Помимо этого, как и у любых капель в нос, у Адрианола для детей в инструкции прописаны побочные действия. Прием этого препарата может вызвать зуд, жжение, болезненность слизистых оболочек носа и его сухость. При проявлении этих симптомов капли применять прекращают, и, по возможности, обращаются к врачу за консультацией.

Подводя итог, хочется отметить, что любой лекарственный препарат должен назначаться доктором. Но если нет возможности его посетить, и принято решение лечить ребенка самостоятельно, то необходимо следить за симптоматикой течения заболевания и принимать капли в той дозировке, которая рекомендована вашему малышу по возрасту.

Капли Адрианол, инструкция по применению для детей и взрослых

Изменено: 20 июня 2018

Состав и форма выпуска

Активными компонентами Адрианола являются фенилэфрина гидрохлорид (0, 012 гр) и тримазолина гидрохлорид (0,01 гр). Эта концентрация предназначена для взрослых. Также Адрианол производят в форме капель для детей, дозировка каждого действующего вещества в них равна 0,005 гр.

В инструкции к Адрианолу также приведены вспомогательные компоненты, помогающие стабилизировать средство. Это натрия гидрофосфата дигидрат, этанол, метилцеллюлоза, глицерол, увлажняющий слизистую носа и защищающий ее от пересушивания.

Назальные капли в нос Адрианол выпускаются во флаконе-капельнице объемом 10 мл.

Фармакологическое действие

Основное действие фенилэфрина и тримазолина – сосудосуживающее и противоотечное. Дыхание восстанавливается уже спустя пару минут, отек спадает, человек начинает дышать. За счет метилцеллюлозы (а именно она дает тягучесть раствору) эффект продолжается до шести часов после закапывания. Вспомогательные вещества также защищают слизистую от сухости, что очень важно при лечении насморка.

Благодаря активным компонентам препарата давление начинает падать в придаточных пазухах носа и даже в среднем ухе. Данный фактор защищает пазухи от попадания инфекции и препятствует ее дальнейшему распространению.

Показания и противопоказания

Применение капель для носа Адрианол возможно при:

Согласно инструкции по применению, капли Адрианол противопоказаны в следующих случаях:

• повышенная чувствительность к компонентам препарата;
• индивидуальная непереносимость веществ;
• в анамнезе атрофический ринит или предрасположенность к нему;
• приступы ишемической болезни сердца и их осложнения;
• тиреотоксикоз в средней и тяжелой форме;
• артериальная гипертензия в средней и тяжелой форме и ее осложнения;
• повышенное внутриглазное давление, глаукома;
• заболевания почек и их тяжелые поражения.

Инструкция по применению и дозировка

В инструкции по применению к Адрианолу сказано, что дозировка вещества зависит от возраста больного, а также от тяжести заболевания.

Так, грудничкам детский Адрианол необходимо закапывать по 1 капле в каждый носовой ход, желательно за 20-30 минут до кормления грудью. Предварительно стоит промыть нос ребенка солевым раствором или Аквамарисом и убрать слизь аспиратором.

С 1 года до 6 лет рекомендуется закапывать по 2 капли до 3-4 раз в сутки. Адрианол для детей имеет меньшую концентрацию, чем взрослый, что дает возможность использовать капли по требованию и самим регулировать количество закапываний. Конечно же, придерживаясь допустимых норм.

С 6 лет детям и их родителям уже можно капать до 3 капель за раз, по 3-4 раза в день. Дозировка вещества для взрослых будет содержать в два раза больше действующих компонентов, чем указано в инструкции к детскому Адрианолу, что тоже стоит учитывать при использовании капель.

В отличие от других сосудосуживающих средств, Адрианол можно использовать при беременности. При возникновении сухости в носу и развитии других нежелательных реакций, следует прекратить прием препарата. Концентрация Адрианола при беременности должна быть той же, что и в каплях для носа, предназначенных для детей. Это нужно учитывать при дозировании и количестве закапываний в течение дня.

В инструкции к Адрианолу для детей и взрослых также имеется информация о длительности использования лекарственного средства. Не стоит применять препарат дольше недели.

Если же есть показания к использованию препарата в течение длительного времени, необходим семидневный перерыв. Это обязательное условие при лечение Адрианолом необходимо соблюдать, чтобы избежать атрофию сосудов и развитие устойчивости организма к компонентам лекарственного средства.

Побочные эффекты

Средство хорошо переносится пациентами разного возраста. Но стоит иметь в виду, что при повышенной чувствительности организма побочные действия все же могут наблюдаться. Информация о передозировке препаратом отсутствует. К нежелательным эффектам средства относятся в первую очередь реакции местного характера.

 К ним относятся:

• сухость слизистой оболочки носа и жжение;
• болезненность;
• зуд.

Эффектами общего действия, проявляющиеся намного реже, являются:

• тошнота, рвота;
• головная боль, головокружение;
• повышение артериального давления;
• тахикардия, одышка;
• аллергические реакции (крапивница, отек Квинке).

При несоблюдении дозировки веществ, а также длительном применении возможны атрофия слизистой оболочки носа, постоянная заложенность, воспаление носа и носовых пазух. Поэтому ни в коем случае нельзя самостоятельно принимать решение о применении капель Адрианол. Специалист поможет подобрать подходящее средство.

Изучая инструкцию по применению препарата, необходимо обратить внимание на возможность использования капель в нос Адрианол совместно с другими лекарственными средствами. К примеру, данное средство нельзя использовать с ингибиторами моноаминоксидазы. Также запрещается использование Адрианола совместно с антидепрессантами: в этом случае высок риск развития артериальной гипертензии, вплоть до гипертонического криза.

Аналоги

У Адрианола нет абсолютных аналогов. Существует множество препаратов с похожим сосудосуживающим действием, но они отличаются по составу и концентрации активных веществ.

Можно сравнить с этим средством такие препараты, как Отривин, Ксимелин, Риностоп, Називин. Но они относятся не к аналогам Адрианола, а к препаратам, относящимся к одной с ним фармакологической группе.

Итак, Адрианол — эффективное сосудосуживающее средство, которое быстро и надолго избавит от заложенности носа. Тот факт, что этот препарат разрешен к применению у грудных детей, говорит о его безопасности, что очень ценится мамами и педиатрами.

Автор: Оксана Акуличева, врач,
специально для Moylor.ru

Полезное видео об осторожности при приеме сосудосуживающих капель в нос

УФ-спектры поглощения а) Адрианола (А) и Адрианола-Т (Б) назальные…

Контекст 1

… УФ-спектры тримазолина и фенилэфрина гидрохлорида в водной среде и УФ-спектр Адрианола Т показаны на рис. 2. В частности, оптическую плотность при 265 нм для тримазолина гидрохлорида и при 272 нм для фенилэфрина гидрохлорида считали оптимальными рабочими длинами волн для их определения. Наилучший линейный отклик на концентрацию аналита достигается при использовании этих длин волн.Кривая регрессии рассчитывалась методом наименьших квадратов. Закон Бера соблюдался в диапазоне концентраций от 10 до 60 мкг см -3 тримазолина гидрохлорида и фенилэфрина гидрохлорида. Спектры поглощения тримазолина гидрохлорида и фенилэфрина гидрохлорида не изменялись в присутствии обычных вспомогательных веществ, используемых в фармацевтических препаратах. Было обнаружено, что рассчитанные значения t (0,814 для гидрохлорида тримазолина при 265 нм и 1,45 для гидрохлорида фенилэфрина при 275 нм) меньше, чем табличные значения t (2.225). Поэтому предлагаемый аналитический метод является специфичным и селективным в отношении препарата. Было обнаружено, что диапазон линейности для гидрохлорида тримазолина при оценке при 265 нм составляет 10–60 мкг см -3 ( r = 0,9992) и 10–60 мкг см -3 ( r = 0,9993) для гидрохлорида фенилэфрина при 275 нм. Достоверность соответствия уравнений регрессии подтверждалась высокими значениями коэффициента регрессии. Точность колебалась от 40 до 60 г см . Отличные средние значения процентного восстановления, близкие к 100 %, и их низкие значения стандартного отклонения (SD < 1.0) представляют собой высокую точность аналитических методов. Валидность и надежность предложенных методов оценивали по восстановительным исследованиям. Среднее процентное извлечение (RSD) для более низких, средних и высоких концентраций составило 99,63 (40 мкг см-3), 99,50 (50 мкг см-3) и 100,08 (60 мкг см-3) для гидрохлорида тримазолина. и 100,57 (40 мкг см-3), 99,60 (50 мкг см-3) и 100,33 (60 мкг см-3) для гидрохлорида фенилэфрина соответственно. Валидность и надежность предложенных методов дополнительно оценивались исследованиями извлечения с помощью стандартного метода добавления.Среднее процентное восстановление для концентрации от 50 мкг см -3 составило 99,74 (0,58), 100,50 (0,64) и 99,84 (0,53) для тримазолина гидрохлорида и 100,53 (0,61), 100,87 (0,49) и 99,04 (0,73) для гидрохлорида фенилэфрина соответственно. Эти результаты показали, что любое небольшое изменение концентрации лекарственного средства в растворах может быть точно определено предложенным аналитическим ...

Фенилэфрин – обзор | ScienceDirect Topics

Сердечно-сосудистые заболевания

Управление по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов (FDA) и Национальный реестр лекарственно-индуцированных глазных побочных эффектов (Институт глаза Кейси, Портленд, штат Орегон) получили 11 сообщений о неблагоприятных системных реакциях на однократную дозу фенилэфрина 10% для местного применения в виде вкладыша. форма [4].Было восемь мужчин и три женщины в возрасте от 1 до 76 лет. Большинство пациентов отмечали системные эффекты в течение нескольких минут после применения фенилэфрина, а побочные системные реакции включали тяжелую гипертензию, отек легких, сердечные аритмии, остановку сердца и субарахноидальное кровоизлияние.

В метаанализе побочных реакций со стороны сердечно-сосудистой системы на местное применение фенилэфрина 2,5% или 10% в восьми рандомизированных контролируемых исследованиях с участием 916 участников ни артериальное давление, ни частота сердечных сокращений не изменились после 0.25% фенилэфрина либо через 20–30 минут, либо через 60 минут [5]. Артериальное давление повысилось через 5 и 10 минут после применения 10% фенилэфрина (средняя разница 15 мм рт. ст.; 95% ДИ = 12, 19), но упало до исходного уровня через 20–30 минут. Частота сердечных сокращений увеличилась на 5 ударов в минуту (95% ДИ = 1, 8) через 20–30 минут и вернулась к исходному уровню через 60 минут.

10% раствор фенилэфрина иногда вызывал чрезвычайно тяжелые сердечно-сосудистые осложнения, включая инфаркт миокарда.

У новорожденных пользу от точной оценки гестационного возраста путем исследования передней сосудистой капсулы хрусталика и ценность исследования глазного дна у больных недоношенных детей следует сопоставлять с возможным риском связанного с этим повышения артериального давления, вызванного зрачковой расширители.Поскольку не происходит усиления мидриатического эффекта при повторных инстилляциях или увеличении концентрации, а их небольшая масса тела подвергает недоношенных новорожденных повышенному риску передозировки фенилэфрина, разумно использовать самую низкую возможную концентрацию, а также наиболее эффективную комбинацию мидриатиков для непрямая офтальмоскопия у недоношенных детей, когда такое обследование абсолютно необходимо. Гипертензивный эффект, вероятно, будет максимальным в течение первых 20 минут, и по возможности (или при наличии факторов риска) следует контролировать артериальное давление.

После глазного применения фенилэфрина у здорового 2-летнего ребенка развился тяжелый гипертонический криз [6].

Селективный агонист α-адренорецепторов фенилэфрин используется в некоторых клинических условиях для купирования гипотензии. Примером может служить спинальная анестезия при кесаревом сечении, как описано в отчете о сердечных аритмиях [7].

•

Женщине 31 года, которой потребовалось экстренное кесарево сечение из-за отсутствия прогресса в родах, сразу после интратекального введения бупивакаина и диаморфина ввели 200 мкг фенилэфрина в виде инфузии; дозу повторяли всякий раз, когда кровяное давление падало ниже исходного уровня.В течение нескольких секунд после начала инфузии у нее развилась желудочковая бигеминия с частотой 94 в минуту, которая сохранялась до родов, синусовый ритм вернулся без лечения. Артериальное давление было от 122/76 до 143/80 мм рт.ст.

Механизм этого эффекта неясен. Авторы предположили, что могла иметь место повышенная постнагрузка, что привело к увеличению растяжения желудочков, но это было спекулятивно.

•

У ребенка после интраоперационного введения глазного фенилэфрина развились сердечные аритмии, выраженная артериальная гипертензия, отек легких [1].

•

У 2-месячного ребенка, которому во время экстракции катаракты вводили периоперационные капли фенилэфрина, развились желудочковые экстрасистолы, очень тяжелая артериальная гипертензия и отек легких, требующие интенсивной терапии [8]. Экстубация была возможна в течение 3 часов, и она выздоровела без неблагоприятных последствий.

Авторы отметили, что изменения артериального давления хорошо описаны при применении глазных капель фенилэфрина, особенно у младенцев. Ясно, что у этих очень молодых пациентов трудно определить точную дозировку, и они предположили, что микрокапли могут быть более безопасным способом введения.

Капли фенилэфриновые глазные используются для расширения зрачков с целью проведения офтальмоскопии и используются у новорожденных при офтальмологическом обследовании для оценки наличия ретинопатии недоношенных. Тем не менее, это может вызвать серьезные сердечно-сосудистые побочные эффекты. У 42 новорожденных не было побочных эффектов фенилэфрина 2,5% в сочетании с 0,5% глазными каплями тропикамида на частоту сердечных сокращений или артериальное давление [9].

Повышение артериального давления, которое вызывает фенилэфрин, само по себе может быть опасным, даже если он не применяется системно или, по крайней мере, не преднамеренно [10].

•

У 23-летнего афроамериканца в результате серповидно-клеточной анемии развился ишемический приапизм. После интракавернозного введения фенилэфрина 500 мкг он жаловался на очень сильную головную боль, КТ показала субарахноидальное кровоизлияние. Его кровяное давление составляло 180/100 мм рт.ст. по сравнению с его исходным показателем 130/88 мм рт.ст. Ему дали эналаприл (доза не указана), и его кровяное давление упало. К счастью, ни тогда, ни позже у него не было неврологических симптомов.

Авторы весьма обоснованно предложили снизить стандартную дозу для инъекций в этих обстоятельствах до 200 мкг, при необходимости повторить.

Антитела к коронавирусу Хорошо. Искусственные молекулы лучше?

Коронавирус может быть новым, но природа давно дала людям инструменты для его распознавания, по крайней мере, в микроскопическом масштабе: антитела, Y-образные иммунные белки, которые могут цепляться за патогены и блокировать их проникновение в клетки.

Миллионы лет эволюции превратили эти белки в оружие для борьбы с болезнями, которым они и являются сегодня.Но всего за несколько месяцев комбинация человеческого и машинного интеллекта, возможно, обыграла Мать-природу в ее собственной игре.

Используя вычислительные инструменты, группа исследователей из Вашингтонского университета разработала и построила с нуля молекулу, которая при противодействии коронавирусу в лаборатории может атаковать и изолировать его, по крайней мере, так же хорошо, как это делает антитело. При попадании в носы мышей и хомяков он также защищает животных от серьезных заболеваний.

Эта молекула, называемая мини-связующим из-за ее способности связываться с коронавирусом, является миниатюрной и достаточно стабильной, чтобы ее можно было массово отправлять в лиофилизированном состоянии.Бактерии также могут производить эти мини-связующие, что потенциально делает их не только эффективными, но и дешевыми и удобными.

Продукт команды все еще находится на очень ранней стадии разработки и не появится на рынке в ближайшее время. Но пока «это выглядит очень многообещающе», — сказала Лорен Картер, один из исследователей проекта, которым руководит биохимик Дэвид Бейкер. В конце концов, здоровые люди смогут самостоятельно вводить мини-биндеры в виде назального спрея и потенциально сдерживать любые проникающие частицы коронавируса.

«Самым элегантным приложением может быть то, что вы держите на прикроватной тумбочке», — сказала мисс Картер. «Это своего рода сон».

Мини-биндеры не являются антителами, но они препятствуют распространению вируса во многом сходным образом. Коронавирус проникает в клетку, используя своего рода взаимодействие «замок-ключ», соединяя белок, называемый шипом — ключом, — с молекулярным замком, называемым ACE-2, который украшает внешнюю сторону некоторых клеток человека. Антитела, вырабатываемые иммунной системой человека, могут вмешиваться в этот процесс.

Многие ученые надеются, что массовое производство имитаторов этих антител может помочь лечить людей с Covid-19 или предотвратить их заболевание после заражения. Но нужно много антител, чтобы обуздать коронавирус, особенно если заражение уже идет. Антитела также обременительны для производства и доставки людям.

Чтобы разработать менее привередливую альтернативу, сотрудники лаборатории Бейкера во главе с биохимиком Лунсин Цао применили вычислительный подход. Исследователи смоделировали, как миллионы гипотетических белков, разработанных в лаборатории, будут взаимодействовать с шипом.После последовательного отсеивания неудовлетворительных результатов команда выбрала лучших из всех и синтезировала их в лаборатории. Они неделями переключались между компьютером и рабочим столом, возясь с конструкциями, максимально приближенными к симуляции и реальности.

Результатом стал полностью самодельный мини-биндер, который легко приклеивался к вирусу, сообщила команда в журнале Science в прошлом месяце.

«Это шаг вперед, чем просто построение из натуральных белков», — сказал Ашер Уильямс, инженер-химик из Корнельского университета, не участвовавший в исследовании.Если бы его адаптировали для других целей, добавил доктор Уильямс, «это было бы большой победой для биоинформатики».

В настоящее время команда возится с алгоритмами глубокого обучения, которые могли бы научить компьютеры лаборатории оптимизировать повторяющийся процесс проб и ошибок при проектировании белков, что позволит получать продукты за недели, а не за месяцы, сказал доктор Бейкер.

Но новизна подхода с мини-переплетом также может быть недостатком. Возможно, например, что коронавирус может мутировать и стать устойчивым к D.И.Ю. молекула.

Даниэль-Адриано Сильва, биохимик из биофармацевтической компании Neoleukin из Сиэтла, который ранее обучался у доктора Бейкера в Вашингтонском университете, возможно, придумал другую стратегию, которая могла бы решить проблему резистентности.

Его команда также разработала белок, который может предотвратить вторжение вируса в клетки, но их самостоятельная работа не помогла. молекула немного более знакома. Это уменьшенная и более прочная версия человеческого белка ACE-2, который имеет гораздо более сильное сцепление с вирусом, поэтому молекула потенциально может служить приманкой, которая отвлекает патоген от уязвимых клеток.

Пандемия коронавируса: что нужно знать

Невакцинированные городские рабочие. Ожидается, что 11 февраля Нью-Йорк уволит до 3000 муниципальных служащих, включая полицейских, пожарных и учителей, за отказ пройти вакцинацию от коронавируса — возможно, это крупнейшее сокращение рабочих в стране, связанное с мандатом на вакцинацию.

Развитие устойчивости было бы бесполезным, сказал Кристофер Барнс, структурный биолог из Калифорнийского технологического института, который сотрудничал с Нелейкиным в их проекте.Штамм коронавируса, который больше не может быть связан с приманкой, вероятно, также потеряет способность связываться с настоящей вещью, человеческой версией ACE-2. «Это большая цена для вируса», — сказал доктор Барнс.

Мини-биндеры и ложные ACE-2 легко изготовить, и они, вероятно, будут стоить всего несколько центов на доллар по сравнению с синтетическими антителами, цена которых может достигать нескольких тысяч долларов, сказала г-жа Картер. И в то время как антитела должны храниться в холоде, чтобы сохранить долголетие, D.И.Ю. белки могут быть сконструированы таким образом, чтобы они прекрасно функционировали при комнатной температуре или даже в более экстремальных условиях. Мини-связку Вашингтонского университета «можно кипятить, и это все еще нормально», — сказал доктор Цао.

Благодаря такой прочности эти молекулы легко транспортировать и вводить различными способами, например, вводя их в кровоток для лечения продолжающейся инфекции.

Две молекулы-конструктора также задействуют вирус в сверхплотном сжатии, позволяя меньшему делать больше.«Если у вас есть что-то, что хорошо связывает это, вам не нужно использовать столько», — сказал Аттабей Родригес Бенитес, биохимик из Мичиганского университета, который не участвовал в исследовании. «Это означает, что вы получаете больше отдачи от затраченных средств».

Обе исследовательские группы изучают свои продукты как потенциальные средства не только для борьбы с инфекцией, но и для ее прямого предотвращения, что-то вроде недолговечной вакцины. В серии экспериментов, описанных в их статье, команда Neoleukin распыляла свою приманку ACE-2 в носы хомяков, а затем подвергала животных воздействию коронавируса.Нелеченые хомяки серьезно заболели, но хомяки, которым вводили назальный спрей, чувствовали себя намного лучше.

Мисс Картер и ее коллеги в настоящее время проводят аналогичные эксперименты со своей мини-папкой и получают сопоставимые результаты.

Исследователи предупредили, что эти результаты могут не распространяться на людей. И ни одна из команд еще не разработала идеальный способ введения своих продуктов животным или людям.

В будущем у двух типов дизайнерских белков еще могут появиться возможности для совместной работы — если не в одном продукте, то, по крайней мере, в одной войне, пока бушует пандемия.«Это очень дополняет друг друга», — сказала г-жа Картер. Если все пойдет хорошо, подобные молекулы могут присоединиться к растущему арсеналу мер общественного здравоохранения и лекарств, уже существующих для борьбы с вирусом, сказала она: «Это еще один инструмент, который вы могли бы иметь».

[ Нравится страница Science Times на Facebook. | Подпишитесь на информационный бюллетень Science Times . ]

Как одна компания перешла от рака к коронавирусу и за 10 недель разработала лекарство, блокирующее вирусы , не может выйти на работу, но не совсем уверен, как продуктивно работать из дома.Мы пекли горы хлеба, убирали квартиры или смотрели Netflix.

Тем временем сотрудники биотехнологического стартапа Neoleukin Therapeutics в свободное время изобрели новую молекулу, блокирующую коронавирус от заражения клеток. Его можно вводить в виде назального спрея, и испытания на хомяках показали, что он защищает животных от болезней.

«Мы увидели возможность изменить мир к лучшему и эффективно использовать свое время, — сказал Даниэль-Адриано Силва, вице-президент по исследованиям компании Neoleukin.«Мы полны энтузиазма и очень рады тому, что мы здесь сделали».

Даниэль-Адриано Сильва из Neoleukin Therapeutics с моделью молекулы, разработанной компанией для … [+] лечения рака без побочных токсических эффектов

Neoleukin (NASDAQ:NLTX) была создана в январе 2019 года с целью создания дизайнерских молекул против раковых клеток. Компания Neoleukin, дочерняя компания Института дизайна белков Вашингтонского университета, использует технологию компьютерного моделирования для разработки белковых фрагментов, называемых пептидами, которые будут складываться в желаемую форму, а также прочно связываться с выбранной целью.

Названный « de novo белковый дизайн», этот метод представляет собой революционный сдвиг в способах разработки лекарств. Вместо того, чтобы искать молекулы в природе, которые могут лечить болезни, а затем пытаться оптимизировать их для безопасности, эффективности и массового производства, дизайн de novo позволяет исследователям создавать молекулы на заказ для выполнения определенной функции.

Хотя компания была запущена для создания молекул для борьбы с раком, эта стратегия одинаково хорошо работает и против инфекционных заболеваний.Дизайнерский антивирус был создан в рекордно короткие сроки и является самым сложным рабочим белком, когда-либо разработанным и созданным людьми с нуля.

«Вот потенциальный способ изменить ход этой пандемии», — сказал Сильва. «Я считаю, что если мы установим эту стратегию в качестве жизнеспособной технологии для борьбы с этой пандемией, ее можно будет использовать для воздействия на течение других вспышек в будущем».

Связывание белков зависит от формы, как кусочки 3D-пазла, которые аккуратно соединяются друг с другом, а также от химических сил.Представьте, что внутри кусочков пазла есть магниты. Если заряды не выровнены, кусочки не встанут на место, даже если физические поверхности совпадают.

Ученые Neoleukin увидели возможность применить свою технологию моделирования белков к новому коронавирусу. Белок шипа на поверхности вируса связывается с белком на поверхности клетки, называемым ACE2. Чтобы вирус не попал в клетку, нужно просто создать что-то, что блокирует часть спайкового белка, связывающую ACE2.

Традиционный подход к отражению вируса заключается в создании моноклональных антител, которые приклеиваются к вирусному белку. Экспериментальная терапия, назначенная президенту Трампу, является примером моноклонального антитела, как и недавно одобренный препарат бамланивимаб. Моноклональные антитела отлично сливаются со своими мишенями, но по молекулярным стандартам они гигантские. Они прикрепляются к большему количеству частей вируса, чем только часть, которая связана с ACE2.

Это означает, что вирус может мутировать таким образом, что лекарство сделает его менее узнаваемым, но это не помешает его способности связываться с ACE2 и инфицировать клетку.Это называется «мутационным побегом», и это объясняет, почему некоторые лекарства, которые поначалу действуют как гангстеры, со временем могут перестать быть эффективными.

Neoleukin разработал крошечный пептид, который точно соответствует той части белка ACE2, которая связывает спайковый белок коронавируса. Любое изменение, которое ослабляет связь между пептидом и вирусом, также ослабляет способность вируса инфицировать клетку. А когда пептид присутствует, с ним связывается шиповидный белок вируса вместо белка ACE2, предотвращая инфекцию.

Модели белка ACE2 и дизайнерского пептида, созданного Neoleukin, под названием CTC-445. Сайты … [+], где они связываются с белком Spike, идентичны. «CTC» означает «Покорение короны».

«Все взаимодействия, которые происходят, такие же, как взаимодействие вируса с ACE2», — сказал Томас Лински, директор Neoleukin по дизайну белков. «Это затрудняет выход вируса».

Процесс проектирования выглядит примерно так.Основываясь на опубликованной последовательности белка шиповидного белка коронавируса, исследователи используют свое программное обеспечение для проектирования белков для создания имитаторов, которые будут связывать соответствующую часть шиповидного белка. «Для этого проекта мы разработали более 35 000 последовательностей на компьютере, — сказал Лински.

Из этих тысяч кандидатов 198 пептидов были оценены в лаборатории, чтобы измерить, насколько хорошо они могут связываться с шиповидным белком в биологических условиях. «Мы много думали о том, как выбрать наилучшие возможные конструкции, которые имеют наилучшие шансы на успех», — сказал Лински.Как только главные претенденты определены, происходит большая оптимизация. С помощью процесса, называемого «направленной эволюцией», исследователи создают множество похожих пептидов, каждый из которых немного отличается, и выбирают, насколько хорошо они связываются с шиповидным белком. Эффективное противовирусное средство должно привлекать шиповидный белок даже в присутствии ACE2, предотвращая его связывание с белком на поверхности клетки и инфицирование клетки.

Противовирусное средство можно вводить в виде назального спрея.

«Как только мы выяснили, что это действительно работает, мы обратились к живому вирусу и подтвердили, что это очень эффективный способ подавления вируса», — сказал Сильва. Это не только предотвратило заражение вирусом клеток человека, выращенных в чашке, но и сработало на хомяках в назальном спрее. Пролеченные хомячки получили смертельную дозу SARS-CoV-2, и все выжили.

На данный момент компания все еще оценивает логистику массового производства молекулы. У них пока нет плана по разработке его для распространения, но потенциально они могли бы сотрудничать с производителем, если бы такая договоренность была осуществима.«Как компания, которая занимается производством белков для лечения рака и аутоиммунных заболеваний, это немного выходит за рамки нашей сферы деятельности», — сказал Джонатан Драхман, генеральный директор Neoleukin. «Это интересно, но мы должны оценить, есть ли смысл для нас пытаться его развивать».

Аэрозоли передают прионы иммунокомпетентным и иммунодефицитным мышам

Образец цитирования: Haybaeck J, Heikenwalder M, Klevenz B, Schwarz P, Margalith I, Bridel C, et al. (2011) Аэрозоли передают прионы иммунокомпетентным и иммунодефицитным мышам.PLoS Патог 7(1): е1001257. https://doi.org/10.1371/journal.ppat.1001257

Редактор: David Westaway, Университет Альберты, Канада

Получено: 22 марта 2010 г.; Принято: 13 декабря 2010 г.; Опубликовано: 13 января 2011 г.

Авторские права: © 2011 Haybaeck et al. Это статья с открытым доступом, распространяемая в соответствии с лицензией Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания оригинального автора и источника.

Финансирование: Эта работа была частично поддержана грантами ЕС ANTEPRION и PRIORITY (LS), а также TSE-Forschungsprogramm des Landes Baden-Wuerttemberg, Germany (LS). Эта работа также была поддержана грантами Министерства окружающей среды, продовольствия и сельского хозяйства Великобритании (AA), грантами ЕС LUPAS и PRIORITY (AA), Исследовательским фондом Novartis (AA) и грантом Advanced Grant Европейского исследовательского совета для АА. MH был поддержан Фондом исследований на медицинском факультете, проф.Фонд доктора Макса-Клоэтты и Фонд Боницци-Телер. Спонсоры не участвовали в разработке исследования, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.

Конкурирующие интересы: Авторы заявили об отсутствии конкурирующих интересов.

Введение

Трансмиссивные губчатые энцефалопатии (ТГЭ) — фатальные нейродегенеративные заболевания, поражающие людей и различных млекопитающих, включая крупный рогатый скот, овец, оленей и лосей.TSE характеризуются превращением клеточного прионного белка (PrP ^C ) в неправильно уложенную изоформу, называемую PrP ^Sc [1]. Агрегация PrP ^Sc связана с глиозом, спонгиозом и нейродегенерацией [2], что неизменно приводит к летальному исходу. Давно известно, что прионные заболевания являются трансмиссивными [3], и передача прионов может происходить после перорального, роговичного, внутрибрюшинного (в/б), внутривенного (в/в), интраназального (в/м), внутримышечного (в/м), внутриязыкового, чрескожного и внутримозгового (в/б) введения. .в) применение, наиболее эффективным из которых является в. прививки [4], [5], [6], [7], [8], [9], [10], [11], [12]. Некоторые биологические жидкости и экскременты (например, слюна, молоко, моча, кровь, плацента, фекалии) содержат значительные уровни инфекционности прионов [13], [14], [15], [16], [17], и считается, что горизонтальная передача иметь решающее значение для естественного распространения ТГЭ [18], [19], [20], [21], [22], [23]. Животные, находящиеся на свободном выгуле, могут поглощать инфекционные частицы приона при кормлении или питье [24], [25], а раны на языке могут представлять собой места проникновения прионов [26].

PrP ^Sc также был обнаружен в обонятельном эпителии пациентов с сБКЯ [27], [28]. Прионная колонизация носового эпителия встречается у разных видов и с разными прионными штаммами [11], [12], [29], [30], [31], [32], [33], [34], [35]. , [36], [37]. В модели прионов HY-TME интраназальное введение в 10–100 раз эффективнее перорального приема [29] и, как и во многих других экспериментальных парадигмах [38], [39], [40], [41], [42] , [43], [44], лимфоретикулярная система (LRS) является самым ранним местом отложения PrP ^Sc .В одной публикации продемонстрирована передача хронического истощения (ХБО) цервидизированным мышам через аэрозоли и при интраназальной инокуляции [45], однако в двух исследованиях сообщалось о диаметрально различающихся результатах о роли обонятельного эпителия или ЛРС в патогенезе прионов при интраназальной инокуляции прионов [11]. ], [12], возможно, из-за разных используемых прионных штаммов и животных моделей. Эти разногласия указывают на то, что механизмы интраназальной и аэрозольной прионной инфекции до конца не изучены.Кроме того, интраназальное введение физически сильно отличается от воздушной передачи прионов, поскольку проникновение в дыхательные пути капель, содержащих прион, может радикально различаться при этих двух способах введения.

Здесь мы проверили клеточные и молекулярные характеристики распространения прионов после воздействия аэрозоля и после интраназального закапывания. Мы обнаружили, что оба пути инокуляции в значительной степени не зависят от иммунной системы, даже несмотря на то, что мы использовали сильно лимфотропный штамм приона.Аэрозоли оказались эффективными переносчиками прионов у мышей, при этом трансмиссивность в основном определялась периодом воздействия, уровнем экспрессии PrP ^C и титром прионов.

Результаты

Передача прионов через аэрозоли

Прионные аэрозоли получали с помощью распылителя с гомогенатами мозга в концентрациях 0,1–20% (далее всегда указывается весовое/объемное процентное содержание), полученными от неизлечимо больных скрепи или здоровых мышей, и вводили в ингаляционную камеру.Согласно спецификациям производителя, аэрозольные частицы имели максимальный диаметр <10 мкм, и примерно 60% были <2,5 мкм [46].

Группы мышей со сверхэкспрессией PrP ^C ( tg a 20 ; n = 4–7) подвергались воздействию аэрозолей прионов, полученных из инфицированных или здоровых гомогенатов мозга (далее IBH и HBH) в различных концентрациях (0,1, 2,5, 5, 10 и 20%) в течение 10 мин (рис. 1А, табл. 1). Все tg a 20 мышей подверглись воздействию аэрозолей, полученных из IBH (концентрация: ≥2.5%) поддались скрепи с показателем атаки 100%. Время инкубации отрицательно коррелировало с концентрацией ИБГ (2,5%: n = 4, 165±54 dpi; 5%: n = 4, 131±7 dpi; 10%: n = 5, 161±27 dpi; 20%: n = 5, 161±27 dpi; = 6, 133±8 dpi, p  = 0,062, стандартная линейная регрессия по стандартному ANOVA, рис. 1А и F, таблица 1, таблица S1A).

Рисунок 1. Передача прионов через аэрозоли.

( A ) tg a 20 мышей подвергали воздействию аэрозолей, образующихся из 0,1%, 2.5%, 5%, 10% или 20% гомогенатов мозга мыши инфицированных прионами (IBH) в течение 10 мин. ( B ) Группы из tg a 20 и ( C ) мышей CD1 подвергались воздействию аэрозолей, образующихся из 20% IBH, в течение 1, 5 или 10 минут. Опыты проводились дважды (разные цвета). ( D ) C57BL/6, ( E ) 129SvxC57BL/6 и Prnp ^o/o мышей подвергали воздействию аэрозолей, генерируемых 20% IBH, в течение 10 мин. Кривые Каплана-Мейера описывают процент выживаемости после определенных моментов времени после воздействия прионных аэрозолей (ось Y представляет процент живых мышей, ось X показывает время выживания в днях после инокуляции).Различные цвета и символы описывают различные экспериментальные группы. ( F ) Неравномерный график рассеяния времени выживания в зависимости от концентрации прионных аэрозолей, образующихся из IBH, с добавлением аппроксимации линейной регрессии (p = 0,0622). ( G ) График флуктуации времени выживания в зависимости от времени воздействия для мышей tg a 20 с добавлением линейной регрессии. Отрицательная корреляция между временем выживания и временем воздействия значима (p<0,001***). ( H ) Последовательные парафиновые срезы правого гиппокампа Prnp ^o/o , tg a 20 , мышей CD1 и C57BL/6, окрашенных HE (на предмет спонгиоза, глиоза, нейронов). SAF84 (отложения PrP ^Sc ), GFAP (астроглиоз) и Iba-1 (микроглия).Все животные подвергались воздействию аэрозолей, образующихся из 20% ИБГ, в течение 10 мин. Шкала баров: 100 мкм.

https://doi.org/10.1371/journal.ppat.1001257.g001

tg a 20 мышей, подвергшихся воздействию аэрозольного 0,1% ИБГ, за период наблюдения не развился клинический скрепи (n = 4; эксперимент прекращен после 300 dpi), но обнаруживал PrP ^Sc головного мозга, указывающий на субклиническую прионовую инфекцию (рис. 1А и 2А). Напротив, у контрольных мышей tg a 20 (n = 4), подвергшихся воздействию HBH в виде аэрозоля, не развилось какое-либо распознаваемое заболевание даже при выдержке в течение ≥300 dpi, и в их мозге не было выявлено PrP ^Sc в гистоблотах и ​​вестерн-блотах. блоты (данные не показаны).

Рис. 2. Отложение PrP ^Sc в головном мозге мышей, инфицированных прионными аэрозолями, и профилирование мышей NSE-PrP .

( A ) Вестерн-блот анализ гомогенатов головного мозга (10%) терминальных или субклинических tg a 20 мышей, подвергшихся воздействию аэрозолей 20% или 0,1% IBH в течение 10 мин. PK+ или -: с расщеплением протеиназой К или без него; кДа: килодальтон. ( B–C ): вестерн-блот-анализ гомогенатов головного мозга мышей tg a 20 ( B ) или мышей CD1 ( C ), подвергшихся воздействию аэрозолей прионов из 20% IBH.( D ) Гистоблот-анализ головного мозга мышей, подвергшихся воздействию аэрозолей прионов. В мозге мышей tg a 20 , зараженных аэрозольным 10% (средняя панель) или 20% (правая панель) IBH, были обнаружены отложения PrP ^Sc в коре и среднем мозге. Поскольку в мозге мыши Prnp ^o/o сигнала не было (левая панель), мы делаем вывод, что сигнал на средней и правой панелях представляет собой локальную репликацию прионов. ( E ) Анализ степени тяжести гистопатологического поражения 5 областей головного мозга, изображенных в виде радарных диаграмм [51] (астроглиоз, губчатое изменение и отложение PrP ^Sc ), полученный из tg a 20 , CD1, C57BL/6 и 129SvxC57 /6 мышей, подвергшихся воздействию прионных аэрозолей.Цифры соответствуют следующим отделам мозга: (1) гиппокамп, (2) мозжечок, (3) обонятельная луковица, (4) лобное белое вещество, (5) височное белое вещество. ( F ) Оценка тяжести гистопатологического поражения 5 областей головного мозга, показанная в виде радарного блоттинга (астроглиоз, губчатое изменение и отложение PrP ^Sc ) в.к. прион инокулировали мкг a 20 , мышей CD1, C57BL/6 и 129SvxC57BL/6. 1 – гиппокамп, 2 – мозжечок, 3 – обонятельная луковица, 4 – белое вещество лобной области, 5 – белое вещество височной области.( G ) Кривая выживаемости и ( H ) оценки тяжести поражения мышей NSE-PrP , подвергшихся воздействию 20% аэрозольного IBH в течение 10 мин. ( I ) Гистологическая и иммуногистохимическая характеристика пораженного скрепи гиппокампа мышей NSE-PrP после воздействия аэрозольного 20% IBH. Обозначения пятен, как на рис. 1H. Масштабная линейка: 100 мкм.

https://doi.org/10.1371/journal.ppat.1001257.g002

В приведенных выше экспериментах и ​​во всех экспериментах, описанных в оставшейся части этого исследования, все экспрессирующие PrP ( tg a 20 и WT ) мышей, у которых диагностировали неизлечимую болезнь скрепи, тестировали вестерн-блоттингом и гистологией: все они неизменно содержали PrP ^Sc в головном мозге (рис.2) и отображать все типичные гистопатологические признаки скрепи, включая спонгиоз, отложение PrP и астроглиоз (рис. 1H).

Корреляция времени воздействия прионных аэрозолей и инкубационного периода

Затем мы попытались определить минимальное время воздействия, при котором прионы могут передаваться через аэрозоли (рис. 1В, табл. 1). tg a 20 мышей подвергали воздействию аэрозольного ИБГ (20%) в течение различной продолжительности (1, 5 или 10 мин) в двух независимых экспериментах.Неожиданно было обнаружено, что времени воздействия всего 1 мин достаточно, чтобы вызвать 100% частоту приступов скрепи. Более длительное воздействие аэрозолей, содержащих прион, сильно коррелирует с укорочением инкубационного периода (рис. 1B и G, таблица 1, таблица S1A и B).

Чтобы проверить универсальность приведенных выше результатов, мы исследовали, могут ли аэрозоли передавать прионы различным линиям мышей (CD1, C57BL/6; 129SvxC57BL/6), экспрессирующим уровни дикого типа (wt) PrP ^C . Мышей CD1 подвергали воздействию аэрозольного 20% IBH в двух независимых экспериментах (фиг.1С, табл. 1). После 5 или 10-минутного воздействия все мыши CD1 умерли от скрепи, тогда как более короткое воздействие (1 минута) привело к степени атаки 0–50% [1-минутное воздействие (первый эксперимент): скрепи у мышей 0/3; экспозиция 1 мин (второй эксперимент): 2/4 мышей умерли от скрепи при 202±0 dpi; 5 мин (первый опыт): n = 4, частота атак 100%, 202±12 dpi; 5 мин (второй опыт): n = 3, частота атак 100%, 202±0 dpi; 10 мин (первый эксперимент): n = 4, частота атак 100%, 202±0 dpi; 10 мин (второй опыт): n = 4, частота атак 100%, 206±16 dpi].У мышей CD1, подвергшихся воздействию аэрозолей, содержащих прион, в течение более длительных интервалов, мы обнаружили тенденцию к сокращению времени инкубации, которая не достигла статистической значимости (таблицы S1A и S1B).

Мы также исследовали, будут ли мыши C57BL/6 или 129SvxC57BL/6 погибать от скрепи при воздействии прионных аэрозолей (рис. 1D и E, таблица 1). 10-минутная экспозиция с 20% IBH привела к частоте атак 100% (C57BL/6: 10 мин: n = 4; 185±11 dpi; 129SvxC57BL/6: n = 5; 10 мин: 182±15 dpi ). Контрольные мыши Prnp ^o/o (фон 129SvxC57BL/6; n = 3) были устойчивы к аэрозольным прионам (20%, 10 мин), как и ожидалось (рис.1Е и Н, таблица 1).

Время инкубации и скорость атаки зависят от уровня экспрессии PrP

Когда tg a 20 мышей подвергали контрольному заражению в течение 10 мин, вариации концентрации аэрозольного ИБГ оказывали незначительное влияние на время выживания ( p  = 0,062; рис. 1F), тогда как вариации продолжительности воздействия из tg a 20 мышей значительно повлияли на продолжительность их жизни ( p <0,001; рис.1Г). Кроме того, tg a 20 мышей, которые экспрессируют в 6-9 раз больше PrP ^C в центральной нервной системе (ЦНС), чем мыши дикого типа [46], [47], [48], значительно раньше погибали от скрепи при воздействие прионного аэрозоля в течение 10 мин (20%) ( мкг a 20 мышей: 134±4 dpi; мышей CD1: 202±12 dpi, p <0,0001; мышей C57BL/6: 185±11 dpi, p  = 0,003; мыши 129SvxC57BL/6: 182±15 dpi, p  = 0,003; рис. 1B–E, рис. S1, таблицы S1A и S1C).Время инкубации было увеличено, а передача была менее эффективной у мышей CD1, чем у мышей tg a 20 после 1-минутного воздействия прионных аэрозолей (20%). Вариабельность времени инкубации между мышами CD1 была низкой (1 ^st против 2 ^nd эксперимента с 5-минутной экспозицией: p  = 0,62, 1 ^st против 2 ^nd эксперимента с 10-минутной экспозицией). : p  = 0,27 (рис. 1В, табл. 1). Это говорит о том, что 1-минутного воздействия прионных аэрозолей (20%) на мышей CD1 достаточно для поглощения ≤1LD50 инфекционных единиц.Это открытие подчеркивает важность уровней экспрессии PrP ^C не только для времени инкубации, но также и для восприимчивости к инфекции и нейроинвазии при воздействии аэрозолей. Гистоблот-анализ подтвердил отложение PrP ^Sc в мозгу мышей tg a 20 , подвергавшихся воздействию аэрозолей прионов, полученных из 10% или 20% IBH, тогда как PrP ^Sc не был обнаружен в мозге Prnp ⁶ o мышей, подвергшихся воздействию аэрозолей прионов (рис. 2D).

Затем мы провели полуколичественный анализ гистопатологических поражений ЦНС. Следующие области мозга оценивались в соответствии со стандартизированной оценкой тяжести (астроглиоз, губчатые изменения и отложение PrP ^Sc ; [49]): гиппокамп, мозжечок, обонятельная луковица, лобное белое вещество и височное белое вещество. Оценки сравнивали с таковыми у мышей, инокулированных внутрикожно. с RML (рис. 2E и F). Профили поражения неизлечимо больных скрепи мышей ( tg a 20 , CD1, C57BL/6 и 129SvxC57BL/6), инфицированных i.в. или через аэрозоли были одинаковыми независимо от генетического фона или уровней экспрессии PrP ^C (рис. 2E и F), при этом CD1 и 129SvxC57BL/6 гиппокампа и мозжечка демонстрировали только легкие гистологические и иммуногистохимические признаки скрепи независимо от пути инокуляции.

Мы попытались проследить PrP ^Sc в носоглотке, полости носа или различных отделах головного мозга сразу после заражения прионным аэрозолем (через 1–6 часов после воздействия) и в различные моменты времени после интраназальных инокуляций (6, 12, 24, 72, 144 часа, 140 dpi и окончательно) с использованием различных методов, включая вестерн-блоттинг, гистоблот и анализ неправильной укладки белков.Однако ни один из этих анализов не обнаружил PrP ^Sc вскоре после воздействия прионного аэрозоля (6–72 часа после воздействия прионного аэрозоля), тогда как при 140 dpi или на терминальной стадии PrP ^Sc был обнаружен всеми этими методами (рис. S2; данные не показаны).

Экспрессия PrP

Затем мы исследовали, будет ли экспрессия PrP ^C в нейронах достаточной для индукции скрепи после воздействия прионов через аэрозоли. Трансгенные мыши NSE-PrP селективно экспрессируют PrP ^C в нейронах, а при размножении на фоне Prnp ^o/o ( Prnp ^o/o / ) проявляют Cr-Prestricted