Бактериофаг при простуде детям: Бактериофаги: как принимать лекарственные препараты бактериофаги для лечения детей и взрослых

Простуда

Болезни уха, горла, носа

 

  • Бактериофаги применяют для лечения гнойно-воспалительных заболеваний уха (отиты), горла (ангины, хронические тонзиллиты), носа (синуситы).
  • Бактериофаги используют местно (промывания, полоскания, закапывания) и внутрь перорально.
  • Бактериофаги используют при множественной устойчивости бактерий-возбудителей к антибиотикам.
  • Бактериофаги используют при лечении пациентов с непереносимостью антибиотиков или наличием противопоказаний к их применению.
  • Бактериофаги могут быть использованы в комбинации с другими антимикробными средствами.
  • Бактериофаги используют для профилактики бактериальных осложнений вирусных инфекций в группах риска: у детей, пожилых людей, пациентов с аллергическими заболеваниями, ослабленным иммунитетом, хроническими заболеваниями.

 

Гнойно-воспалительные заболевания уха, горла и носа обычно развиваются как осложнения после перенесенной острой респираторной вирусной инфекции (ОРВИ).

Заболевания уха, горла, носа часто вызываются условно-патогенной флорой – стафилококками, стрептококками, синегнойной палочкой и т.д. Эти бактерии обитают на слизистых оболочках дыхательных путей почти у каждого и вызывают заболевания только при ослаблении иммунной системы (в частности при ОРВИ). Представители условно-патогенной флоры человека часто  демонстрируют множественную устойчивость к антибиотикам. Использование бактериофагов в лечении гнойно-воспалительных заболеваний уха, горла и носа позволяет не только устранить инфекцию, но и стимулировать собственные иммунные реакции организма.

 

Синуситы – гайморит, фронтит, этмоидит

 

Если насморк сохраняется более 10 дней, наблюдаются желто-зеленые выделения из носа, головная боль, светобоязнь и слезотечение, то есть основания заподозрить острый гнойный синусит — бактериальное поражение придаточных пазух носа. При синуситах из-за воспаления отекшей слизистой узкие отверстия, соединяющие полость и придаточные пазухи носа, практически полностью перекрываются. Выделения из пазух перестают отходить, нарушаются вентиляция и дренаж пазух, в результате чего создаются благоприятные условия для размножения бактерий и усиления воспалительного процесса. Воздух вместе с гноем или другим отделяемым оказывает давление на стенки синуса и вызывает боль, а бактериальные токсины и продукты распада тканей, всасываясь через слизистые околоносовой пазухи в кровь, приводят к общей интоксикации организма.

 

Без адекватного лечения эти заболевания могут переходить в хроническую форму, вызывать осложнения со стороны внутренних органов. У больных хроническим синуситом значительно чаще отмечаются бронхиты и пневмонии.

 

Лечение гнойных синуситов включает устранения отека слизистой оболочки носовой полости и эвакуацию слизи из пазух, а также антибактериальную терапию. Для устранения инфекции целесообразно применение препаратов, содержащих бактериофаги, лизирующие наиболее распространенных возбудителей гнойных синуситов, в частности, препарата Пиофаг®. Фагопрепараты высокоспецифичны — они уничтожают болезнетворные бактерии, не затрагивая полезную микрофлору ротовой полости и кишечника. Благодаря высокой безопасности, Пиофаг® разрешен к использованию у детей (см.

Инструкцию). Кроме того, бактериофаги стимулируют факторы специфического и неспецифического иммунитета, что особенно важно при лечении хронических воспалительных заболеваний у ослабленных пациентов.

 

Препарат Пиофаг® при синуситах применяют местно, а также внутрь перорально.

 

Для местного применения используют ватные турунды, смоченные в растворе бактериофага (неразбавленный препарат). Турунды вводят в носовые ходы после промывания пазух и оставляют на 1 час. Турунды меняют в течение дня до 3 раз. Для промывания носа препарат разводят в кипяченой воде комнатной температуры в соотношении 1:3, то есть 10 мл препарата на 30 мл воды.

Внутрь препарат принимают 3 раза в день возрастную дозу за 1 час до приема пищи в течение 7-20 дней.

 

Возрастные дозировки препарата смотрите в Инструкции для медицинского применения лекарственного средства Пиофаг®.

 

Отиты

 

Боль в ухе, нарушения слуха, повышение температуры могут свидетельствовать о начале отита. Вирусный отит без лечения переходит в гнойную форму. Наиболее распространенная форма отита — воспаление среднего уха. Бактерии попадают в ушную полость из носоглотки при насморке, фарингите; могут заноситься в слуховую трубу с током крови и лимфы; в детском возрасте воспаление и разрастание аденоидов может привести к перекрытию отверстия среднего уха и нарушению его естественной вентиляции. При бактериальном отите гной скапливается в полости среднего уха и распирает барабанную перепонку. Боль нарастает и начинает отдавать височную область. Гной может прорывать барабанную перепонку и вытекать наружу. Если гной не имеет выхода, инфекция может распространяться на соседние ткани (внутреннее ухо, оболочки головного мозга, тройничный нерв), приводить к тугоухости.

 

Лечение гнойного отита включает уменьшение отека слизистой оболочки и восстановление нормального сообщения между носовой полостью и средним ухом. Противовоспалительные и обезболивающие средства применяют как местно в виде капель, так и системно. Основой лечения гнойного отита является антибактериальная терапия. Эффективным и безопасным вариантом последней является фаготерапия — лечение бактериофагами, лизирующими наиболее распространенных возбудителей гнойных отитов, в частности, препаратом Пиофаг®. Фагопрепараты, уничтожая болезнетворные бактерии, не затрагивают полезную микрофлору. Пиофаг® разрешен к использованию у детей (см. Инструкцию). Бактериофаги стимулируют иммунную систему, что особенно важно при лечении хронических воспалительных заболеваний.

 

Препарат Пиофаг® при отитах применяют местно, а также внутрь перорально.

 

Для местного применения используют ватные турунды, смоченные в растворе бактериофага (неразбавленный препарат). Турунды вводят в слуховой проход и оставляют на 1 час. Турунды меняют в течение дня до 3 раз. Внутрь препарат принимают 3 раза в день возрастную дозу за 1 час до приема пищи в течение 7-20 дней.

 

Возрастные дозировки препарата смотрите в Инструкции для медицинского применения лекарственного средства Пиофаг®.

 

Ангина (острый тонзилит)

 

Сильная боль в горле с внезапным повышением температуры тела до 38–39°, головной болью, слабостью, появление желтых гнойничков или серо-белого налета на миндалинах — так обычно начинается ангина (острый тонзиллит). Чаще всего причиной ангины является стрептококковая инфекция. По разным причинам (неправильное лечение, ослабленный иммунитет) острый тонзиллит может переходить в хроническую форму, когда воспаление в глотке наблюдается постоянно и периодически обостряется. Кроме того, бактерии, заселившие миндалины, выделяют токсичные продукты, которые могут постепенно привести к развитию ревматизма, миокардита, артритов, гломерулонефрита и т.д.

 

Лечение ангины включает постельный режим, обильное питье, антибактериальную терапию — как местную, так и системную. В комплекс лечения ангины целесообразно включать препараты бактериофагов, лизирующих стрептококков и других возбудителей заболевания, в частности, препарат Пиофаг®. Фагопрепараты действуют только на болезнетворные бактерии, не затрагивая нормальную микрофлору и не вызывая дисбактериоз. Кроме того, бактериофаги стимулируют иммунную систему. Пиофаг® разрешен к использованию у детей (см. Инструкцию).

 

Препарат Пиофаг® при отитах применяют местно, а также внутрь перорально.

 

Препарат используют для полоскания горла 3-4 раза в день в дозе 10-20 мл, а также для прицельного промывания миндалин. Внутрь препарат принимают возрастную дозу 3 раза в день за 1 час до приема пищи в течение 7-20 дней.

 

  • Возрастные дозировки препарата смотрите в Инструкции для медицинского применения лекарственного средства Пиофаг®.
  • Полная информация о препарате содержится в Инструкции для медицинского применения.
  • Перед приемом ознакомьтесь с Инструкцией для медицинского применения лекарственного средства Пиофаг®.

 

Загрузить Инструкцию для медицинского применения лекарственного средства Пиофаг®

 

Р.П. №UA/15974/01/01. Утверждено Приказом МЗ Украины № 478 от 28.04.2017г.

 

Информация о препарате представлена исключительно с ознакомительной целью и не должна быть использована как руководство к самолечению. Только врач может принять решение о назначении препарата, а также определить дозы и способ его применения.

Пиобактериофаг поливалентный очищенный инструкция по применению: показания, противопоказания, побочное действие – описание Pyobacteriophage polyvalent purified р-р д/приема внутрь, местн. и наружн. прим.: фл. 20 мл 4 или 10 шт. (36440)

Перед использованием флакон с бактериофагом необходимо взболтать и просмотреть. Препарат должен быть прозрачным и не содержать осадка.

Внимание! При помутнении препарат не применять!

Вследствие содержания в препарате питательной среды, в которой могут развиваться бактерии из окружающей среды, вызывая помутнение препарата, необходимо при вскрытии флакона соблюдать следующие правила:

  • тщательно мыть руки;
  • обработать колпачок спиртсодержащим раствором; снять колпачок, не открывая пробки;
  • не класть пробку внутренней поверхностью на стол или другие предметы;
  • не оставлять флакон открытым;
  • вскрытый флакон хранить только в холодильнике.

При использовании малых доз (2-8 капель) препарат необходимо отбирать стерильным шприцем в объеме 0.5-1 мл.

Препарат из вскрытого флакона при соблюдении условий хранения, вышеперечисленных правил и отсутствии помутнения может быть использован в течение всего срока годности.

Препарат используют для приема внутрь (через рот), в виде клизм, аппликаций, орошений, введения в полости ран, вагины, матки, носа, пазух носа, а также в дренированные полости: абсцессов, брюшную, плевральную, мочевого пузыря, почечной лоханки.

Внутрь препарат принимают натощак за 0.5-1 час до приема пищи.

Рекомендуемые дозировки препарата

Возраст пациента Доза на 1 прием при различных способах введения препарата
внутрь (мл) в клизме (мл)
0-6 мес 5 10
6-12 мес 10 20
От 1 года до 3 лет 15 20-30
От 3 до 8 лет 20 30-40
От 8 лет и старше 20-30 40-50

Лечение гнойно-воспалительных заболеваний с локализованными поражениями должно проводиться одновременно как местно, так и приемом препарата внутрь.

В случае обработки полости гнойного очага химическими антисептиками перед применением бактериофага она должна быть промыта стерильным 0.9 % раствором натрия хлорида.

При лечении ангины, фарингита, ларингита препарат используют для полосканий полости рта и глотки 3 раза в день по 10-20 мл, курс лечения 7-10 дней.

При лечении бронхита, пневмонии препарат принимают внутрь 3 раза в день по 10-20 мл, а также применяют в виде аэрозолей и ингаляций (без подогрева и использования ультразвука), курс лечения 15-20 дней.

При лечении отита препарат используют для промывания и введения в полость среднего уха по 2-5 мл 1-3 раза в день. Курс лечения 7-15 дней.

При лечении воспаления пазух носа препарат используют для промывания полости носа, носоглотки и пазух носа в дозе 5-10 мл и введения в пазухи 2-3 мл. Процедуру повторяют ежедневно однократно в течение 7-10 дней. Кроме того, препарат вводят в полость носа в виде турунд, смоченных бактериофагом, по очереди в каждый носовой ход и оставляют в течение 0,5-1 часа. Процедуру повторяют 3 раза в день, курс лечения 7-15 дней.

При лечении стоматита и хронического пародонтита препарат используют в виде полосканий полости рта 3-4 раза в день в дозе 10-20 мл, а также введением в парадонтальные карманы турунд, пропитанных бактериофагом, на 5-10 мин, курс лечения 7-10 дней.

При конъюнктивите и кератоконъюнктивите препарат применяют по 2-3 капли 4-5 раз в день, курс лечения 5-7 дней; при гнойной язве роговицы – по 4-5 капель в день в течение 7-10 дней, при гнойном иридоциклите – по 6-8 капель каждые 3 часа в сочетании с приемом внутрь в терапевтических дозировках в течение 7-10 дней.

При абсцессе после вскрытия и удаления гнойного содержимого препарат вводят в количестве меньшем, чем объем удаленного гноя ежедневно однократно, курс лечения 7-10 дней.

При перитоните и плеврите препарат вводят в дренированные полости – брюшную и плевральную через дренажные трубки ежедневно однократно 20-70 мл, курс лечения 10-15 дней.

При остеомиелите препарат вводят в полость раны через турунды, дренажи в количестве 10-30 мл ежедневно однократно, курс лечения 15-20 дней.

При лечении мастита, нагноений ран и ожогов, препарат применяют в виде орошения, аппликаций, повязок, введения в дренаж в дозе 5-50 мл в зависимости от очага поражения не менее 1 раз в день, курс лечения 10-15 дней.

При лечении гнойно-воспалительных гинекологических заболеваний (нагноений ран, эндометрита, вульвита, бартолинита, кольпита, сальпингоофорита) препарат используют для орошений, аппликаций, вводят в полости ран, вагины, матки по 5-20 мл один раз в день в течение 7-10 дней.

При цистите, пиелонефрите, уретрите препарат принимают внутрь в терапевтической дозе 3 раза в день за 1 час до еды в течение 10-20 дней. В том случае, если полость мочевого пузыря или почечной лоханки дренированы, препарат вводят через цистостому или нефростому 1-3 раза в день по 20-50 мл в мочевой пузырь и 5-7 мл в почечную лоханку, курс лечения 7-15 дней.

При гастроэнтероколите, панкреатите, холецистите, а также дисбактериозе кишечника бактериофаг принимают внутрь в возрастных дозировках 3 раза в день за 1 час до еды в течение 7-15 дней (по клиническим показаниям). При неукротимой рвоте препарат применяют в виде высоких клизм 2-3 раза в день по 20-40 мл. При дисбактериозе кишечника препарат может применяться с препаратами нормофлоры.

Для профилактики внутрибольничных хирургических инфекций препарат используют для обработки послеоперационных и свежеинфицированных ран в дозе 5-50 мл в зависимости от очага поражения ежедневно однократно в течение 5-7 дней.

Применение препарата у детей до 1 года (включая недоношенных детей)

При гастроэнтероколите, пневмонии и сепсисе новорожденных препарат применяют через рот 2-3 раза в сутки по 3-5 мл за 30 минут до кормления. В случаях неукротимой рвоты препарат применяют в виде высоких клизм (через газоотводную трубку или катетер) ежедневно однократно в дозе 5-10 мл. Возможно сочетание ректального (в виде высоких клизм) и перорального применения препарата. Курс лечения 7-15 дней (по клиническим показаниям). При рецидивирующем течении заболевания возможно повторное проведение курсов лечения.

При лечении омфалита, пиодермии, инфицированных ран бактериофаг применяют в виде аппликаций по 5-10 мл 2-3 раза в день (марлевую салфетку смачивают бактериофагом и накладывают на пупочную ранку или пораженный участок кожи) в течение 7-15 дней.

С целью профилактики возникновения внутрибольничной инфекции у новорожденных детей бактериофаг применяют по эпидемическим показаниям внутрь по 3-5 мл 3 раза в день за 30 минут до кормления в течение всего срока пребывания в стационаре.

Пиобактериофаг комплексный жидкий инструкция по применению: показания, противопоказания, побочное действие – описание Pyobacteriophage complex liqiud р-р д/приема внутрь и местн. применения 100 мл: фл. 1 шт. (30634)

Пиобактериофаг комплексный

📜 Инструкция по применению Пиобактериофаг комплексный

💊 Состав препарата Пиобактериофаг комплексный

✅ Применение препарата Пиобактериофаг комплексный

📅 Условия хранения Пиобактериофаг комплексный

⏳ Срок годности Пиобактериофаг комплексный


Сохраните у себя

Поделиться с друзьями

Пожалуйста, заполните поля e-mail адресов и убедитесь в их правильности

Описание лекарственного препарата Пиобактериофаг комплексный (Pyobacteriophage complex)

Основано на официально утвержденной инструкции по применению препарата и подготовлено для электронного издания справочника Видаль 2011 года, дата обновления: 2020.10.16

Владелец регистрационного удостоверения:

Код ATX: V03A (Прочие разные препараты)

Лекарственные формы


Пиобактериофаг комплексный

Р-р д/приема внутрь, местн. и наружн. прим. 20 мл: фл. 8 шт.

рег. №: ЛС-000700 от 21.06.10 – Бессрочно Дата перерегистрации: 29.06.20

Р-р д/приема внутрь, местн. и наружн. прим. 100 мл: фл. 1 шт.

рег. №: ЛС-000700 от 21.06.10 – Бессрочно Дата перерегистрации: 29.06.20

Форма выпуска, упаковка и состав препарата Пиобактериофаг комплексный


Раствор для приема внутрь и местного применения1 фл.
смесь стерильных фильтратов фаголизатов стафилококков, стрептококков, энтерококков, протея, клебсиелл (пневмонии и окситока), синегнойной и кишечной палочек20 мл

Консервант: хинозол 0.0001 г/мл

20 мл – флаконы (8) – пачки картонные.

Раствор для приема внутрь и местного применения1 фл.
смесь стерильных фильтратов фаголизатов стафилококков, стрептококков, энтерококков, протея, клебсиелл (пневмонии и окситока), синегнойной и кишечной палочек100 мл

Консервант: хинозол 0.0001 г/мл

100 мл – флаконы (1) – пачки картонные.

Фармакологическое действие

Пиобактериофаг комплексный жидкий обладает способностью специфически лизировать бактерии стафилококков, стрептококков, энтерококков, протея, клебсиелл пневмония и окситока, синегнойной и кишечной палочек.

Показания препарата Пиобактериофаг комплексный

Лечение и профилактика гнойно-воспалительных и кишечных заболеваний, вызванных стафилококками, энтерококками, стрептококками, синегнойной палочкой, клебсиеллами, патогенной кишечной палочкой различных серогрупп, протеем при внутреннем, ректальном и наружном применении:

  • заболевания уха, горла, носа, дыхательных путей и легких: воспаления пазух носа, среднего уха, ангина, фарингит, ларингит, трахеит, бронхит, пневмония, плеврит;
  • хирургические инфекции: нагноения ран, ожоги, абсцесс, флегмона, фурункулы, карбункулы, гидроаденит, панариции, парапроктит, мастит, бурсит, остеомиелит;
  • урогенитальные инфекции: уретрит, цистит, пиелонефрит, кольпит, эндометрит, сальпингоофорит;
  • посттравматические конъюнктивиты, кератоконъюнктивиты, гнойные язвы роговицы и иридоциклиты;
  • энтеральные инфекции: гастроэнтероколит, холецистит, дисбактериоз;
  • генерализованные септические заболевания;
  • гнойно-воспалительные заболевания новорожденных: омфалит, пиодермия, конъюнктивит, гастроэнтероколит, сепсис и др.;
  • другие заболевания, вызванные бактериями стафилококков, стрептококков, энтерококков, протея, клебсиелл пневмония и окситока, синегнойной и кишечной палочек.

С профилактической целью препарат используют для обработки операционных и свежеинфицированных ран, а также для профилактики внутрибольничных инфекций по эпидемическим показаниям.

Важным условием эффективной фаготерапии является предварительное определение фагочувствителыюсти возбудителя.

Открыть список кодов МКБ-10
A40 Стрептококковый сепсис
A41 Другой сепсис
h20.2 Другие острые конъюнктивиты
h26.0 Язва роговицы
h26.2 Кератоконъюнктивит (в т.ч. вызванный внешним воздействием)
h30.0 Острый и подострый иридоциклит (передний увеит)
h54.0 Гнойный эндофтальмит
H66 Гнойный и неуточненный средний отит
J01 Острый синусит
J02 Острый фарингит
J03 Острый тонзиллит
J04 Острый ларингит и трахеит
J15 Бактериальная пневмония, не классифицированная в других рубриках
J20 Острый бронхит
J85 Абсцесс легкого и средостения
J86 Пиоторакс (эмпиема плевры)
J90 Плевральный выпот
K29 Гастрит и дуоденит
K52 Другие неинфекционные гастроэнтериты и колиты
K61 Абсцесс области заднего прохода и прямой кишки
K63 Другие болезни кишечника
L01 Импетиго
L02 Абсцесс кожи, фурункул и карбункул
L03 Флегмона
L08.0 Пиодермия
L60 Болезни ногтей
L73.2 Гидраденит гнойный
M86 Остеомиелит
N10 Острый тубулоинстерстициальный нефрит (острый пиелонефрит)
N11 Хронический тубулоинтерстициальный нефрит (хронический пиелонефрит)
N30 Цистит
N34 Уретрит и уретральный синдром
N41 Воспалительные болезни предстательной железы
N61 Воспалительные болезни молочной железы
N70 Сальпингит и оофорит
N71 Воспалительная болезнь матки, кроме шейки матки (в т.ч. эндометрит, миометрит, метрит, пиометра, абсцесс матки)
N72 Воспалительная болезнь шейки матки (в т.ч. цервицит, эндоцервицит, экзоцервицит)
N73.0 Острый параметрит и тазовый целлюлит
P36 Бактериальный сепсис новорожденного
P38 Омфалит новорожденного с небольшим кровотечением или без него
T79.3 Посттравматическая раневая инфекция, не классифицированная в других рубриках

Режим дозирования

Лечение гнойно-воспалительных заболеваний с локализованными поражениями должно проводиться одновременно как местно, так и через рот, 7-20 дней (по клиническим показаниям).

В зависимости от характера очага инфекции бактериофаг применяют:

  1. Местно в виде орошения, примочек и тампонирования жидким фагом в количестве до 200 мл в зависимости от размеров пораженного участка. При абсцессах бактериофаг вводят в полость очага после удаления гноя с помощью пункции. Количество вводимого препарата должно быть несколько меньше объема удаленного гноя. При остеомиелите после соответствующей хирургической обработки в рану вливают бактериофаг по 10-20 мл.
  2. Введение в полости – плевральную, суставную и другие ограниченные полости до 100 мл бактериофага, после чего оставляют капиллярный дренаж, через который в течение нескольких дней повторно вводят бактериофаг.
  3. При циститах, пиелонефритах, уретритах препарат принимают внутрь. В случае, если полость мочевого пузыря или почечной лоханки дренированы, бактериофаг вводят через цистостому или нефростому 1-2 раза в день по 20-50 мл в мочевой пузырь и по 5-7 мл в почечную лоханку.
  4. При гнойно-воспалительных гинекологических заболеваниях препарат вводят в полость вагины, матки в дозе 5-10 мл ежедневно однократно.
  5. При гнойно-воспалительных заболеваниях уха, горла, носа препарат вводят в дозе 2-10 мл 1-3 раза в день. Бактериофаг используют для полоскания, промывания, закапывания, введения смоченных турунд (оставляя их на 1 час).
  6. При конъюнктивитах и кератоконъюнктивитах препарат закапывают по 2-3 капли 4-5 раз/сут, при гнойной язве роговицы – по 4-5 капель, при гнойных иридоциклитах препарат применяют по 6-8 капель каждые 3 ч в сочетании с приемом внутрь.
  7. При лечении стоматитов и хронических генерализованных парадонтитов препарат используют в виде полосканий полости рта 3-4 раза в день в дозе 10-20 мл, а также введением в пародонтальные карманы турунд, пропитанных пиобактериофагом, на 5-10 минут.
  8. При кишечных формах заболевания, заболеваниях внутренних органов, дисбактериозе бактериофаг применяют через рот и в клизме. Через рот бактериофаг дают 3 раза/сут натощак за 1 ч до еды. В виде клизм назначают 1 раз/сут вместо одного приема через рот.

Рекомендуемые дозировки препарата

ВозрастДоза на 1 прием (в мл)
через ротв клизме
0-6 мес510
6-12 мес1020
от 1 года до 3 лет1530
от 3 лет до 8 лет2040
от 8 лет и старше3050

Применение бактериофагов не исключает использования других антибактериальных препаратов. В случае, если до применения бактериофага для лечения ран применялись химические антисептики, рана должна быть тщательно промыта стерильным 0.9% раствором натрия хлорида.

Применение бактериофага у детей (до 6 месяцев). При сепсисе, энтероколите новорожденных, включая недоношенных детей, бактериофаг применяют в виде высоких клизм (через газоотводную трубку или катетер) 2-3 раза в сутки (см. табл.). При отсутствии рвоты и срыгивания возможно применение препарата через рот. В этом случае он смешивается с грудным молоком. Возможно сочетание ректального (в клизмах) и перорального (через рот) применения препарата. Курс лечения 5-15 дней. При рецидивирующем течении заболевания возможно проведение повторных курсов лечения. С целью профилактики сепсиса и энтероколита при внутриутробном инфицировании или опасности возникновения внутрибольничной инфекции у новорожденных детей бактериофаг применяют в виде клизм 2 раза в день в течение 5-7 дней.

При лечении омфалитов, пиодермии, инфицированных ран препарат применяют в виде аппликаций ежедневно двукратно (марлевую салфетку смачивают бактериофагом и накладывают на пупочную ранку или на пораженный участок кожи).

Побочное действие

Не установлено.

Противопоказания к применению

Отсутствуют.

Применение при беременности и кормлении грудью

Возможно применение препарата при беременности и в период грудного вскармливания по показаниям.

Применение у детей

Применение возможно согласно режиму дозирования.

Применение у пожилых пациентов

Применение возможно согласно режиму дозирования.

Особые указания

Перед употреблением флакон с жидким бактериофагом необходимо взбалтывать. При помутнении не употреблять!

Влияние на способность к управлению транспортными средствами и механизмами

Сведения о возможном влиянии лекарственного препарата на способность управлять транспортными средствами, механизмами отсутствуют.

Передозировка

Меры по оказанию помощи при передозировке не установлены.

Лекарственное взаимодействие

Применение препарата возможно в сочетании с другими лекарственными средствами, в т.ч. с антибиотиками.

Условия хранения препарата Пиобактериофаг комплексный

Хранение в соответствии с СП 3.3.2.1248-03 при температуре от 2 до 8 °С в сухом, защищенном от света и недоступном для детей месте. Замораживание не допускается.

Срок годности препарата Пиобактериофаг комплексный

Срок годности – 2 года.

Транспортирование в соответствии с СП 3.3.2.1248-03 при температуре от 2° до 8°С, допускается транспортирование при температуре от 9° до 25°С не более 1 месяца. Замораживание не допускается.

Условия реализации

Без рецепта.


Сохраните у себя

Поделиться с друзьями

Пожалуйста, заполните поля e-mail адресов и убедитесь в их правильности

Инструкция по применению Секстафаг поливалентный раствор для приема внутрь флаконы 20 мл 4 шт

Действующие вещества

Пиобактериофаг

Форма выпуска

Раствор

Состав

Действующее вещество: фильтрат фаголизатов бактерий Staphylococcus, Streptococcus, Proteus (P. vulgaris, P. mirabilis), Pseudomonas aeruginosa, энтеропатогенных Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae

Фармакологический эффект

Пиобактериофаг поливалентный обладает способностью специфически лизировать бактерии стафилококков, стрептококков (в том числе энтерококков), протея, клебсиелл пневмонии, синегнойной и кишечной палочек.

Фармакокинетика

Данные по фармакокинетике препарата не предоставлены.

Показания

Заболевания уха, горла, носа, дыхательных путей и легких воспаления пазух носа, среднего уха, ангина, фарингит, ларингит, трахеит, бронхит, пневмония, плеврит; хирургические инфекции – нагноения ран, ожоги, абсцесс, флегмона, фурункулы, карбункулы, гидроаденит, панариции, парапроктит, мастит, бурсит, остеомиелит; урогенитальные инфекции – уретрит, цистит, пиелонефрит, кольпит, эндометрит, сальпингоофорит; посттравматические конъюнктивиты, кератоконъюнктивиты, гнойные язвы роговицы и иридоциклиты; энтеральные инфекции – гастроэнтероколит, холецистит, дисбактериоз; генерализованные септические заболевания; гнойно-воспалительные заболевания новорожденных – омфалит, пиодермия, конъюнктивит, гастроэнтероколит, сепсис и др.; другие заболевания, вызванные бактериями стафилококков, стрептококков, энтерококков, протея, клебсиелл пневмонии и окситока, синегнойной и кишечной палочек.С профилактической целью препарат используют для обработки операционных и свежеинфицированных ран, а также для профилактики внутрибольничных инфекций по эпидемическим показаниям.

Противопоказания

Гиперчувствительность к компонентам препарата.

Меры предосторожности

Не превышать рекомендованные дозы.

Применение при беременности и кормлении грудью

Целесообразно применение препарата при беременности и в период грудного вскармливания при наличии инфекций, вызванных фагочувствительными штаммами бактерий (по рекомендации врача).

Способ применения и дозы

Местно в виде орошения, примочек и тампонирования жидким фагом в количестве до 200 мл в зависимости от размеров пораженного участка. При абсцессах бактериофаг вводят в полость очага после удаления гноя с помощью пункции. Количество вводимого препарата должно быть несколько меньше объема удаленного гноя. При остеомиелите после соответствующей хирургической обработки в рану вливают бактериофаг по 10-20 мл.Введение в полости – плевральную, суставную и другие ограниченные полости до 100 мл бактериофага, после чего оставляют капиллярный дренаж, через который в течение нескольких дней повторно вводят бактериофаг.При циститах, пиелонефритах, уретритах препарат принимают внутрь. В случае, если полость мочевого пузыря или почечной лоханки дренированы, бактериофаг вводят через цистостому или нефростому 1-2 раза в день по 20-50 мл в мочевой пузырь и по 5-7 мл в почечную лоханку.При гнойно-воспалительных гинекологических заболеваниях препарат вводят в полость вагины, матки в дозе 5-10 мл ежедневно однократно.При гнойно-воспалительных заболеваниях уха, горла, носа препарат вводят в дозе 2-10 мл 1-3 раза в день. Бактериофаг используют для полоскания, промывания, закапывания, введения смоченных турунд (оставляя их на 1 час).При конъюктивитах и кератоконъюктивитах препарат закапывают по 2-3 капли 4-5 раз в день, при гнойной язве роговицы – по 4-5 капель, при гнойных иридоциклитах препарат применяют по 6-8 капель каждые 3 часа в сочетании с приемом внутрь.При лечении стоматитов и хронических генерализованных пародонтитов препарат используют в виде полосканий полости рта 3-4 раза в день в дозе 10-20 мл, а также введением в пародонтальные карманы турунд, пропитанных пиобактериофагом, на 5-10 минут.При кишечных формах заболевания, заболеваниях внутренних органов, дисбактериозе бактериофаг применяют через рот и в виде клизм в течение 7 –20 дней. Через рот бактериофаг дают 3 раза в сутки натощак за 1 час до еды. В виде клизм назначают 1 раз в день вместо одного приема через рот.

Побочные действия

Не установлено.

Передозировка

Не установлено.

Взаимодействие с другими препаратами

Применение препарата возможно в сочетании с другими лекарственными средствами, в том числе с антибиотиками.

Особые указания

Меры предосторожности при применении.Перед употреблением флакон с жидким бактериофагом необходимо взбалтывать. При помутнении не употреблять!Влияние на способность к вождению автотранспорта и управлению механизмамиСведения отсутствуют.

Отпуск по рецепту

Да

Секстафаг ® Пиобактериофаг поливалентный

Описание
Пиобактериофаг поливалентный обладает способностью специфически лизировать бактерии стафилококков, стрептококков (в том числе энтерококков), протея, клебсиелл пневмонии, синегнойной и кишечной палочек

Форма выпуска
Раствор для приема внутрь, местного и наружного применения. по 20 мл во флаконах. 4 или 10 флаконов по 20 мл в пачке из картона вместе с инструк-цией по применению.

Состав
Препарат представляет собой стерильный фильтрат фаголизатов бактерий Staphylococcus, Streptococcus, Proteus (P. vulgaris, P. mirabilis), Pseudomonas aeruginosa, энтеропатогенных Escherichiacoli, Klebsiellapneumoniae.

Консервант – 8-гидроксихинолина   сульфата моногидрат – 0,0001 г/мл (содержание расчетное).

Показания для применения
Лечение и профилактика гнойно-воспалительных и энтеральных заболеваний, вызванных стафилококками, стрептококками, протеями, клебсиеллами, синегнойной и кишечной палочками:
  • заболевания уха, горла, носа, дыхательных путей и легких – воспаления пазух носа, среднего уха, ангина, фарингит, ларингит, трахеит, бронхит, пневмония, плеврит;
  • хирургические инфекции – нагноение ран, ожоги, абсцесс, флегмона, фурункулы, карбункулы, гидроаденит, панариции, парапроктит, мастит, бурсит, остеомиелит;
  • урогенитальные инфекции – уретрит, цистит, пиелонефрит, кольпит, эндометрит, сальпингоофорит;
  • посттравматические конъюктивиты, кератоконъюктивиты, гнойные язвы роговицы и иридоциклиты;
  • энтеральные инфекции – гастроэнтероколит, холецистит, дисбактериоз;
  • генерализованные септические заболевания;
  • гнойно-воспалительные заболевания новорожденных – омфалит, пиодермия, конъюктивит, гастроэнтероколит, сепсис и др.;
  • другие заболевания, вызванные бактериями стафилококков, стрептококков (в том числе энтерококков), протея, клебсиелл пневмонии, синегнойной и кишечной палочек.
При тяжелых проявлениях инфекций, вызванных стафилококками, стрептококками, протеем, клебсиеллой пневмонии, синегнойной и кишечной палочками, препарат назначается в составе комплексной терапии.

С профилактической целью препарат используют для обработки операционных и свежеинфицированных ран, а также для профилактики внутрибольничных инфекций по эпидемическим показаниям.

Важным условием эффективной фаготерапии является предварительное определение фагочувствительности возбудителя.

Противопоказания
Отсутствуют

Режим дозирования и способ применения
Перед использованием флакон с бактериофагом необходимо взболтать и просмотреть. Препарат должен быть прозрачным и не содержать осадка.

Внимание! При помутнении препарат не применять!

Вследствие содержания в препарате питательной среды, в которой могут развиваться бактерии из окружающей среды, вызывая помутнение препарата, необходимо при вскрытии флакона соблюдать следующие правила:

  • тщательно мыть руки;
  • обработать колпачок спиртосодержащим раствором;
  • снять колпачок, не открывая пробки;
  • не класть пробку внутренней поверхностью на стол или другие предметы;
  • не оставлять флакон открытым;
  • вскрытый флакон хранить только в холодильнике.
При использовании малых доз (2-8 капель) препарат необходимо отбирать стерильным шприцем в объеме 0,5 – 1 мл.

Препарат из вскрытого флакона при соблюдении условий хранения, вышеперечисленных правил и отсутствии помутнения может быть использован в течение всего срока годности.

Лечение гнойно-воспалительных заболеваний с локализованными поражениями должно проводиться одновременно как местно, так и приемом препарата внутрь в течение 7-20 дней (по клиническим показаниям).

В зависимости от характера очага инфекции бактериофаг применяют:

  1. Местно в виде орошения, примочек и тампонирования жидким фагом в количестве до 200 мл в зависимости от размеров пораженного участка. При абсцессах бактериофаг вводят в полость очага после удаления гноя с помощью пункции. Количество вводимого препарата должно быть несколько меньше объема удаленного гноя. При остеомиелите после соответствующей хирургической обработки в рану вливают бактериофаг по 10-20 мл.
  2. Введение в полости – плевральную, суставную и другие ограниченные полости до 100 мл бактериофага, после чего оставляют капиллярный дренаж, через который в течение нескольких дней повторно вводят бактериофаг.
  3. При циститах, пиелонефритах, уретритах препарат принимают внутрь. В случае, если полость мочевого пузыря или почечной лоханки дренированы, бактериофаг вводят через цистостому или нефростому 1-2 раза в день по 20-50 мл в мочевой пузырь и по 5-7 мл в почечную лоханку.
  4. При гнойно-воспалительных гинекологических заболеваниях препарат вводят в полость вагины, матки в дозе 5-10 мл ежедневно однократно.
  5. При гнойно-воспалительных заболеваниях уха, горла, носа препарат вводят в дозе 2-10 мл 1-3 раза в день. Бактериофаг используют для полоскания, промывания, закапывания, введения смоченных турунд (оставляя их на 1 час).
  6. При конъюктивитах и кератоконъюктивитах препарат закапывают по 2-3 капли 4-5 раз в день, при гнойной язве роговицы – по 4-5 капель, при гнойных иридоциклитах препарат применяют по 6-8 капель каждые 3 часа в сочетании с приемом внутрь.
  7. При лечении стоматитов и хронических генерализованных пародонтитов препарат используют в виде полосканий полости рта 3-4 раза в день в дозе 10-20 мл, а также введением в пародонтальные карманы турунд, пропитанных пиобактериофагом, на 5-10 минут.
  8. При кишечных формах заболевания, заболеваниях внутренних органов, дисбактериозе бактериофаг применяют через рот и в виде клизм в течение 7 –20 дней. Через рот бактериофаг дают 3 раза в сутки натощак за 1 час до еды. В виде клизм назначают 1 раз в день вместо одного приема через рот.
Рекомендуемые дозировки препарата
Возраст
пациента
Доза на 1 прием (мл)
Внутрь В клизме
0 – 6 мес. 5 10
6 – 12 мес. 10 20
От 1 года до 3 лет 15 20-30
От 3 – до 8 лет 20 30-40
От 8 лет и старше 20 – 30 40-50

В случае, если до применения бактериофага для лечения ран применялись химические антисептики, рана должна быть тщательно промыта стерильным 0,9 % раствором натрия хлорида.

Применение бактериофага у детей (до 6 месяцев). При сепсисе, энтероколите новорожденных, включая недоношенных детей, бактериофаг применяют в виде высоких клизм (через газоотводную трубку или катетер) 2-3 раза в сутки (см. табл.). При отсутствии рвоты и срыгивания возможно применение препарата через рот. В этом случае он смешивается с грудным молоком. Возможно сочетание ректального (в клизмах) и перорального (через рот) применения препарата. Курс лечения 5-15 дней. При рецидивирующем течении заболевания возможно проведение повторных курсов лечения. С целью профилактики сепсиса и энтероколита при внутриутробном инфицировании или опасности возникновения внутрибольничной инфекции у новорожденных детей бактериофаг применяют в виде клизм 2 раза в день в течение 5-7 дней.

При лечении омфалитов, пиодермий, инфицированных ран препарат применяют в виде аппликаций ежедневно двукратно (марлевую салфетку смачивают бактериофагом и накладывают на пупочную ранку или на пораженный участок кожи).

Меры предосторожности при применении
Перед употреблением флакон с жидким бактериофагом необходимо взбалтывать. При помутнении не употреблять!

Возможные побочные эффекты
Не выявлены

Взаимодействие с другими препаратами
Применение препарата возможно в сочетании с другими лекарственными средствами, в том числе с антибиотиками

Применение при беременности и в период грудного вскармливания
Целесообразно применение препарата при беременности и в период грудного вскармливания при наличии инфекций, вызванных фагочувствительными штаммами бактерий (по рекомендации врача)

Условия отпуска
Отпускается без рецепта

Бактериофаги против гриппа и ОРВИ: есть ли результат?

ОРВИ и грипп приходят с эпидемиями весной и осенью – именно тогда, когда иммунитет снижен, а организм человека наиболее уязвим. Особенностью этих заболеваний является то, что бактерии и вирусы очень быстро распространяются во все клетки тела, и иммунной системе требуется помощь. С изобретением антибиотиков проблема была решена – при бактериальной инфекции и ОРВИ антибиотики уничтожали бактерии буквально за несколько дней, а то и часов.

Но, как все мы знаем, произошло массовое привыкание к антибиотикам именно из-за бесконтрольного приема. Иммунная система человека опять осталась без помощи извне, а различные штаммы гриппа, вирусы и инфекции напротив, развиваются и растут в количестве.  Тогда врачи предложили заменить антибиотики бактериофагами.

Почему именно бактериофаги?

Вирусы и бактерии тоже болеют. И эта болезнь называется «бактериофаг» — буквально переводиться «пожиратель бактерий». Бактериофаг – это вирус, который поражает некоторые виды бактерий. Именно на этом взаимодействии построены все лекарственные препараты-бактериофаги, которые сейчас уверенно вытесняют антибиотики.

В настоящее время в медицине активно применяются следующие виды бактериофагов:

  • стрептококковый,
  • стафилококковый,
  • клебсиеллёзный,
  • дизентерийный поливалентный,
  • пиобактериофаг,
  • коли,
  • протейный и колипротейный.

Практика применения бактериофагов

На самом деле бактериофаги применяют уже давно, они показали высокую эффективность при кишечных инфекциях, даже при дизентерии, вытеснив антибиотики. Но для лечения гриппа и ОРВИ эту группу препаратов начали применять сравнительно недавно. На Западе врачи до сих пор сомневаются в целесообразности приема фагов при таких заболеваниях. Но уже разработаны препараты для местного применения при стафилококковой инфекции, например: нозальные спреи, для полости рта, для ушей, для интимной гигиены.

Но пока что они применяются как вспомогательные средства, которые дают возможность иммунитету мобилизоваться на борьбу с вирусами и бактериями. Полностью антибиотики они еще заменять не могут.

Не занимайтесь самолечением, и при появлении симптомов гриппа или ОРВИ обращайтесь к терапевту в ЛКК «Сенситив» в Ейске.

Другие статьи:

Кишечная инфекция у детей

Кишечная инфекция у детей – группа инфекционных заболеваний различной этиологии, протекающих с преимущественным поражением пищеварительного тракта, токсической реакцией и обезвоживанием организма.

У детей кишечная инфекция проявляется повышением температуры тела, вялостью, отсутствием аппетита, болями в животе, рвотой, диареей. Диагностика кишечной инфекции у детей основана на клинико-лабораторных данных (анамнезе, симптоматике, выделении возбудителя в испражнениях, обнаружении специфических антител в крови). При кишечной инфекции у детей назначаются антимикробные препараты, бактериофаги, энтеросорбенты; в период лечения важно соблюдение диеты и проведение регидратации.

Кишечная инфекция у детей – острые бактериальные и вирусные инфекционные заболевания, сопровождающиеся кишечным синдромом, интоксикацией и дегидратацией. В структуре инфекционной заболеваемости в педиатриикишечные инфекции у детей занимают второе место после ОРВИ. Восприимчивость к кишечной инфекции у детей в 2,5-3 раза выше, чем у взрослых. Около половины случаев кишечной инфекции у детей приходится на ранний возраст (до 3 лет). Кишечная инфекция у ребенка раннего возраста протекает тяжелее, может сопровождаться гипотрофией, развитием дисбактериоза и ферментативной недостаточности, снижением иммунитета. Частое повторение эпизодов инфекции вызывает нарушение физического и нервно-психического развития детей.

Причины кишечной инфекции у детей

Спектр возбудителей кишечных инфекций у детей крайне широк. Наиболее часто патогенами выступают грамотрицательные энтеробактерии (шигеллы, сальмонеллы, кампилобактеры, эшерихии, иерсинии) и условно-патогенная флора (клебсиеллы, клостридии, протей, стафилококки и др.). Кроме этого, встречаются кишечные инфекции, вызываемые вирусными возбудителями (ротавирусами, энтеровирусами, аденовирусами), простейшими (лямблиями, амебами, кокцидиями), грибами. Общими свойствами всех возбудителей, обусловливающих развитие клинических проявлений, являются энтеропатогенность, способность к синтезу эндо- и экзотоксинов.

Заражение детей кишечными инфекциями происходит посредством фекально-орального механизма алиментарным (через пищу), водным, контактно-бытовым путями (через посуду, грязные руки, игрушки, предметы обихода и т. д.). У ослабленных детей с низкой иммунологической реактивностью возможно эндогенное инфицирование условно-патогенными бактериями. Источником ОКИ может выступать носитель, больной со стертой или манифестной формой заболевания, домашние животные. В развитии кишечной инфекции у детей большую роль играет нарушение правил приготовления и хранения пищи, допуск на детские кухни лиц-носителей инфекции, больных тонзиллитом, фурункулезом, стрептодермией и пр.

Наиболее часто регистрируются спорадические случаи кишечной инфекции у детей, хотя при пищевом или водном пути инфицирования возможны групповые и даже эпидемические вспышки. Подъем заболеваемости некоторыми кишечными инфекциями у детей имеет сезонную зависимость: так, дизентерия чаще возникает летом и осенью, ротавирусная инфекция – зимой.

Распространенность кишечных инфекций среди детей обусловлена эпидемиологическими особенностями (высокой распространенностью и контагиозностью возбудителей, их высокой устойчивостью к факторам внешней среды), анатомо-физиологическими особенностями пищеварительной системы ребенка (низкой кислотностью желудочного сока), несовершенством защитных механизмов (низкой концентрацией IgA). Заболеваемости детей острой кишечной инфекцией способствует нарушение нормальной микробиоты кишечника, несоблюдение правил личной гигиены, плохие санитарно-гигиенические условия жизни.

Классификация кишечной инфекции у детей

По клинико-этиологическому принципу среди кишечных инфекций, наиболее часто регистрируемых в детской популяции, выделяют шигеллез (дизентерию), сальмонеллез, коли-инфекцию (эшерихиозы), иерсиниоз, кампилобактериоз, криптоспоридиоз, ротавирусную инфекцию, стафилококковую кишечную инфекцию и др.

По тяжести и особенностям симптоматики течение кишечной инфекции у детей может быть типичным (легким, средней тяжести, тяжелым) и атипичным (стертым, гипертоксическим). Выраженность клиники оценивается по степени поражения ЖКТ, обезвоживания и интоксикации.

Характер местных проявлений при кишечной инфекции у детей зависит от поражения того или иного отдела ЖКТ, в связи с чем выделяют гастриты, энтериты, колиты, гастроэнтериты, гастроэнтероколиты, энтероколиты. Кроме локализованных форм, у грудных и ослабленных детей могут развиваться генерализованные формы инфекции с распространением возбудителя за пределы пищеварительного тракта.

В течении кишечной инфекции у детей выделяют острую (до 1,5 месяцев), затяжную (свыше 1,5 месяцев) и хроническую (свыше 5-6 месяцев) фазы.

Дизентерия у детей

После непродолжительного инкубационного периода (1-7 суток) остро повышается температура (до 39-40° C), нарастает слабость и разбитость, снижается аппетит, возможна рвота. На фоне лихорадки отмечается головная боль, ознобы, иногда – бред, судороги, потеря сознания. Кишечная инфекция у детей сопровождается схваткообразными болями в животе с локализацией в левой подвздошной области, явлениями дистального колита (болезненностью и спазмом сигмовидной кишки, тенезмами с выпадением прямой кишки), симптомами сфинктерита. Частота дефекации может варьировать от 4-6 до 15-20 раз за сутки. При дизентерии стул жидкий, содержащий примеси мутной слизи и крови. При тяжелых формах дизентерии возможно развитие геморрагического синдрома, вплоть до кишечного кровотечения.

У детей раннего возраста при кишечной инфекции общая интоксикация преобладает над колитическим синдромом, чаще возникают нарушения гемодинамики, электролитного и белкового обмена. Наиболее легко у детей протекает кишечная инфекция, вызванная шигеллами Зоне; тяжелее – шигеллами Флекснера и Григорьеза-Шига.

Сальмонеллез у детей

Наиболее часто (в 90% случаев) развивается желудочно-кишечная форма сальмонеллеза, протекающая по типу гастрита, гастроэнтерита, гастроэнтероколита. Характерно подострое начало, фебрильный подъем температуры, адинамия, рвота, гепатоспленомегалия. Стул при сальмонеллезе жидкий, обильный, каловый, цвета «болотной тины», с примесями слизи и крови. Обычно данная форма кишечной инфекции заканчивается выздоровлением, однако у грудных детей возможен летальный исход вследствие тяжелого кишечного токсикоза.

Гриппоподобная (респираторная) форма кишечной инфекции встречается у 4-5% детей. При данной форме сальмонеллы обнаруживаются в посеве материала из зева. Ее течение характеризуется фебрильной температурой, головной болью, артралгией и миалгией, явлениями ринита, фарингита, конъюнктивита. Со стороны сердечно-сосудистой системы отмечаются тахикардия и артериальная гипотония.

На тифоподобную форму сальмонеллеза у детей приходится 2% клинических случаев. Она протекает с длительным периодом лихорадки (до 3-4-х недель), выраженной интоксикацией, нарушением функции сердечно-сосудистой системы (тахикардией, брадикардией).

Септическая форма кишечной инфекции обычно развивается у детей первых месяцев жизни, имеющих неблагоприятный преморбидный фон. На ее долю приходится около 2-3% случаев сальмонеллеза у детей. Заболевание протекает крайне тяжело, сопровождается септицемией или септикопиемией, нарушением всех видов обмена, развитием тяжелых осложнений (пневмонии, паренхиматозного гепатита, отоантрита, менингита, остеомиелита).

Эшерихиозы у детей

Данная группа кишечных инфекций у детей крайне обширна и включает коли-инфекци, вызываемые энтеропатогенными, энтеротоксигенными, энтероинвазивными, энтерогеморрагическими эшерихиями.

Кишечная инфекция у детей, вызванная эшерихиями, протекает с субфебрильной или фебрильной температурой, слабостью, вялостью, снижением аппетита, упорной рвотой или срыгиваниями, метеоризмом. Характерна водянистая диарея (обильный, брызжущий стул желтого цвета с примесью слизи), быстро приводящая к дегидратации и развитию эксикоза. При эшерихиозе, вызываемом энтерогеморрагическими эшерихиями, диарея носит кровавый характер.

Вследствие обезвоживания у ребенка возникает сухость кожи и слизистых оболочек, снижается тургор и эластичность тканей, западает большой родничок и глазные яблоки, снижается диурез по типу олигурии или анурии.

Ротавирусная инфекция у детей

Обычно протекает по типу острого гастроэнтерита или энтерита. Инкубационный период в среднем длится 1-3 дня. Все симптомы кишечной инфекции у детей разворачиваются в течение одних суток, при этом поражение ЖКТ сочетается с катаральными явлениями.

Респираторный синдром характеризуется гиперемией зева, ринитом, першением в горле, покашливанием. Одновременно с поражением носоглотки развиваются признаки гастроэнтерита: жидкий (водянистый, пенистый) стул с частотой дефекаций от 4-5 до 15 раз в сутки, рвотой, температурной реакцией, общей интоксикацией. Длительность течения кишечной инфекции у детей – 4-7 дней.

Стафилококковая кишечная инфекция у детей

Различают первичную стафилококковую кишечную инфекцию у детей, связанную с употреблением пищи, обсемененной стафилококком, и вторичную, обусловленную распространением возбудителя из других очагов.

Течение кишечной инфекции у детей характеризуется тяжелым эксикозом и токсикозом, рвотой, учащением стула до 10-15 раз в день. Стул жидкий, водянистый, зеленоватого цвета, с небольшой примесью слизи. При вторичной стафилококковой инфекции у детей кишечные симптомы развиваются на фоне ведущего заболевания: гнойного отита, пневмонии, стафилодермии, ангины и пр. В этом случае заболевание может принимать длительное волнообразное течение.

Диагностика кишечной инфекции у детей

На основании осмотра, эпидемиологических и клинических данных педиатр (детский инфекционист) может лишь предположить вероятность кишечной инфекции у детей, однако этиологическая расшифровка возможна только на основании лабораторных данных.

Главную роль в подтверждении диагноза кишечной инфекции у детей играет бактериологическое исследование испражнений, которое следует проводить как можно ранее, до начала этиотропной терапии. При генерализованной форме кишечной инфекции у детей проводится посев крови на стерильность, бактериологическое исследование мочи, ликвора.

Определенную диагностическую ценность представляют серологические методы (РПГА, ИФА, РСК), позволяющие выявлять наличие Ат к возбудителю в крови больного с 5-х суток от начала болезни. Исследование копрограммы позволяет уточнить локализацию процесса в ЖКТ.

При кишечной инфекции у детей требуется исключить острый аппендицит, панкреатит, лактазную недостаточность, дискинезию желчевыводящих путей и др. патологию. С этой целью проводятся консультации детского хирурга и детского гастроэнтеролога.

Лечение кишечной инфекции у детей

Комплексное лечение кишечных инфекций у детей предполагает организацию лечебного питания; проведение оральной регидратации, этиотропной, патогенетической и симптоматической терапии.

Диета детей с кишечной инфекцией требует уменьшения объема питания, увеличения кратности кормлений, использования смесей, обогащенных защитными факторами, употребление протертой легкоусвояемой пищи. Важной составляющей терапии кишечных инфекций у детей является оральная регидратация глюкозо-солевыми растворами, обильное питье. Она проводится до прекращения потерь жидкости. При невозможности перорального питания и употребления жидкости назначается инфузионая терапия: внутривенно вводятся растворы глюкозы, Рингера, альбумина и др.

Этиотропная терапия кишечных инфекций у детей проводится антибиотиками и кишечными антисептиками (канамицин, гентамицин, полимиксин, фуразолидон, налидиксовая кислота), энтеросорбентами. Показан прием специфических бактериофагов и лактоглобулинов (сальмонеллезного, дизентерийного, колипротейного, клебсиеллезного и др.), а также иммуноглобулинов (антиротавирусного и др.). Патогенетическая терапия предполагает назначение ферментов, антигистаминных препаратов; симптоматическое лечение включает прием жаропонижающих, спазмолитиков. В период реконвалесценции необходима коррекция дисбактериоза, прием витаминов и адаптогенов.

Прогноз и профилактика кишечной инфекции у детей

Раннее выявление и адекватная терапия обеспечивают полное выздоровление детей после кишечной инфекции. Иммунитет после ОКИ нестойкий. При тяжелых формах кишечной инфекции у детей возможно развитие гиповолемического шока, ДВС-синдрома, отека легких, острой почечной недостаточности, острой сердечной недостаточности, инфекционно-токсического шока.

В основе профилактики кишечных инфекций у детей – соблюдение санитарно-гигиенических норм: правильное хранение и термическая обработка продуктов, защита воды от загрязнения, изоляция больных, проведение дезинфекции игрушек и посуды в детских учреждениях, привитие детям навыков личной гигиены. При уходе за грудным ребенком мама не должна пренебрегать обработкой молочных желез перед кормлением, обработкой сосок и бутылочек, мытьем рук после пеленания и подмывания ребенка.

Дети, контактировавшие с больным кишечной инфекцией, подлежат бактериологическому обследованию и наблюдению в течение 7 дней.

Простуда у детей | Уход за детьми

«Простуда» вызывается вирусами (микробами), поражающими нос, горло и пазухи. Простудные заболевания наиболее распространены осенью и зимой, когда люди находятся в помещении и находятся в тесном контакте друг с другом.

Может показаться, что всю зиму ваш ребенок простужается одна за другой. Маленькие дети не выработали иммунитет (защиту) к более чем 100 различным вирусам простуды, которые существуют вокруг. Вот почему они могут простудиться от 8 до 10 раз в год, прежде чем им исполнится 2 года.После того, как вы переболели вирусом простуды, вы становитесь невосприимчивы к этому конкретному микробу. Вот почему дети меньше простужаются, когда становятся старше.

Как распространяется простуда?

Дети могут простудиться от братьев и сестер, родителей, других членов семьи, товарищей по играм или опекунов. Микробы обычно распространяются одним из 3 путей:

  • Прямой контакт — например, поцелуй, прикосновение или держание за руку — с инфицированным человеком. Если у вас есть вирус, у вас будут микробы в носу, во рту, в глазах и на руках.Прикасаясь к другим людям, вы можете передать вирус.
  • Косвенный контакт  означает прикосновение к чему-либо (игрушке, дверной ручке или использованной ткани), к которому прикасался инфицированный человек и на котором теперь есть микробы. Некоторые микробы, в том числе вызывающие простуду и диарею, могут оставаться на поверхностях в течение многих часов.
  • По воздуху  когда человек кашляет или чихает. Капли от кашля или чихания могут попасть в нос или рот другого человека.

Как узнать, простудился ли мой ребенок?

Типичные симптомы простуды включают:

  • насморк или заложенность носа,
  • чихание,
  • кашель,
  • головная боль,
  • легкая боль в горле,
  • потеря аппетита,
  • усталость (усталость) и
  • легкая лихорадка.

Вирус гриппа вызывает сильную лихорадку, кашель и боли в теле. Он поражает быстрее, чем простуда, и заставляет людей чувствовать себя хуже. У детей с простудой обычно есть энергия, чтобы играть и заниматься своими повседневными делами. Дети с гриппом обычно лежат в постели.

Когда я должен позвонить своему врачу?

Детям в возрасте до 3 месяцев может быть трудно дышать через заложенный нос, что может затруднить кормление. Позвоните своему врачу, чтобы записаться на прием, или отвезите ребенка в отделение неотложной помощи, если ваш ребенок:

  • проблемы с дыханием,
  • не ест или его рвет, или  
  • имеет лихорадку (ректальная температура 38.5°С и выше).

Некоторые респираторные вирусы, вызывающие простуду у детей старшего возраста и взрослых, могут вызывать более серьезные заболевания у младенцев и малышей. К таким заболеваниям относятся круп (охриплость, шумное дыхание, лающий кашель), пневмония (инфекция легких), бронхиолит (свистящее дыхание, затрудненное дыхание) или боль в глазах, боль в горле и отек шейных желез. Дети с такими состояниями должны быть осмотрены врачом.

Дети всех возрастов  должны обратиться к врачу, если кажется, что простуда вызывает более серьезные проблемы.Позвоните своему врачу или отвезите ребенка в отделение неотложной помощи, если вы заметили своего ребенка:

  • дышит быстро или, кажется, тяжело дышит,
  • имеет синие губы,
  • так сильно кашляет, что задыхается или его рвет,
  • просыпается утром с закрытым одним или обоими глазами и засохшим желтым гноем,
  • гораздо более сонный, чем обычно, не хочет есть и играть, или очень беспокойный, и его невозможно утешить, или
  • имеет густые или окрашенные (желтые, зеленые) выделения из носа в течение более 10-14 дней.

Позвоните своему врачу, если у вашего ребенка появятся какие-либо признаки инфекции среднего уха (боль в ухе, выделения из уха), которые могут быть вызваны простудой.

Что мне делать, если мой ребенок простудился?

От простуды нет лекарства. Простуда обычно длится около недели, но может продолжаться до 2 недель. Обычно они проходят сами по себе.

  • Обеспечьте ребенку максимальный комфорт. Предлагайте много жидкости и небольшие питательные блюда.
  • Проверьте температуру вашего ребенка.
  • Чтобы облегчить боль, боль или лихорадку, используйте ацетаминофен. Ибупрофен можно применять детям старше 6 месяцев.
  • Не давайте ацетилсалициловую кислоту (АСК [например, аспирин]) или любые лекарства, содержащие ее, детям и подросткам с простудой, поскольку это может привести к повреждению головного мозга и печени (синдром Рея).
  • Если у вашего ребенка возникли проблемы с кормлением грудью из-за заложенного носа, используйте отсос, чтобы удалить слизь из носа. Можно использовать солевые капли в нос или спрей, если слизь очень густая.
  • Не давайте безрецептурные (безрецептурные) лекарства от кашля и простуды (которые не требуют рецепта врача) детям младше 6 лет , если их не прописал ваш врач.
  • Деконгестанты и антигистаминные препараты (лекарства от заложенности носа и придаточных пазух) не помогают при кашле. Противоотечные средства, принимаемые внутрь, не очень эффективны и могут вызвать у ребенка учащенное сердцебиение или проблемы со сном. Антигистаминные препараты при простуде не действуют.
  • Лекарственные капли или спреи для носа обеспечивают лишь кратковременное облегчение и не должны использоваться более 2–3 дней.Они действительно могут усугубить затор. Не используйте эти продукты у детей до 6 лет .
  • Увлажнители холодного тумана не рекомендуются из-за риска заражения бактериями и плесенью. Если вы используете его, дезинфицируйте его ежедневно. Испарители с горячей водой не рекомендуются из-за риска ожогов.
  • Антибиотики не помогут избавиться от простуды. Антибиотики следует использовать только тогда, когда у детей развиваются более серьезные заболевания, вызванные бактериями, такие как ушная инфекция или пневмония.
  • Дети могут продолжать свою обычную деятельность, если они чувствуют себя достаточно хорошо. Если у них жар или осложнения, им может потребоваться несколько дней отдыха дома. Ваш ребенок может пойти в школу, если он чувствует себя достаточно хорошо, чтобы принимать участие в мероприятиях.
  • Простудные дети могут играть на улице.

Как предотвратить простуду?

  • Мытье рук — самый важный способ уменьшить распространение простудных заболеваний:
    • Мойте руки после кашля, чихания или вытирания носа.
    • Мойте руки после контакта с простудным человеком.
    • Мойте руки себе и ребенку после того, как вытерли им нос.
    • Если вода и мыло недоступны, используйте предварительно смоченные салфетки для рук или дезинфицирующие средства для рук на спиртовой основе. Держите дезинфицирующие средства в недоступном для ребенка месте, потому что они могут нанести вред при проглатывании.
  • По возможности держите детей младше 3 месяцев подальше от людей с простудой.
  • Научите своих детей прикрывать нос и рот салфетками, когда они чихают или кашляют, или кашлять в верхнюю часть рукава или локоть.
  • Избегайте совместного использования игрушек, которые маленькие дети берут в рот, пока они не будут очищены.
  • Не делитесь чашками, посудой или полотенцами с другими, пока они не будут вымыты.
  • Если ваш ребенок посещает детский сад, сообщите воспитателю о любых симптомах и спросите, должен ли ваш ребенок оставаться дома в этот день.
  • Убедитесь, что ваш ребенок получил все рекомендуемые прививки. Хотя вакцины не предотвратят простуду, они помогут предотвратить некоторые осложнения, такие как бактериальные инфекции ушей или легких.

Дополнительная информация от CPS

Рассмотрено следующими комитетами CPS

  • Консультативный комитет по государственному образованию

Последнее обновление: август 2021 г.

вопросов и ответов | Пандемический грипп (грипп)

Что такое пандемия гриппа?

Пандемия гриппа — это глобальная вспышка нового вируса гриппа А , который сильно отличается от нынешних и недавно циркулирующих вирусов сезонного гриппа А среди людей.Пандемии случаются, когда появляются новые (новые) вирусы гриппа А, которые способны легко заражать людей и эффективно и устойчиво распространяться от человека к человеку.

Откуда берутся пандемические вирусы гриппа?

Различные животные, включая птиц и свиней, являются носителями вирусов гриппа А, которые обычно не заражают людей. Вирусы гриппа А постоянно меняются, что позволяет в очень редких случаях изменять вирусы гриппа, не относящиеся к человеку, таким образом, что они могут легко заражать людей и эффективно передаваться от человека к человеку.

Как вирусы гриппа А изменяются, вызывая пандемию?

Вирусы гриппа А делятся на подтипы на основе двух белков на поверхности вируса: гемагглютинина (Н) и нейраминидазы (N). Существует 18 различных подтипов гемагглютинина и 11 различных подтипов нейраминидазы (от h2 до h28 и от N1 до N11). Теоретически возможна любая комбинация 18 гемагглютининов и 11 белков нейраминидазы, но не все из них были обнаружены у животных, и еще меньшее их количество способно инфицировать людей.

Вирусы гриппа могут изменяться двумя разными способами, один из которых называется «антигенным сдвигом» и может привести к появлению нового вируса гриппа. Антигенный сдвиг представляет собой резкое серьезное изменение вируса гриппа А. Это может произойти в результате прямого заражения людей нечеловеческим вирусом гриппа А, например, вирусом, циркулирующим среди птиц или свиней. Антигенный сдвиг также может произойти, когда нечеловеческий вирус гриппа А (например, вирус птичьего гриппа) обменивается генетической информацией с другими вирусами гриппа А в процессе, называемом генетической реассортацией, и полученный в результате новый вирус способен заражать людей.Например, обмен генами между вирусом гриппа А человека и вирусом птичьего гриппа А может создать новый вирус гриппа А с белком гемагглютинина или с белком гемагглютинина и белком нейраминидазы из вируса птичьего гриппа А. Если этот новый вирус вызывает заболевание у инфицированных людей и может легко передаваться от человека к человеку, может возникнуть пандемия гриппа.

Что происходит при появлении пандемического вируса гриппа?

Когда появляется пандемический вирус гриппа, он может быстро распространяться, потому что большинство людей не будут иметь иммунитета, а вакцина, обеспечивающая немедленную защиту, может быть недоступна.Например, во время пандемии h2N1 2009 года новый вирус h2N1 был впервые обнаружен в апреле 2009 года. К июню 2009 года этот новый вирус h2N1 распространился по всему миру, и Всемирная организация здравоохранения объявила пандемию. Распространение пандемического вируса гриппа может происходить в виде нескольких «волн» заболевания, разделенных несколькими месяцами. По мере распространения пандемического вируса гриппа большое количество людей во всем мире может нуждаться в медицинской помощи. Школы, детские сады, рабочие места и другие места массового скопления людей могут чаще ходить на работу.Системы общественного здравоохранения и здравоохранения могут оказаться перегруженными, что приведет к повышенному уровню госпитализаций и смертей. Другие важные объекты инфраструктуры, такие как правоохранительные органы, службы экстренной медицинской помощи и транспортная отрасль, также могут быть затронуты.

Защитят ли вакцины против сезонного гриппа от пандемического гриппа?

Маловероятно, что вакцины против сезонного гриппа защитят от пандемического вируса гриппа. Вакцины против сезонного гриппа, которые используются ежегодно, защищают от циркулирующих в настоящее время вирусов гриппа человека А и В.Они не предназначены для защиты от новых вирусов гриппа А. Вирус пандемического гриппа будет сильно отличаться от циркулирующих вирусов сезонного гриппа А, и поэтому нельзя ожидать, что сезонные вакцины обеспечат защиту.

Существуют ли вакцины для защиты от пандемического гриппа?

Федеральное правительство создало запас некоторых вакцин против некоторых вирусов гриппа А с пандемическим потенциалом, которые можно использовать в случае пандемии, включая вакцины против некоторых видов птичьего гриппа А (например,г. вирусы H5N1 и H7N9). Если бы подобный вирус начал пандемию, какая-то вакцина уже была бы доступна.

Министерство здравоохранения и социальных служб (HHS) является ведущим агентством по обеспечению готовности общественного здравоохранения и медицинскому реагированию на пандемию гриппа. В рамках HHS отдел по борьбе с гриппом Управления перспективных биомедицинских исследований и разработок (BARDA) отвечает за передовую разработку и закупку медицинских и нефармацевтических средств противодействия для обеспечения готовности к пандемии гриппа и реагирования на нее.внешний значок

Сколько времени потребуется на разработку новой пандемической вакцины?

В случае появления нового пандемического вируса гриппа (не включенного в предпандемический запас вакцины), вероятно, потребуется разработать вакцину против этого вируса, чтобы обеспечить достаточное количество вакцины, доступной для всех желающих пройти вакцинацию. Сколько времени потребуется для производства вакцины против пандемического гриппа, будет зависеть от многих факторов, в том числе от того, сколько времени потребуется для создания вируса вакцины-кандидата (CVV) и от того, какой процесс производства вакцины будет использоваться.” Для вакцины против сезонного гриппа обычно требуется не менее шести месяцев, чтобы произвести большое количество вакцины против гриппа. Во время пандемии h2N1 2009 года на это ушло примерно столько же времени. CDC начал разработку CVV для производства моновалентной (однокомпонентной) вакцины h2N1pdm09 в середине апреля. Первые дозы вакцины были введены в начале октября, а большое количество вакцины стало доступно в конце ноября. В настоящее время предпринимаются усилия по сокращению времени, необходимого для производства вакцин против гриппа, но из-за текущего времени, необходимого для производства вакцины против гриппа, ранних поставок пандемической вакцины может быть недостаточно для удовлетворения спроса, особенно если большинству людей требуется две дозы вакцины. для защитного иммунитета.

Сколько доз пандемической вакцины потребуется каждому человеку?

Людям, у которых нет иммунитета против нового вируса гриппа, может потребоваться две дозы, чтобы полностью защититься от этого вируса. Первая доза запускает иммунную систему, а вторая создает защитный ответ. Во время пандемии гриппа h2N1 в 2009 г. CDC рекомендовал вводить две дозы вакцины детям в возрасте от 6 месяцев до 9 лет, чтобы усилить иммунный ответ.

Какие существуют методы лечения пандемического гриппа?

Во время пандемии гриппа противовирусные препараты были бы важным инструментом для лечения и предотвращения распространения заболевания гриппом.Противовирусные препараты — это лекарства (таблетки, жидкость или порошок для ингаляций), которые борются с вирусами гриппа, поражающими дыхательные пути. Противовирусные препараты рекомендуются для лечения сезонного гриппа у людей, которые очень больны или подвержены высокому риску серьезных осложнений гриппа. Эти же препараты могут быть полезны для лечения пандемического гриппа, в зависимости от того, является ли вирус пандемического гриппа чувствительным или устойчивым к имеющимся противовирусным препаратам. Противовирусные препараты отпускаются по рецепту (они не продаются без рецепта) и отличаются от рецептурных антибиотиков, которые лечат бактериальные инфекции.

Есть ли другие способы замедлить пандемию?

Немедикаментозные вмешательства, или НФВ, — это действия, помимо вакцинации и приема лекарств, которые люди и сообщества могут предпринять, чтобы замедлить распространение респираторных заболеваний, таких как пандемический грипп. Опять же, эти действия не включают лекарства, вакцины или другие фармацевтические вмешательства. Учитывая, что на производство вакцины против пандемического гриппа (не включенной в предпандемический запас вакцин) могут уйти месяцы и что противовирусные препараты могут быть зарезервированы для лечения, НФВ, вероятно, будут единственными средствами профилактики, доступными на ранних стадиях пандемии и , таким образом, критически важно помочь замедлить распространение инфекции.

Как будут использоваться нефармацевтические вмешательства (НФВ) во время пандемии?

NPI, также известные как стратегии смягчения последствий для сообщества, могут быть более эффективными при использовании на ранних стадиях пандемии гриппа и многоуровневым образом. Должностные лица общественного здравоохранения будут рекомендовать людям постоянно выполнять повседневные профилактические действия . Эти действия включают в себя пребывание дома во время болезни, прикрывание салфеткой при кашле и чихании, частое мытье рук и очистку поверхностей и предметов, к которым часто прикасаются.Во время тяжелой, очень тяжелой или экстремальной пандемии гриппа должностные лица органов здравоохранения могут рекомендовать дополнительные меры, такие как использование масок для лица во время болезни и в тесном контакте с другими людьми, временное закрытие детских учреждений и школ, увеличение расстояния между людьми и уменьшение частота контактов между людьми (то есть социальное дистанцирование).

Как вы планируете использовать НПВ во время пандемии гриппа?

Центры по контролю и профилактике заболеваний США (CDC) разработали обновленный набор руководств, который называется «Руководство по смягчению последствий пандемии гриппа на уровне сообщества  – США, 2017 г. для пандемии гриппа и для использования немедикаментозных вмешательств (НФВ).Кроме того, CDC разработал значок NPI 101 trainingExternalexternal для специалистов в области общественного здравоохранения, чтобы помочь им узнать больше о NPI и поделиться информацией со своими сообществами о том, как использовать NPI.

Существуют ли новые вирусы гриппа А, которые вызывают особую озабоченность с точки зрения их пандемической угрозы?

Новый вирус гриппа (гриппа) представляет собой вирус гриппа А, вызвавший инфекцию человека и отличающийся от современных вирусов сезонного гриппа А человека. Любой новый вирус гриппа А, например, птичьего или свиного происхождения, может вызвать пандемию гриппа.Считается, что некоторые новые вирусы гриппа А представляют большую угрозу пандемии и больше беспокоят должностных лиц общественного здравоохранения, чем другие, потому что они уже вызывали серьезные заболевания и смерть людей, а также могли распространяться в ограниченной степени от человека к человеку. Новые вирусы гриппа А вызывают особую озабоченность из-за потенциального воздействия, которое они могли бы оказать на здоровье населения, если бы они приобрели способность легко передаваться от человека к человеку и тем самым вызывать пандемию гриппа. Примеры новых вирусов гриппа А, вызывающих особую озабоченность из-за их способности вызывать тяжелую пандемию, включают вирусы птичьего гриппа А (H5N1) и птичьего гриппа А (H7N9).Эти два разных вируса птичьего гриппа А вызывали спорадические инфекции у людей, в некоторых случаях распространялись от человека к человеку и приводили к критическим заболеваниям и смерти людей.

Вирусы гриппа, которые обычно циркулируют среди свиней, также заражают людей; эти вирусы включают грипп A (h2N1v), (h2N2v) и (h4N2v). Когда вирусы гриппа, которые обычно циркулируют у свиней, обнаруживаются у людей, их называют «вариантными» вирусами; «v» после имени вируса указывает на разновидность вируса. Для этих вирусов также было обнаружено ограниченное неустойчивое распространение от человека к человеку, но в целом эти вариантные вирусы связаны с менее тяжелым заболеванием и меньшим количеством смертей, чем вирусы птичьего гриппа.В целом, случаи заражения людей вирусами H5N1, H7N9, h2N1v, h2N2v и h4N2v происходили редко, но если бы эти вирусы изменились таким образом, что они могли бы легко заражать людей и распространяться от человека к человеку устойчивым образом, может возникнуть пандемия гриппа.

Вирусная сенсация, журнал «Католический университет» — Католический университет Америки, Вашингтон, округ Колумбия

Эллен Н. Вудс
Католический университет , осень 2021 г.

В начале 2020 года, когда свирепствовал коронавирус, профессор биологии Венигалла Рао использовал 40-летние исследования одного крошечного вируса для срочного поиска вакцины.Он добился быстрого успеха в исследованиях на животных. Сейчас его вакцина направляется на клинические испытания.

В 2019 году профессор биологии Венигалла Рао работала над интересным проектом — разработкой универсальной вакцины против вируса гриппа. Он подал заявку на получение гранта в Национальный институт здравоохранения (NIH). «Мы хотели разработать универсальный образец вакцины, который можно было бы быстро адаптировать к любому появляющемуся патогену», — говорит Рао. «Мы собирались использовать грипп в качестве модели».

Если бы это сработало, это изменило бы правила игры.Безыгольный назальный спрей было бы проще производить и применять, он был бы более рентабельным и обладал бы потенциалом для защиты от большинства вариантов вируса гриппа с долгосрочной защитой.

Это не было журавлем в небе. Предложение Рао было основано на более чем 40-летних исследованиях одного крошечного, сложного, доброкачественного вируса: бактериофага Т4. Вирус называется бактериофагом, потому что он поражает бактерии, а именно кишечную палочку, безвредные бактерии, которые живут в нашем кишечнике.

Работа Рао по изучению генетики и атомной структуры вируса на его самом базовом уровне привела к значительным прорывам в открытии функции, механизма и биомедицинского применения фага Т4, что в конечном итоге привело к результатам, показывающим, как можно использовать этот микроорганизм. как средство для переноса инновационных новых вакцин и генной терапии в организм человека.

Когда из Ухани, Китай, начали поступать сообщения о вирусе SARS-CoV-2, вызывающем симптомы, похожие на пневмонию, Рао обратил на это внимание. Поскольку число случаев заболевания росло вместе с серьезностью болезни, он знал, что должен изменить направление своего исследовательского проекта.

В начале января 2020 года Всемирная организация здравоохранения объявила коронавирусную болезнь 2019 года (COVID-19) чрезвычайной ситуацией в области общественного здравоохранения во всем мире.

«Мне как вирусологу было ясно, что это опасный и легко передающийся вирус, — говорит Рао.«Это сильно отличалось от предыдущего SARS [тяжелого острого респираторного синдрома]. Его распространение по миру невозможно остановить. Мы знали, что нужно что-то делать. У нас была платформа бактериофагов и технология включения любого патогенного материала в вакцину. Мы также недавно разработали мощную технологию генома CRISPR, которая позволяет нам ускоренно создавать вирус».

В конце января Рао собрал членов своей исследовательской группы — доктора философии.Д. студентов и постдокторантов, разделяющих его страсть к изучению бактериофага Т4 и его терапевтической ценности, — в конференц-зале на третьем этаже здания биологии Маккорт-Уорд. Стоя перед доской, Рао взял кусок мела и, позаимствовав строчку, синонимическую космической миссии «Аполлон-13», написал: «Неудача недопустима».

Все были готовы приостановить свои существующие исследовательские проекты и направить ресурсы на разработку вакцин-кандидатов против COVID-19.Их поиск окажется более интенсивным, чем они могли себе представить.

“Машина” Биолог

Любовь Рао к науке началась в раннем возрасте. Он вырос в Донепуди, небольшой деревне в штате Андхра-Прадеш, Индия. Его работа заключалась в том, чтобы косить траву и возить ее на велосипеде, чтобы накормить буйволов на небольшой ферме его семьи. Он проехал на том же велосипеде 10 миль в одну сторону, чтобы поступить в колледж, который начинается после 10-го класса в Индии. У него был учитель химии, который признал его способности к науке и пригласил Рао присоединиться к его группе репетиторов.Это наставничество помогло ему получить стипендию для получения степени магистра биохимии в Университете Андхра.

Позже он проехал 500 миль на угольном поезде из дома своей семьи, чтобы получить степень доктора философии. программа в престижном Индийском институте науки в Бангалоре. Рао получил докторскую степень за пять лет, защитив диссертацию по ферментной инженерии. На следующий день после представления диссертации он совершил свой первый в жизни полет на самолете в Балтимор, чтобы начать постдокторскую стажировку в Медицинской школе Университета Мэриленда в лаборатории профессора Линдсея Блэка, «отличного наставника», который был изучение бактериофага Т4.

Размышляя о своей девятилетней стажировке (1980–1989), Рао говорит, что он познакомился с тем, что станет делом и страстью всей его жизни, «удивительным миром бактериофагов». Он начал с сложной цели — собрать вирус бактериофага Т4 в пробирке. Это займет у него семь лет.

Рао приписывают открытие машины для упаковки ДНК бактериофага T4. Когда он начал свои исследования более 40 лет назад, мало что было известно об упаковке генома вируса или механизмах, участвующих в выполнении этого сложного процесса.Рао, как ведущий автор, и Блэк за это время опубликовали несколько ключевых статей, описывающих упаковочную машину, капсид (белковую оболочку вируса, заключающую в себе его генетический материал) и двигатель.

В 1989 году Рао поступил на кафедру биологии Католического университета в качестве доцента. Вскоре после этого он получил грант Министерства энергетики. Его любопытство и преданность T4 никогда не колебались, несмотря на то, что прошло еще несколько лет, прежде чем он увидел еще один грант. Он продолжал публиковать и строить исследовательскую лабораторию вокруг вируса, и в конце концов последовали гранты.

В дополнение к открытию упаковочной машины ДНК, Рао продолжил творить историю в области вирусологии, открыв функциональные мотивы, приводящие в действие упаковочную машину, атомные структуры машины и динамическую внутреннюю работу отдельных упаковочные машины в режиме реального времени.

Рао и его сотрудники установили, что двигатель фага Т4 является самой быстрой и мощной из известных упаковочных машин. Двигатель был бы в два раза мощнее автомобильного, если бы он был увеличен до таких размеров.Фактический размер мотора составляет 17 нм в ширину и 9 нм в высоту. (Один нанометр равен одной миллионной миллиметра.) Упаковочная машина бактериофага позволяет ему размножаться внутри бактерии-хозяина, быстро втягивая длинную нить ДНК в крошечную оболочку, которую производит бактериофаг.

«Эти мощные инженерные концепции позволили нам разработать Т4 как наноразмерное устройство, которое может доставлять антигены патогенов и генные терапевтические средства в клетки человека», — говорит Рао. Это делается путем украшения внешней поверхности капсида белками и комплексами, в то время как внутренняя часть упаковывается терапевтическими молекулами ДНК.Разработка стратегии инженерии фагов CRISPR — одно из последних достижений Рао в области исследований, позволяющее быстро создавать рекомбинантные фаги для доставки вакцин и генов.

«Мы используем собственные стратегии вируса T4 для полезных приложений, таких как разработка его для имитации другого вируса или патогена. Проще говоря, наша иммунная система распознает сконструированный вирус Т4 как патоген и вырабатывает иммунитет против него», — говорит Рао. «Мы также можем разработать наномотор для упаковки ДНК, чтобы он доставлял терапевтические молекулы в клетки-мишени для лечения генетических заболеваний, таких как серповидно-клеточная анемия или рак.

Рао, избранный член престижной Американской академии микробиологии, задокументировал свою работу в 120 рецензируемых статьях в таких уважаемых научных журналах, как Cell , Science Advances, Nature Communications и Proceedings of the National Academy of наук .

Он получил более 20 грантов, в первую очередь от Национального научного фонда, NIH и Министерства обороны (DoD). Его открытия привели к получению университетом 23 патентов.Прорывы привели к биомедицинскому применению фага Т4, включая разработку двойной вакцины против сибирской язвы и чумы, которая обеспечивает полную защиту от двух смертоносных агентов биотерроризма.

«Доктор. Рао вывел изучение Т4 на новый уровень. Никто больше не додумался реконструировать этот инфекционный организм таким образом, чтобы использовать его для целого ряда полезных применений», — говорит Фрэнк Малдарелли, клинический исследователь Национального института здравоохранения, который возглавляет секцию клинической ретровирусологии в Национальной программе динамики и репликации ВИЧ. Институт рака.Он и Рао сотрудничали в исследованиях вакцины против ВИЧ.

«Говорить, что он мыслит нестандартно, было бы неверно, потому что для Рао не существует коробки. Он не признает систему барьеров. Возможности для его исследований столь же безграничны, как и его воображение», — говорит Мальдарелли.

Стоя на платформе Готов к работе

Работа всей жизни, полная открытий, позволила Рао присоединиться к ученым всего мира в поисках вакцин против COVID. Поскольку платформа хорошо зарекомендовала себя, для начала ему понадобится генетический материал вируса.В феврале 2020 года Рао связался с контактными лицами и сотрудниками, в том числе с Энтони Фаучи, директором Национального института аллергии и инфекционных заболеваний Национального института здравоохранения. Благодаря соглашениям о передаче материалов он получил коды биологически безопасных нуклеиновых кислот для SARS-CoV-2 как от Национального института здравоохранения, так и от Техасского университета в Остине.

Пока команда готовилась к разработке нескольких различных конструкций для вакцин-кандидатов, Рао хотел найти способ оказать немедленную помощь во время кризиса.Он работал с офисом ректора над планом, согласно которому университет предлагал безвозмездные лицензии на патенты, связанные с доставкой вакцин, полученные в результате его исследований, ученым, приступающим к своим собственным срочным исследованиям вакцины против COVID.

«В гонке по уменьшению распространения и разрушительного числа погибших щедрость и участие в научном сообществе были ярким пятном», — говорит Рао.

Сотрудничество с исследователями в дополнительных областях исследований было «одним из самых радостных аспектов моей карьеры», — говорит Рао.У него давние отношения с исследователями из Медицинского отделения Техасского университета (UTMB), Университета Пердью, Калифорнийского университета (Сан-Диего), Национального института рака и Армейского исследовательского института Уолтера Рида (где он сотрудничает с его жена Мангала Рао, руководитель отдела исследований адъювантов и антигенов в Военной исследовательской программе по ВИЧ).

Один из его самых дорогих сотрудников скончался в 2019 году. Ученый, номинированный на Нобелевскую премию, Майкл Россман был заслуженным профессором биологических наук Хэнли Purdue.Среди его открытий он определил структуру многих вирусов и белков с помощью рентгеновской кристаллографии. По счастливой случайности один из грантов Россмана, который действовал на момент его смерти, позволил NIH предоставить экстренное финансирование для исследования вакцины Рао против COVID при поддержке и сотрудничестве Университета Пердью.

Страшное, но золотое время

К весне 2020 года вирус начал распространяться в Соединенных Штатах, и исследовательская группа Католического университета работала по 12–14 часов в день, семь дней в неделю.Исследователи, проконсультировавшись с администрацией университета и используя свои знания об инфекционных заболеваниях, ввели набор протоколов безопасности, фактически создав собственный пузырь в лабораторных помещениях третьего этажа. Команда из шести человек работала по модели социального дистанцирования. Несмотря на то, что они работали на одном этаже в своих лабораториях, их взаимодействие происходило через Zoom.

Когда страна была заблокирована, а страх стал таким же безудержным, как и вирус, у команды был момент, когда усомнились в безопасности покидать свои дома и каждый день ездить в университетский городок.

«Это было страшное время, — вспоминает Рао. «Это не было особой заботой о них самих, но их семьи по понятным причинам беспокоились об их безопасности. В конечном итоге мы пришли к выводу, что не можем позволить себе приостановить эксперименты».

«Командная работа — это сила», — говорит Свати Джайн, доктор философии. 2020 г., докторант Рао, которая защитила диссертацию во время пандемии и осталась в лаборатории, чтобы работать над проектом вакцины против COVID. «У всех нас была своя роль, и мы были полны решимости обеспечивать безопасность друг друга.С доктором Рао в качестве лидера это очень мотивировало. Он никогда не сдается. Его любовь к науке и забота о своей команде вдохновляют».

«Это был шанс, который выпадает раз в жизни ученого», — говорит Цзиньген Чжу, научный сотрудник с докторской степенью, который работал над дизайном вакцины, в частности над основными компонентами фага Т4. «Конечная цель науки — служить людям. Мы работали с невероятным чувством безотлагательности, сердцем и страстью».

«Это золотой момент, когда вы знаете, что у вас есть нужные навыки и знания и правильная платформа для решения проблемы, которая происходит вокруг вас в режиме реального времени», — добавляет Джейн.

Успех, ухабистая дорога и празднование

К октябрю 2020 года команда добилась успеха. У них была вакцина-кандидат, которая давала сильные титры антител у иммунизированных мышей, которые полностью блокировали заражение культивируемых клеток вирусом SARS-CoV-2. После того, как у них были эти иммунологические данные, эффективность вакцины необходимо было проверить с помощью смертельного заражения мышей живым вирусом SARS-CoV-2, для чего потребуется установка с уровнем биологической безопасности 3 (BSL-3).

Рао связался с Ашоком Чопрой в кампусе UTMB в Галвестоне, исследователем, с которым он сотрудничал в разработке вакцины против сибирской язвы/чумы.Они разработали план выполнения задачи в лаборатории Чопры BSL-3.

Рао назвал это «логистическим кошмаром» и в то же время «самым великодушным поступком со стороны коллег-ученых». Мыши должны были пройти ряд процедур, включая проверку на наличие паразитов, прежде чем UTMB рискнул принять их. Пришлось нанять единственную в своем роде курьерскую службу, способную перевезти 75 мышей по всей стране. Это означало, что их нужно было держать здоровыми, теплыми, увлажненными и кормить в стерильной среде с контролируемым климатом.

«Это был один из самых тревожных опытов в моей жизни», — говорит Джайн, который вместе с Химаншу Батрой, доктором философии. 2020, на протяжении всего исследования работал непосредственно с мышами. «Если что-нибудь случится с мышами, все наше исследование будет скомпрометировано». 20 ноября мыши были в полете. Когда стало известно, что их направили в Хьюстон, а не на прямой рейс, исследователи затаили дыхание и вздохнули с облегчением на следующее утро, когда мыши прибыли в лабораторию Чопры в хорошем состоянии.

Несколько недель спустя Рао получил звонок, на который он надеялся. Иммунизированные мыши выжили после летального заражения и были здоровы. Вес контрольной группы мышей быстро снижался, и в течение пяти дней 80% из них погибли.

Adaptive Phage Therapeutics (APT), биотехнологическая компания клинической стадии, специализирующаяся на разработке методов лечения устойчивых к лекарствам инфекционных заболеваний, приняла к сведению работу Рао. В августе 2020 года компания получила грант Министерства обороны США в размере 9,8 млн долларов на разработку нескольких приоритетных вакцин-кандидатов на основе бактериофагов против SARS-CoV-2.APT в партнерстве с Католическим университетом провел собственное независимое исследование платформы Рао, которое подтвердило результаты.

Называя Рао «первопроходцем в использовании фагов в качестве вектора для доставки терапевтических средств и вакцин», Грег Меррил, генеральный директор APT, говорит: «Мы сосредоточены на переводе удивительных исследований доктора Рао в широкую коммерческую доступность. Мы считаем, что доклинические данные являются чрезвычайно многообещающими, и не только для COVID-19. Его платформу можно использовать и для других появляющихся вариантов и вирусов.(На момент публикации ожидалось, что APT, работая в тесном сотрудничестве с Рао и его командой, проведет клинические испытания вакцины Католического университета в начале 2022 года.)

В сентябре 2021 года в журнале Science Advances была опубликована «Универсальная платформа наночастиц бактериофага T4 для разработки мультиплексных вакцин-кандидатов против SARS-CoV-2 с помощью CRISPR Engineering».

В статье, опубликованной в рекордно короткие сроки в мире научных публикаций, задокументировано, чем вакцина T4 COVID отличается от вакцин, появившихся на рынке в начале 2021 года благодаря экстренному разрешению FDA.Согласно аннотации, вакцина стимулировала сильные иммунные реакции, блокировала взаимодействия вирус-рецептор, нейтрализовала вирусную инфекцию и обеспечивала полную защиту от вирусной инфекции. Вакцина T4 фокусируется на большем количестве белков в вирусе COVID-19, чем другие вакцины, тем самым обеспечивая более широкий и надежный иммунитет против вируса и, возможно, против текущих и будущих вариантов.

Кроме того, многокомпонентная вакцина не содержит адъювантов (без химикатов), обладает высокой стабильностью (возможно, даже при комнатной температуре), экономична в производстве и разрабатывается как безыгольная интраназальная вакцина.Эти факторы сделают вакцину особенно полезной в отдаленных и неблагополучных странах, а также для вакцинации детей.

За несколько месяцев до публикации, когда члены исследовательской группы узнали, что их статья принята, они собрались в зале Маккорт-Уорд. С появлением вакцин они только привыкали снова быть вместе. Рао принес шоколадный торт. Другие принесли домашние блюда. Они праздновали в комнате, где 17 месяцев на доске оставались руководящие слова «Неудача — не выход».Они не планируют брать ластик в ближайшее время.

границ | Модульный подход к выбору бактериофагов, нацеленных на Pseudomonas aeruginosa, для их применения у детей, страдающих кистозным фиброзом

Введение

Использование антибиотиков при лечении бактериальных инфекций все чаще сталкивается с трудностями, связанными с появлением и быстрым распространением патогенных бактерий, обладающих множественной лекарственной устойчивостью.Открытие и изучение новых антибиотиков — чрезвычайно дорогой и трудоемкий процесс, связанный со многими рисками (Fowler et al., 2014). В результате возобновился интерес к фаготерапии – использованию бактериальных вирусов (фагов) в их роли «естественных врагов» бактерий. Основной задачей фаготерапии является элиминация болезнетворных бактерий в очагах инфекции. Но после появления и размножения бактерий, устойчивых к фагам, единственным путем вперед будет использование новых фагов, способных преодолевать эту устойчивость.

Фаговая терапия была предложена и применена для лечения бактериальных инфекций Феликсом Д’Эрелем, одним из пионеров бактериальных вирусов около 100 лет назад. Подтверждением потенциального медицинского применения бактериофагов является их длительное применение при лечении некоторых бактериальных инфекций в России, Грузии и Польше. Действительно, существуют особые надежды в отношении как эффективности, так и безопасности фаготерапии при поверхностных инфекциях кожи и слизистых оболочек (Abedon et al., 2011; Крылов, 2014). В этих странах в промышленных масштабах производятся лечебные смеси, активные в отношении различных бактериальных возбудителей, поэтому за эти годы накоплен значительный уровень знаний и большая коллекция бактериофагов. Однако до широкого распространения фаговой терапии еще далеко. Использование фаготерапии в странах Запада в основном прекратилось после введения в медицинскую практику антибиотиков, но теперь, в связи с появлением патогенных бактерий, устойчивых ко всем доступным антибиотикам, необходимость возрождения представляется почти неизбежной.

Научные работники хорошо осведомлены об эпидемическом потенциале быстро распространяющейся множественной лекарственной устойчивости. Это понимание привело к детальному обсуждению необходимости внедрения фаготерапии в медицинскую практику разных стран и решения нерешенных проблем, связанных с такой практикой (Алавидзе и др., 2016). Среди них проблемы законодательного характера, необходимость доказательства долгосрочной безопасности фаготерапии, продвижение признания фаготерапии за пределами горстки стран Восточной Европы на международный уровень, вопросы с производством фаговых коктейлей в промышленных масштабах. , связанное с этим финансирование и проблемы с патентованием.

Хотя необходимость решения этих проблем признается, следует иметь в виду, что будущее принесет с собой случаи, когда фаги могут быть единственным путем к антибактериальной терапии. Примером такой ситуации может быть появление в специализированных центрах по лечению больных муковисцидозом (МВ) плазмид, придающих бактериям резистентность к колистину, что приводит к значительному ухудшению прогноза. Поэтому проблемы, связанные с внедрением фаготерапии для борьбы с полирезистентной Pseudomonas aeruginosa , требуют безотлагательного решения.В случаях, когда повторные инфекции неизбежны (например, у пациентов с муковисцидозом) и нет подходящих антибиотиков, фаготерапия может оказаться единственным вариантом увеличения продолжительности жизни пациентов.

Параллельно с этой работой мы считаем приоритетным направлением изучение фаготерапии у детей, страдающих муковисцидозом. Успех в таких случаях обеспечит место фагам в нашем медицинском арсенале, создав положительное общественное восприятие лечения, а также опыт, который будет накоплен в ходе исследований.

Здесь подробно обсуждаются различные аспекты, необходимые для осуществления фаготерапии P. aeruginosa легочной инфекции у детей, страдающих муковисцидозом. В эпоху растущей устойчивости к антибиотикам фаговая терапия может оказаться единственным возможным путем к антибактериальной терапии.

Особенности кистозного фиброза, вызванного бактериальной инфекцией

Муковисцидоз — частое наследственное заболевание европеоидов. По разным оценкам, в среднем один из каждых 2500–7000 новорожденных является гомозиготным по мутантному аллелю CFTRΔF508.Патогенез заболевания связан с нарушением секреторной функции легочного эпителия, что приводит к нарушению ионного обмена и скоплению слизи и жидкости в легких. Это создает благоприятные условия для роста бактерий различных видов. На ранних стадиях основной причиной является стафилококковая инфекция, затем преобладает P. aeruginosa (Косорок и др., 2001). Выработка этими бактериями альгината, чрезвычайно вязкого полисахарида, способствует размножению и выживанию других опасных видов, таких как Burkholderia sp., что ухудшает общий прогноз (Henry et al., 1992; Lynch and Dennis, 2012). Симптомы этого заболевания могут значительно различаться у разных людей, но основные из них, как правило, очевидны с раннего возраста.

В процессе инфекции происходит постепенное изменение свойств первично-инфицирующих штаммов P. aeruginosa , проявляющееся снижением их патогенности и вирулентности, а также повышением чувствительности к литическому действию бактериофагов (Friman et al. др., 2013; Каллен и др., 2015). Более того, эти штаммы, будучи адаптированными к условиям легких, влияют на проявление патогенных свойств других видов в сопутствующей микрофлоре (таких как Burkholderia multivorans, Burkholderia cenocepacia, Pandoraea pulmonicola и Pandoraea apista ), значительно снижая их .

Было высказано предположение, что такое доминирование достигается за счет продуктов генов, участвующих в ощущении кворума и биосинтезе пиовердина (Costello et al., 2014). Массовая активность множества взаимодействующих бактерий приводит к разрушению легких, что обычно рассматривается как основная причина сокращения продолжительности жизни больных муковисцидозом. Использование новых антибиотиков, а также ингаляционных протоколов их введения в легкие значительно увеличило продолжительность жизни пациентов. Однако применение антибиотиков даже в высоких дозах не всегда приводит к эрадикации P. aeruginosa из-за персистенции некоторых бактериальных клеток путем превращения их в покоящиеся цистоподобные и некультивируемые клетки (Мулюкин и соавт., 2015).

Важным фактором эволюции P. aeruginosa в специализированных центрах лечения МВ является постоянное включение новых бактериальных штаммов, несущих в своих геномах разные профаги, в том числе мобильные фаги, путем перекрестного заражения пациентов. Считается, что активность мобильных фагов в патогенных островках привела к появлению штаммов, проявляющих повышенную вирулентность, патогенность и устойчивость к факторам внешней среды и, как следствие, способность к эпидемическому распространению (Winstanley et al., 2009). Такое эпидемическое распространение также является фактором риска за пределами центров CF (Mohan et al., 2008).

Предложены различные подходы к продлению жизни пациентов и улучшению ее качества. Среди них хирургическая замена легких пациента (Morrell and Pilewski, 2016). Была также надежда разработать препарат для селективного ингибирования синтеза альгината в бактериальных клетках (Hershberger et al., 1995). Другое предложение состояло в том, чтобы заменить функцию мутантного гена путем создания вирусного интегрируемого вектора, несущего аллель дикого типа (Yan et al., 2015). Также есть предположение, что модификация активности толл-подобных рецепторов и других корецепторов с помощью генной инженерии может привести к изменениям критических компонентов иммунобиологии МВ. Это пока невозможно, но ожидается, что благодаря усовершенствованиям в биоинженерии, разработке новых векторов и методов доставки, биосовместимости и безопасности будет успешно достигнута терапевтическая эффективность. Однако на это может уйти много лет (Atkinson, 2008). Таким образом, следует полагать, что в настоящее время и в ближайшем будущем антибактериальная терапия будет основным подходом к лечению больных муковисцидозом.В настоящее время это принимает форму «агрессивной антибиотикотерапии», обычно путем чередования двух антибиотиков с целью снижения вероятности возникновения и накопления мутантов с множественной лекарственной устойчивостью. В случаях возникновения резистентных штаммов в качестве крайней меры можно использовать ингаляции колистина, очень токсичного вещества, проявляющего сильную поверхностную активность. Устойчивость к колистину из-за мутаций в бактериальной хромосоме — редкое явление, поскольку для этого требуются мутации в двух генах, контролирующих структуру плазматической мембраны бактерий (Fernández et al., 2010; Lee et al., 2014), и появилась надежда, что ингаляции колистина могут быть надежной защитной мерой у взрослых (у детей в свете его высокой токсичности это возможно только после достижения ребенком 6-летнего возраста) .

Однако недавно возникла новая проблема, которая может ограничить использование колистина. Была выделена трансмиссивная плазмида, кодирующая MCR-1, фермент, который трансформирует бактериальный липид A во внешней мембране в состояние, устойчивое к колистину (Liu et al., 2015).Эта плазмида была обнаружена в штаммах Escherichia coli , но, учитывая относительную легкость межвидовой миграции плазмид, практически неизбежно возникновение ситуации, когда некоторые штаммы P. aeruginosa , инфицирующие больных муковисцидозом, приобретут дополнительную трансмиссивную резистентность к колистин. Пока неясно, может ли штамм с такой плазмидой быть вытеснен более физиологически активным, но чувствительным к колистину штаммом в отсутствие селективного давления антибиотиков, как это иногда происходит в случае хромосомной резистентности к колистину.Поэтому не исключено, что использование бактериальных вирусов — фаготерапия — может быть не только целесообразным, но и ценным методом антибактериальной терапии, особенно при лечении детей в специализированных отделениях МВ, под тщательным медико-микробиологическим контролем.

Сравнение бактериофагов и антибиотиков как антимикробных средств: оценка результатов применения фаготерапии

Бактериофаги приобретают свойства живых систем в процессе заражения чувствительных бактерий.Существуют различные точки зрения на отношения между фагами и их хозяевами. Их часто считают врагами бактерий, но на них также можно смотреть с точки зрения потенциального источника дополнительного генетического материала, предназначенного для поддержания эволюции бактериального домена и их адаптивного потенциала. В любом случае их естественное назначение не заключается в использовании для лечения болезней человека и животных. Таким образом, очевидно желание не использовать в качестве терапевтических средств фаги со значительным потенциалом трансдукции бактериальных генов.Это необходимо иметь в виду при применении фаготерапии, и это одна из причин, по которой результат такого лечения может носить непредсказуемый характер. Кроме того, мы не можем исключить возможность таких событий, как рекомбинация с родственными фагами, появление различных устойчивых к фагам бактериальных мутантов или установление псевдолизогении (Hobbs and Abedon, 2016) у чувствительных бактерий, а также взаимодействия с различными плазмидами, умеренными и вирулентные фаги неродственных видов.Знание возможных модификаций взаимоотношений вирулентных фагов и бактериальных хозяев очень важно для успеха фаготерапии. Это требует предварительного проведения in vitro сравнительных исследований роста различных фагов, инфицирующих разные клинические изоляты в микробиоте.

Так как же оценить эффективность фаготерапии? При лечении открытых инфицированных ран с применением бактериофагов иногда бывает достаточно даже однократного применения соответствующим образом подобранной фаговой смеси (Ворошилова и соавт., 2013) за успешное очищение раны. Объективную оценку эффективности антибактериальной фаготерапии при лечении легочной инфекции можно провести путем сравнения изменений бактериального состава мокроты больных до и после аппликации фага (цит. по: Abedon, 2015), с оценкой устойчивости выживших бактерий к используются терапевтические фаги (см. далее). Это важно, так как появление резистентных вариантов обеспечивает уровень подтверждения успешности предыдущего ингаляционного лечения фагами, но, с другой стороны, демонстрирует необходимость продолжения лечения с подбором и введением новых активных смесей фагов.Иногда эффект фаготерапии можно наблюдать только через несколько дней, чтобы позволить накопить активную концентрацию фага, достаточную для заражения большинства патогенных клеток. Кроме того, оценка эффективности фаготерапии может быть правомерна только в условиях, исключающих перекрестное заражение больного другими штаммами, циркулирующими в настоящее время в стационаре.

Предпосылка для безопасной фаготерапии – отказ от расширения литического спектра фаговых препаратов с помощью случайных бактериофагов

В странах Восточной Европы, где фаготерапия официально признана, решение о ее применении принимают практикующие врачи.Фабрики, расположенные по всей России, производят фаговые препараты, активные в отношении нескольких региональных видов патогенных бактерий. С определенной периодичностью фаговые препараты проходят процесс «адаптации» к новым циркулирующим фагорезистентным штаммам, полученным из различных специализированных клиник и стационаров региона, путем введения в них новых фагов из внешних источников для преодоления этой резистентности. Этот метод усиления литического спектра коммерческих препаратов фагов прост, быстр, недорог и в то же время очень эффективен (Ворошилова и др., 2013). Несмотря на то, что вновь введенные фаги не идентифицированы и их свойства остаются неизученными, эти препараты показывают хорошие результаты при кратковременном лечении различных открытых инфицированных ран, инфекций кишечника и мочевыводящих путей. Состав фаговых препаратов, имеющих сходное название, но выпускаемых разными производителями в разное время, может различаться по своей активности. Эта неидентичная природа фаговых препаратов различного происхождения может позволить провести сравнение эффективности и впоследствии позволить выбрать наиболее подходящую смесь.Однако в целом врачи рассматривают возможность использования фаготерапии только после неоднократных неудач с различными антибиотиками (и то не всегда!). Тем не менее, использование таких препаратов случайного обогащения, содержащих не охарактеризованные фаги, в том числе умеренные, мобильные и нитчатые, потенциально участвующие в стимуляции эволюции бактериальных возбудителей при МВ, может привести к нежелательным последствиям (McCallin et al., 2013).

В процессе лечения хронических инфекций введение новых активных фагов должно происходить в режиме реального времени, чтобы предотвратить появление и накопление новых фагорезистентных вариантов.Целесообразно рассмотреть возможность модификации состава лекарственной смеси, при которой вероятность возникновения таких нежелательных эффектов могла бы быть устранена или существенно снижена. Это помогло бы превратить фаговую терапию из почти забытой в официальной медицине процедуры с ограниченным применением в устоявшийся метод антибактериальной терапии (за рамками сферы МВ). В первую очередь необходимо запретить расширение литического спектра при введении смеси новых фагов с неизученными свойствами.Затем также было бы желательно, чтобы процедура адаптации активности смеси фагов применялась к лечению отдельного пациента и чтобы это осуществлялось в клинических условиях. Такая модификация не требует внесения существенных организационных изменений, и эту работу могут выполнить имеющиеся в клинике профессиональные сотрудники лаборатории микробиологии, имеющие некоторый практический опыт работы с бактериофагами. Их задача будет заключаться в том, чтобы следить за тем, не возникают ли у пациентов штаммы, устойчивые к фагам, и затем отбирать новые фаги из фагового банка для восстановления терапевтической активности фаговой смеси.

Поскольку при отсутствии активных антибиотиков фаговая терапия может стать постоянной клинической процедурой, важно иметь в виду, что может возникнуть некоторая непредсказуемость, которая может повлиять на результат каждого применения фага. Размножение бактериофагов в легких может зависеть от многих неконтролируемых условий — взаимодействия различных видов бактерий, характера инфицированной поверхности, состава и вязкости легочной жидкости, среди прочих переменных.

Решающим фактором для поддержания непрерывного времени лечения является постоянное расширение литического спектра фаговых препаратов.Таким образом, чрезвычайно важно установить строгие процедуры мониторинга для быстрого обнаружения потенциальных мутантов, устойчивых к фагам, поскольку их быстрое уничтожение может зависеть от концентрации. До сих пор принятый в настоящее время способ расширения диапазона литической активности малоэффективен, так как адаптация требует слишком много времени. Однако оптимизация литических спектров для фаговой терапии должна быть персонализирована в режиме реального времени. Естественно, это не только повышает требования к надежности активного фагового препарата, но и превращает клиническую фаготерапию в текущие исследования.Как пример – в медицинских препаратах должны отсутствовать умеренные фаги и их литические варианты, даже обладающие уникальными литическими спектрами. Действительно, потенциальные переходы в профаговое состояние (в результате рекомбинации с уже присутствующими в легких фагами) могут привести к приданию таких свойств, как повышенная патогенность, повышенная устойчивость во внешней среде, способность к эпидемическому распространению.

Мы считаем, что абсолютной предпосылкой внедрения фаготерапии в качестве метода антибактериальной терапии МВ во всем мире является изучение генетических и других свойств фагов, вводимых в препараты, и потенциальных взаимодействий, связанных с ними.Можно ожидать, что такая работа в перспективе даст новые ценные данные, необходимые не только для характеристики фагов как антибактериальных средств, но и, например, как носителей генетического материала, способного компенсировать мутацию гена CFTR, ответственную за муковисцидоз.

Были проведены многочисленные исследования с конечной целью добиться возрождения фаготерапии в западном мире, включая лечение инфекций, связанных с муковисцидозом. Различные модели острой и хронической инфекции у мышей, крыс, восковой моли и клеточных культур обеспечивают прекрасную основу для тестирования фагов в различных условиях.Например, ранее было продемонстрировано, что использование восковой моли ( Galleria mellonella ) в качестве модели позволяет проводить быстрое сравнение фаговой активности, полезное для быстрой оценки эффективности в отношении конкретных фаговых препаратов in vivo. в процессе лечения (Beeton et al., 2015; Olszak et al., 2015). Используя мышиную модель, можно также оценить бактерицидную активность литических фагов при инфекции легких. Одно исследование показало хорошую корреляцию активности in vitro и in vivo для всех используемых вирулентных фагов, однако, за исключением двух видов, показанных как недостаточно активные in vivo , несмотря на хорошую активность in vitro ( Генри и др., 2013). Это важное наблюдение, поскольку оно подчеркивает необходимость повышения литической активности фагов нескольких видов путем отбора конкретных мутантов, проявляющих повышенную вирулентность. Это также свидетельствует о необходимости разработки оптимальных конфигураций смесей фагов для достижения наилучших результатов лечения. Действительно, что касается использования мультифаговых препаратов, терапевтическая активность является продуктом комбинированного действия всех присутствующих фагов. Фактически, Alemayehu et al.(2012) ранее продемонстрировали способность останавливать первичное инфицирование мышей полирезистентным штаммом P. aeruginosa , полученным от больного муковисцидозом с легочной инфекцией, с помощью таких фаговых препаратов. Бактерицидный эффект этих фагов был подтвержден инфекцией in vitro этого штамма на клеточной линии бронхиального эпителия биопленки CF (CFBE41o). В дополнение ко всему этому применение двух штаммоспецифических вирулентных фагов в мышиной модели острого легочного P.aeruginosa сопровождалась не только быстрой элиминацией возбудителя, но и сопутствующим снижением уровня воспаления (Pabary et al., 2015). Однако требование непрерывного контроля состава легких у больных МВ при применении фаготерапии является существенным, как и необходимость принятия дополнительных мер по предотвращению перманентной адгезии бактерий к легочному эпителию. Фриман и др. (2016) продемонстрировали, что индивидуальная предварительная адаптация фага к другому пациенту повышает эффективность эффекта лизиса фага.Однако проведение этого процесса предварительной адаптации может занять некоторое время и отсрочить начало фактического лечения, что, очевидно, не всегда возможно. В свете всех этих исследований становится ясно, что применение фаготерапии в лечении инфекции, связанной с муковисцидозом, имеет значительные перспективы, и, вне всякого сомнения, помимо этого, должны быть установлены строгие протоколы, если мы хотим обеспечить как безопасность и максимальный потенциал лечения.

Значение умеренных бактериофагов в клинических проявлениях муковисцидоза

Исследования с использованием метагеномного анализа показали, как умеренные бактериофаги P.aeruginosa в клинических условиях после индукции вовлекаются в горизонтальный перенос ДНК и приобретают избирательное предпочтение для развития и накопления в специфических условиях нижних отделов легких (Tariq et al., 2015). Их способность к переносу дополнительных генов увеличивается со временем при ухудшении функции легких больного и прогноза заболевания. Это представляет собой первое прямое клиническое подтверждение предполагаемой эволюции фагов in vivo на слизистых поверхностях легких.Активная роль экспрессии фаговых генов в течении заболевания и его прогнозе была подтверждена в исследовании эпидемического штамма Liverpool. Другое исследование (Lemieux et al., 2016) показало, что группы штаммов, обладающих мутациями в профаговых регионах и патогенных островках, проявляли сниженную патогенность в крысиной модели хронической легочной инфекции и были связаны с нарушениями фаговой транскрипции.

Критический анализ результатов фаготерапии

Pseudomonas aeruginosa инфекций у группы детей с муковисцидозом

Основной целью антибактериальной терапии при муковисцидозе является лечение хронических бактериальных инфекций, особенно вызванных P.aeruginosa с целью увеличения продолжительности жизни пациентов. Это имеет первостепенное значение для детей в возрасте до 6 лет из-за невозможности использования колистина в крайних случаях полирезистентной инфекции. Таким образом, фаготерапия при муковисцидозе должна осуществляться с учетом этой группы в первую очередь. Мы надеемся, что значение текущих исследований приведет к возрождению интереса к фаготерапии в западном мире, особенно для поддержки детей, страдающих муковисцидозом.

Актуальны совместные исследования, проводившиеся в 1991–1992 гг. между Лабораторией генетики бактериофагов (находившейся в то время в Институте генетики и селекции промышленных микроорганизмов, Москва, Россия) и отделом муковисцидоза (МВ) в Детская республиканская клиническая больница в Москве. После получения согласия родителей и разрешения Академии медицинских наук (рис. 1) было проведено исследование использования P.aeruginosa при лечении пяти детей с муковисцидозом. Хотя конкретных ограничений на количество детей, участвующих в этом исследовании, не было, необходимость ограничения числа участников была сочтена необходимой в связи с тем, что это было первое испытание, включающее ингаляцию фагов для лечения Инфекция, связанная с муковисцидозом, и осторожность всегда мудры на такой неизведанной территории. Кроме того, используемые препараты фагов были адаптированы и приготовлены в высококонцентрированных формах с очисткой в ​​градиентах плотности хлорида цезия для использования участниками в течение 7–10 дней.Из-за этих строгих протоколов лабораторные ресурсы были ограничены небольшим числом пациентов.

РИСУНОК 1. Официальное разрешение на применение фаготерапии в отделении МВ ЦРДКБ, Москва, Россия и согласие врачей отделения МВ на сотрудничество в исследовании (для запроса грантовой поддержки).

Пятерым детям от 7 до 12 лет. Изучен состав штаммов Pseudomonas в их легких.Дифференцировку штаммов проводили с учетом таких признаков, как устойчивость к клинически применяемым антибиотикам, слизеобразующая (альгинатная) продукция, пигментация колоний, продукция умеренных фагов, чувствительность к различным бактериофагам (в том числе умеренным), имеющимся на тот момент в лабораторной коллекции. Обычно в мокроте каждого ребенка обнаруживали не менее двух различных штаммов P. aeruginosa . Для каждого ребенка готовили разные смеси вирулентных бактериофагов на основе тестирования чувствительности бактериальных штаммов к фагам.Используемые фаги были выбраны из нескольких видов, классифицированных в то время, включая phiKZ-, Lin68- и PB1-подобные фаги, а также из группы, позже названной phiKMV-подобными фагами. Фаги подбирались для каждого ребенка на основании наибольшего литического действия на штаммы, выделенные из мокроты (те, которые приводили к прозрачному лизису в точечном анализе). Отобранные фаги выращивали в течение ночи в чашках Петри с P. aeruginosa PAO1 путем конфлюэнтного лизиса с последующим ресуспендированием в физиологическом растворе и удалением бактериального дебриса центрифугированием.Супернатант обрабатывали хлороформом для удаления остаточных бактериальных клеток и дополнительно концентрировали фаги путем преципитации полиэтиленгликолем. Полученный фаг затем подвергали центрифугированию в градиенте хлорида цезия. После диализа индивидуальные препараты смешивали с титрами не менее 10 11 –10 12 частиц/мл. Такие высокие титры использовались на основании предположения, что более высокая концентрация фагов во вдыхаемых смесях позволит определить эффект (или его отсутствие) за короткий промежуток времени.Однако при непосредственном клиническом применении фаговых смесей препараты разбавляли в несколько раз, так как оказалось, что концентрированные смеси не проходят через ингаляционное устройство. Ингаляции проводились в течение недели по стандартным протоколам наблюдения за состоянием детей.

Было обнаружено, что у одного ребенка был кратковременный период с преходящим повышением температуры тела. У остальных явных изменений в общем состоянии не было.В двух случаях при сравнении бактерий в образцах мокроты после курса фаготерапии выявлены явные изменения, связанные с применением фагов. В одном из образцов мокроты преобладали фагорезистентные варианты, демонстрирующие внешний вид исходных пигментированных бактерий и типичные мукоидные свойства, наблюдаемые у P. aeruginosa . В мокроте второго ребенка обнаружены фагорезистентные варианты P. aeruginosa , проявляющие новые свойства. Было высказано предположение, что в этом втором случае исходные бактериальные клетки, чувствительные к фагам, были заменены другим штаммом, устойчивым к фагам, с новыми свойствами, возможно, из-за перекрестного заражения от других пациентов.

Появление устойчивых к фагам вариантов исходного инфекционного бактериального штамма у одного ребенка и замена чувствительных бактерий новым устойчивым к фагам штаммом в легких второго ребенка является явным свидетельством эффекта фаготерапии in vivo . Отсутствие обнаруживаемых изменений у трех других детей можно объяснить различными причинами, такими как слишком низкая концентрация фаговой смеси после разведения исходного препарата, высокая вязкость слизи, препятствующая распространению фага, и недостаточная продолжительность применения фага.Эти результаты были представлены на нескольких заседаниях CF и рассматривались как первоначальные доказательства безопасного использования фаготерапии при МВ (Шабалова и др., 1993, 1995). К сожалению, производные исследования не могли быть проведены в то время из-за недостаточного финансирования. Однако, учитывая растущую устойчивость к антибиотикам, ситуация начинает меняться. Использование коммерческих препаратов фагов для лечения инфекции P. aeruginosa у детей с муковисцидозом в Грузии также показало определенные перспективы (Kutateladze and Adamia, 2010).

Принцип модульной композиции для приготовления терапевтических фаговых коктейлей

Описанное выше педиатрическое исследование показало, что персонализированные фаговые препараты могут оказывать заметный эффект в короткие сроки. Ранее активные штаммы P. aeruginosa в легких двух детей были элиминированы и заменены другими штаммами. Независимо от их происхождения (резистентный мутант или перекрестная инфекция) такие ситуации требуют немедленной переоценки терапевтической смеси для каждого из двух детей с положительной реакцией.Использование коммерческих препаратов, содержащих неохарактеризованные изоляты, не является подходящим курсом действий. Следовательно, необходимо внедрить серию быстрых протоколов, позволяющих быстро выделить, охарактеризовать и выбрать фаги, а также обеспечить соответствующую модификацию препаратов в терапевтические сроки. Все это должно осуществляться безопасным и прагматичным образом.

Мы предлагаем метод повышения скорости приготовления смесей фагов для персонализированной терапии муковисцидоза посредством альтернативного подхода, который также позволит улучшить литические спектры полученного препарата.Фундаментальная идея заключается в использовании того, что мы называем здесь модульным принципом. Эти модули могут быть смесями моновидовых фагов или смесью фагов неродственных видов, взятых из коллекции предварительно отобранных фагов. Преимущество такого подхода состоит в том, что расширение фаговой активности таких смесей достигается не единоразовым введением в конечный продукт неизвестных фагов, а введением в каждый такой модульный продукт нового фага того же вида, но с повышенная активность моновидовых смесей или какого-либо другого нового фага в гетеровидовой смеси.При совместном размножении таких смесей близкородственные фаги могут рекомбинировать, потенциально приводя к потомству, проявляющему новые спектры литической активности.

Таким образом, для перехода к этому новому подходу мы предлагаем (1) выделить ограниченное число хорошо изученных групп фагов, содержащих большое количество описанных неидентичных фагов, и составить из этих фагов моновидовые смеси, обладающие уникальными литическими спектрами; (2) объединить в общую единую многовидовую смесь хорошо изученные бактериофаги других известных видов с уникальными спектрами литической активности; (3) Каждый из препаратов размножается путем заражения P.aeruginosa PAO1 или другой приемлемый штамм; (4) Окончательный терапевтический препарат для персонализированной терапии состоит из отдельных смесей (модулей), обеспечивающих максимальную литическую активность.

Очевидно, что обширное накопление и изучение фагов для каждого из выбранных видов, проявляющих широкий спектр литической активности, является абсолютной предпосылкой для работы этого протокола. Как описано выше, даже кратковременное использование смесей постоянного состава из небольшого числа фагов приводит к селекции резистентных бактерий.До сих пор имеются лишь отдельные исследования частоты встречаемости фагов, способных инфицировать разные виды бактерий. Например, есть сообщение, описывающее фаги, способные инфицировать бактерии видов P. aeruginosa и Burkholderia cepacia (Nzula et al., 2000). Но в таких случаях важно учитывать и оценивать потенциальную межвидовую трансдукцию. В другом исследовании (Malki et al., 2015) авторы демонстрируют, что PB1-подобные фаги P.aeruginosa , выделенная из естественной среды обитания, может инфицировать неродственные виды родов Arthrobacter, Chryseobacterium и Microbacterium . Это также предполагает возможность межвидовой трансдукции с потенциально непредсказуемыми результатами. Конечно, несмотря на эту возможность, это естественная неизбежность, связанная с бактериофагами, и она не зависит от процесса фаговой терапии (Penadés et al., 2015). Таким образом, полная профилактика не является реальной целью.Тем не менее, мы считаем, что необходимы дополнительные исследования, чтобы получить представление о влиянии горизонтального переноса генов с применением фагов in vivo .

Критическое значение при выборе видов фагов для лечения псевдомонадной инфекции при МВ имеет способность инфицировать различные природные штаммы P. aeruginosa . С практической точки зрения это достигается за счет распознавания таких чувствительных штаммов по появлению бляшек.Более того, в первичных легочных инфекциях больных МВ способен участвовать любой штамм P. aeruginosa . В качестве общей догмы в процессе производства перспективных терапевтических смесей лучшие виды фагов образуют основу, на которой происходят циклы обновления с использованием новых модулей для расширения общей литической активности по мере необходимости. Основываясь на этих общих соображениях и предшествующем опыте, мы выбрали три группы фагов, подходящие для составления целостных моновидовых фаговых смесей в качестве основы: phiKZ-подобные, phiKMV-подобные и PB1-подобные фаги.Их частое появление в современных коммерческих смесях может отражать широкий спектр их литической активности. Кроме того, они хорошо охарактеризованы — многие геномы фагов этих групп секвенированы и аннотированы. Наконец, фаги этих видов образуют узнаваемые бляшки (рис. 2), что позволяет легко идентифицировать их среди смешанных популяций в природных образцах. Однако существуют и другие виды фагов, которые кажутся многообещающими для дополнительных смесей моновидовых фагов и составляют основу для последующих исследований.

РИСУНОК 2. Различный внешний вид роста на газоне P. aeruginosa PAO1 позволяет предварительно идентифицировать пять видов бактериофагов.

Особенности видов, отобранных для смесей моновидовых фагов, и выбор лучших источников этих фагов

В таблице 1 перечислены общие характеристики группы выбранных видов вирулентных фагов, активных на P. aeruginosa (Adams et al., 2015). Функция большинства генных продуктов этих фагов остается неизвестной.Поэтому выбор этих видов фагов для терапии основывается главным образом на результатах длительной работы в нескольких лабораториях и, кроме того, на частом присутствии этих фагов в коммерческих терапевтических смесях еще со времен Д’Эреля. Можно оценить эффективность различных фагов, определив их пропорциональность после терапевтического применения с использованием фенотипа бляшек и ПЦР, а затем соответствующим образом адаптировать смесь для следующего раунда фаговой терапии. Ниже приводится обзор основных групп фагов, которые предлагается использовать в моновидовых и гетеровидовых смесях.

ТАБЛИЦА 1. Виды фагов Pseudomonas aeruginosa , предложенные для использования в фаговых композициях в виде моно- или гетеровидовых смесей.

Вирусы, подобные phiKZ

Группа phiKZ-подобных гигантских фагов, инфицирующих P. aeruginosa , включает несколько видов и представляет интерес не только в связи с их использованием в терапевтических целях, но и как уникальная модель для изучения эволюции фагов и специфической упаковки геномная ДНК (Буркальцева и соавт., 2002; Месянжинов и др., 2002; Крылов и др., 2003, 2004, 2005, 2011; Хертвельд и др., 2005; Шабурова и др., 2008; Плетенева и др., 2010; Соколова и др., 2014). Эта группа фагов Myoviridae включает несколько видов фагов, которые проявляют общие свойства представителя типа phiKZ (размер и морфология частиц, наличие внутреннего тела в капсиде и специфический механизм упаковки фаговой геномной ДНК). В секвенированных и аннотированных геномах двух разных видов этой группы – phiKZ и phiEL – не обнаружены гены, кодирующие ДНК-полимеразу.Это может оказаться общей чертой для этой группы. Геномы PhiEL и phiKZ различаются по размеру и не имеют какой-либо ощутимой гомологии на уровне нуклеотидов. Два других фага, тесно связанных с phiEL, – это phiRU (выделенный из почвы) и phiCHE (из клинического штамма P. aeruginosa , выделенного из инфицированной ожоговой раны). phiEL-подобные фаги могут скрещиваться в различных комбинациях, давая жизнеспособное потомство. Это потенциально полезно для создания рекомбинантов, проявляющих переменную специфичность хозяина как in vitro , так и in vivo .

Фаги phiLin68 (из коллекции фагов Линдберга) и phiLBG22 (наша лабораторная коллекция) являются представителями третьей группы phiKZ-подобных вирусов. Эти фаги были включены из-за того, что они могут лизировать некоторые штаммы, устойчивые к фагам из групп phiKZ и phiEL. Нами обнаружены неидентичные фиКЗ-подобные бактериофаги во всех коммерческих лечебных смесях разных производителей. Интересно, что phiEL- и phiLin68-подобные фаги до сих пор не были обнаружены в терапевтических смесях.При создании лечебных препаратов, содержащих phiKZ-подобные фаги, следует учитывать, что все виды этой группы обладают способностью переводить бактериальные клетки в персистирующее («псевдолизогенное») состояние (Плетенева и др., 2010). Он имеет сходство с эффектом ингибирования лизиса после заражения бактериальных клеток E. coli фагом Т4 дикого типа, но не мутантами r-типа (быстрый лизис) (Doermann and Hill, 1953). Возможной причиной может быть сохранение определенных структур в клеточной оболочке после повторного заражения бактерий фагом дикого типа (Крылов, 1970).Между тем бактериофаг phiCHE, близкородственный phiEL, был выделен из бактериального штамма в ожоговой ране. На эффект влияют различные мутации в геномах phiEL-подобных фагов (Крылов и др., 2011). Это проявляется появлением опалесценции бактериального роста (рис. 3) и значительным увеличением конечного выхода фага. Однако в этом состоянии лизис инфицированных бактерий задерживается. По этой причине нежелательно использовать phiKZ-подобные фаги дикого типа в качестве компонентов терапевтических препаратов для лечения P.aeruginosa пневмония. Кроме того, среди 90 351 штаммов P. aeruginosa 90 352 штамма, выделенных из легких больных МВ, часто являются штаммами, способными образовывать аутобляшки (Pillich et al., 1985). Нами установлено, что заражение in vitro клинических изолятов при МВ различными phiKZ-подобными фагами дикого типа приводит к снижению уровня аутопланкирования этих бактерий. В результате рост phiKZ-подобных псевдолизогенных бактерий происходит быстрее, чем рост исходных неинфицированных бактерий (рис. 4).Поэтому для сохранения возможности безопасного использования широкого литического потенциала phiKZ-подобных фагов при МВ нами была выделена группа мутантов фагов phiKZ и phiEL, утративших способность переводить бактерии в псевдолизогенное состояние (Крылов и др., 2011). Некоторые из этих мутантов также проявляют признаки гипервирулентности, способные лизировать псевдолизогенные бактерии. Мы считаем, что подобные мутантные фаги, принадлежащие к phiKZ-подобной группе, можно безопасно использовать в составе терапевтических смесей, дополняя активность друг друга и, таким образом, предоставляя нам дополнительное оружие в нашем арсенале.

РИСУНОК 3. Вирмутант бактериофага phiKZ не может переходить в псевдолизогенное состояние.

Рис.

Решение о включении фагов вида Lin68 в лечебную смесь может быть принято после выделения подобных мутантов и (предпочтительно) после секвенирования и аннотации их геномов, как это сделано для phiKZ и phiEL.

PhiKMV-подобные бактериофаги

Бактериофаги, родственные

phiKMV (Lavigne et al., 2003, 2006; Буркальцева и др., 2006), также являются частыми компонентами различных коммерческих смесей и демонстрируют другой диапазон хозяев и размеры бляшек по сравнению с другими группами. Например, новый phiKMV-подобный фаг, phiNFS, был выделен нашей группой в виде мутанта из коммерческой смеси. Родительский фаг образует небольшие прозрачные бляшки на газоне штамма РАО1, и в каждой такой бляшке с высокой частотой возникают мутанты с повышенной скоростью роста (Крылов и др., 2015). Возможная причина такого эффекта может быть связана с использованием при производстве коммерческой смеси бактериального хозяина, обладающего свойствами, отличными от свойств P. aeruginosa PAO1. Мутанты, выделенные из различных бляшек, могут различаться по скорости роста на разных клинических изолятах. Способность к постоянным модификациям различных характеристик роста является неотъемлемым свойством фага phiNFS. Механизмы, лежащие в основе этого, изучаются. Предварительные данные предполагают, что это может быть связано с процессами, участвующими в ощущении кворума.Например, в некоторых клинических изолятах фаг phiNFS специфически ингибирует образование бактериальных бляшек, при этом наблюдается четкая граница ингибирования (рис. 5), что можно объяснить образованием при росте бляшки неизвестного продукта, который специфически взаимодействует с клетками бляшки. производство бактериального штамма («все или ничего»). У этого фага в наибольшей степени выражена особенность phiKMV-подобных фагов: непрерывный (5-7 дней) рост на состарившихся бактериальных газонах, что нехарактерно для других видов P.aeruginosa фагов. Циклический характер этого роста может быть обусловлен способностью фага преодолевать физиологические изменения бактерий, возникающие в результате процесса старения (рис. 6).

РИСУНОК 5. Рост KMV-подобного фага phiNFS на газоне бляшек P. aeruginosa клинический изолят ингибирует образование бляшек. Можно наблюдать различную активность диффундирующих продуктов: (a) полное ингибирование образования зубного налета; (b) значительное уменьшение размеров бляшек до определенного размера; (c) резкое прекращение взаимодействия.Это пример взаимодействия фаг-хозяин, которое может серьезно повлиять на результаты фаготерапии, усиливая рост бактерий в биопленке легких. Только специально приготовленная смесь фагов может предотвратить нежелательные эффекты терапии монофагами.

РИСУНОК 6. Продолжающийся рост phiKMV-подобного фага, проходящий через циклические периоды литического роста и псевдолизогении.

PB1-подобные бактериофаги

РВ1-подобные бактериофаги — еще один частый представитель фаговых коктейлей.Четкий налет с характерным признаком – темной полосой по краю нароста (рис. 7а) является типичным признаком группы и может быть использован в качестве видового признака при поиске новых фагов группы. Эта полоса появляется в конце роста бляшки и состоит из инфицированных клеток в специфическом состоянии (Крылов и др., 2015). Он ограничивает распространение бляшек других видов фагов (рис. 7b), но не может предотвратить проникновение фаговых частиц в бляшки PB1. Преимущества РВ1-подобных фагов заключаются в простоте их выделения из обогащения лечебных смесей (неидентичные фаги часто встречаются в пробах, взятых из одних и тех же природных источников воды), широком диапазоне литической активности и относительной низкая частота образования устойчивых к фагам мутантов (Garbe et al., 2010).

РИСУНОК 7. Общим признаком всех PB1-подобных фагов являются специфические бактериальные полосы, окаймляющие их бляшки. Такие полосы содержат особые бактериальные клетки в псевдолизогенном состоянии и ограничивают рост фагов других видов. В ряде случаев это свойство может влиять на результат фаготерапии (а) Рост клеток в псевдолизогенном состоянии вокруг фаговой бляшки phiPB1. (б) Взаимодействие литических участков бактериофагов phiPB1 и phiNFS.

Коктейль из гетеровидных фагов

Помимо трех моновидовых смесей мы предлагаем использовать дополнительную смесь, включающую фаги нескольких неродственных видов. Каждый из этих фагов имеет определенные различия в спектре литической активности, например способность лизировать бактерии, проявляющие устойчивость к фаговым смесям трех ранее упомянутых основных видов, а также штаммы, несущие плазмиды, придающие устойчивость к фагам. В эту группу входят фаги phiEL (NC_007623), phiLin68, phiPerm5, phiMK (KU61955) и phiCHU (NC_028933), представляющие несколько разных групп.Поскольку все фаги, выбранные для этой смеси, относительно легко распознать (Крылов и др., 2015), выбор новых фагов с целью расширения литического спектра не вызовет особых проблем. Тем не менее крайне важно обратить особое внимание на возможность существования существенных различий между близкородственными фагами. Иногда их геномы могут содержать небольшие вариации, что делает их непригодными для терапевтического использования. Например, фаги phiTL и phiCHU показали хороший рост на PAO1 в присутствии плазмид группы IncP2 (например, плазмиды pMG53) и на некоторых клинических изолятах, устойчивых к другим фагам.Улучшенный рост фагов сопровождается появлением нестабильной морфологии бляшек (рис. 8). Однако в терапевтических смесях можно использовать только phiCHU, поскольку было обнаружено, что геном phiTL кодирует предполагаемый слитый ген транспозазы (NC_023583, Magill et al., 2015). Эти фаги тесно связаны с LUZ24 (Ceyssens et al., 2008; Wagemans et al., 2015) и phiPaP3 (Tan et al., 2007), вместе принадлежащими к роду LUZ24likevirus.

РИСУНОК 8. Разнообразие бляшек бактериофага phiCHU на газоне P.aeruginosa PAO1 (pMG53). Пересев фагов из прозрачных (а) , мутных (б) или полупрозрачных (в) бляшек снова приводит к образованию всех типов бляшек. Бар 1см.

P. aeruginosa Pao1: лучший хозяин для изучения новых фагов, но не для размножения терапевтических смесей?

В некоторых случаях могут возникнуть проблемы при поиске подходящего штамма для амплификации готовых терапевтических смесей.Одной из таких проблем является то, что штаммы P. aeruginosa часто содержат профаги нитчатых фагов. Считается, что причиной частого появления нитчатых профагов является то, что они обеспечивают адаптивные возможности P. aeruginosa в неблагоприятных условиях (Rice et al., 2009). Накопление нитчатых фагов в слизи легких способствует кристаллизации и образованию твердых биопленок (Secor et al., 2015). Следовательно, выбор хозяев, содержащих эти профаги (например, P.aeruginosa PAO1) может привести к непреднамеренному включению нитчатых фагов в конечный препарат. Поэтому терапевтическое использование смеси фагов, полученной в результате случайного обогащения и амплификации на неизученном штамме-хозяине, нежелательно. Кроме того, следует отметить, что, несмотря на то, что штамм PAO1 P. aeruginosa является хорошо изученным и давно используемым во многих микробиологических лабораториях, следует с осторожностью относиться к его потенциальному использованию в окончательной амплификации фага. приготовления.Это связано с тем, что он обладает довольно высоким патогенным потенциалом, о чем свидетельствует его длительное присутствие в легких мышей, хотя он полезен для предотвращения внедрения умеренных фагов с нежелательными свойствами (Tayabali et al., 2015). . Однако это так; остаются общепринятым штаммом для изучения самих фагов.

Работа по созданию резервной коллекции новых фагов для включения в моновидовые фаговые смеси должна проводиться на постоянной основе.По нашему опыту, отбор новых фагов и воспроизведение моновидовых смесей лучше осуществлять при строгом использовании стандартного штамма P. aeruginosa PAO1 и его минорных вариантов (например, несущих плазмиды для размножения плазмидзависимых фаги, такие как phiCHU). Использование стандартного штамма PAO1 необходимо для предотвращения внедрения в терапевтические фаговые смеси потенциальных умеренных фагов с нежелательными свойствами (например, мобильными возможностями).Очевидно, совместное размножение неидентичных, но близкородственных фагов может и будет давать ценные рекомбинанты, в том числе с повышенным спектром литической активности. Таким образом, простой акт воспроизводства смеси моновидов создаст дополнительную возможность для расширения литического спектра.

«Несущественные» гены и перспективы «исправления» геномов бактериофагов

Мы уверены, что фаготерапия инфекции P. aeruginosa у детей с муковисцидозом является очень перспективным подходом и отнюдь не ограничивается использованием природных фагов из хорошо изученных групп.Вполне вероятно, что новые методы редактирования генома будут использоваться для улучшения терапевтических фагов. Это позволит проводить менее трудоемкие процедуры отбора фагов с новыми литическими спектрами. Поэтому может представлять некоторый интерес исследование причин значительных различий в размерах геномов фагов с одинаковой морфологией из-за наличия в геномах некоторых видов фагов участков, содержащих потенциально несущественные гены с дополнительными функциями.Такие фаги могут быть использованы в качестве удобных векторов. Например, у фагов phiKZ и phiEL, принадлежащих к разным, но филогенетически родственным группам гигантских phiKZ-подобных фагов, мы наблюдаем сходство размеров фаговых частиц и внутреннего объема капсида. Однако геном phiEL примерно на 80 т.п.н. меньше, чем у phiKZ. Причиной такого различия может быть, например, несоответствие скорости эволюции морфологической структуры фаговой частицы размеру ее генома. Следует также учитывать, что увеличение размера генома ограничено емкостью фаговой частицы, поэтому можно предположить, что эволюция будет благоприятствовать меньшим размерам генома из-за физических ограничений.Однако жизнеспособность фаговых частиц (в частности, способность ДНК вводить в клетку) может зависеть как от плотности упаковки ДНК, так и от потери значительного числа генов, даже тех, функции которых перестали быть значимыми в клетке. развитие фага может оказаться смертельным. В таких случаях есть две разные стратегии, которые могут обеспечить выживание фага. Одной из таких стратегий может быть разработка нового механизма упаковки ДНК. Другая возможность заключается в сохранении генов, функции которых становятся ненужными, или в замене их последовательностями ДНК аналогичного размера временного происхождения.Как оказалось, обе эти стратегии были реализованы. В случае фага phiEL возник механизм вариабельной упаковки, обеспечивающий необходимую плотность упаковки ДНК и, следовательно, инъекцию (Sokolova et al., 2014). Другой постулируемый механизм может быть проиллюстрирован сравнением геномов двух близкородственных фагов P. aeruginosa PAO1 – умеренного фага phiD3 и его природного литического варианта phiPMG1 (Крылов и др., 2012). В центральной части генома этих фагов существует обширная область, содержащая фрагменты генов вариабельного происхождения.Наличие обширных участков малозначимой ДНК («геномные лакуны»), по-видимому, обычное явление. Они были обнаружены и при сравнении геномов двух мобильных фагов, PM105 и B3 (Pourcel et al., 2016).

Фаги, обладающие такими пробелами в геноме, могут стать прочной основой для направленного конструирования геномов терапевтических фагов, например, для вставки генов, повышающих эффективность фагового лизиса. Например, вставка генов, кодирующих бактериоцины, способные убивать бактерии других патогенных видов, обычно ассоциируется с МВ.Эта идея чрезвычайно многообещающа, но потребует не только знания детальных функций всех генов и их взаимодействий, но и доказательства того, что введение новых генов не приведет к неблагоприятным нежелательным эффектам. Кроме того, разработка и использование таких будущих искусственных фагов потребует тщательного изучения их потенциального взаимодействия с естественной микробиотой человека и их потенциального воздействия на окружающую среду.

Расширение коллекции терапевтических фагов: сотрудничество национального и международного банка фагов

Внедрение непрерывной персонализированной фаговой терапии потребует кооперативной и эффективной системы, позволяющей обмениваться специфическими бактериофагами.Существование центрального банка фагов, в котором хранится большинство фагов, активных в отношении P. aeruginosa и других патогенов, активных в отношении муковисцидоза, и обеспечение их доступности для клинических лабораторий в разных странах, стало бы чрезвычайно ценным ресурсом в дополнение к национальным коллекциям. Основные цели этого центрального фагового банка:

(1) Накопление фагов P. aeruginosa , их классификация и сравнение видовой активности;

(2) Хранение фагов, сертифицированных как безопасные;

(3) Составление исходных смесей моновидовых фагов с широким кругом хозяев для адаптации смесей к требованиям реального времени в больницах;

(4) Доставка в больницы небольших образцов различных фагов, чтобы помочь клиницистам и персоналу лабораторий провести быстрый отбор подходящих фагов.

В настоящее время общепринято понимание необходимости формирования таких фаговых банков. Такие учреждения сформируют центральный узел, из которого можно будет разработать фаговую терапию.

Заключение

Одной из целей данного обзора было показать, что для выбора фагов, пригодных для терапевтического использования, необходимы не только подходы геномики и биоинформатики, но и длительные предварительные исследования их свойств и проявлений в различных условиях с целью оптимизации их активности.Другая цель состояла в том, чтобы внедрить новый подход к составлению терапевтических смесей, основанный на модульной сборке персонализированных препаратов с использованием комбинаций смесей моно- и гетеровидов для лечения инфекций P. aeruginosa у пациентов с муковисцидозом.

Эффективность фаготерапии не вызывает сомнений, если достигнут правильный подбор фага. Как обсуждалось, это было подтверждено в экспериментах по уничтожению P.aeruginosa легочной инфекции у мышей после интраназального введения вирулентных фагов (Alemayehu et al., 2012; Henry et al., 2013). Имеются также косвенные подтверждения положительного ответа на активность фага в клинических условиях, следующие из наблюдения (James et al., 2015), при котором авторы обнаружили корреляцию между увеличением количества свободных частиц умеренного фага в мокроте и улучшением самочувствия больного. состояние. Это понятно, поскольку заражение бактериальных клеток умеренными фагами обычно приводит к тому, что преобладающим способом развития фага является литический цикл.Однако это исследование не поддерживает преднамеренное использование умеренных фагов. Наконец, пример прямого использования персонализированных смесей фагов в клинической практике, описанный здесь, усиливает общую безопасность самой процедуры.

Таким образом, мы считаем, что фаготерапия при муковисцидозе является перспективной, но ее применение должно быть ограничено теми особыми случаями, когда доказана неэффективность всех доступных антибиотиков. В группу потенциальных больных входят дети до 6 лет, инфицированные полирезистентными штаммами P.aeruginosa (поскольку использование колистина пока не разрешено) или взрослых пациентов, инфицированных P. aeruginosa , устойчивых ко всем доступным антибиотикам, включая колистин. На самом деле переход к постоянному применению фаготерапии даже в особых случаях потребует существенного изменения работы специализированных клиник. Должны быть приняты специальные меры для отделения пациентов, получающих фаговую терапию, от других, чтобы предотвратить перекрестное заражение другими P.aeruginosa штаммов. Наилучшим решением была бы организация специального центра фаготерапии для больных муковисцидозом с предоставлением необходимых ресурсов и возможностей для поддержания и пополнения коллекций фагов и т.д. лаборатории. Задачей специализированных бригад микробиологов в больницах, работающих с фагами, будет отслеживание изменения доли бактерий, устойчивых к используемым фагам, разработка и планирование внедрения новых фаговых препаратов, создание новых комбинаций соединений, расширяющих литический спектр, все процедуры, которые должны обеспечить непрерывность фаготерапии.Мы считаем, что если бы сертифицированные производители коммерческих смесей фагов участвовали в приготовлении предлагаемых смесей моно- и гетеровидов фагов, это упростило бы и значительно сократило время отклика при приготовлении персонализированных коктейлей и, таким образом, помогло бы фаговой терапии стать общепризнанной. главное оружие в нашем арсенале против бактериальной инфекции.

Вклад авторов

ВК: автор-корреспондент, организация работы, написание статьи.ОС: подготовка картинок, редактирование текста. ФП, ОП и ЭК: отбор и тестирование фагов, состав фаговых смесей, анализ данных. МБ, СК и АК: анализ ДНК фагов разных видов. ЛК и ДМ: последовательность ДНК новых фагов, анализ данных, редактирование и корректировка текста.

Заявление о конфликте интересов

Авторы заявляют, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могли бы быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

Благодарности

Сердечно благодарим проф. Р. Лавиня и д-ра Х. Оливейру (Левенский католический университет, Бельгия) за участие в изучении мутантов бактериофага phiKZ, проф. М. Ванехаутте (Гентский университет, Бельгия) и проф. Перепановой (Московский институт урологии, Россия) для групп клинических штаммов P. aeruginosa .

Ссылки

Абедон, С. Т., Куль, С. Дж., Бласдел, Б. Г., и Каттер, Э. М. (2011). Фаговое лечение инфекций человека. Бактериофаг 1, 66–85. doi: 10.4161/бакт.1.2.15845

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Адамс, М.Дж., Лефковиц, Э.Дж., Кинг, А.М., Бэмфорд, Д.Х., Брейтбарт, М., Дэвисон, А.Дж., и соавт. (2015). Ратификационное голосование по таксономическим предложениям в международный комитет по таксономии вирусов (2015 г.). Арх. Вирол. 160, 1837–1850 гг. doi: 10.1007/s00705-015-2425-z

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Алавидзе З., Аминов Р., Betts, A., Bardiau, M., Bretau deau, L., Caplin, J., et al. (2016). Экспертный круглый стол по принятию и повторному внедрению бактериофаговой терапии. Шелковый путь к принятию и повторному внедрению терапии бактериофагами. Биотехнология. J. 11, 595–600. doi: 10.1002/биот.201600023

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Alemayehu, D., Casey, P.G., McAuliffe, O., Guinane, C.M., Martin, J.G., Shanahan, F., et al. (2012). Бактериофаги φMR299-2 и φNH-4 могут элиминировать Pseudomonas aeruginosa в легких мышей и в клетках дыхательных путей при муковисцидозе. МБио 3:e29-12. doi: 10.1128/mBio.00029-12

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Аткинсон, Т.Дж. (2008). Муковисцидоз, генная терапия, опосредованная векторами, и значимость толл-подобных рецепторов: обзор проблем, прогресс и возможности. Курс. Джин Тер. 8, 201–207. дои: 10.2174/156652308784746468

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Битон, М.Л., Алвес, Д.Р., Энрайт, М.С., и Дженкинс, А.Т. (2015). Оценка фаготерапии против Pseudomonas aeruginosa с использованием модели инфекции Galleria mellonella . Междунар. Дж. Антимикроб. Агенты 46, 196–200. doi: 10.1016/j.ijantimicag.2015.04.005

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Буркальцева М.В., Крылов В.Н., Плетенева Е.А., Шабурова О.В., Крылов С.В., Волкарт Г. и др. (2002). Феногенетическая характеристика группы гигантских Phi KZ-подобных бактериофагов Pseudomonas aeruginosa . Генетика 38, 1470–1479.

Академия Google

Буркальцева М.В., Плетенева Е.А., Шабурова О.В., Кадыков В.А., Крылов В.Н. (2006). Консерватизм генома phiKMV-подобных бактериофагов (супергруппа Т7), активных в отношении Pseudomonas aeruginosa . Генетика 42, 33–38.

Академия Google

Ceyssens, P.J., Hertveldt, K., Ackermann, H.W., Noben, J.P., Demeke, M., Volckaert, G., et al. (2008). Интронсодержащий геном литического фага Pseudomonas LUZ24 напоминает умеренный фаг PaP3.1. Вирусология 377, 233–238.doi: 10.1016/j.virol.2008.04.038

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Костелло, А., Рин, Ф.Дж., О’Гара, Ф., Каллаган, М., и МакКлин, С. (2014). Ингибирование совместной колонизации патогенов, ассоциированных с кистозным фиброзом, Pseudomonas aeruginosa и Burkholderia multivorans . Микробиология 160 (Pt 7), 1474–1487. doi: 10.1099/мик.0.074203-0

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Каллен Л., Вайзер Р., Ольшак Т., Maldonado, R.F., Moreira, A.S., Slachmuylders, L., et al. (2015). Фенотипическая характеристика международной эталонной панели Pseudomonas aeruginosa : штаммы муковисцидоза (МВ) происхождения проявляют меньшую вирулентность in vivo, чем штаммы, не относящиеся к МВ. Микробиология 161, 1961–1977. doi: 10.1099/мик.0.000155

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Доерманн, А. Х., и Хилл, М. Б. (1953). Генетическая структура бактериофага Т4, описанная в исследованиях рекомбинации факторов, влияющих на морфологию бляшек. Генетика 38, 79–90.

Академия Google

Фернандес, Л., Гудерхэм, В. Дж., Бейнс, М., Макфи, Дж. Б., Виганд, И., и Хэнкок, Р. Э. (2010). Адаптивная устойчивость к антибиотикам «последней надежды» полимиксину В и колистину у Pseudomonas aeruginosa опосредована новой двухкомпонентной регуляторной системой ParR-ParS. Антимикроб. Агенты Чемотер. 54, 3372–3382. doi: 10.1128/AAC.00242-10

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Фаулер, Т., Уокер, Д., и Дэвис, Южная Каролина (2014). Риск/польза предсказания постантибиотической эры: работает ли сигнал тревоги? Энн. Академик Нью-Йорка науч. 1323, 1–10. doi: 10.1111/nyas.12399

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Фриман, В.П., Гул, М., Молин, С., Йохансен, Х.К., и Баклинг, А. (2013). Адаптация Pseudomonas aeruginosa к легким больных муковисцидозом приводит к снижению устойчивости к фагам и врагам протистов. PLoS ONE 8:e75380.doi: 10.1371/journal.pone.0075380

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Фриман, В.П., Соанс-Браун, Д., Серочински, П., Молин, С., Йохансен, Х.К., Мерабишвили, М., и соавт. (2016). Предварительная адаптация паразитарных фагов к патогену приводит к увеличению клиренса патогена и снижению развития резистентности с бактериальными изолятами муковисцидоза Pseudomonas aeruginosa . Дж. Эвол. биол. 29, 188–198. doi: 10.1111/jeb.12774

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Гарбе, Дж., Wesche, A., Bunk, B., Kazmierczak, M., Selezska, K., Rohde, C., et al. (2010). Характеристика JG024, Pseudomonas aeruginosa PB1-подобного фага широкого круга хозяев в смоделированных условиях инфекции. ВМС микробиол. 26:301. дои: 10.1186/1471-2180-10-301

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Генри М., Лавин Р. и Дебарбье Л. (2013). Прогнозирование in vivo эффективности терапевтических бактериофагов, используемых для лечения легочных инфекций. Антимикроб.Агенты Чемотер. 57, 5961–5968. doi: 10.1128/AAC.01596-13

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Генри, Р.Л., Меллис, К.М., и Петрович, Л. (1992). Мукоид Pseudomonas aeruginosa является маркером плохой выживаемости при муковисцидозе. Педиатр. Пульмонол. 12, 158–161. doi: 10.1002/стр.1950120306

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Hershberger, C.D., Ye, R.W., Parsek, M.R., Xie, Z.D., and Chakrabarty, A.M.(1995). Ген algT (algU) Pseudomonas aeruginosa , ключевой регулятор, участвующий в биосинтезе альгината, кодирует альтернативный сигма-фактор (сигма-Е). Проц. Натл. акад. науч. США 15, 7941–7945. doi: 10.1073/pnas.92.17.7941

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Хертвельд К., Лавин Р., Плетенева Е., Сернова Н., Курочкина Л., Корчевский Р. и соавт. (2005). Сравнение геномов Pseudomonas aeruginosa крупных фагов. Дж.Мол. биол. 354, 536–545.

Академия Google

Хоббс З. и Абедон С. Т. (2016). Разнообразие типов фаговых инфекций и связанная с ними терминология: проблема «литического или лизогенного». FEMS микробиол. лат. 363:fnw047. doi: 10.1093/femsle/fnw047

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

James, C.E., Davies, E.V., Fothergill, J.L., Walshaw, M.J., Beale, C.M., Brockhurst, M.A., et al. (2015). Литическая активность умеренных фагов Pseudomonas aeruginosa при длительных муковисцидозных хронических инфекциях легких. ISME J. 9, 1391–1398. doi: 10.1038/ismej.2014.223

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Косорок, М. Р., Зенг, Л., Уэст, С. Е., Рок, М. Дж., Сплайнгард, М. Л., Лаксова, А., и соавт. (2001). Ускорение заболевания легких у детей с муковисцидозом после приобретения Pseudomonas aeruginosa . Педиатр. Пульмонол. 32, 277–287. doi: 10.1002/ppul.2009.abs

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Крылов С.В., Кропинский А.М., Плетенева Е. А., Шабурова О. В., Буркальцева М. В., Мирошников К. А. и др. (2012). Свойства нового D3-подобного Pseudomonas aeruginosa бактериофага phiPMG1: структура генома и перспективы использования в фаготерапии. Генетика 48, 1057–1067.

Академия Google

Крылов С.В., Плетнева Е.А., Буркальцева М.В., Шабурова О.В., Мирошников К.А., Лавин Р. и соавт. (2011). Геномная нестабильность Pseudomonas aeruginosa фагов вида EL: исследование вирулентных мутантов. Генетика. 47,183–189.

Академия Google

Крылов В., Плетенева Е., Буркальцева М., Шабурова О., Волкерт Г., Сыкилинда Н. и соавт. (2003). Бактериофаги Myoviridae Pseudomonas aeruginosa : долгий и сложный эволюционный путь. Рез. микробиол. 154, 269–275. doi: 10.1016/S0923-2508(03)00070-6

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Крылов В., Шабурова О., Плетенева Е., Крылов С., Каплан А., Буркальцева М. и соавт. (2015). Выбор фагов и условий для безопасной фаготерапии против инфекций Pseudomonas aeruginosa . Вирол. Грех. 30, 33–44. doi: 10.1007/s12250-014-3546-3

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Крылов В. Н. (1970). Возможная функция генов rII бактериофага Т4. Вирусология 41, 711–717. дои: 10.1016/0042-6822(70)-6

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Крылов В.Н. (2014). Бактериофаги Pseudomonas aeruginosa : долгосрочные перспективы использования в фаготерапии. Доп. Вирус. Рез. 88, 227–278. doi: 10.1016/B978-0-12-800098-4.00005-2

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Крылов В.Н., Буркальцева М.В., Сыкилинда Н.Н., Плетенева Е.А., Шабурова О.В., Кадыков В.А., и соавт. (2004). Сравнение геномов новых гигантских фагов Pseudomonas aeruginosa из аборигенных популяций из разных регионов. Генетика. 40, 462–468.

Академия Google

Крылов В.Н., Плетнева Е.А., Лавин Р., Хертвельд К., Фолькарт Г., Сернова Н.В., и соавт. (2005). Сравнение генома филогенетически родственных бактериофагов phiKZ и EL Pseudomonas aeruginosa : эволюционные аспекты и минимальный размер генома. Генетика 41, 455–465.

Академия Google

Кутателадзе, М., и Адамия, Р. (2010). Бактериофаги как потенциальные новые терапевтические средства для замены или дополнения антибиотиков. Тенденции биотехнологии. 28, 591–595. doi: 10.1016/j.tibtech.2010.08.001

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Лавин Р., Буркальцева М.В., Роббен Дж., Сыкилинда Н.Н., Курочкина Л.П., Гримонпрез Б. и соавт. (2003). Геном бактериофага phiKMV, T7-подобного вируса, инфицирующего Pseudomonas aeruginosa . Вирусология 20, 49–59. doi: 10.1016/S0042-6822(03)00123-5

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Лавин, Р., Noben, J.P., Hertveldt, K., Ceyssens, P.J., Briers, Y., Dumont, D., et al. (2006). Структурный протеом Pseudomonas aeruginosa бактериофага phiKMV. Микробиология 152 (часть 2), 529–534. doi: 10.1099/мик.0.28431-0

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Ли, Дж. Ю., Чанг, Э. С., На, И. Ю., Ким, Х., Шин, Д., и Ко, К. С. (2014). Развитие резистентности к колистину у pmrA-, phoP-, parR- и cprR-инактивированных мутантов Pseudomonas aeruginosa . J. Антимикроб. Чемотер. 69, 2966–2971. doi: 10.1093/jac/dku238

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Lemieux, A.A., Jeukens, J., Kukavica-Ibrulj, I., Fothergill, J.L., Boyle, B., Laroche, J., et al. (2016). Гены, необходимые для производства свободных фагов, необходимы для Pseudomonas aeruginosa хронических инфекций легких. Дж. Заразить. Дис. 213, 395–402. doi: 10.1093/infdis/jiv415

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Лю, Ю.Y., Wang, Y., Walsh, T.R., Yi, L.X., Zhang, R., Spencer, J., et al. (2015). Появление плазмид-опосредованного механизма резистентности к колистину MCR-1 у животных и человека в Китае: микробиологическое и молекулярно-биологическое исследование. Ланцет Заражение. Дис. 16, 161–168. doi: 10.1016/S1473-3099(15)00424-7

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Линч, К. Х., и Деннис, Дж. Дж. (2012). Лекция с вручением золотой медали в Кангене – Геномный анализ и модификация бактериофагов комплекса Burkholderia cepacia . Кан. Дж. Микробиол. 58, 221–235. дои: 10.1139/w11-135

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Магилл Д. Дж., Шабурова О. В., Чеснокова Е. Н., Плетенева Е. А., Крылов В. Н. и Кулаков Л. А. (2015). Полная нуклеотидная последовательность phiCHU: Luz24-подобный вирус, инфицирующий Pseudomonas aeruginosa и демонстрирующий уникальный диапазон хозяев. FEMS микробиол. лат. 362:fnv045. doi: 10.1093/femsle/fnv045

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Малки, К., Кула, А., Брудер, К., Сибл, Э., Хацопулос, Т., Стейдель, С., и соавт. (2015). Бактериофаги, выделенные из озера Мичиган, демонстрируют широкий круг хозяев в нескольких типах бактерий. Вирол. Дж. 12:164. doi: 10.1186/s12985-015-0395-0

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Маккаллин С., Алам Саркер С., Барретто С., Султана С., Бергер Б., Хук С. и др. (2013). Анализ безопасности российского фагового коктейля: от метагеномного анализа до перорального применения у здоровых людей. Вирусология 443, 187–196. doi: 10.1016/j.virol.2013.05.022

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Месянжинов В.В., Роббен Дж., Гримонпрез Б., Костюченко В.А., Буркальцева М.В., Сыкилинда Н.Н., и соавт. (2002). Геном бактериофага phiKZ Pseudomonas aeruginosa . Дж. Мол. биол. 15, 1–19. doi: 10.1006/jmbi.2001.5396

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Мохан, К., Фотергилл, Дж. Л., Сторрар, Дж., Ледсон, М.Дж., Уинстенли, К., и Уолшоу, М.Дж. (2008). Передача эпидемического штамма Pseudomonas aeruginosa от больного кистозным фиброзом домашней кошке. Грудная клетка 63, 839–840. doi: 10.1136/thx.2007.092486

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Моррелл, М. Р., и Пилевски, Дж. М. (2016). Трансплантация легких при муковисцидозе. клин. Грудь Мед. 37, 127–138. doi: 10.1016/j.ccm.2015.11.008

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Мулюкин А.Л., Козлова А. Н., Сорокин В. В., Сузина Н. Е., Чердынцева Т. А., Котова И. Б. и др. (2015). Выжившие формы у обработанных антибиотиками Pseudomonas aeruginosa . Микробиология 84, 645–659.

Академия Google

Нзула, С., Вандамм, П., и Гован, Дж. Р. (2000). Чувствительность комплекса Burkholderia cepacia и Pseudomonas aeruginosa к трансдуцирующим бактериофагам. ФЭМС Иммунол. Мед. микробиол. 28, 307–312.doi: 10.1111/j.1574-695X.2000.tb01491.x

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Ольшак Т., Зарновец П., Кака В., Данис-Влодарчик К., Аугустыняк Д., Древинек П. и соавт. (2015). In vitro и in vivo антибактериальная активность бактериофагов окружающей среды в отношении штаммов Pseudomonas aeruginosa у больных муковисцидозом. Заяв. микробиол. Биотехнолог. 99, 6021–6033. doi: 10.1007/s00253-015-6492-6

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Пабари, Р., Сингх С., Моралес С., Буш А., Альшафи К., Билтон Д. и др. (2015). Антипсевдомонадный бактериофаг снижает инфекционную нагрузку и воспалительную реакцию в легких мышей. Антимикроб. Агенты. Чемотер. 60, 744–751. doi: 10.1128/AAC.01426-15

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Penadés, JR, Chen, J., Quiles-Puchalt, N., Carpena, N., and Novick, R.P. (2015). Бактериофаг-опосредованное распространение генов вирулентности бактерий. Курс. мнение микробиол. 23, 171–178.doi: 10.1016/j.mib.2014.11.019

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Пиллих, Дж., Кубицкова, Д., и Вымола, Ф. (1985). Фаговые бляшки и аутобляшки у штаммов Pseudomonas aeruginosa . Дж. Хиг. Эпидемиол. микробиол. Иммунол 29, 163–167.

Академия Google

Плетенева Е.А., Крылов С.В., Шабурова О.В., Буркальцева М.В., Мирошников К.А., Крылов В.Н. (2010). Псевдолизогения бактерий Pseudomonas aeruginosa , инфицированных phiKZ-подобными бактериофагами. Генетика 46, 26–32.

Академия Google

Пурсель К., Миду К., Буркальцева М., Плетенева Е. и Крылов В. (2016). Полная последовательность генома PM105, нового Pseudomonas aeruginosa B3-подобного мобильного фага. Объявление генома. 4:e1543-15. doi: 10.1128/genomeA.01543-15

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Rice, S.A., Tan, C.H., Mikkelsen, P.J., Kung, V., Woo, J., Tay, M., et al. (2009). Жизненный цикл биопленки и вирулентность Pseudomonas aeruginosa зависят от нитевидного профага. ISME J. 3, 271–282. doi: 10.1038/ismej.2008.109

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Secor, P.R., Sweere, J.M., Michaels, L.A., Malkovskiy, A.V., Lazzareschi, D., Katznelson, E., et al. (2015). Нитевидный бактериофаг способствует сборке и функционированию биопленки. Микроб-хозяин клетки 18, 549–559. doi: 10.1016/j.chom.2015.10.013

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Шабалова Л.А., Капранов Н.И., Крылов В.Н., Шарибжанова Т.О. и Ахвердян В.З. (1995). « Бактериофаг Pseudomonas aeruginosa в лечении инфекции P. aeruginosa у пациентов с муковисцидозом», в Proceedings of IX International Cystic Fibrosis Congress , (Цюрих: Международная ассоциация муковисцидоза), 443.

Академия Google

Шабалова Л.А., Капранов Н.И., Крылов В.Н., Соловьева Т.И. (1993). «Pseudomonas aeruginosa Bacteriophages in Treatment Pseudomonas aeruginosa Infection in CF», Proceedings of the 7th Annual North American Cystic Fibrosis Conference , Dallas, TX, 13–16.

Шабурова О.В., Плетенева Е.А., Хертвельд К., Крылов В.Н. (2008). Сравнение размеров ДНК в группе гигантских фагов Pseudomonas aeruginosa методом PFGE. Генетика. 44, 713–716.

Академия Google

Соколова О.С., Шабурова О.В., Печникова Е.В., Шайтан А.К., Крылов С.В., Киселев Н.А., и соавт. (2014). Упаковка генома в EL и Lin68, двух гигантских phiKZ-подобных бактериофагах P. aeruginosa . Вирусология 46, 472–478.doi: 10.1016/j.virol.2014.09.002

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Tan, Y., Zhang, K., Rao, X., Jin, X., Huang, J., Zhu, J., et al. (2007). Секвенирование всего генома нового умеренного бактериофага P. aeruginosa: доказательства того, что ген тРНК опосредует интеграцию генома фага в бактериальную хромосому хозяина. Клеточная микробиология. 9, 479–491. doi: 10.1111/j.1462-5822.2006.00804.x

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Тарик, М.А., Эверест Ф.Л., Коули Л.А., Де Сойза А., Холт Г.С., Бридж С.Х. и др. (2015). Метагеномный подход к характеристике популяций умеренных бактериофагов у пациентов с муковисцидозом и бронхоэктазами, не связанными с кистозным фиброзом. Фронт. микробиол. 6:97. doi: 10.3389/fmicb.2015.00097

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Таябали, А.Ф., Коулман, Г., и Нгуен, К.С. (2015). Атрибуты вирулентности и анализ реакции хозяина для определения патогенного потенциала штаммов Pseudomonas , используемых в биотехнологии. PLoS ONE 10:e0143604. doi: 10.1371/journal.pone.0143604

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Ворошилова Н.Н., Боговазова Г.Г., Казакова Т.Б., Алферова Е.В. (2013). «Разработка новых препаратов бактериофагов для лечения гнойно-воспалительных и энтеральных заболеваний, вызванных условно-патогенными бактериями, и изучение их клинической эффективности», в Материалы Международной научно-практической конференции: Бактериофаги: теоретические и практические аспекты применения их в медицине, ветеринарии и пищевой промышленности , г. Ульяновск.

Wagemans, J., Delattre, A.S., Uytterhoeven, B., De Smet, J., Cenens, W., Aertsen, A., et al. (2015). Антибактериальные фаговые ORFans Pseudomonas aeruginosa фага LUZ24 обнаруживают новый белок, ингибирующий MvaT. Фронт. микробиол. 6:1242. doi: 10.3389/fmicb.2015.01242

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Winstanley, C., Langille, M.G., Fothergill, J.L., Kukavica-Ibrulj, I., Paradis-Bleau, C., Sanschagrin, F., et al. (2009). Недавно введенные геномные профаговые островки являются критическими детерминантами конкурентоспособности in vivo ливерпульского эпидемического штамма Pseudomonas aeruginosa . Рез. генома. 19, 12–23. doi: 10.1101/gr.086082.108

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Yan, Z., Stewart, Z.A., Sinn, P.L., Olsen, J.C., Hu, J., McCray, P.B. Jr., et al. (2015). Модели муковисцидоза на хорьках и свиньях: перспективы и перспективы генной терапии. Гул. Джин Тер. клин. Дев. 26, 38–49. doi: 10.1089/humc.2014.154

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *